转化生长因子-β1在大鼠牙髓炎中的定量分析

转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)是一族具有多种生物学功能的细胞因子,包括TGF-βl,TGF-β2,TGF-β3,TGF-β4四个亚型,TGF-βl是其中最重要的一种亚型,它通过受体进行信号的传递。TGF-β1作为创伤修复过程固有的内源性因子,它对牙齿发育、成牙本质细胞分化、反应性牙本质形成,特别是对牙髓组织炎症损伤和修复的作用,受到广泛关注。目前在基础研究方面,TGF-β1在牙胚发育、成牙本质细胞分化和牙髓损伤修复机制中的作用日益受到国内外学者的关注并得到一定阐明。本     

TGF-β1在大鼠可复性牙髓炎中的表达

转化生长因子-β （transforminggrowth factor,TGF—B）是一族具有多种生物学功能的细胞因子,对细胞的形态发生、增殖和分化过程起着重要作用,有利于胚胎发育和细胞修复,参与牙胚的发生、发展以及牙体组织的修复过程。TGF-β超家族主要包括TGF—β1,2,3和BMPs．TGF—β1是其中最重要的一种亚型,     

TGF-β受体TβRⅠ、TβRⅡ在实验性鼠牙髓炎中的定量分析

目的：观察研究转化生长因子-β受体TβRⅠ、TβRⅡ在大鼠可复性牙髓炎中在不同时间段动态变化特点,分析TGF-β受体TβRⅠ、TβRⅡ在牙髓炎发生、发展及转归的意义。方法：通过对大鼠上颌第1磨牙进行机械性不喷水均匀磨除釉质,酸蚀剂处理暴露的牙本质,建立实验性大鼠可复性牙髓炎模型;将牙髓炎模型组织块连续切片后采用免疫组化法染色,光镜观察、单因素方差分析（ANOVA）、Tukey检验。结果：在可复性牙髓炎症组织中TGF-β受体TβRⅠ、TβRⅡ的表达明显增强,且随时间呈动态变化趋势,TβRⅠ、TβRⅡ在3d达到最高,之后略有下降。结论：TGF-β受体TβRⅠ、TβRⅡ参与牙髓组织损伤修复并发挥重要作用。     

转化生长因子-β1及其受体TβRⅠ、Ⅱ在鼠牙髓炎组织中的表达及意义

目的 观察转化生长因子（TGF）-β1及其受体TβRⅠ、TβRⅡ在大鼠可复性牙髓炎模型中不同时间的动态表达及定位情况,探讨TGF-β1及其受体TβRⅠ、TβRⅡ在大鼠牙髓炎症发展过程中可能的作用机制及在牙髓损伤修复中的意义.方法 通过对大鼠上颌第1磨牙进行机械性不喷水均匀磨除釉质,后用酸蚀剂处理暴露的牙本质,建立实验性大鼠可复性牙髓炎模型.然后对牙髓炎组织连续切片采用免疫组化法分析,并进行单因素方差分析（ANOVA）、Tukey检验.结果 在炎症牙髓中TGF-β1及其受体TβRⅠ、TβRⅡ的表达明显增强,且随时间呈动态变化趋势;TGF-β1在5 d达到高峰,之后明显下降.TβRⅠ、TβRⅡ在3 d达到最高,之后略有下降.在0～3 d TGF-β1及TβRⅠ、TβRⅡ均呈上升趋势,但不成正比例关系.结论 TGF-β1通过与受体TβRⅠ、TβRⅡ结合,参与牙髓组织损伤修复并发挥重要作用,TGF-β1可上调TβRⅠ、TβRⅡ表达,但不成正比例关系.     

