不同剂量辛伐他汀对冠状动脉性心脏病患者瘦素/脂联素影响的对比研究

目的:对比研究不同剂量辛伐他汀对冠状动脉性心脏病患者瘦素/脂联素影响。方法:选择冠状动脉性心脏病患者100例,分为观察组和对照组。两组均给予冠心病常规治疗,在此基础上对照组口服辛伐他汀40 mg,观察组口服辛伐他汀80 mg。于用药前、用药4周后均测定血清瘦素浓度和脂联素浓度,并计算出比值。结果:治疗前血清瘦素/脂联素比较,两组差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后,观察组血清瘦素/脂联素低于对照组,治疗前后的血清瘦素/脂联差值也低于对照组,比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:对冠状动脉性心脏病患者强化辛伐他汀的使用剂量可有效降低瘦素/脂联素水平,具有较高的应有价值。     

脂联素与慢性乙型病毒性肝炎患者肝纤维化的相关性研究

目的探讨脂联素与慢性乙型病毒性肝炎患者肝纤维化的相关性。方法纳入30例肝纤维化患者、30例肝硬化患者、30例健康体检者为研究对象,对肝纤维化及肝硬化患者以恩替卡韦抗病毒,分别于纳入研究当日、24周、48周检测所有对象肝功能、脂联素水平、肝纤四项。比较各组脂联素水平;评价脂联素与AST/ALT、TBA、肝纤维化指标的相关性;单独以肝纤维化及肝硬化患者为研究对象,将48周时肝纤维化得到改善患者纳为改善组,其余患者纳为未改善组,对比血清脂联素水平。结果 1各时点对比,血清脂联素水平均呈健康体检者<肝纤维化组<肝硬化组,组间差异均有统计学意义(P<0.05);2脂联素水平与AST/ALT、TBA、PCⅢ、LN、CⅣ、HA均呈正相关(P<0.05);3改善组血清脂联素水平明显低于对照组(P<0.05)。结论血清脂联素水平随肝纤维化、肝硬化病程发展而上升;脂联素水平与肝功能恶化程度、肝纤四项均有明显相关性;患者若接受抗病毒治疗,脂联素水平将显著下降。     

烟酸对兔脂肪细胞分泌脂联素的影响

目的:探讨烟酸对高胆固醇血症兔血清脂联素及正常兔脂肪细胞分泌脂联素的影响.方法:将10只新西兰大白兔饲以高胆固醇饲料8周后,随机分为高脂淀粉组(5只)和高脂烟酸组(5只),后者在高胆固醇饮食基础上给予烟酸缓释片0.4 g/(kg·d)共6周;另设普通饲料对照组(5只),于第14周末取皮下脂肪组织行脂肪细胞培养,以不同浓度烟酸孵育兔脂肪细胞24 h后提取上清液.采用ELISA方法分别测定兔血清及上清液中脂联素的浓度.结果:高脂淀粉组兔血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显高于对照组(P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)轻度升高;烟酸干预后,血TC和LDL-C明显降低(P＜0.001),HDL-C明显升高(P＜0.001).8周时高脂组血清脂联素浓度为(1.268±0.039)mg/L,明显低于对照组的(1.449±0.107)mg/L(P＜0.01),经治疗后,脂联素水平明显升高至(1.444±0.057)mg/L,且与HDL-C呈正相关,与TC和LDL-C呈负相关.体外干预实验发现,烟酸促进正常脂肪细胞分泌脂联素,呈浓度依赖性.结论:高胆固醇血症兔脂肪细胞脂联素分泌明显减少,烟酸能显著促进脂联素的分泌,提示烟酸可能有独立于降脂外的升高脂联素的作用.     

