甘草和五味子对大鼠肝微粒体CYP450诱导作用的研究

目的：考察甘草和五味子对大鼠肝微粒体CYP450的诱导作用及其对丙咪嗪体外代谢的影响。方法：大鼠分别给予甘草或五味子的水提物连续3d或6d，然后制备肝微粒体并测定其CYP450的水平；以丙咪嗪为底物，采用体外温孵法，用HPLC测定丙咪嗪及其主要代谢物的量以考察其代谢情况。结果：给予中草药的大鼠肝微粒体CY P450水平均显著增加，其对丙咪嗪的体外代谢速率显著加快。结论：研究显示甘草和五味子对大鼠CYP450有诱导作用，且与剂量或诱导时间有关。     

基于CYP450酶的四逆汤复方配伍减毒机制研究

目的探讨CYP450酶的四逆汤复方配伍减毒机制。方法采用"Cocktail"探针药物法测定CYP1A2和CYP3A4酶活性,使用高效液相色谱仪检测血浆中咖啡因和咪达唑仑两种特异性探针药物的浓度。应用CO示差还原法测定大鼠肝微粒体中CYP450酶含量,通过反转录聚合酶链式反应来检测CYP1A2和CYP3A4 mRNA的表达。结果附子对CYP1A2和CYP3A4酶活性及CYP450酶含量无影响;甘草、附子配伍甘草和四逆汤对CYP1A2和CYP3A4酶活性有诱导作用并且显著增加CYP450酶含量;与对照组比较,甘草组、附子配伍甘草组和四逆汤全方组对CYP3A4 mRNA的表达有不同程度诱导作用。甘草组和四逆汤全方组对CYP1A2 mRNA表达有显著诱导作用,附子配伍甘草组对CYP1A2 mRNA表达无显著影响。结论实验研究表明甘草、附子配伍甘草、四逆汤全方能够诱导CYP1A2和CYP3A4酶活性,显著增加CYP450酶含量;附子配伍甘草对两种酶活性的影响可能由甘草对酶基因表达影响引发,使酶活性增强,从而加快附子毒性成分在体内代谢,从肝药代谢酶角度阐明甘草在四逆汤中对附子起主要减毒作用。     

基于尿液代谢组学的附子配伍甘草减毒作用研究

目的:利用代谢组学方法,基于附子毒性生物标记物配伍甘草前后的轨迹变化规律,阐释附子配伍甘草的减毒作用机制。方法:采用UPLC-HDMS对连续给药6个月的附子组、附子-甘草组和空白对照组大鼠尿液代谢轮廓进行分析,结合组织病理学观察结果,分析鉴定与附子毒性相关的生物标记物及相关代谢通路,并对附子与甘草配伍前后大鼠体内毒性生物标记物表达水平进行比较。结果:确定了12个与附子毒性相关的生物标记物和与之相关的6条代谢通路,附子配伍甘草后对其中10个毒性生物标记物具有较好的回调作用。结论:附子与甘草配伍可通过调节戊糖、葡萄糖醛酸转换,淀粉和蔗糖代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等代谢通路;有效降低附子的毒性,从代谢产物角度揭示中药配伍减毒的科学性,为附子的临床用药安全提供参考。     

常态及虚寒状态小鼠体内次乌头碱的血药浓度差异研究

目的:对比研究虚寒状态和常态小鼠血清中次乌头碱浓度差异,分析不同机体代谢环境的差异,在代谢层面说明药物毒性发生与机体的代谢环境有关。方法:复制小鼠虚寒状态模型,连续给予附子水煎液14d,用HPLC检测第1,7,14天虚寒状态及常态小鼠血清中次乌头碱的浓度;同时观察小鼠的存活率。结果:附子水煎液对虚寒状态小鼠机体代谢起调节作用,给药14d后,其血药浓度恢复或接近正常组水平;附子水煎液对常态组小鼠的体内代谢环境存在扰动,给药7,14d的血药浓度均比第1天高;在14d的给药周期内,虚寒组血药浓度的变化范围小于正常组。附子水煎液灌胃后第7天及第14天,虚寒状态组小鼠的存活率明显高于常态组小鼠。结论:常态及虚寒状态小鼠血药浓度的差异提示常态和虚寒状态小鼠的代谢环境存在差异,代谢环境在给予附子水煎液的过程中发生改变。实验结果在一定程度上说明附子在临床上产生毒性的剂量不同与机体的代谢环境不同有关。     