川芎嗪对人肝星状细胞TGF-β1信号传导的影响

目的：探讨中药单体川芎嗪（TMP）对肝星状细胞（HSC）转化生长因子-β1（TGF-β1）信号传导的影响。通过检测TGF-β1及其Ⅰ型和Ⅱ型受体、Smad 3及Smad 7 mRNA表达的变化,探讨川芎嗪抗肝纤维化作用的相关机制。方法：体外培养人肝星状细胞,RT-PCR法检测HSC中TGF-β1及其Ⅰ型和Ⅱ型受体、Smad 3及Smad 7 mRNA表达。结果：与阴性对照组相比,TMP A、B、C各组均可显著降低TGF-β1 mRNA（P〈0.01）;TMP B、C组TβRⅠmRNA相对表达量降低,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;TMP B、C浓度组的TβRⅡmRNA、Smad 3 mRNA表达量显著降低（P〈0.01）;TMP B、C组可显著升高Smad 7 mRNA表达量（P〈0.01）。结论：川芎嗪可降低HSC中TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体及Smad 3 mRNA表达,同时促进Smad7 mRNA表达,表明川芎嗪可抑制肝星状细胞的活化、增殖,这可能与阻断TGF-β/Smad通路的信号传导有关。     

外界刺激对内源性生长因子TGF-β_1的影响

目的观察备洞对家犬牙髓中TGF-β1表达的影响及修复性牙本质的形成情况,探讨牙本质牙髓复合体原位形成和内源性生长因子的相关性。方法 6只健康家犬,分别选取四颗磨牙,随机分为1、2、3、4四个组,每组6颗牙;1组不予任何处理,作为对照组,2、3、4组为实验组,分别给予长3 mm,宽3 mm,洞深2、2.5、3 mm的备洞刺激,予氧化锌丁香油粘固剂暂封窝洞,分别于2、4、6周麻醉下拔除,制作病理切片,显微镜下观察修复性牙本质的形成情况,图像分析和免疫组化方法观察转化生长因子-β1的表达。结果在2.5 mm洞深刺激强度下,2周时,每组都没有修复性牙本质形成;3 mm洞深刺激强度,4、6周时,前期牙本质增宽,成牙本质细胞空泡变性,有第三期牙本质形成;每组都有转化生长因子-β1表达,结果表明:随着刺激度强和时间增加,呈表达增强趋势(P<0.05)。结论备洞刺激可能激活了内源性转化生长因子-β1,且可能参与了牙本质牙髓复合体的形成,内源性转化生长因子-β1的诱导表达与时间和刺激强度成正相关关系。     

转化生长因子β在肿瘤微环境中的作用

转化生长因子β（TGF-β）是一类具有多种生物学活性的细胞因子,参与调节细胞的增殖、分化、发育和凋亡等多种生命活动。近期研究表明,TGF-β信号参与调控肿瘤的发生、发展,并可以通过影响肿瘤微环境如间质干细胞（MSCs）、成纤维细胞、免疫应答促进或抑制肿瘤的发展和转移。明确TGF-β与肿瘤微环境的关系,进而明确肿瘤发生、发展、转移过程中发挥重要作用的关键分子,寻找其相应的分子靶点,对肿瘤的诊断及治疗具有重要作用。     

一种新型的截短型转化生长因子-βⅡ型受体的构建

目的设计并构建一种新型的截短型转化生长因子-βⅡ受体(tTGF-βRⅡ)。方法 RT-PCR方法扩增TGF-βⅠ的CDS序列、tTGF-βRⅡ,并将其分别克隆至pGBKT7和pGADT7载体中。利用酵母双杂交和GST-pulldown试验检测tTGF-βRⅡ与TGF-βⅠ间的相互作用。人工合成该tTGF-βRⅡ多肽。结果成功地设计并克隆了一种新的tTGF-βRⅡ,其可以与配体TGF-βⅠ结合。结论制备的tTGF-βRⅡ可以作为TGF-βRⅡ的拮抗剂,竞争性的与TGF-βⅠ结合,为瘢痕治疗奠定了基础。     