小鼠周脂素基因的原核表达及纯化

目的构建小鼠周脂素（prilipin,Plin）原核表达载体,表达周脂素蛋白并进行初步纯化,为研究周脂素的功能奠定基础。方法通过酶切从pMD18-Plin重组载体上酶切下周脂素目的基因,定向插入原核表达载体pET-32a（＋）中,转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定后,进行纯化。结果构建的pET-32a-Plin载体能够表达周脂素重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白的50%,经初步纯化后,纯度达95%以上。结论成功构建了周脂素原核表达载体,并在原核系统中表达了重组蛋白,纯化的蛋白纯度较高,可用于后续试验。     

罗格列酮对肥胖大鼠骨骼肌脂质及其相关蛋白表达的影响

目的探讨罗格列酮对肥胖大鼠骨骼肌脂质含量和脂滴相关蛋白磷酸化周脂素和小凹蛋白-3表达的影响。方法建立肥胖大鼠模型并以罗格列酮进行干预,14周后测量体质量、身长,检测生化指标,并对其进行正葡萄糖-高胰岛素钳夹试验;处死大鼠后提取骨骼肌,生化方法检测骨骼肌脂质含量、Western blot检测骨骼肌脂滴相关蛋白的表达水平。结果肥胖大鼠骨骼肌细胞内脂质沉积明显增加、磷酸化周脂素和小凹蛋白-3分别较对照组增加42%和26%,与胰岛素抵抗相关,而罗格列酮干预后可以显著降低肥胖大鼠的骨骼肌脂质含量、增加胰岛素敏感性,上调磷酸化周脂素和小凹蛋白-3的表达水平。结论罗格列酮增加胰岛素敏感性,上调磷酸化周脂素和小凹蛋白-3的表达水平与格列酮类改善脂质溢出、调节脂滴脂质构成,直接下调DAG等反应性脂簇有关。     

非酒精性脂肪肝大鼠脂联素及其受体与肝脏病理改变的关系

目的:探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠血清脂联素水平、肝脏脂联素受体(adipoR)mRNA表达与肝组织病理改变的关系。方法:喂养高脂饲料建立NAFLD大鼠模型,分别于第2、4、8、12周处死,ELISA法检测血清脂联素及其他生化指标,测肝指数,RT-PCR法检测肝脏adipoR mRNA表达,肝组织切片苏丹Ⅲ脂肪染色、H-E常规染色和Masson三色纤维染色,显微镜下观察。结果:模型组大鼠第2、4、8、12周血清脂联素水平逐步下降,均低于同期对照组(P均＜0.01);血清脂联素水平与肝指数(r=-0.383,P=0.015)、肝脏炎症评分(r=-0.475,P=0.002)、纤维化评分(r=-0.459,P=0.003)均显著负相关。模型组肝脏adipoR1 mRNA表达逐步上升,adipoR2表达逐步下降,分别于4周、2周开始与对照组相比具有统计学差异(P均＜0.01);肝脏adipoR2 表达与肝指数(r=-0.431,P=0.006)、纤维化评分(r=-0.353,P=0.025)均显著负相关。结论:NAFLD大鼠肝脏adipoR mRNA表达异常、血清脂联素水平降低,后者与肝脏脂肪性炎症、纤维化程度相关,提示血清脂联素降低,肝脏adipoR表达异常,尤其是adipoR2 mRNA降低与NAFLD密切相关。     

洛伐他汀对急性心肌梗死患者血清脂联素浓度的影响

目的 探讨洛伐他汀对急性心肌梗死(AMI)患者血清脂联素浓度的影响.方法 临床选取AMI患者56例,随机分为常规治疗组(26例)和洛伐他汀组(30例).两组患者均给予常规药物治疗2周;洛伐他汀组在常规治疗的基础上加用洛伐他汀20mg,每日1次口服,治疗2周.分别于治疗前和治疗后测定血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和脂联素,并进行对比.结果 ①常规治疗组患者治疗前后对比的血清TG、TC及LDL-C无明显变化,而脂联素浓度明显升高(P<0.05);②洛伐他汀组患者治疗后的血清TG、TC、LDL-C均较治疗前下降,而脂联素浓度明显升高,且治疗后脂联素的升高较常规治疗组更为明显(P<0.05).结论 洛伐他汀能改善AMI患者的血脂水平,显著升高血清脂联素浓度.     