利血平诱导的急性抑郁模型大鼠体内CYP450亚酶的活性变化

目的:运用Cocktail探针法测定利血平诱导的急性抑郁模型大鼠体内6种细胞色素P450(CYP450)亚酶活性变化,从药物代谢相互作用的角度探寻抑郁症的发病机制。方法:建立利血平诱导的急性抑郁模型,大鼠随机分为空白组(记为A组),模型组(记为C组)和西药文拉法辛组(记为H组),适应1星期后,H组连续给药2周,A组和C组给予清水2周,第21天C组和H组按4 mg·kg~(-1)腹腔注射利血平注射剂,A组注射等体积生理盐水,第22天禁食不禁水12 h,第23天各组大鼠按10 m L·kg~(-1)灌胃给予混合探针药物。选取茶碱、氯唑沙宗、甲苯磺丁脲、右美沙芬、奥美拉唑以及咪达唑仑作为大鼠CYP1A2,CYP2C6,CYP2D1,CYP2D2,CYP2E1和CYP3A2的探针底物,采用LC-MS/MS测定大鼠体内6种混合探针的血药浓度,计算药动学参数。结果:造模后甲苯磺丁脲在大鼠体内浓度显著升高、代谢减慢;咪达唑仑在大鼠体内浓度显著降低、代谢加快。给予抗抑郁文拉法辛后,茶碱、氯唑沙宗和咪达唑仑在大鼠体内浓度显著升高、代谢减慢。结论:利血平诱导的急性抑郁模型状态对大鼠CYP2D1和CYP2D2有中强抑制作用,对CYP3A2有中强诱导作用;给予文拉法辛后对模型大鼠CYP1A2,CYP2C6,CYP2E1,CYP3A2为中强抑制作用。     

活血化瘀药物脑安胶囊对丙戊酸镁药动学影响的研究

 目的考察活血化瘀药物脑安胶囊对治疗癫痫药物丙戊酸镁(VPA-Mg)的药动学影响 方法 设计了自身对照双周期试验的方法,以实验兔单用丙戊酸镁片(单用组)及合用丙戊酸镁片+脑安胶囊(合用组)后,用TDx测定不同时间的血药浓度,比较其药动学参数。结果合用组所有的药动学参数均优于单用组(P<0.05),生物利用度单用组:合用组为1:1.57结论 活血化瘀药物脑安胶囊对治疗癫痫药物丙戊酸镁片的吸收有显著的协同、促进作用。     

电针对抑郁模型大鼠行为活动的影响

目的:观察电针及合用小剂量三环类抗抑郁药———氯丙咪嗪后抑郁模型大鼠行为活动的改善情况,探讨电针及针药结合的抗抑郁效果。方法:SD大鼠48只,分为正常组、模型组、电针组、小剂量氯丙咪嗪(2.5 mg/kg)组、大剂量氯丙咪嗪(5 mg/kg)组、电针合用小剂量氯丙咪嗪(2.5 mg/kg)组。采用国际通用的不可预知的长期应激刺激制造大鼠抑郁模型。应激刺激14 d后,治疗组(包括电针组和不同剂量的药物组)在给予应激刺激的同时开始治疗。药物治疗每天1次,共给药14次。电针取“百会”、右侧“阳陵泉”,疏密波(疏波频率4 Hz,串长2.5 s;密波频率60 Hz,串长5 s),强度≤1 mA,持续30 min/次,隔天1次,共治疗7次。采用活动性测试和强迫游泳实验评判大鼠抑郁程度的改善情况。结果:造模成功后,大鼠在活动性测试中垂直和水平运动显著下降,强迫游泳中静止时间显著增加。电针和大剂量的氯丙咪嗪(5 mg/kg)均可以增加大鼠的垂直和水平运动,减少强迫游泳实验中大鼠的静止时间。电针与小剂量氯丙咪嗪合用可进一步减少静止时间,增加垂直运动和水平运动。结论:电针具有良好的抗抑郁效果,小剂量药物合用电针一方面可降低用药剂量,另一方面可进一步提高电针疗效。     