糖尿病大鼠视网膜内转化生长因子-β2及其受体的表达

目的探讨糖尿病视网膜损伤和转化生长因子-β2(TGF-β2)产生的关系以及TGF-β2的作用机制。方法链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型,用Western blot方法检测不同病程糖尿病动物模型(2周及20周)视网膜中TGF-β2的表达,RT-PCR测定其受体TGF-βRⅠ及TGF-βRⅡ的表达。结果糖尿病大鼠视网膜内TGF-β2随糖尿病进展表达增加,其受体TGF-βRⅠ的表达和对照组相比无显著差异,而TGF-βRⅡ的表达显著增加。结论TGF-β2在糖尿病视网膜病变(DR)形成过程中有重要作用,并有可能通过TGF-βR1'GP一限Ⅱ型受体起作用。     

TGF-βRⅡ与错配修复基因hMSH2在大肠癌组织中的表达及临床意义

为探讨错配修复(MMR)基因hMSH2与细胞生长因子βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)两者在散发性大肠癌发生中的作用及其与大肠癌生物学性状关系,我们采用免疫组织化学SP法检测56例散发性大肠癌组织中hMSH2和TGF-βRⅡ的表达情况,并分析其与大肠癌的临床病理特征关系。     

良性前列腺增生组织中转化生长因子受体与成纤维生长因子受体表达的相关性研究

目的探讨转化生长因子βⅠ型受体（TGFβRⅠ）与成纤维生长因子受体（FGFR）在良性前列腺增生（BPH）组织中表达的意义及其相关性.方法采用免疫组化法研究两种受体在31例BPH标本中表达的意义,并与正常前列腺组织22例作对照研究.结果TGFβRⅠ在BPH上皮、间质组织中的表达显著高于正常前列腺组织（P＜0.05）;FGRβRⅠ在BPH上皮组织中的表达显著高于正常前列腺组织（P＜0.05）,而在BPH间质组织中的表达差异无显著性.在BPH间质组织TGFβRⅠ与FGFRⅠ的表达呈正相关（相关系数r值为0.358,P＜0.05）差异具有统计学意义.结论TGFβRⅠ与FGFRⅠ在BPH上皮中表达增高以及在间质中的表达呈正相关,说明两者之间具有协同作用,提示两者可能参与了BPH的发生和病理过程.     

转化生长因子β1及其Ⅱ型受体表达与子宫内膜癌发生的关系

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）及其Ⅱ型受体（TGFβR-Ⅱ）与子宫内膜癌发生的关系。方法采用免疫组织化学方法检测子宫内膜癌、子宫内膜复杂增生、正常于宫内膜组织中TGF-β1及TGFβR-Ⅱ的表达。利用CD34相关抗原标记血管内皮细胞,计数微血管密度（MVD）。结果子宫内膜癌及复杂增生组织中TGF-β1表达明显高于正常子宫内膜组织（P〈0．05或P〈0．01）,而前两者之间差异无统计学意义（P〉0．05）。从正常子宫内膜、复杂增生到子宫内膜癌组织中TGFβR-Ⅱ表达逐渐下降甚至缺如,且两两差异均有统计学意义（P〈0．05）。子宫内膜癌组织中MVD高于复合增生组及正常子宫内膜（P〈0．05）,与TGF-β1呈正相关（r=0．182,P〈0．01）。结论TGF-β1过度表达促进子宫内膜癌的生长与血管发生,可能是子宫内膜癌发生的早期现象,其负性调控的丧失与TGFβR-Ⅱ表达下降或缺如有关。     

