臭灵丹黄酮对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的保护作用

目的:观察臭灵丹黄酮(CLD)对脂多糖(LPS)引起的小鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法:昆明种小鼠随机分为空白对照组、模型组、地塞米松组和臭灵丹黄酮低、中、高剂量组。臭灵丹黄酮各剂量组于造模前连续7 d灌胃给予CLD,于最后一次给药后2 h,通过滴鼻LPS建立小鼠ALI模型,造模6 h及24 h后分别处死动物,测定肺湿/干重比值(W/D)、肺泡灌洗液(BALF)中NO和总蛋白的含量、肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)及髓过氧化物酶(MPO)的水平,观察肺部组织学的病理变化。结果:臭灵丹黄酮可以显著降低LPS引起的急性肺损伤小鼠的肺组织W/D,降低BALF中NO和总蛋白的含量,降低肺组织中MPO的水平,升高肺组织中SOD的含量,减轻肺组织中炎性细胞的浸润及支气管腔炎性细胞和渗出物。结论:臭灵丹黄酮对LPS所致ALI具有保护作用,其作用机制可能与抑制肺组织中炎症介质和减轻肺组织脂质过氧化损伤有关。     

积雪草苷对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响

目的观察积雪草苷对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的保护效应。方法56只Balb/c小鼠随机分为对照、假手术、模型、溶媒、积雪草苷(5、15、45 mg/kg)7组,每组8只。LPS(2.5 mg/kg)气管滴注造ALI模型,24 h后HE染色观察小鼠肺组织病理改变,计算肺湿质量/干质量值;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)后行白细胞计数和分类,BCA法检测其蛋白的量;化学法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果积雪草苷各剂量组呈剂量依赖性减轻LPS所致ALI模型肺组织病变情况,减轻肺水肿,减轻中性粒细胞的浸润,抑制蛋白渗出。抑制肺组织中MPO活性。结论积雪草苷对LPS诱导ALI有保护效应。     

金振口服液对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的实验研究

目的：探讨金振口服液（JZKFY）对脂多糖（LPS）致急性肺损伤（ALI）大鼠的影响。方法：实验动物随机分为正常组、模型组、阳性对照组、JZKFY 高、中、低3 个剂量（4.4、2.2、1.1 g·kg-1）,各给药组连续灌胃给药7 天;末次给药后1 h,除正常组外,每鼠气管内滴注LPS（6 mg·kg-1）复制LPS 致ALI 大鼠模型,正常对照组给予等体积生理盐水,注射LPS 16 h 后麻醉大鼠,取肺,进行组织学观察,并检测肺通透性、肺组织MPO、MDA、SOD 活性、血清TNF-ɑ、IL-6、IL-1β的含量。结果：JZKFY 高、中、低剂量组均能降低肺通透指数;JZKFY 高、中剂量组能调节肺组织MPO、MDA、SOD 活性;JZKFY 高、中剂量组明显降低血清TNF-ɑ、IL-6、IL-1β的含量;JZKFY 高、中剂量组明显改善ALI 的肺组织病变。结论：JZKFY 对LPS 诱导的急性肺损伤具一定的改善作用,其机制可能与改善肺血管通透性,减轻肺内中性粒细胞聚集,提高抗氧化应激能力及下调炎症反应有关。     

透邪解毒汤对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的干预效果及机制研究

目的 观察透邪解毒汤对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠的干预效果,并探讨其作用机制。方法 将40只C57BL6小鼠随机分成对照组、模型组、透邪解毒汤低浓度组及透邪解毒汤高浓度组,每组10只。对照组和模型组每日均予0.9%氯化钠注射液0.2 mL灌胃,透邪解毒汤低、高浓度组每日分别予1、2 g/mL透邪解毒汤药液0.2 mL灌胃,各组均连续灌胃5 d后,除对照组外其余3组小鼠分别给予腹腔注射LPS(10 mg/mL)0.2 mL诱导建立ALI模型,并在LPS注射24 h后收集肺泡灌洗液、摘取全部肺组织。比较各组小鼠肺损伤评分、肺湿/干质量比情况,比较各组小鼠肺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β的mRNA相对表达量及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-1β表达情况,比较各组小鼠肺组织中Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路相关蛋白TLR4、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白磷酸化c-Jun氨基末端蛋白激酶(p-JNK)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38)、...     