四逆汤组方配伍减毒实验研究

目的针对四逆汤组方中所含的有毒中药附子,从毒理学角度研究四逆汤组方配伍的合理性。方法通过平行比较附子、附子配伍甘草、附子配伍干姜和四逆汤全方水煎液小鼠急性毒性、大鼠心脏毒性和毒性成分,测定小鼠急性毒性的半数致死剂量(LD50)、大鼠心脏毒性半数中毒剂量(TD50)和水煎液液中乌头碱类生物碱含量,从急性毒性、毒性靶器官和毒性成分3个方面研究四逆汤组方中不同配伍对附子毒性的影响。结果四逆汤组方中附子配伍甘草急性毒性的 LD50和心脏毒性的 TD50高于单用附子与四逆汤全方。而附子配伍干姜对附子的急性毒性的 LD50和心脏毒性的 TD50影响不明显。附子配伍甘草水煎液中主要毒性成分双酯型生物碱含量低于附子配伍干姜。结论四逆汤组方配伍药物中甘草对附子毒性具有减毒作用。     

基于代谢组学和网络药理学探讨附子甘草药对在生理/病理状态下的核心配伍内涵北大核心CSCD

为探讨附子甘草药对在正常生理状态与病理状态下的核心配伍内涵,对比研究附子单煎液、附子甘草合煎液对正常大鼠与心力衰竭模型大鼠血清/心肌组织生化指标、心肌组织病理学形态以及血清代谢轮廓的影响,利用网络药理学与代谢组学关联分析,构建甘草对附子增效、减毒的代谢物-靶点-通路关联网络,并采用Western blot方法对网络中的代表性通路进行实验验证。结果显示,附子单煎液与附子甘草合煎液均可降低模型大鼠体内肌酸激酶等指标的含量,改善心肌病理损伤,同时也均可使正常大鼠体内肌酸激酶等指标含量异常升高,导致心肌病理损伤,在正常大鼠与模型大鼠组间表现出配伍减毒与配伍增效2种结果;代谢组学结果显示,与附子单煎液相比,附子甘草合煎液回调模型大鼠体内代谢物种类更多,且回调作用更优,同时干扰正常大鼠代谢物水平的作用弱于附子单煎液;关联分析结果显示,甘草增强附子抗心力衰竭药效网络共涉及112个代谢物,89个靶点,15条通路,包括钙离子信号通路、cAMP信号通路等;甘草降低附子心脏毒性网络共涉及36个代谢物,59个靶点,11条通路,包括心肌细胞肾上腺素能信号、三羧酸循环等,相关蛋白表达水平的实验结果验证了关联分析的可靠性。该文通过研究说明,附子甘草药对在生理与病理状态下的核心配伍内涵发生改变,同时其配伍增效与配伍减毒结果是基于不同代谢途径与生物通路得以实现。     

四逆汤微量生物热技术加减配伍对细菌生长代谢影响的研究

目的:将微量生物热技术引入中药四逆汤加减配伍对细菌生长代谢影响的研究中。方法:模型菌采用大肠杆菌,建立热动力学模型,分析大肠杆菌在单药、附子配伍及四逆汤中的热动力学参数变化。结果:附子、干姜可增加大肠杆菌的代谢功率,甘草可使大肠杆菌的代谢功率略增加。附子与干姜配伍,可明显增加大肠杆菌的代谢功率;附子与甘草配伍后,可略降低大肠杆菌的代谢功率。四逆汤可明显增加大肠杆菌的代谢功率。结论:本研究结果可印证中医关于"附子性大热,干姜性热,甘草性平"及"附子无干姜不热,得甘草则缓"的理论,为中药配伍加减提供理论基础。     