骨形成蛋白2基因转染对犬牙髓细胞生物学特性的影响

目的构建骨形态发生蛋白2（bone morphogenetic proteins 2,BMP2）绿色荧融合蛋白pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,然后再用其在体外转染犬牙髓细胞（DDPCs）形成BMP2-DDPCs细胞,观察BMP2基因转染对牙髓细胞生物学特性的影响。方法构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,采用阳离子脂质体转染法将BMP2基因转染体外培养的DDPCs,检测BMP2-DDPCs碱性磷酸酶（ALP）活性,骨钙素（OC）产量和Ⅰ型胶原合成量等指标的测定,研究BMP2基因转染对牙髓细胞生物学特性的影响。结果成功构建pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒,对构建的BMP2真核重组质粒用XhoI、HindIII进行双酶切,其产物进行琼脂糖凝胶电泳后,在1.2、4.7kb可见两条特异条带;并进行全基因序列测序,报告100%符合,证明pEGFP-N1-BMP2重组质粒构建成功。BMP2-DDPC中ALP活性,OC产量和Ⅰ型胶原合成量增加,与对照组DDPCs、N1-DDPCs相比差异有统计学意义（P〈0.05）,通过增强ALP、OC和Ⅰ型胶原等成骨标志物的表达,促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化。结论 pEGFP-N1-BMP2真核表达质粒转染后的牙髓细胞,具有成牙本质细胞的特征。     

黄芪对尾加压素Ⅱ诱导的心脏成纤维细胞胶原合成及分泌转化生长因子-β_1的影响

目的观察黄芪注射液对尾加压素Ⅱ（UⅡ）诱导的心脏成纤维细胞合成胶原及分泌转化生长因子（TGF-β1）的影响。方法体外培养乳鼠心脏成纤维细胞,分成3组：对照组、UⅡ组、UⅡ＋黄芪组。作用一定时间后,Real-time RT-PCR法测定各组细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1基因表达情况,3H-脯氨酸掺入测定胶原合成情况,双抗体夹心ELISA法测定培养上清TGF-β1分泌情况。结果UⅡ可以促进乳鼠心脏成纤维细胞胶原合成,刺激TGF-β1的分泌,黄芪注射液可明显抑制UⅡ的上述作用。结论黄芪可以通过抑制UⅡ诱导的心脏成纤维细胞胶原合成及TGF-β1分泌,延缓心肌纤维化及心脏重构的进展。     

TGF-β Ⅲ型受体介导的信号通路及其在纤维化疾病中的作用

转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)在细胞的自我调控包括细胞增殖、分化、凋亡、胚胎发育、免疫监督、血管再生等过程中发挥重要作用。TGF-βⅢ型受体(TβRⅢ)是TGF-β超家族的辅助受体之一,TβRⅢ不仅能介导TGF-β超家族配体依赖的Smad经典通路,还可以介导非Smad依赖的信号通路,参与调控细胞的多种信号通路,在纤维化、肿瘤、心血管系统等疾病中发挥重要作用。该文就TβRⅢ参与的信号通路及其在纤维化疾病中的作用作一综述。     

雌二醇对CCl4诱导的肝纤维化大鼠转化生长因子β1及其受体的影响

目的：通过雌二醇对CCl4诱导的肝纤维化大鼠转化生长因子β1（TGF-β1）及其Ⅰ型受体（Tβ3R Ⅰ）影响,探讨雌二醇对肝纤维化的抑制作用机理。方法：应用放免和免疫组化方法。以CCl4诱导大鼠肝纤维化动物模型,观察雌二醇对大鼠肝纤维化形成过程中TGF—β1、TβRⅠ型受体影响。结果：雌二醇可以明显降低TGF—β1的表达（P〈0．05）,对TβRⅠ型受体无明显影响（P〉0．05）。结论：雌二醇通过下调TGF—β1的表达,抑制肝纤维化形成;雌二醇可以作为一种预防肝纤维化的药物。     

TGF-β2与增生性玻璃体视网膜病变的关系

增生性玻璃体视网膜病变（proliferati vevitreoretinopathv．PVR）是一种眼内创伤过度的损伤修复过程，主要是RPE（视网膜色素上皮细胞）发生迁移、增生并表型变化，及神经胶质细胞的增生和收缩，形成可以收缩的增生膜。造成牵拉性视网膜脱离的病变，有许多细胞因子和生长因子参与了这个过程，其中转化生长因β2（transfonning growth factorβ，TGF-β）是其中的一个重要因子。     