3种常见脂多糖所致急性肺损伤大鼠模型肺损伤程度相关性研究

目的研究3种常见脂多糖所致急性肺损伤（ALI）大鼠模型,并探讨模型制作的方法和经验。方法选择130只健康SD大鼠,随机分4组,尾静脉注射组（40只）采用尾静脉注射造模,气管注入模型组（40只）采用气管注入造模．二次打击模型组（40只）采用“二次打击”方式造模,另选10只SD大鼠为对照组。结果完成实验后,尾静脉注射组死亡4只,气管注入模型组死亡10只,二次打击模型组死亡12只,尾静脉注射组与气管注入模型组、二次打击模型死亡率组比较具有明显差异。肺组织干湿质量比3组之间无显著性差异;病理学显示气管注入模型组病理损伤不均匀,以气道上皮的水肿、坏死脱落,气道内以中性粒细胞为主的多种炎细胞浸润为主要特点。尾静脉注射组及二次打击模型组病理损伤多较均匀,以毛细血管渗透性增高,纤维蛋白渗出,肺水肿形成为主要特点。尾静脉注射组较气管注入模型组量化值稍高,但未见明显统计学差异,尾静脉注射组、气管注入模型组与二次打击模型组量化值比较,量化值增高明显,具有显著差异（P〈0．05或0．01）。结论3种方式均能成功制造急性肺损伤模型,但尾静脉注射组死亡率低,操作简便且病理学较为符合人类ALI病理学改变,且稳定可靠。     

黄芪对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤p38丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

目的探讨脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织磷酸化 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)表达的变化以及黄芪对其影响。方法静脉注射 LPS 复制大鼠 ALI 模型。随机分成3组,即正常对照组、LPS 刺激组和黄芪干预组。采用蛋白质印迹法检测肺组织磷酸化 p38MAPK 的表达,并观察大鼠动脉血氧分压(PaO_2)、肺湿/干重比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)白蛋白、血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化以及肺组织病理学改变。结果 LPS 刺激组大鼠肺组织磷酸化 p38MAPK 的表达较正常对照组显著增加(P<0.01)。与LPS 刺激组比较,黄芪干预组大鼠肺组织磷酸化 p38 MAPK 的表达、W/D、BALF 白蛋白以及血清 TNF-α含量显著下降,PaP_2显著上升(P<0.05),肺组织病理学损伤明显减轻。结论 ALI 时肺组织 p38 MAPK 磷酸化表达增加;黄芪注射液对内毒素性肺损伤有保护作用,其机制可能与抑制磷酸化 p38MAPK 的表达有关。     

马齿苋多糖对LPS诱导小鼠急性肺损伤的实验研究

目的:研究马齿苋多糖对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法:将60只体重为18～20 g昆明种小鼠随机分6组。分别为正常组,LPS组,醋酸地塞米松组[0.005 g/(kg·d)],马齿苋多糖低、中、高剂量组[1.5、3、6 g/kg/d,生药量],每组10只,先连续灌胃给药14 d,每天1次,第14天给药2 h后,利用LPS建立小鼠ALI动物模型,除正常组小鼠气管滴注等量生理盐水外,其他各组滴注LPS (10 mg/kg)溶液,12 h后酶联免疫吸附剂法测定血清中肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白介素1β (IL-1β)和白介素6 (IL-6)含量以及肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性,计算肺组织湿/干重(W/D)值,并进行肺组织病理切片检查。结果:与正常组比较,LPS组中W/D值,TNF-α和IL-1β含量及MPO活性均显著性升高(P <0.05或0.01);与LPS组比较,醋酸地塞米松组、马齿苋多糖中剂量和高剂量组中W/D值,TNF-α和IL-1β含量及MPO活性、肺损伤评分均显著降低(P <0.05或0.01)。结论:马齿苋多糖具有一定的保护AL...     

