L-精氨酸诱导急性胰腺炎小鼠肠黏膜损伤的实验研究

目的探讨肠组织TNF-α和ICAM-1在大剂量L-精氨酸诱导小鼠急性胰腺炎并发肠黏膜损伤机制中的作用.方法 40只健康小鼠分正常对照组(15只)和胰腺炎组(25只).给胰腺炎组小鼠腹腔注射L-精氨酸(2 g/kg体重),间隔1 h后同量再注射1次,对照组注射等量生理盐水.胰腺炎组在末次注射后12 h采用比色法检测小鼠血清淀粉酶活性、放射免疫法测定肠组织TNF-α的含量;24 h观察胰腺和肠组织病理变化并采用免疫组织化学染色法检测肠组织ICAM-1的蛋白表达.结果胰腺组织和肠组织HE染色可见典型的炎性改变;胰腺炎组小鼠肠组织TNF-α的含量、ICAM-1的表达高于对照组,且差异有显著性(P＜ 0.05).结论肠组织TNF-α和ICAM-1可能参与了L-精氨酸诱导的AP小鼠的肠黏膜损伤机制.     

L-精氨酸诱导急性胰腺炎小鼠肠黏膜损伤的实验研究

目的探讨肠组织TNF-α和。ICAM-1在大剂量L-精氨酸诱导小鼠急性胰腺炎并发肠黏膜损伤机制中的作用。方法40只健康小鼠分正常对照组(15只)和胰腺炎组(25只)。给胰腺炎组小鼠腹腔注射L-精氨酸(2g/kg体重),间隔1h后同量再注射1次,对照组注射等量生理盐水。胰腺炎组在末次注射后12h采用比色法检测小鼠血清淀粉酶活性、放射免疫法测定肠组织TNF-α的含量;24h观察胰腺和肠组织病理变化并采用免疫组织化学染色法检测肠组织ICAM-1的蛋白表达。结果胰腺组织和肠组织HE染色可见典型的炎性改变;胰腺炎组小鼠肠组织TNF-α的含量、ICAM-1的表达高于对照组,且差异有显著性(P<0.05)。结论肠组织TNF-α和ICAM-1可能参与了L-精氨酸诱导的AP小鼠的肠黏膜损伤机制。     

腹腔注射左旋精氨酸诱导急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的实验研究

目的探讨大剂量左旋精氨酸腹腔注射诱导大鼠急性坏死性胰腺炎相关性肺损伤模型。方法将48只SD大鼠随机分成对照组(C组,n=24)、急性胰腺炎组(A组,n=24)。A组用6%的左旋精氨酸(L-Arginine,L-Arg)腹腔内注射,每次1.5 mg/g体重,共3次,注射间隔1h,诱导ANP和APALI模型;C组同法注射等量生理盐水。在注射完L-Arg后的第6、12和24小时三个时点分批处死大鼠,分别测定两组各时点血清淀粉酶水平,并观察各组对应各时点胰腺和肺组织病理学改变的变化。结果 A组大鼠胰腺和肺组织病理损伤在各时点比C组明显加重(P0.01);在肺损伤评分均呈正相关(r_s=0.374,P=0.046;r_s=0.452,P=0.027)。结论大剂量L-精氨酸分次腹腔内注射可成功诱导急性坏死性胰腺炎相关性肺损伤大鼠模型,ANP肺组织损伤程度与胰腺组织损伤程度密切相关。     

腹腔注射左旋精氨酸诱导急性坏死性胰腺炎大鼠模型

目的:通过大剂量左旋精氨酸(1-arginine) ip诱导大鼠急性胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)模式,探讨此模型制备的方法和机制．方法:将60只SD大鼠随机分为正常对照组(C组,n=24),ANP模型组(A组,n=36)．C组接受生理盐水对照;A组用60 g/L左旋精氨酸分3次ip建立ANP模型．分别观察两组大体病理变化、光镜下病理评分、血清淀粉酶水平．结果:1-arginine ip后24 h可观察到集中于小叶边缘区的大片胰腺组织坏死、腺小叶结构消失,A组的病理评分(4 h:4．45±1．33 vs 0．50±0．55．P<0．01;12 h:5．33±1．66 vs 0．67±0．82．P<0．01;24 h:7．89±1．67 vs 0．67±0．82,P<0．01;36 h:8．33±1．12 vs 0．67±0．82, P<0．01)、血清淀粉酶(4 h:8296．16±1028．21 nkat／L vs 6315．10±816．83 nkat／L,P<0．01;12 h: 11 255．92±2565．18 nkat／L vs 5867．84±632．29 nkat／L,P<0．01;24 h:54 424．22±27 125．09 nkat／L vs 6078．05±1070．88 nkat／L．P<0．01; 36 h:28 494．53±12 278．62 nkat／L vs 6286．26±1074．38 nkat／L,P<0．01)各时点都比C组明显升高．结论:采用分3次ip 60 g／L左旋精氨酸方法可成功诱导ANP模型．     

