抑制性寡脱氧核苷酸对肝损伤小鼠pSTAT4、pSTAT6和T bet表达的影响及其意义 FREE

目的探讨抑制性寡脱氧核苷酸（suppressive oligodeoxynucleotide,Sup ODN）对刀豆蛋白A（ConA）诱导肝损伤小鼠兔抗鼠磷酸化信号转导和转录激动子4抗体 (pSTAT4) 、pSTAT6和T bet表达的影响及其意义。方法Balb/C小鼠40只被随机分为4组,分别为生理盐水（NS,空白对照）组、环孢菌素A（CsA）组（阳性对照）、Con ODN组（对照ODN）、Sup ODN组（实验组）。ConA（20 mg/kg）尾静脉注射Balb/C小鼠造模,造模同时分别给予Sup ODN、Con ODN、CsA或 NS 0.3 mL腹腔注射,分别于干预后8 h和24 h摘取小鼠脾脏,提取蛋白检测pSTAT4、pSTAT6和T bet的表达。结果无论是干预后8 h还是24 h,Sup ODN组pSTAT4及T bet蛋白的表达水平与NS、Con ODN及CsA组相比,均显著下降（均P<0.01）;而pSTAT6蛋白表达水平,Sup ODN组与NS、Con ODN及CsA组差异均无显著性（均P>0.05）。结论Sup ODN可能通过抑制细胞内转录因子pSTAT4和T bet的表达,抑制小鼠Th1型免疫应答,最终实现其对肝损伤的保护作用。     

抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠CD4+T细胞T bet、STAT4及STAT6表达的影响

目的探讨体外实验中,抑制性寡脱氧核苷酸(Sup ODN)对小鼠脾脏CD4+T细胞转录因子T细胞表达的T盒(T bet)、信号转导子和转录激动子(STAT) 4及STAT6表达的影响。方法分离小鼠脾脏淋巴细胞,免疫磁珠阳选法纯化CD4+T细胞,流式细胞仪分析分选纯度,在抗 CD3ε抗体、抗 CD28抗体、白细胞介素（IL） 12作用下,加入Sup ODN或对照寡脱氧核苷酸(Con ODN)培养72 h后,常规提取核蛋白。Western blot测定核蛋白中磷酸化的STAT (pSTAT) 4、pSTAT6 和T bet蛋白表达。结果与Con ODN 组和PBS组比较,Sup ODN组中T bet 和pSTAT4的表达水平明显降低（P＜0.05）,而pSTAT6表达水平明显升高（P＜0.05）。结论Sup ODN可能通过下调pSTAT4和T bet的表达,体外抑制小鼠CD4+T细胞向Th1细胞的功能性分化,上调pSTAT6的表达,促进Th2细胞的分化。     

抑制性寡脱氧核苷酸对染矽尘小鼠肺炎症的影响

将Balb/c小鼠60只随机分为4组,分别为正常组、矽尘组、抑制性寡脱氧核苷酸(Sup ODN)组、对照寡脱氧核苷酸(Con ODN)组。7 d后处死动物,检测血清IFN-、TNF-α水平;瑞氏染色作白细胞分类计数;HE染色观察肺组织的病理改变。结果Sup ODN组与矽尘组、Con ODN组相比,IFN-水平明显降低(P0.01),Sup ODN可明显减轻肺组织炎症反应,炎性细胞浸润减少。提示Sup ODN对染矽尘小鼠肺部炎症有明显的保护作用。     