牡荆素对急性肺损伤小鼠的保护作用

目的研究牡荆素对C57BL/6雄性小鼠急性肺损伤的保护作用。方法采用脂多糖(LPS)7 mg/kg腹腔注射建立急性肺损伤小鼠模型。72只模型小鼠随机分为正常组、牡荆素对照组、模型组、牡荆素治疗低、中、高剂量组。观察小鼠一般情况,检测6 h后肺湿/干质量比(W/D),肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,肺泡灌洗液中总蛋白水平,光镜下观察肺组织病理变化,检测肺组织中NF-κBp65mRNA的表达。结果与模型组相比,牡荆素低、中、高剂量组剂量依赖性地降低肺组织中TNF-α、MDA水平和肺泡灌洗液中总蛋白水平,升高SOD水平,降低肺湿质量/干质量比值,减轻病理损伤程度,抑制NF-κBp65 mRNA的表达(P0.05)。结论牡荆素能通过抗炎、抗氧化作用对急性肺损伤小鼠产生保护作用。     

和厚朴酚对脂多糖诱导的急性肺损伤的保护机制

目的：探讨和厚朴酚（HK）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤的保护作用机制。方法: 选取SPF级BALB/c小鼠40只,随机分为5组（n=8）：对照组、LPS组、低剂量及高剂量HK组、地塞米松（DEX）组,利用LPS诱导小鼠急性肺损伤（ALI）模型,和厚朴酚腹腔注射后检测肺干湿比值（W/D）、进行支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数、检测血气分析、计算肺泡液体清除率（AFC）等。ELISA法检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子α（TNF- α）和细胞因子白介素-1β（ IL-1β）的表达变化的影响,Western blot法和Real time PCR检测各组小鼠肺组织基质金属蛋白酶9（MMP-9）和核因子-κB（NF-κB）蛋白的表达。结果: 1.LPS组中,小鼠BALF中中性粒细胞计数、肺W/D比值、TNF- α、IL-1β、MMP-9以及NF-κB蛋白明显增高(P<0.05);小鼠的动脉血氧分压(PaO2 )、酸碱度（PH）、肺泡液体清除率（AFC）显著降低(P<0.05)。 (P<0.05),2. HK处理组,小鼠BALF中中性粒细胞计数、肺W/D比值、TNF- α、 IL-1β、MMP-9以及NF-κB蛋白明显下降(P<0.05);小鼠的PaO2、PH、AFC显著上升(P<0.05)。结论: 和厚朴酚通过抑制NF-κB、MMP-9对LPS诱导的急性肺损伤发挥重要的保护作用,为临床上ALI患者的治疗提供了新的治疗方案和参考依据。     