急性坏死性胰腺炎时肾上腺损伤的实验研究

重症急性胰腺炎(SAP)病情凶险,开始表现为全身炎症反应综合征,由此导致多器官功能不全综合征,病死率高达20%～30%.其中肾上腺功能不全(relative adrenal insufficiency)也是一个重要的临床问题[1-3],发生率随病情加重而增加[4].本研究建立急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠模型,探讨ANP时肾上腺形态及其功能的变化.     

急性坏死性胰腺炎肠粘膜屏障功能障碍及生长激素的作用

目的 探讨急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）肠粘膜屏障形态和功能的变化及生长激素（ＧＨ）的作用。方法 采用胰胆管内逆行注射５％牛磺胆酸钠溶液诱导大鼠ＡＮＰ。实验分３组：假手术组、ＡＮＰ＋生理盐水（ＮＳ）组、及ＡＮＰ＋ＧＨ组。术后２４h取末端回肠,观察病理形态变化;应用＾１２５Ⅰ－白蛋白测定肠壁通透性;ＲＴ－ＰＣＲ检测胰岛素样生长因子（ＩＧＦ－１）mＲＮＡ表达。结果 ＡＮＰ大鼠肠粘膜间质充血水肿,炎症细胞浸     

急性出血坏死性胰腺炎大鼠肠粘膜病变的实验研究

以胆胰管内注入牛磺胆酸钠诱发大鼠急性出血坏死性胰腺炎（ＡＨＮＰ）模型。术后１、６、１２小时应用８６ＲｂＣｌ标记法动态测定空回肠血流量；取回肠标本小块作光镜、扫描和透视电镜观察；同时观察ＮＢ５２０２１、Ｄａｚｍｅｇｒｅｌ对上述指标的影响。结果表明ＡＨＮＰ模型制备后，肠粘膜病理损伤呈时间依赖性，术后１２小时呈显著的粘膜下水肿、绒毛脱落裸露、上皮细胞间桥粒断裂；肠血流量进行性下降；ＢＮ５２０２１、Ｄａｚｍｅｇｒｅｌ显著增加肠血流量，减轻肠粘膜病理损伤。提示ＡＨＮＰ大鼠存在肠粘膜损伤，可能与血小板活化因子及血栓素Ａ２介导的肠血流减少有关。     

猪急性坏死性胰腺炎模型制备及肠屏障功能的改变

目前人们逐渐认识到肠道在重症急性胰腺炎（SAP）中的作用,肠屏障功能障碍和肠内细菌易位是导致SAP并发败血症及多器官功能衰竭（MODS）的一个重要因素。因此,肠道被认为是“MODS”的发动机”’。本研究的目的是建立猪急性坏死性胰腺炎（ANP）模型,并观察小肠黏膜的形态及功能改变,从而收集更多关于SAP肠屏障功能障碍的证据。     

猪急性坏死性胰腺炎模型制备及肠屏障功能的改变

目前人们逐渐认识到肠道在重症急性胰腺炎(SAP)中的作用,肠屏障功能障碍和肠内细菌易位是导致SAP并发败血症及多器官功能衰竭(MODS)的一个重要因素~([1-2]).因此,肠道被认为是"MODS"的发动机~[3].本研究的目的是建立猪 急性坏死性胰腺炎(ANP)模型,并观察小肠黏膜的形态及功能改变,从而收集更多关于SAP肠屏障功能障碍的证据.     

血管活性肠肽对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障功能的影响

目的 探讨血管活性肠肽(VIP)对ANP大鼠肠黏膜损伤的影响.方法 54只SD大鼠随机分成假手术组(SO)、ANP组和VIP组,每组分制模后1 h、6 h、12 h 3个时间点,各6只.采用4%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备ANP模型,VIP组在制模后5 min腹腔内注射VIP 5 nmol.ELISA法检测血浆及肠组织匀浆VIP水平;MB-80微生物快速动态检测系统检测血浆内毒素水平;RT-PCR法检测肠黏膜组织TNF-α、IL-6、IL-10 mRNA表达;肠黏膜行病理学检查.结果 ANP组肠黏膜结构损害明显,VIP组病变减轻.ANP组血浆及肠黏膜VIP水平在制模后6 h分别为(49.582 ±3.735)pg/ml和(87.731 ±4.601)pg/g pro,均显著低于SO组(P＜0.05),制模后12 h分别为(65.192±5.785)pg/ml和(110.978 ±6.420)pg/g pro,高于SO组;ANP组制模后6 h血浆内毒素水平、肠黏膜TNF-α、IL-6、IL-10mRNA表达量分别为(29.570±5.127)pg/ml、0.861±0.081、1.150±0.187和0.786±0.102,均显著高于SO组(P＜0.05).VIP组制模后6 h血浆内毒素水平、肠黏膜TNF-α、IL-6 mRNA表达分别为(20.486 ±2.811)pg/ml、0.707 ±0.095和0.889 ±0.136,均较ANP组下降(P＜0.05);IL-10 mRNA表达为0.992 ±0.126,较ANP组增高(P＜0.05).结论 VIP对ANP大鼠肠黏膜损伤具有明显的保护作用.     