抑制性寡核苷酸对染矽尘小鼠γ-干扰素和pSTAT4表达的影响

目的 探讨抑制性寡核苷酸(suppressive oligodeoxynucleotides,Sup ODN)对染矽尘小鼠γ-干扰素(IFN-γ)和磷酸化的信号转导子及转录激活子4(pSTAT4)表达的影响.方法 Balb/c小鼠60只随机分为空白对照组、矽尘组、抑制性寡核苷酸组、对照寡核苷酸(control oligodeoxynucleotides,Con ODN)组,每组15只.抑制性寡核苷酸组和对照寡核苷酸组分别腹腔注射抑制性寡核苷酸组、对照寡核苷酸各0.3 ml(1 mg/ml)3 h后,经气管一次性注入0.1 ml SiO2悬液(5 g/L),空白对照组经气管一次性注入等量生理盐水.不同处理7d后处死动物,采用ELISA法检测血清IFN-γ水平;免疫组织化学法检测肺组织中IFN-γ和pSTAT4的表达,并作定量分析;HE染色观察肺组织病理变化.结果 HE染色显示,矽尘组小鼠肺组织间隔水肿并增厚,抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织炎症较矽尘组减轻.与空白对照组[血清:(280.1±41.3) pg/ml,肺组织:(0.249-0.373)]比较,矽尘组小鼠肺组织IFN-γ表达[血清:(886.3±81.7) pg/ml,肺组织:(0.270±0.300)]增加,差异有统计学意义(P＜0.05).抑制性寡核苷酸组小鼠血清中IFN-γ表达[(478.5±38.6) pg/ml]明显低于矽尘组和对照寡核苷酸组[(894.5±91.6) pg/ml],差异有统计学意义(P＜0.01).与矽尘组比较,抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织内IFN-γ表达(0.241±0.250)减少,差异有统计学意义(P＜0.05).与空白对照组(0.279±0.353)比较,矽尘组小鼠肺组织pSTAT4表达(0.313±0.231)增加,差异有统计学意义(P＜0.01);与矽尘组比较,抑制性寡核苷酸组小鼠肺组织内pSTAT4表达(0.269±0.523)明显减少,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 抑制性寡核苷酸可抑制IFN-γ和pSTAT4的表达,对染矽尘小鼠早期炎症有一定的抑制作用,具体机制有待进一步研究.     

抑制性寡脱氧核苷酸的免疫学活性及其应用

抑制性寡脱氧核苷酸(oligodeoxymucleotides,ODN)序列在哺乳动物端粒中呈高频率出现。富含“GC”序列的抑制性ODN选择性阻断CpG-SODN诱导的免疫活化作用。含多聚“G”结构的抑制性ODN,具有更广泛的抑制效应。有理由相信抑制性ODN用于以免疫过度活化为特征的组织损伤和自身免疫性疾病的治疗中将会有很好的前景。     

外源核苷酸对小鼠免疫功能的影响

目的 :　本实验研究了日粮核苷酸促进免疫抑制小鼠的免疫功能恢复的作用。方法 :　选取 5～ 6 w龄 ,体重为 (2 0± 2 ) g的健康昆明种小鼠 6 0只 ,设 0、0 .0 5 %、0 .2 5 %三个核苷酸水平处理 ,每个处理中又分成正常和免疫抑制两个组 ,其中所有免疫抑制组在实验的第 2 d一次性大剂量腹腔注射环磷酰胺 (1 5 0 mg/kg bw) ,制备免疫抑制模型 ;正常组注射等同剂量的生理盐水。饲养 1 0 d后观察小鼠增重、脾脏和胸腺的脏器指数、脾淋巴细胞转化率、脾脏中抗 SRBC抗体形成细胞数量以及血清中抗 SRBC抗体水平。结果 :　日粮中添加核苷酸能够提高正常小鼠的增重 (P<0 .0 5 )、胸腺指数、淋巴细胞转化率 (P<0 .0 5 )及血清中抗体水平 ,极显著提高免疫抑制小鼠抗体水平 (P<0 .0 1 ) ,使抑制小鼠的各项指标接近正常。抗 SRBC抗体形成细胞数量没有显著变化。结论 :　在无核苷酸日粮中添加核苷酸能够促进正常小鼠免疫功能的提高 ,使免疫抑制小鼠免疫功能得到改善。     