红景天苷对转化生长因子-β1诱导人肾小管上皮细胞逆向分化的影响

目的：阐释红景天苷对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导人肾小管上皮细胞（HKC）表型转分化的效应,探讨其对I型（colⅠ）和Ⅲ型（ColⅢ）胶原蛋白表达的影响。方法：体外培养HKC,应用不同浓度红景天苷处理经TGF-β1诱导活化的HKC细胞,显微镜观察细胞形态改变,免疫组化法检测角化蛋白-18和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达：应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测ColⅠ型和ColⅢ型胶原蛋白表达。结果：HKC细胞经过TGF-β1诱导,细胞角化蛋白．18表达明显下调,α-SMA、ColⅠ、ColⅢ型胶原表达明显上调,与空白对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。经红景天苷干预后,其表达有所下降,与TGF-β1诱导组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：红景天苷可抑制TGF-β1诱导的HKC表型转分化,同时可以抑制肾小管上皮细胞外基质成分ColⅠ、ColⅢ型胶原的合成,在一定程度上具有阻止肾小管间质纤维化的作用。     

扶肾方调节各种细胞因子干预腹膜间皮细胞 EMT的实验研究

摘要：目的 探讨扶肾方对大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子-β受体Ⅰ（TGF-βRⅠ）、TGF-βRⅡ、Smad泛素化相 关因子2（Smurf2）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、紧密连接蛋白-1（ZO-1）的影响及抑制上皮-间充质转分化（EMT）的作 用机制。方法 原代培养大鼠腹膜间皮细胞,传至第2代并鉴定后,分为空白对照（C）组,含药血清（B）组,模型（T） 组（40 μg/L TGF-β1）,模型+含药血清（T+B）组,模型+MG132（T+M）组。培养24 h后收集细胞和培养液上清液,采用 蛋白印迹法检测Smurf2蛋白水平,qPCR检测各组TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ、E-cadherin、ZO-1的mRNA转录水平。结果 与C组比较,T组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅡ mRNA、Smurf2蛋白表达明显上调（P＜0.05）;与T组比较,B组 E-cadherin、ZO-1 mRNA 表达均上调,T+B 组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅡ mRNA 表达均上调,Smurf2蛋白表达下 调,T+M组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1RⅠ mRNA、Smurf2蛋白表达均下调,TGF-β1RⅡ mRNA表达上调（P＜0.05）;与 B组比较,T+B组和T+M组E-cadherin mRNA表达下调,T+M组ZO-1、TGF-β1RⅠ mRNA表达下调（P＜0.05）;与T+B 组比较,T+M组E-cadherin、ZO-1、TGF-β1R,TGF-β1RⅡ mRNA表达均下调（P＜0.05）。结论 扶肾方抑制大鼠腹膜 间皮细胞EMT可能与上调TGF-βRⅡ mRNA转录,下调Smurf2蛋白含量,促进E-cadherin、ZO-1 mRNA的转录相关。     

转化生长因子β及其受体在肝癌中的表达研究

目的观察转化生长因子β（TGF-β）及其受体在肝癌中的表达，探讨其在肝癌发病中的作用机制及临床意义。方法应用免疫组织化学SABC法对36例肝癌标本进行研究。结果TGF-β主要分布于肿瘤细胞质中，其在肝癌中的表达率（69．25％）明显高于正常组织（19．16％）（P〈0．05）。TGF-β型受体主要分布于细胞膜和细胞质中，其在肝癌中的阳性表达率（34．52％）明显低于正常组织（95．83％）（P〈0．01）。结论TGF-β表达与肝癌发生、发展有密切关系，其受体表达的缺失可能是肿瘤细胞逃逸TGF-β负调控的机制之一。