黄连素对2型糖尿病患者群瘦素、脂联素及胰岛素抵抗的影响

目的:探讨黄连素在2型糖尿病患者群中对瘦素、脂联素及胰岛素抵抗的影响,为黄连素的临床降糖提供临床依据。方法:选取单用胰岛素治疗的2型糖尿病患者,将其分为黄连素治疗组和对照组,分别于服药0、4、8、12周检测空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、瘦素、脂联素及空腹胰岛素,并计算胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数。结果:黄连素治疗组与对照组比较,空腹血糖自第4周始逐渐降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。脂联素自第8周始逐渐升高,差异具有统计学意义(P<0.05);血清瘦素和胰岛素水平降低,具有统计学意义(P<0.05);胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:黄连素可降低血糖,提高脂联素水平,降低瘦素水平,改善胰岛素抵抗。     

妊娠期糖尿病患者和正常孕妇的内脏脂肪素、脂联素在不同孕周的血清及新生儿脐血清中的表达

目的:研究妊娠期糖尿病患者和正常孕妇的内脏脂肪素、脂联素在不同孕周的血清及新生儿脐血清中的表达。方法:2013年1月-7月在青岛市立医院产科产检的孕妇中,选取妊娠期糖尿病孕妇62例为试验组,正常孕妇68例为对照组。用ELISA方法检测31~33周孕妇血清,37~41周孕妇血清,足月新生儿脐血血清脂联素(adiponectin)、内脂素(visfatin)的含量。结果:随着妊娠的进展,血清脂联素水平呈逐渐下降,内脂素水平逐渐上升,三个采血时间段比较差异均有统计学意义(P0.001)。妊娠期糖尿病患者血清脂联素水平在中孕及晚孕均低于正常妊娠组,而血清内脂素水平在中孕及晚孕均高于正常妊娠组,两组比较差异均有统计学意义(P0.001)。新生儿脐血脂联素、内脂素水平显著高于母血,比较差异均有统计学意义(P0.001)。结论:可考虑应用血清脂联素水平与内脂素水平对妊娠期糖尿病进行预测及评估,并作为指导GDM的治疗的新的理论。     

黄连素对2型糖尿病大鼠脂联素基因表达的影响

目的观察黄连素对高脂膳食加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病(2-DM)大鼠胰岛素抵抗指数及肾周脂肪组织脂联素基因mRNA表达的影响。方法选用高脂饲料加小剂量STZ建立2-DM大鼠模型共40只,将2-DM大鼠随机分为模型组(水)和黄连素高、中、低剂量组(0.20、0.10、0.05g/kg),每组10只,另选10只大鼠为正常组,各组灌胃8周后,空腹取材,采用逆转录聚合酶链式反应检测肾周白色脂肪组织脂联素基因mRNA水平,放射免疫法测定空腹胰岛素并计算胰岛素抵抗指数(IRI)。结果正常对照组大鼠与2型糖尿病模型组大鼠脂联素基因表达、IRI间比较差异有统计学意义(P<0.01);模型组与黄连素高、中剂量组大鼠脂联素基因表达、IRI间差异有统计学意义(P<0.01)。结论黄连素可增加2-DM大鼠脂联素基因mRNA的表达,降低IRI。     

C57BL/6J小鼠脂肪组织总RNA提取及周脂素基因的克隆

目的 用改进后的方法提取高质量的RNA,以此为模板,应用T-A克隆法克隆C57BL/6J小鼠周脂素基因编码区,对其进行测序验证,并与GenBank比对.方法 在试剂说明书基础上,改进提取脂肪组织RNA的方法,从C57BL/6J附睾脂肪组织提取高质量的总RNA,用RT-PCR扩增出周脂素编码区基因,并将目的基因编码区克隆入pMD18-T载体中,转化E-coli JM109后,筛选阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后,对其进行测序验证,并与GenBank比对.结果 用改进后的方法成功提取出了高质量的总RNA,并且成功提取构建的重组载体中含有周脂素基因的全长序列,与GenBank公布的序列一致.结论 改进的后的脂肪组织RNA提取方法是可行的,并获得周脂素基因的cDNA.为进一步研究其生物学功能奠定了基础.     