乌司他丁对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的 观察乌司他丁干预急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠后血TNF-α、二胺氧化酶(DAO)及肠黏膜组织紧密连接蛋白-1( zonula occludens-1,ZO-1)表达水平的变化,探讨其可能机制.方法 按完全随机法将SD雄性大鼠随机分为假手术组、ANP组及乌司他丁组.采用5％牛磺胆酸钠逆行注入胆胰管的方法制模.制模后6、24h取血检测TNF-α、DAO活性,胰腺及回肠组织常规病理检查,RT-PCR及免疫组化法检测回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白的表达.结果 术后6h,ANP组胰腺大片坏死,大量炎细胞浸润;回肠黏膜绒毛上皮坏死、血管出血、炎细胞浸润.乌司他丁组的胰腺及回肠组织损伤较ANP组减轻.假手术组、ANP组、乌司他丁组术后6h的血TNF-α水平分别为(10.83±0.96)、( 181.89±4.93)、(128.23±2.40) ng/L;DAO活性分别为(354.79±3.67)、(117.21±5.58)、(282.98±9.12) U/L;回肠组织ZO-1蛋白表达量分别为(10.00±1.87)、(1.20±0.84)、(5.80±2.86)分;Z(O)-1 mRNA表达量为0.878±0.015、0.466±0.023、0.778±0.033.ANP组血TNF-α水平较假手术组明显升高,DAO活性、回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白表达较对照组明显降低(P值均＜0.05);乌司他丁组的血TNF-α水平较ANP组降低,DAO活性、回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白表达较ANP组明显升高(P值均＜0.05).结论 乌司他丁可能通过抑制TNF-α的过度释放、提高血浆中DAO活性,从而上调回肠组织中ZO-1 mRNA和蛋白表达,进而保护肠黏膜屏障.     

重症急性胰腺炎肠屏障功能障碍研究

重症急性胰腺炎患者常伴有肠屏障功能障碍,正常肠道屏障由机械屏障、化学屏障、免疫屏障与微生物屏障4部分构成.肠屏障功能障碍通常指上述4种屏障功能出现不同程度的破坏,本文就重症急性胰腺炎肠道屏障功能障碍时上述4种屏障的病理生理改变作一概述.     

重症急性胰腺炎对肠黏膜屏障损伤影响的研究进展

肠黏膜屏障功能是肠道的重要特征之一,大量研究表明重症急性胰腺炎(SAP)患者易发生肠屏障功能障碍,而肠屏障功能障碍又可进一步继发感染,甚至诱发和加重全身炎症反应综合征(SIRS)、多器官功能障碍综合征(MODS)。本文就SAP对肠黏膜屏障损伤影响的研究进展作一简要综述。     

大黄对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障及肠道菌群的作用研究

研究发现,重症急性胰腺炎（SAP）常并发肠黏膜屏障功能障碍（IBD）,出现肠道细菌易位,继发肠源性感染。感染相关并发症导致的病死人数占SAP患者病死总人数的80％。中药大黄作为一种溢清泻下的药物已应用于临床,但其详细机制不清。本研究旨在观察大黄对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肠黏膜屏障及肠道菌群的保护作用。     