红托竹荪对小鼠IL-12、IL-4和IFN-γ表达影响

目的探讨红托竹荪对小鼠免疫功能的影响。方法用不同浓度红托竹荪按0.02mL/g对小鼠连续灌胃30 d,在第20天开始对环磷酰胺组、红托竹荪低、中、高剂量组(5、10、15 g/kg)小鼠腹腔注射50 mg/kg环磷酰胺,连续3d,同时各剂量红托竹荪组继续进行红托竹荪灌胃。禁食24h后称重,小鼠眼球取血,分离脾脏和胸腺。测定小鼠血清中白细胞介素-12(IL-12)、IL-4和γ-干扰素(IFN-γ)水平。结果与对照组比较,环磷酰胺组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数无明显变化;与环磷酰胺组比较,高剂量红托竹荪组小鼠体重、脾脏指数、胸腺指数明显升高(P0.05)。与对照组比较,环磷酰胺组小鼠血清中IL-12、IL-4和IFN-γ含量[分别为(18.12±3.55)、(10.19±2.29)、(12.73±2.79)ng/mL]均明显下降,差异有统计学意义(P0.05);与环磷酰胺组比较,中、高剂量红托竹荪组小鼠血清中IL-12、IL-4和IFN-γ含量[分别为(32.58±3.95)、(17.81±4.23)、(22.58±3.76)和(31.73±4.30)、(23.50±1.66)、(25.27±3.86)ng/mL]均升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论红托竹荪可以促进IL-12、IL-4和IFN-γ表达,对环磷酰胺诱导的小鼠免疫功能损伤具有一定保护作用。     

外源核苷酸对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的 探讨外源核苷酸对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法 首先建立了体内细胞凋亡模型,25只4周龄雄性小鼠腹腔注射地塞米松(25mg／kg)4、8、16、24h后取胸腺淋巴细胞进行细胞凋亡检测。确定建立体内细胞凋亡模型的条件为注射地塞米松(25mg／kg)后16h取小鼠胸腺细胞。外源核苷酸对小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的影响,60只小鼠分成阴性对照、阳性对照、核苷酸1组、核苷酸2组,共4组,每组15只小鼠,均饲喂半纯合饲料。对照组每天灌胃生理盐水,核苷酸1组和2组分别灌胃12．5mg和25mg的核苷酸,连续饲养14d后阳性对照组和核苷酸组小鼠腹腔注射地塞米松溶液,诱导小鼠胸腺淋巴细胞凋亡,阴性对照组注射等量的生理盐水,16h后分离脾脏和胸腺,测定脾脏及胸腺指数,并采用琼脂糖凝胶电泳和流式分析方法检测胸腺淋巴细胞凋亡情况以及细胞游离Ca^2 浓度([Ca^2 ]i)。结果 核苷酸1组和2组小鼠的增重分别为3．71、4．01g,阴性对照组小鼠增重为2．74g,注射地塞米松后阳性对照组和核苷酸组小鼠的脾脏、胸腺重量以及脏器指数低于阴性对照,添加核苷酸对这些脏器指数没有明显影响;注射地塞米松后小鼠胸腺细胞DNA出现梯形条带,注射地塞米松后阳性对照组和核苷酸组小鼠胸腺细胞内Ca^2 水平分别升高至167．37nmoL／L、191．16nmol／L、180．78nmol／L,高于阴性对照(103．76nmoL／L)。细胞凋亡率也分别由阴性对照组的0．31％升高到11．93％、9．82％、11．15％,补充核苷酸对细胞内Ca^2 水平和细胞凋亡率均没有显著影响。结论 外源核苷酸对地塞米松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡没有显著影响。     

