共查询到20条相似文献,搜索用时 62 毫秒
1.
应用基因芯片技术检测耐利福平结核分枝杆菌基因型 总被引:3,自引:0,他引:3
目的研制一种新型DNA芯片,用于快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变。方法根据结核分枝杆菌rpoB基因序列设计探针并制作DNA芯片,用TAMRA标记的引物扩增结核分枝杆菌rpoB基因突变热点的片断,与DNA芯片杂交,同时以PCR-SSCP和DNA测序法为对照。结果240株结核分枝杆菌临床分离株中,55株全敏感株和66株耐其他药物的利福平敏感株的PCK—SSCP和DNA芯片杂交结果与结核分枝杆菌标准株完全相同;119株耐RFP临床分离株中DNA芯片杂交有117株检测到rpoB基因突变,其中111株单位点突变,78株为531住密码子TCG→TTG(Ser→Leu)、TCG→TGG(Ser→Trp)和TCG→TAC(Ser→Tyr)突变;24株为526位蓉码子CAC→TAC(His→Tyr)、CAC→GAC(His→Asp)、CAC→CCC(His→Pr0)、CAC→CTC(His→Leu)和CAC→CGC(His→A职)突变;4株为516住客码子GAC→GTC(Asp→Val)和GAC→GGC(Asp→Gly)突变;3株为533位密码子CTG→CCG(Leu→Pro)突变;1株为511位密码子CTG→CCG(Leu→Pro)突变;1株为513位密码子CAA→AAA(Gln→Lys)突变;6株为双位点突变,其中3株511和516位联合突变,2株533和515住联合突变,1株517位密码子CAG→CAC(Gln→His)和518位密码子AAC→GAC(Asn→Asp)联合突变。DNA测序结果与DNA芯片杂交结果完全一致。1株516位GAC—TAC(Asp→Tyr)突变的分离株及1株516位GAC—TAC(Ssp→Tyr)和518住AAC—CAC(Asn→His)联合突变的分离株DNA芯片检测阴性,是因为芯片上无相应的探针。结论用DNA芯片可快速、特异地检测出大多数结核分枝杆菌耐利福平分离株的rpoB基因突变。可用于临床耐药性的检测,指导临床用药。 相似文献
2.
淋球菌多重耐药性与mtrR基因点突变的关系 总被引:2,自引:1,他引:2
目的探讨多传递耐药(mtr)外排系统中mtrN基因点突变与淋球菌流行株多重耐药性的关系。方法应用K-B法和琼脂稀释法分离出55株淋球菌流行株。利用小量细菌基因组DNA快速抽提试剂盒取淋球菌DNA,PCR扩增16株淋球菌mtrR基因.并对扩增产物测序.比较淋球菌敏感株与多重耐药株的差异。结果淋球菌多重耐药株占76.36%(42/55)。4株敏感株和2株耐青霉素淋球菌无mtrR基因突变,10株多重耐药株均有mtrR基因点突变,表现为3种点突变形式:6株发生了第45位Gly(GGC→GAC)Asp,3株发生了第14位His(CAC→CGC)Arg.1株发生了第51化Phe(TTC→GTC)Val。结论淋球菌mtrR基因第45位Gly(GGC→GAC)Asp,14位His(CAC→CGC)Arg和第51位Phe(TTC→GTC)Val突变与淋球菌流行株的多重耐药性密切相关。 相似文献
3.
目的 探讨甘露糖凝集素(mannosebinding lectin,MBL)基因多态性与中枢神经系统脱髓鞘疾病的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法检测45例中枢神经系统脱髓鞘疾病和60例健康人的MBL基因多态性的分布.结果 45例中枢神经系统脱髓鞘疾病患者甘露糖凝集素基因Exon Ⅰ54位密码子点突变中,野生型(GGC/GGC)为34例,占75.56%;突变杂合子型(GGC/GAC)为10例,占22.22%;突变纯合子型(GAC/GAC)为1例,占2.22%.基因频率:GGC为86.67%,GAC为13.33%.对照组野生型(GGC/GGC)为30例,占50.00%;突变杂合子型(GGC/GAC)为28例,占46.67%;突变纯合子型(GAC/GAC)为2例,占3.33%.基因频率:GGC为73.33%,GAC为26.67%.中枢神经系统脱髓鞘疾病患者GGC/GGC基因型频率增高,而GGC/GAC基因型频率降低,差异均有统计学意义(P<0.05);中枢神经系统脱髓鞘疾病患者GGC等位基因频率高于健康对照组,而GAC等位基因频率低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MBL基因突变可能是中枢神经系统脱髓鞘疾病发病的危险因素. 相似文献
4.