高浓度葡萄糖刺激脂肪细胞脂肪分解的效应及其机制

目的:研究高浓度葡萄糖刺激脂肪细胞脂肪分解升高血浆游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)水平的效应及其机制,进一步阐明高糖导致胰岛素抵抗的作用机制.方法:以Sprague-Dawley(SD)大鼠附睾原代脂肪细胞为研究对象,设为正常葡萄糖(5mmol/L)对照组和高浓度葡萄糖(25mmol/L)干预组.将细胞孵育一定时间直接或加入异丙基肾上腺素刺激后测定培养基中甘油含量作为评价脂肪分解的指标.脂肪分解数据表示为每升脂肪细胞压积的毫摩尔甘油释放量(mmol/L packed cell volume, mmol/L PCV).用Western blot方法分别检测总的及磷酸化的脂滴包被蛋白(perilipin)含量以及激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase, HSL)和脂肪组织甘油三酯水解酶(adipose triglyceride lipase, ATGL)的含量.用酶化学法测定胞浆脂肪分解酶活性.结果:高浓度葡萄糖明显刺激大鼠原代脂肪细胞脂肪分解.将细胞在高糖中孵育24h,甘油累积量从4.4mmol/L PCV增加至6.4mmol/L PCV,即增加1.5倍(P<0.01);30min甘油释放量从0.11mmol/L PCV增加至0.24 mmol/L PCV,即增加2.1倍(P<0.01).高糖刺激脂肪分解的作用从细胞孵育16h开始持续到24h,且25mmol/L葡萄糖的效应较10mmol/L葡萄糖强.高糖明显增加perilipin磷酸化,但不影响该蛋白表达.高糖使胞内脂肪分解酶活性升高1.74倍并显著上调HSL蛋白表达,但不影响ATGL蛋白含量.异丙基肾上腺素刺激的脂肪分解在高糖环境下进一步增强.结论:高浓度葡萄糖通过增加perilipin磷酸化、上调HSL蛋白表达和升高脂肪分解酶活性从而直接刺激脂肪细胞脂肪分解.这提示高浓度葡萄糖单独即可以使FFA从脂肪组织向血浆中释放增加,循环FFA水平升高从而导致胰岛素抵抗.     

Perilipin对脂肪细胞内三酰甘油的代谢调控作用

三酰甘油贮存在哺乳动物细胞内脂滴中,脂滴表面镶嵌着多种蛋白,对脂滴功能具有重要调节作用,因此脂滴也越来越多地被认为是一种代谢活跃的细胞器。新近的研究表明脂滴表面PAT家族蛋白perilipin对脂肪细胞内三酰甘油的代谢起全局性调控作用,本文就脂肪细胞内perilipin的功能予以综述。     

脂肪干细胞向神经细胞诱导分化研究进展

随着干细胞研究的不断深入,人们对胚胎干细胞、骨髓干细胞等干细胞的研究取得很大成就.现由于脂肪干细胞来源丰富,便于提取,并且与骨髓于细胞均来源于中胚层,具有自我修复能力和多向分化潜能,在特定的环境条件下可以诱导脂肪干细胞向多种细胞(神经细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、软骨细胞、心肌细胞等)分化.目前诱导脂肪肝细胞向神经细胞分化具有治疗勃起功能障碍的潜能,同时在治疗其他神经损伤方面有一定的疗效,因此脂肪干细胞向神经细胞诱导分化是值得我们进一步探索和研究的.     

法国海岸松树皮提取物碧萝芷对长链游离脂肪酸诱导的巨噬细胞perilipin基因表达的影响

 目的研究碧萝芷（PYC）对油酸诱导的巨噬细胞perilipin2 表达的影响及其相关分子机制。方法应用Real-time PCR
和Western blot 测定油酸及PYC 对perilipin2 mRNA 和蛋白水平表达影响。应用荧光素酶活性分析方法检测油酸及PYC 对perilipin2
启动子活性的影响。结果油酸以剂量和浓度依赖方式上调perilipin2 mRNA 和蛋白水平表达,并促进perilipin2 启
动子活性。PYC 以剂量依赖方式抑制了油酸诱导的perilipin2 表达及启动子活性。结论PYC 抑制了巨噬细胞中油酸诱导的
perilipin2 的表达。PYC通过抑制perilipin2 启动子活性,从而直接抑制perilipin2 的表达。     