附子汤合芍药甘草汤镇痛抗炎作用研究

目的 :观察附子汤与芍药甘草汤合用的镇痛、抗炎作用。方法 :采用扭体法、热板法和二甲苯致炎法分别检测附子汤、芍药甘草汤及二者合用对小鼠的镇痛率、对痛域提高的百分率和肿胀抑制率。结果 :附子汤与芍约甘草汤合用有镇痛、抗炎作用 ,且强于二方单用。结论 :附子汤与芍药甘草汤合用可使其镇痛、抗炎作用增强。     

桂枝芍药知母汤拆方的正交t值法实验研究

桂枝芍药知母汤为治疗类风湿关节炎的经方,长期以来广泛应用于临床,收效良好.为进一步探究方中起主要作用的药物,笔者采用正交t值法从抗炎、镇痛两方面药理作用综合考虑,进行了初步的处方筛选.实验结果表明:白芍、麻黄、制附子、炙甘草为方中主药.     

附子汤与芍药甘草汤合用的镇痛作用及机制研究

目的 :研究附子汤与芍药甘草汤合用的镇痛作用及其机制。方法 :采用福尔马林疼痛模型大鼠 ,观察药物的镇痛作用 ;采用冰醋酸致痛模型小鼠 ,测血清和脊髓中一氧化氮 (NO催化光度法 )、前列腺素E2 (PGE2 )的含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性 (紫外分光光度法 )。结果 :附子汤加芍药甘草汤能抑制福尔马林引起的I相及Ⅱ相疼痛 ,能显著降低冰醋酸疼痛模型小鼠血清中和脊髓中的NO ,PGE2 的含量 ,增加SOD的活性。结论 :附子汤与芍药甘草汤合用对中枢及外周神经末梢均有镇痛作用 ,其镇痛作用与NO ,PGE2 ,SOD有关     

中医“血瘀、阳亢、痰浊”高血压动物模型构建的研究

目的:构建一种具备中医"血瘀-阳亢-痰浊"证候特点的高血压大鼠模型,为相关研究提供载体。方法:将24只5周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)随机分为模型组(SHR-M)及对照组(SHR-C),同时设置9只年龄和性别相匹配的WKY大鼠(WKY-C)对照。其中SHR-C及WKY-C组始终以普通大鼠饲料喂养,而SHR-M组则接受持续高脂饮食喂养并且前4周以附子汤灌胃。12周后观察各组大鼠的血压、易激惹程度,并通过腹主动脉取血测定AngⅡ含量,空腹血糖、胰岛素、甘油三酯及胆固醇水平、血黏度等指标。结果:12周后SHR-M组大鼠血压高于其他两组大鼠(P<0.05),SHR-M组大鼠具有更高的易激惹程度(P<0.01),SHR-M组大鼠的血浆AngⅡ、甘油三酯、胆固醇、血黏度等指标均显著高于其余两组(P<0.05),SHR-M组大鼠的HOMA-IR胰岛素抵抗指数显著高于其余两组(P<0.05)。结论:以SHR为基础持续高脂饮食喂养配合附子汤灌胃可成功建立具备中医"血瘀-阳亢-痰浊"证候特点的高血压大鼠模型。     

附子的临床合理应用

附子的临床合理应用,一是要选用正品入药;二是要按标准规范炮制减毒应用;三是中医临床辩证要准确;四是配伍要对症合理,避免与相反相畏药物配伍;五是考虑病人个体差异的影响,投用剂量应遵循从小剂量到有效剂量,再到小剂量的应用原则。如此,方能扬附子宏效之长,避附子峻毒之短,达到临床合理应用附子的目的。     

隔物温和灸治疗膝骨关节炎临床观察

目的采用隔附子饼温和灸足三里、膝眼的方法,观察其治疗膝骨关节炎患者的临床疗效.方法隔物温和灸组用隔物温和灸治疗,穴取患膝犊鼻、内膝眼、足三里;药物组口服仙灵骨葆胶囊治疗.治疗4周后采用关节主症疼痛量表(VAS)、膝关节骨关节炎严重性指数(ISOA)量表评估临床疗效.结果2组患者治疗后关节疼痛、严重性指数的改善都明显优于治疗前(P＜0.01);治疗后隔物温和灸组止痛效果、病情严重性指数的变化均优于药物组(P＜0.05).隔物温和灸组基本临床痊愈率为80.0%,起效时间为(10.91±4.17)天,药物组为53.3%、(12.28±4.60)天,2组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).结论采用隔物温和灸治疗膝骨关节炎的临床疗效优于口服仙灵骨葆胶囊.     