贝母瓜蒌散抑制炎症反应改善脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的机制研究

目的：基于网络药理学和脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤模型探究贝母瓜蒌散干预急性肺损伤（acute lung injury,ALI）的抗炎作用。方法：通过中医药系统药理学数据库和分析平台，以生物利用度和药物相似性为条件筛选贝母瓜蒌散活性成分和作用靶点；在GeneCards数据库获取ALI相关靶基因。通过STRING平台构建化合物靶点-ALI靶基因相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络，运用Cytoscape 3.8. 0软件构建药材-成分-靶点-通路网络，利用Metascape平台进行基因本体（gene ontology,GO）分析，应用通路数据库Reactome进行信号通路富集分析，预测其分子机制。通过贝母瓜蒌散对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠的干预实验，对潜在靶点和通路进行验证。结果：获得贝母瓜蒌散活性成分44个、靶点606个，与ALI有关共同靶点258个。GO功能富集分析发现，贝母瓜蒌散对ALI的作用主要涉及激酶活性的正调控、受体复合物、蛋白激酶活性等过程；通路富集分析指出，贝母瓜蒌散可能从调控白细胞介素信号、白介素-4和白介素-13的信号、免疫系统中的细胞因子信号传递等信号通路发挥治疗作用。HE染色及胶原纤维阳性染色结果显示，贝母瓜蒌散能改善肺损伤；qPCR结果显示，贝母瓜蒌散能下调小鼠肺组织IL-1α、IL-2、IL6、IL-10、TNF-α mRNA表达。结论：贝母瓜蒌散可能通过抑制促炎细胞因子表达发挥治疗ALI的作用。     

Lysimachia clethroides Duby extract attenuates inflammatory response in Raw 264.7 macrophages stimulated with lipopolysaccharide and in acute lung injury mouse model

Ethnopharmacological relevance

Lysimachia clethroides Duby (LC) is a traditional medicinal herb used to treat edema, hepatitis and inflammatory diseases in China and other Asian countries. In this study, the anti-inflammatory effects of LC extract and the mechanisms underlying were explored in both in vitro cell lines and acute lung injury (ALI) animal model of inflammation in vivo.

Materials and methods

Lipopolysaccharide (LPS)-stimulated Raw 264.7 murine macrophages were used to study the regulatory effects of LC extract on inflammatory mediators such as nitric oxide (NO) and proinflammatory cytokine expression. Western blotting or ELISA techniques were employed to estimate protein levels. RT-PCR was used for analyzing the interferon (IFN)-β production. LPS-induced ALI mouse model in vivo was employed to study the effect of LC extract. Further high-performance liquid chromatography (HPLC) fingerprinting technique was used to evaluate the active constituents present in LC extract, compared with reference standards.

Results

Pre-treatment with LC extract inhibited the LPS-stimulated NO release, interleukin (IL)-1β and IL-6 production in Raw 264.7 cells dose dependently. LC extract inhibited the LPS-stimulated IRF3 and STAT1 phosphorylation. Further, in vivo experiments revealed that LC extract suppressed the infiltration of immune cells into the lung and proinflammatory cytokine production in broncho-alveolar lavage fluid (BALF) in the LPS-induced ALI mouse model.

Conclusions

Our results indicate that LC extract attenuates LPS-stimulated inflammatory responses in macrophages via regulating the key inflammatory mechanisms, providing a scientific support for its traditional use in treating various inflammatory diseases.     

加味小青龙汤对内毒素致急性损伤大鼠肺组织TLR4 mRNA表达的影响

目的:探讨加味小青龙汤对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的影响。方法:将72只雄性Wistar大鼠随机分为:对照组、模型组、地塞米松组和加味小青龙汤(小、中、大剂量)组,每组再分为4h和8h两个亚组,每个亚组6只。尾静脉注射LPS 10mg/kg制备大鼠ALI模型。地塞米松组和加味小青龙汤(小、中、大剂量)组分别于造模前灌胃地塞米松和加味小青龙汤,2次/d,3d。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测TLR4 mRNA的表达,并于光镜下观察大鼠肺组织病理变化。结果:与模型组相比,在8h组中,加味小青龙汤(小、大剂量)组的TLR4 mRNA表达均明显降低(P<0.01)。病理学观察,模型组大鼠肺组织出现大片出血及坏死,各治疗组大鼠肺组织病理改变明显轻于模型组,肺细支气管偶见炎症改变,水肿较轻,中性粒细胞(PMN)和红细胞渗出较少。结论:加味小青龙汤能减轻内毒素致ALI大鼠肺组织损伤,对肺损伤有保护作用,其机制可能与其能降低内毒素致ALI大鼠肺组织TLR4 mRNA的表达有关。     