脂肪干细胞(ASCs)在急性肾损伤(AKI)动物模型治疗中的作用研究进展

 近年来干细胞移植已成为损伤组织更新、再生和修复研究的重点。来源于脂肪组织的干细胞群较其他干细胞系有独特的优势。首先,脂肪组织分布广泛,容易获取,对患者创伤小,患者易于接受;其次,干细胞群易于分离,增殖速度快,能够快速应用于治疗。急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)作为内科常见急症,发病率高,治疗手段相对较局限,治疗效果不理想,亟需新的治疗方法,其中细胞疗法被认为是非常有前景的治疗手段。本文就脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ASCs)在AKI动物模型治疗中的应用进行综述和展望,以期为今后的研究奠定基础。     

衰老过程中的脂肪组织炎症研究进展

传统上,脂肪组织在肥胖和饮食相关代谢紊乱研究中被视为一种内分泌器官,然而,随着研究揭示白色脂肪组织作为能量储存、脂质代谢位点和脂肪因子分泌者发挥作用,脂肪组织已被认为是年轻肥胖和老年肥胖代谢健康的重要器官。在衰老研究的领域内,抗衰老药senolytics已经成为该领域的研究热点,清除衰老细胞能减少与年龄相关的疾病。更有意思的是,抗衰老研究显示,这些衰老细胞,特别是p16（Ink4a）阳性衰老细胞可在脂肪组织、骨骼肌和眼睛中积累。暗示脂肪组织在衰老中的重要性,并拓宽了衰老细胞跨越免疫和非免疫细胞途径影响机体寿命和健康的研究范围。     

绿色荧光蛋白标记人脂肪基质细胞成骨分化能力体外实验研究

目的研究绿色荧光蛋白(GFP)基因体外转染人脂肪基质细胞的方法,并检测基因转染后细胞的生物学特性及分化潜能。方法体外分离培养人脂肪基质细胞,用重组腺病毒载体Ad-GFP及脂质体介导质粒pEGFP-C1两种方法转染GFP基因,通过流式细胞术观察比较GFP转染和表达的结果;倒置显微镜下观察细胞生长情况;将腺病毒介导的基因转染细胞经成骨定向诱导后,检测碱性磷酸酶表达和钙结节形成情况。结果重组GFP基因的腺病毒Ad-GFP转染的脂肪基质细胞的感染率达(42.5±1.5)%,16h即有GFP表达,7d时表达趋于稳定,感染6周时仍可见有GFP表达,明显优于脂质体转染组(转染效率最高为11.4%)。感染Ad-GFP后的脂肪基质细胞与未感染的对照组脂肪基质细胞成骨诱导分化后碱性磷酸酶(ALP)表达均逐渐增高,两组间差异无统计学意义(P>0.05);诱导21d后两组均见到茜素红钙盐染色阳性。结论重组GFP基因的腺病毒载体Ad-GFP可高效率感染脂肪基质细胞,基因转染后细胞的增殖分化能力未受到影响,可以作为一种高效可靠的人脂肪基质细胞标记方法。     

干细胞移植治疗股骨头骨坏死研究进展

股骨头骨坏死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)是骨关节科临床常见的疑难病、多发病之一,因发病机制尚未完全明确,故难以治疗,晚期致残率较高。近年来有不少研究均证实了干细胞移植对该病的较好疗效,如间充质干细胞、脂肪干细胞、外周血造血干细胞等多种干细胞均可以用于移植。本文将对运用干细胞移植治疗股骨头骨坏死目前的研究进展进行综述。     

海藻糖对颗粒脂肪细胞冷冻保存效果的影响

目的观察海藻糖在低温保存条件下对颗粒脂肪细胞活性的影响,以寻求一种实用、有效保护颗粒脂肪细胞活性的方法,为临床应用提供初步理论依据。方法剪碎法获取的正常乳房脂肪,纯化后,每2．5ml置入一冻存管,将冻存管分为A、B组,分别添加同体积的生理盐水和海藻糖,置于-196℃（液氮）中冻存。2周后取出、复苏解冻,全自动生化分析仪测定颗粒脂肪细胞葡萄糖转移量,苏木精一伊红染色观察细胞形态学变化,镜下计数形态完整脂肪细胞。通过2组间葡萄糖转移量及细胞形态的对比,比较添加物对颗粒脂肪细胞活性的影响。结果B组葡萄糖转移量明显高于A组,2组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。2组大部分脂肪细胞形态完整,细胞核位置无明显变化;2组完整细胞计数比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论低温条件下,与生理盐水相比,海藻糖能较好保持脂肪细胞活性。