参附注射液对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障保护作用的研究

目的 探讨参附注射液对ANP大鼠肠黏膜屏障的保护作用及机制.方法 雄性Wister大鼠21只,按随机分组法分为对照组、ANP组及参附治疗组(SF组),检测各组血浆MDA、MPO、SOD、TNF-α及小肠组织MDA、NO、MPO含量;免疫组化方法检测小肠组织NF-кB、ICAM-1及iNOS的蛋白表达.结果 ANP组血浆MPO、MDA、SOD、TNF-α量分别为(390.22±24.58)U/L、(41.79±5.68)nmol/L、(108.74±12.98)U/ml和(5.54±0.31)fmol/ml;肠组织MPO、MDA、NO含量分别为(270.96±31.86)U/g湿片、(7.61±2.02)nmol/g port和(51.21±46.98)μmoL/g prot;NF-кB、ICAM-1及iNOS蛋白阳性表达细胞数分别为85.68±7.79、0.218±0.035和0.098±0.016.SF组相对应值分别为(279.68±50.19)U/L、(31.07±3.92)nmoL/L、(123.45±7.94)U/L和(4.82±0.24)fmol/L:(214.46±19.64)U/g湿片、(2.88±1.48)nmol/g port和(20.27±7.92)μmol/g port;19.87±7.88、0.124±0.018和0.069±0.024.各项指标两组间差异均非常显著(P＜0.01).结论 参附注射液对ANP大鼠肠黏膜屏障有保护作用,其机制可能通过抑制NF-кB的表达,减少TNF-α、ICAM-1及iNOS的生成,从而改善肠道微循环,减轻肠组织炎症反应和减少氧自由基所致.     

生豆浆灌胃治疗小鼠急性坏死性胰腺炎研究

目的 探讨生豆浆灌胃对ANP小鼠的治疗作用.方法 采用腹腔注射左旋精氨酸法诱导小鼠ANP模型.200只小鼠按随机分组法分为正常组、ANP组、生豆浆治疗组、熟豆浆治疗组和纯净水组.后4组又分制模后6 h、12 h、24 h、48 h和72 h 5个时间点,各8只.检测各组血清淀粉酶活性,观察胰腺病理变化并评分,分析小鼠死亡率.结果 生豆浆组24 h、48 h和72 h血清淀粉酶活性分别为(3 910±833)U/L、(2 798±634)U/L和(3 398±1 389)U/L;胰腺病理分值分别为3.13±0.34、2.35±0.19和2.22±0.21,较其他3组均明显降低(P＜0.01或P＜0.05).生豆浆组7 d内死亡2只,其他组死亡5～6只.结论 生豆浆灌胃可明显抑制ANP小鼠的血清淀粉酶活性,减轻胰腺炎症程度,降低死亡率.该法可能是一种可行的治疗方法,值得进一步研究.     

血管活性肠肽对重症急性胰腺炎肠屏障保护作用的实验研究

目的 探讨血管活性肠肽(VIP)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠屏障的保护作用及其机制.方法 54只SD大鼠随机分成3组:假手术组(SO)、SAP组和VIP干预组,采用微泵逆行胰胆管注射4%牛磺胆酸钠制备SAP动物模型,SAP制模后5 min腹腔注射VIP 5×10-9nmol作为VIP干预组.各组在制模后1 h、6 h、12 h检测血浆内毒素水平,逆转录(RT)-PCR法及免疫组化法检测肠黏膜Toll样受体4(TLR4)表达,并对肠黏膜组织行电镜检查.结果 与SO组相比,SAP组血浆内毒素和肠黏膜TLR4表达在制模1 h即开始增高,并随制模时间的延长而进行性增高.两者具有明显的相关性.电镜检查肠黏膜有明显的病理损伤.VIP干预组与SAP组同时点相比,血浆内毒素和肠黏膜TLR4表达降低,病理损伤减轻,制模后6 h尤为明显.SO组肠黏膜未见TLR4表达.结论 VIP能有效保护SAP肠屏障功能,其机制可能与下调肠黏膜TLR4的表达有关.     

肠屏障功能障碍与重症急性胰腺炎

重症急性胰腺炎(SAP)常伴有肠屏障功能障碍(IBFD),IBFD可导致细菌、内毒素易位使SAP的病情进一步加重.SAP时IBFD的发生与炎症介质、微循环障碍、腹内高压、肠动力障碍、免疫功能障碍等因素有关,保护肠黏膜屏障对改善SAP的预后具有重要意义.     

谷氨酰胺对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用及机制

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)时的细菌感染主要是由于肠黏膜屏障破坏导致肠道细菌易位所致.谷氨酰胺作为肠黏膜的重要能源物质,同时也是核苷酸合成的重要底物,能够起到保护肠黏膜屏障,增强肠道免疫功能,降低炎症介质和细胞因子释放的作用.但其具体机制尚不清楚.本实验旨在评价谷氨酰胺灌肠对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肠黏膜屏障的保护作用,探讨其机制.     

清胰汤对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜机械屏障的保护作用

重症急性胰腺炎(SAP)发病机制除了胰酶激活学说,还有细菌及内毒素易位学说,其与肠屏障有关.针对SAP时如何保护肠黏膜屏障,减少肠道细菌易位和减轻内毒素血症成为近年来研究的热点[1-3].清胰汤是中药治疗SAP的经典方之一,本试验观察清胰汤对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)时小肠病理组织学和超微结构变化的影响,探讨其保护肠黏膜屏障的机制.