栀子黄色素对四氯化碳肝损伤小鼠的影响

目的 :　研究栀子黄色素 (GY)对 CCl4 肝损伤小鼠的保护作用。方法 :　取健康的雄性昆明种小鼠 (2 0± 2 ) g 5 0只 ,按体重随机分成 5组 ,每组 1 0只 ,即正常组 ,(饲喂正常饲料 ) ,CCl4 肝损伤组 (正常饲料 +CCl4 ) ,低剂量组 (正常饲料 +CCl4 +0 .1 ml GY溶液 /只 ) ,中剂量组 (正常饲料 +CCl4 +0 .2 ml GY溶液 /只 ) ,高剂量组 (正常饲料 +CCl4 +0 .4ml GY溶液 /只 )。GY溶液提前 5 d每天灌胃 ,对照组与肝损伤组灌胃 0 .4ml生理盐水 ,末次灌胃后 2 h给 0 .1 0 % CCl4 0 .4ml致伤。1 8h后摘除眼球取血 ,测定血清谷丙转氨酶 (SGPT)、谷草转氨酶 (SGOT)、乳酸脱氢酶 (LDH)活性 ,破腹取肝脏 ,测定肝脏丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)含量及肝脏指数 ,并对肝细胞的组织形态学进行观察。结果 :　预先灌 GY溶液 ,具有显著地抑制 CCl4 引起的小鼠血清 SGPT、SGOT、LDH及肝脏 MDA含量、肝脏指数的升高以及肝脏 GSH含量的降低 ,并能显著地减轻 CCl4 引起的肝小叶内的灶性坏死。结论 :　栀子黄色素对 CCl4 致小鼠肝损伤具有保护作用     

镁离子、维生素C对小鼠实验性肝损伤的影响

目的：探讨镁离子、维生素C对昆明种小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：昆明种小鼠50只随机分5组，设正常对照组、病理模型组、镁离子保护组，饮水中以MgS04的形式加入镁；维生素C保护组，饲料中加入维生素C；镁离子和维生素C保护组；饲养10d，腹腔注射0．15％0c14致小鼠肝损伤，观察镁离子、维生素C单独应用和联合应用对急性肝损伤的保护作用。结果：镁离子和维生素C能显著降低血清中ALT和AST，以及肝细胞中脂质过氧化物MDA的含量；镁和维生素C合用有协同效应。结论：镁离子和维生素C对实验性肝损伤有保护作用。     

外源核苷酸对IEC-6细胞凋亡的影响

目的探讨外源核苷酸对正常肠上皮细胞系IEC6凋亡的作用。方法体外培养的IEC6细胞经4种单核苷酸及按母乳组成模式配制的核苷酸混合物处理,然后采用流式细胞术、电子显微镜等方法观测细胞凋亡。结果流式细胞检测表明嘌呤核苷酸AMP和GMP均能诱导细胞凋亡,但电子显微镜观察发现仅有AMP诱导典型的细胞凋亡特征。嘧啶核苷酸和核苷酸混合物不诱导细胞凋亡,而且嘧啶核苷酸UMP能解除嘌呤核苷酸诱导细胞凋亡的作用。结论嘌呤核苷酸可诱导肠上皮细胞凋亡,嘧啶核苷酸UMP可解除嘌呤核苷酸的凋亡诱导作用。     

乌蕨对小鼠CCl_4肝损伤防治作用的研究

乌蕨为鳞始蕨科植物乌蕨[Stenolomachusana（L）Ching］的全草，又称金花草，土黄莲，广泛分布于我国长江以南地区，是一种用途较广的民间草药[1]。全草味苦，性微寒，在浙江民间主要用于治疗急性黄殖和非黄疸型肝炎。本文就其对四氯化碳所致小鼠肝损伤的防治作用进行实验研究。一、材料与方法1．药材与试剂（1）乌蕨采自浙江省奉化县，该钟经第二军医大学药学院生药学教研室张芝玉教授鉴定。将该药制成水煎剂，每11。l相当于原药材3g。（2）动物：第二军医大学动物实验中心提供昆明种雄性小鼠，体重18～229。（3）试剂：谷一两转氨酶测定…     