Anti-inflammatory effect of SQC-beta-CD on lipopolysaccharide-induced acute lung injury

AIM OF THE STUDY: Shuang-Qing-Cao (SQC) is a folk Chinese medicinal formula. The therapeutic effects of inclusion complexation of SQC extract in beta-cyclodextrin (SQC-beta-CD) against lipopolysaccharide (LPS)-induced acute lung injury (ALI) were studied in mice. MATERIALS AND METHODS: Two protocols were designed for administration of SQC-beta-CD (10 and 20 mg/kg body weight) or DEX (2 mg/kg). According to Protocol A we intraperitoneally injected diluent (saline with 0.5% Tween 80), SQC-beta-CD or DEX respectively into mice 30 min and 3h after LPS challenge. Alternatively, in Protocol B we administered diluent, SQC-beta-CD or DEX 3h before and 30 min after LPS challenge. RESULTS: The histological results showed that SQC-beta-CD (20 mg/kg) protected mice from LPS-induced ALI such as oedema, haemorrhage, blood vessel and alveolar structural damage. Furthermore, SQC-beta-CD inhibited LPS-increased pulmonary MPO activity and migration of polymorphonuclear neutrophils (PMNs) into bronchoalveolar lavage fluid (BALF). Immunohistochemical experiment demonstrated that SQC-beta-CD decreased inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression in lung 24h after LPS administration. Consequently, SQC-beta-CD prevented LPS-induced nitric oxide (NO) release in BALF. CONCLUSIONS: The results indicated that SQC-beta-CD is greatly effective in inhibiting ALI. The present study indicated that SQC-beta-CD acted as a potential therapeutic reagent for treating ALI.     

调肝理脾方制剂防治小鼠乙醇性肝损伤的实验研究

目的:研究不同工艺的调肝理脾方制剂保护小鼠乙醇性肝损伤的程度及其主要作用环节。方法:采用乙醇肝损伤模型小鼠,以复方鳖甲软肝片为阳性对照,观察调肝理脾方三种不同工艺制剂对乙醇性肝损伤模型小鼠保护效应,观察血液天门冬氨酸氨基转移酶(AST),丙氨酸氨基转移酶(ALT),胆固醇(CHOL),甘油三酯(TG)水平,肝组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,及肝脏的病理变化。结果:调肝理脾方3种工艺制剂能显著降低ALT、AST、TG、MAD(P<0.01),显著缓解肝脏病理变化。结论:调肝理脾方制剂对乙醇性肝损伤模型小鼠有保护效应,总体疗效评分显示工艺2组为3种工艺制剂中疗效最好的,而该制剂能通过阻止自由基损伤产生与促进局部损伤修复防治乙醇性肝损伤。     

肠缺血再灌注致急性肺损伤早期模型低温干预安全性的研究

目的观察对肠缺血再灌注导致的急性肺损伤早期模型应用低温干预的安全性。方法新西兰大白兔60只,随机分为空白对照组（肛温37-38℃）、缺血对照组（肛温37-38℃）、浅低温组（肛温32-35℃）、中低温组（肛温28-32℃）各15只。采用完全夹闭肠系膜上动脉1 h,开放后再灌注6 h的方法制备肠缺血再灌注（IIR）致急性肺损伤（ALI）模型。使用体表降温方法控制体温。实验过程中监测动物平均动脉压、心电图和呼吸频率;IIR前、IIR后6 h内分别进行动脉血气分析和静脉血凝血酶原时间检测。结果与空白对照组比较,缺血对照组随着IIR时间的增加,逐渐发生低氧血症;进行低温干预后,同缺血对照组相比,浅低温组和中低温组的低氧血症得到改善,平均动脉压升高,心率减慢（未出现心律失常）,呼吸频率降低,凝血酶原时间延长。浅低温组凝血酶原时间的延长小于中低温组,差异有统计学意义（P〈0.05）,其他指标与中低温组比较差异无统计学意义。结论在急性肺损伤早期,浅低温和中低温对循环、呼吸和凝血功能的不良影响较小,浅低温和中低温治疗方法较为安全。     