对喹诺酮类药物耐药的志贺菌gyrA基因突变的研究 总被引:4,自引:1,他引:3
目的 研究福氏志贺菌对喹诺酮类药物的耐药机制。方法 对38株耐药的福氏志贺菌gyrA基因的N末端编码区进行PCR扩增后,用SSCP方法检测突变,然后测序。结果 福氏志贺菌gyrA基因PCR-SSCP显示有8株突变,测序结果揭示存在2个导致氨基酸改变的基因点突变:83位TCG(Ser)→TTG(Leu)突变和87位GAC(Asp)→GGC(Gly)突变。结论 gyrA基因点突变与福氏志贺菌对喹诺酮类药物的高水平耐药有密切关系。 相似文献
5.
对喹诺酮类药物耐药的志贺菌gyrA基因突变的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的研究福氏志贺菌对喹诺酮类药物的耐药机制。方法对38株耐药的福氏志贺菌gyrA基因的N末端编码区进行PCR扩增后,用SSCP方法检测突变,然后测序。结果福氏志贺菌gyrA基因PCR-SSCP显示有8株突变,测序结果揭示存在2个导致氨基酸改变的基因点突变:83位TCG(Ser)→TTG(Leu)突变和87位GAC(Asp)→GGC(Gly)突变。结论gyrA基因点突变与福氏志贺菌对喹诺酮类药物的高水平耐药有密切关系。 相似文献
6.
目的了解遵义地区结核分枝杆菌耐利福平临床分离株rpoB基因突变特点.方法采用比例法对肺结核患者痰标本分离的127株结核分枝杆菌进行药物敏感性试验,并对结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因包括耐药决定区81个碱基在内的412bp片段进行PCR扩增及序列测定.结果127株结核分枝杆菌临床分离株中49株对利福平耐药,78株对利福平敏感.49株耐利福平临床分离株中,31株rpoB基因存在突变(63.3%),突变位点为531、526和516等;511位点CTG→CAG(Leu→Pro)为新的突变位点;4株双位点联合突变,其中2例为新的联合突变:GAC516GGC,ATC572CTC和CTG511CAG,CAC526AAC.结论结核分枝杆菌耐利福平与rpoB基因突变相关,且存在地区差异. 相似文献
7.
微流芯片技术在耐药株结核杆菌检测中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨微流芯片技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变的可行性。方法:根据rpoB基因最为常见的三种突变形式(531TCG→TTG,526CAC→TAC,516GAC→GTC)设计引物,用于微流芯片检测结核分枝杆菌利福平耐药性,同时与常规药敏试验和DNA测序结果进行比较。结果:引物比例1:5,杂交温度52℃,杂交时间10min为最佳条件。在20株常规药敏试验为利福平敏感株中,微流芯片测出2株耐药株,并经DNA测序证实;而28株药敏试验为利福平耐药株中,1株微流芯片测定为敏感株,DNA测序证实为513位CAA→CTA突变。该法与常规药敏试验和DNA测序的总符合率分别为93.8%(45/48)和97.9%(47/48)。结论:微流芯片技术快速、灵敏、准确,可用于结核分枝杆菌利福平耐药性的快速检测。 相似文献
8.
目的:检测乳腺癌患者(breast and ovarian cancer susceptibility gene1,BRCAl)基因exonll突变情况及突变位置,探讨BRCAl突变与乳腺癌的关系。方法:采取105例乳腺癌标本为实验组,30例非癌乳腺组织为对照组。应用PCR—SSCP技术和DNA直接测序法检测所有标本BRCAl基因外显子11全部序列的突变情况。结果:30例非癌乳腺组织BRCAl基因外显子11未检出突变,105例乳腺癌中有10例发生基因突变,占总例数的9.5%。10例中2例为同义突变:2430T→ C,2630T→G;8例为错义突变:2532T→G,2685T→C(2例),3191C→G,3232A→G,3667A→G(2例),3876C→A。结论:BRCAl基因外显子11突变与乳腺癌的发生关系密切,对其进行检测可能对乳腺癌的患病风险评估及早期诊断具有重要意义。 相似文献
9.