镁离子对小鼠CCl_4实验性肝损伤的保护作用

目的:探讨镁离子对实验性肝损伤的保护作用。方法:3月龄昆明种小鼠50只,随机分正常对照组、氧化对照组、不同浓度镁保护组,饲养10 d,腹腔注射0.15%CCl4致小鼠肝损伤,24 h取血分离血清,制备肝匀浆,测定血清中ALT、AST及肝匀浆中MDA、SOD、GSH的含量,观察镁离子对肝损伤的保护作用;结果:镁离子能显著降低小鼠血清中ALT和AST活性,以及肝细胞中脂质过氧化物MDA的含量。结论:镁离子能对抑制自由基的生成,促进自由基的清除,对肝损伤有保护作用。     

大蒜素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的影响

大蒜素 (diallyl trisulfide)又名大蒜新素 ,化学名为二烯丙基三硫化物 ,是从大蒜球茎中分离出的一种化合物 ,为大蒜的有效成分 ,大蒜素具有多种生物活性 ,如抗真菌、降血脂及防癌等功效 ,还具有抗氧化作用。已知人体内自由基、脂质过氧化反应是药物或毒物产生病理损伤的生化基础 ,故本文采用四氯化碳 (CCl4)致小鼠急性肝损伤模型 ,研究大蒜素对化学性肝损伤的保护作用。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　样品 :“大蒜素”由江西鹰潭天益正元生物保健品有限公司提供 ,为白色粉末 ,不溶于水。1.1.2　试剂 :CCl4(分析纯 )由上海化学试剂厂生产 …     

载硒酵母对小鼠化学性肝损伤的影响

观察不同剂量（３０，６０，９０ｍｇ／ｋｇ）载硒酵母（ｓｅｌｍｉｎｍ－ｅｎｒｉｃｈｅｄｙｅａｓｔ，ＳＥＹ）ｉｇ７天对ＣＣｌ４和Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ引起的化学性肝损伤的保护作用。结果发现：ＳＥＹ６０ｍｇ／ｋｇ可降低ＣＣｌ４所致血清ＡＬＴ的升高，各剂量组均可降低Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致血清ＡＬＴ和ＡＳＴ的升高，ＳＥＹ３０ｍｇ／ｋｇ可减轻Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致肝病理损伤，各剂量组ＳＥＹ均可降低Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致肝匀浆ＭＤＡ含量升高。提示ＳＥＹ在一定程度上可减轻ＣＣｌ４和Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ的化学性损伤，其作用机制可能与抗氧化作用有关。     

被动吸烟对小鼠白介素-6、白介素-8水平表达的影响

目的观察被动吸烟对小鼠白介素石（IL-6）、白介素-8（IL-8）水平表达的影响。方法将小鼠随机分为2组,分别为实验组和对照组。用ELISA方法检测小鼠血清中IL-6、IL-8的表达情况。结果实验组小鼠血清中IL-6含量为（41．77±1．87）pg／ml,对照组小鼠血清中IL-6含量为（34．98±1．84）pg／ml,两者相比,差异有统计学意义（t=14．15,P〈0．01）。实验组小鼠血清中IL-6含量增高;实验组小鼠血清中IL-8含量为（52．95±1．09）pg／ml,对照组小鼠血清IL-8含量为（65．63±2．59）pg／ml,两者相比差异有统计学意义（t=24．86,P〈0．01）。实验组小鼠血清中IL-8含量减少。结论被动吸烟能促使小鼠IL-6的表达升高,IL-8的表达降低。可能与其参与炎症反应过程有关。     