中医药治疗急性肺损伤的临床观察

目的：探讨中医药治疗急性肺损伤的临床效果。方法：将55例急性肺损伤患者按照随机、对照的原则分为观察组（30例）和对照组（25例）。两组患者均给予常规的西医治疗,观察组加用自拟救肺汤进行治疗。结果：观察组治疗效果、动脉血气分析指标改善明显优于对照组。结论：采用中医药治疗急性肺损伤效果显著。     

探讨乌司他丁对急性肺损伤（ALI）疗效

目的：观察乌司他丁对急性肺损伤（ALI）的治疗效果.方法：选择急性肺损伤（ALI）患者40例,随机分为2组,对照组20例予以常规治疗,治疗组20例在常规治疗基础上加用乌司他丁,乌司他丁30万u静脉泵入,每8h一次,每天共90万u,连用14天.对比2组治疗有效率及治疗后3d、10d的血气分析变化及白细胞总数变化,同时观察心率、呼吸频率的变化.结果：治疗组有效率为75%,与对照组50%相比差异有统计学意义（P〈0.01）,治疗组PaO2、氧合指数高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论：乌司他丁应用有助于改善急性肺损伤（ALI）患者的呼吸功能及预后.     

放射性肺损伤中医证候学特点及其演变规律的研究

目的:探索动物实验作为新手段研究放射性肺损伤病因病机与证候演变的可能性,并为制定中医药早期防治方法提供理论和实验依据。方法:Wistar雌性大鼠80只,随机分为造模组和对照组各40只,每次麻醉定位后,造模组用6mVX线照射右肺2cm×3cm,3Gy×2次/w,最多10次/5w;分别在第3、5、8、12、26w末,从两组各随机抽取8只处死;运用中医诊断学方法,通过对大鼠活体状况、肺脏大体标本和肺组织切片进行动态观察和比较,分析在照射过程中放射性肺损伤中医证候学特点及其演变规律。结果:造模组大鼠在照射初期即出现鼻周及眼周红赤、有黄色分泌物,呼吸急促、大便干硬、精神萎靡、反应迟钝、活动减少等症状,符合热毒内盛、元气耗伤证;放射早期大鼠肺脏肿胀,表面鲜红,并有鲜红色斑片状出血,镜下示肺间质充血、出血、水肿明显,属热伤血络、血溢脉外证;后期肺脏外观颜色晦暗、有明显紫黑色瘀斑、质硬而弹性差,镜下见陈旧性出血灶、肺内毛细血管瘀滞、闭锁,局灶性纤维化团块等,与瘀血阻络证相吻合。对照组无异常变化。结论:通过动物实验,可以利用现代病理学方法作为中医证候学研究的手段,从活体、肺脏大体标本及肺组织微观层面揭示放射性肺损伤热毒致病,早...     

蜂胶预防大鼠急性肺损伤的作用及其机制

 目的　观察蜂胶对油酸加脂多糖(LPS)两次打击大鼠诱导急性肺损伤的保护作用及其机制。方法　40只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(给予地塞米松)、蜂胶水提组和蜂胶醇提组,每组8只,尾静脉注入油酸4h后用LPS实施第二次打击。通过白细胞分类计数、计算肺指数、常规镜检病理切片以及通过免疫组化及原位杂交观察对CD54 ,NF-κBp65活性及表达的影响。结果　蜂胶醇提液能明显对抗肺水肿,蜂胶水提液和醇提液均能对抗中性粒细胞的升高,明显改变肺炎症病变的病理状态,明显抑制NF -κBp65的表达及活化。结论　抑制NF-κBp65的活化活性,是蜂胶发挥抗炎作用的分子机制之一。