加味麻杏石甘汤治疗支气管哮喘64例

[目的]观察加味麻杏石甘汤治疗支气管哮喘急性发作期的疗效。[方法]将128例随机分为两组,治疗组在西药治疗基础上,结合中药汤剂口服,对照组只用西药常规治疗。[结果]治疗组的疗效优于对照组(P<0.05)。[结论]在西药治疗基础上配合加味麻杏石甘汤,可明显改善症状,缩短疗程。     

活血潜阳方对高脂饮食加附子灌胃SHR血清AngⅡ含量、IR及脂代谢的影响

目的 分析血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量、HOMA-IR胰岛素抵抗指数及血脂变化,探求持续高脂饮食及附子灌胃对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）内皮功能及糖脂代谢的影响,并探讨活血潜阳方的干预作用.方法 以5周龄雄性SHR为对象,通过持续高脂饮食及附子灌胃4周,随机分为治疗组及模型对照组.并以年龄和性别相匹配的空白SHR大鼠及WKY大鼠对照.治疗组以活血潜阳方灌胃.其余各组以纯净饮用水灌胃.治疗8周后腹主动脉取血,测定AngⅡ含量,空腹血糖、胰岛素、三酰甘油（TG）及胆固醇（TC）水平.结果 各组SHR大鼠的AngⅡ含量、HOMA-IR指数、TG及TC均明显高于WKY组;其中高脂饮食＋附子灌胃的SHR大鼠模型组（SHR-C）各指标进一步显著提高,而活血潜阳方治疗8周,可以显著改善上述指标.结论 高脂饮食＋附子灌胃可以造成SHR大鼠更严重的内皮功能损伤,血脂异常及胰岛素抵抗.活血潜阳方可有效降低AngⅡ含量,改善其血脂异常及胰岛素抵抗状态.     

布拖附子最佳采收期的研究

目的：确定布拖附子最佳采收期。方法：采用折干率实验,研究不同生长期附子的产量,采用甲橙比色法测定附子中总生物碱含量。结果与结论：从药材内在质量和产量两方面综合考虑,确定8月20日至9月10日为布拖附子的最佳采收期。     

黑附子及配伍甘草、干姜对小鼠致死毒性随机平行对照研究

[目的]探讨附子及配伍对小鼠致死毒性影响。[方法]将50只小鼠编号并按随机数字表法分为四组:对照组、附子水组、附子炙甘草组、附子干姜组,10只/组。通过预实验确定小白鼠死亡临界剂量,将附子浓度分别配制成半致死剂量1倍、2倍和4倍3种浓度。根据小白鼠体重30±5g预测胃容量0.5±0.1mL,浓度分别为1.03mg/mL、2.05mg/mL、4.10g/mL;预实验结果4倍浓度下为69.68g/kg。8~9时间段内小鼠大量死亡,由此界定小鼠致死剂量。将药物熬到沸腾,持续40min,最后浓缩到10mL。常规灌胃干预,将小鼠腹位固定于玻璃板上,将附子及配伍甘草、干姜水煎剂灌胃小鼠,根据体重不同灌胃剂量0.5±0.1mL。[结果]附子与干姜或炙甘草配伍可缓解附子对小鼠的致死毒性,炙甘草作用较干姜明显,心率和体温下降明显变慢,漏搏、早搏、倒置减少。[结论]高浓度附子对小鼠具有较强的致死毒性,附子与干姜或炙甘草配伍对附子的致死作用具有较强解毒作用。