目的探讨多药耐药基因1(Multidrug-resistance Gene1,MDR1)C3435T位点单核苷酸多态性(Sin-gle Nucleotide Polymorphism,SNP)及其相应的蛋白产物-多药耐药蛋白(P-gp)在乳腺癌患者中表达的临床意义。方法收集宁夏医科大学附属医院154例乳腺癌患者的术后石蜡包块及相关临床及病理资料,应用免疫组化方法(IHC)检测乳腺癌组织中P-gp的表达状态,评估P-gp在乳腺癌中的表达及其临床意义;并随机抽取其中60例石蜡标本采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析(Polymerase Chain Reaction-Restriction FragmentLength Polymorphism,PCR-RFLP)各基因型,评估MDR1基因C3435T位点多态性与P-gp表达的关系。结果①P-gp阳性组化疗后白细胞和血红蛋白的Ⅰ-Ⅳ度下降率分别为79.44%和43.93%,均低于P-gp阴性组化疗后白细胞和血红蛋白的Ⅰ-Ⅳ度的下降率95.74%及63.83%,差异均有统计学意义(P〈0.05);②MDR1C3435T位点野生纯合子TT基因型的P-gp阳性表达率4%明显低于突变后的CC+TC基因型的P-gp阳性表达率96%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 P-gp有望成为化疗用药的指南及预测化疗后出现血液毒性的指标;MDR1C3435T位点突变后的基因型可能更易导致其蛋白产物P-gp表达水平的变化。 相似文献
10.
家族性乳腺癌23例患者乳腺癌易感基因-1部分序列突变分析 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨中国汉族家族性乳腺癌患者乳腺癌易感基因-1(BRCA1)的突变情况。方法:采用聚合酶链反应-单链构像多态性分析(PCR-SSCP),标记染色双脱氧末端法测序,对15个家系23例家族性乳腺癌患者进行BRCA1部分序列突变分析。结果:发现4例基因突变,突变率为17.4%(4/23例),其中1例为2228insG,致编码子711处蛋白截短,另3组(2种)为1884A→T和3232A-→G,突变引起单个氨基酸改变。结论:在中国汉族家族性乳腺癌患者中BRCA 1突变率较低,3232A→G可能为中国人的突变热点,BRCA 1突变检测在高危人群中有一定意义。 相似文献
11.
12.
13.
2-氯-4-硝基苯-麦芽三糖苷作为α-淀粉酶底物的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究α-淀粉酶及其底物2-氯-4-硝基苯-麦芽三糖苷(CNP-G3)酶促反应过程中的激动剂,抑制剂,最适pH、米氏常数等。方法:以测定酶促反应速度的方式分别进行综合。结果:阳离子中仅钙离子和氨离子对α-淀粉酶有轻度的激活作用,阴离子中的氯离子对α-淀粉酶有强大的激活作用,约是迭氮钠的4倍,醋酸离子也有弱激活作用。硫酸,磷酸氢,碳酸离子无激活作用;乙二胺四乙酸是酶的强抑制剂;酶的最适pH为5.9-6.1;酶以CNP-G3为底物时的Km值约为0.22mmol/L;麦芽糖对α-淀粉酶有显著的抑制作用;EGTA为钙离子螯合剂,可调节反应速度,结论:α-淀粉/CNP-G3酶促反应系统研究可用于酶活性和激动剂测定。 相似文献
14.
一个半综合征是一种具有特征性的眼球运动障碍,也是一个具有重要定位意义的临床休征。本文报道6例思考并结合文献资料,对该综合征的临床表现、病变部位和病因进行了讨论。 相似文献
15.
16.
施作雄 《南通大学学报(哲学社会科学版)》2004,20(2):113-117
王个簃乃吴昌硕衣钵传人,有"当代缶庐"之誉.早年追随吴昌硕,浸淫于传统文化的探求;中年外师造化,深入生活探索创新,笔墨紧随时代;晚年重构新局,开笔墨设色新境界.个簃先生诗书画印,高浑郁勃,古茂班斓,堪称大师风范.其虚怀若谷、诲人不倦的美德,老而弥坚的爱国爱乡情怀,更是垂范艺林. 相似文献
17.
石宏 《中国比较医学杂志》2014,24(10):78-81,89
目的:观察酸敏感离子通道亚基3(ASIC3,又名ACCN3)基因敲除ASIC3-/-小鼠、香草酸瞬时受体亚型I(TRPV1)基因敲除TRPV1-/-小鼠的生存曲线,为进一步繁殖使用该品系小鼠提供参考。方法选用105只基因敲除小鼠,其中ASIC3-/-鼠44只,TRPV1-/-鼠61只。观察正常喂养两种小鼠500d以内的生存情况,并绘制生存曲线,进行生存分析。结果ASIC3-/-小鼠与TRPV1-/-小鼠随着时间的延长,生存概率降低,经比较TRPV1-/-小鼠的生存概率优于ASIC3-/-小鼠的生存概率,两种小鼠的生存时间存在统计学差异,(P=0.004,P<0.01),两种小鼠中不同性别之间的生存曲线无显著学差异。结论TRPV1-/-小鼠的生存概率优于ASIC3-/-小鼠的生存概率。而两种鼠不同性别之间的生存概率则基本相当。 相似文献
18.
19.
MOROCUTTI C 《Wiener Medizinische Wochenschrift》1957,107(28):582-586