外源性核苷酸对孕期饮酒小鼠子代生长发育的影响

目的 探讨外源性核苷酸对孕期饮酒C57BL/6J小鼠子代生长发育的影响.方法 C57BL/6J孕鼠随机分为空白对照组、酒精对照组和低(0.01％)、中(0.04％)、高(0.16％)3个核苷酸干预组,对照组动物喂饲普通小鼠饲料,核苷酸干预组喂饲含有相应剂量核苷酸的饲料,并于孕6～15 d给予酒精对照组和各干预组孕鼠5 g/kg bw酒精灌胃,观察母鼠和仔鼠整个实验周期内体重、进食量、食物利用率的变化和子代小鼠生长发育、神经发育指标达标的时间.结果 0.04％核苷酸干预组孕鼠孕期的体重增长值明显高于酒精对照组(P＜0.05),3个核苷酸干预组孕鼠的食物利用率也显著高于酒精对照组(P＜0.01);断乳后4周内,酒精对照组子代小鼠的体重增长值和食物利用率均明显低于其他各组(P＜ 0.05和P＜0.01);酒精对照组子代小鼠出生后门齿萌出、睁眼的时间和平面翻正、悬崖回避、空中翻正等神经反射达标的时间也明显比其他各组迟缓(P＜0.05和P＜0.01).结论 孕期补充核苷酸可以干预宫内酒精暴露引起的生长发育迟缓.     

扇贝提取物对肝损伤小鼠抗氧化功能的影响

目的　观察扇贝提取物 (SE)对肝损伤小鼠抗氧化功能的影响。方法　一次灌胃6% CCl4 油溶液 1 0 ml/kg bw,通过谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)、脂质过氧化物 (LPO)等指标观察给予 0 .5、1 .5、3.0 (g/kg)扇贝提取物的作用。结果　给予不同剂量扇贝提取物降低 LPO、提高 GSH- Px及 SOD的作用不同 ,以 1 .5g/kg bw效果最好。结论　扇贝提取物可能具有保护肝脏的作用     

急、慢性酒精暴露对小鼠肝损伤的作用

目的探讨不同方式酒精暴露致小鼠肝损伤作用。方法选择32只6周龄SPF级C57BL/6J雄性小鼠,适应性喂养1周后,随机分配到急性酒精处理组和慢性酒精处理组,每组16只;在每个组别中,再随机分成对照组(n=8)和酒精组(n=8)。将C57BL/6J小鼠分别通过单次给予50%(V/V)乙醇溶液(4 g/kg体重)灌胃和喂养LIEBER-DECARLI酒精液体饲料6周建立急性和慢性酒精性肝损伤模型。取血清检测生化指标丙氨酸氨基转移酶(ALT)及血脂水平,取肝脏并称重,计算肝脏指数。采用苏木精伊红(HE)染色观察病理改变、肝组织匀浆后检测丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平。结果与各自对照组相比,两酒精组小鼠肝脏指数均有增加,且慢性酒精组(5.47±0.08)差异有统计学意义(P=0.032);两酒精组小鼠血清ALT和甘油三酯水平均显著增加,其中慢性酒精组ALT[(69.6±0.10)mmol/L]增加更为明显(P=0.009);HE染色结果显示两酒精组小鼠肝组织均有受损,其中慢性酒精组小鼠肝损伤组织学、脂肪变性及炎症坏死程度较急性组均表现更严重;两酒精组小鼠肝脏MDA含量均有升高,...     

枸杞多糖对肝损伤小鼠总胆红素和NO影响的实验研究

目的探讨枸杞多糖对实验性肝损伤的保护作用。方法用CCL4建立小鼠肝损伤模型。给小鼠口服枸杞多糖100 mg.kg-1.d-1;用苯甲酸钠—咖啡因比色法测定血清中总胆红素含量,采用硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮含量。结果枸杞多糖能有效地降低CCL4引起的小鼠血清中总胆红素、一氧化氮的含量;统计学处理有显著性差异(P<0.01),明显减轻CCL4对肝组织的损伤。结论枸杞多糖具有抗CCL4所致小鼠肝细胞损伤的作用。