透明质酸钠可作为成骨诱导后骨髓间充质干细胞的载体

目的:研究透明质酸钠作为组织工程骨支架的可行性.方法:体外培养兔骨髓间充质干细胞(MSCs),在成骨诱导剂地塞米松等的诱导下,向成骨细胞转化,并使之与透明质酸钠凝胶复合,通过倒置相差显微镜和扫描电子显微镜观察细胞贴附情况.结果:地塞米松等诱导组细胞形态向类成骨细胞转化,碱性磷酸酶表达明显增高,并表达Ⅰ型胶原.体外复合培养10 h,成骨细胞即开始于透明质酸钠凝胶中伸展生长,复合培养7 d,成骨细胞在凝胶中分化增殖,分泌细胞外基质.结论:适当浓度成骨诱导剂可成功地将兔MSCs向成骨细胞诱导,透明质酸钠是骨组织工程的良好载体.     

成骨细胞增殖分化中的地塞米松和鹿瓜多肽:抑制还是促增殖分化?

背景:目前因地塞米松注射液广泛及长期使用引起的骨质疏松症发病率逐渐升高,但临床尚没有确切的治疗方法,鹿瓜多肽注射液为常用的促进骨折愈合、提高骨密度的药物。目的:观察鹿瓜多肽注射液在高浓度地塞米松条件下对成骨细胞增殖与分化的影响。方法:将大鼠成骨细胞随机分成3组,地塞米松+鹿瓜多肽注射液组添加1×10-7 mol/L地塞米松注射液、8 mg/L鹿瓜多肽注射液和终浓度为1 g/L的二甲基亚砜;地塞米松组添加与地塞米松+鹿瓜多肽注射液组等量的二甲基亚砜及1×10-7 mol/L的地塞米松注射液;对照组只添加与地塞米松+鹿瓜多肽注射液组等量的二甲基亚砜。96 h后以RT-PCR分析骨钙素的表达,21 d后茜素红染色对比观察钙结节的表达。结果与结论:地塞米松+鹿瓜多肽注射液组与对照组骨钙素的mRNA表达量均高于地塞米松组(P0.01),地塞米松+鹿瓜多肽注射液组与对照组钙结节表达量也高于地塞米松组(P0.01),而地塞米松+鹿瓜多肽注射液组与对照组比较差异无显著性意义(P0.05)。提示鹿瓜多肽注射液可对抗高浓度地塞米松对成骨细胞增殖和分化的抑制作用。     

人甲状旁腺素对新生大鼠成骨细胞护骨素基因表达的影响

目的研究人甲状旁腺激素(hPTH)对新生大鼠成骨细胞护骨素(OPG)基因表达的影响,探讨PTH对成骨细胞的作用机制.方法采用新生SD大鼠的颅骨行成骨细胞的原代培养,用hPTH于培养的不同阶段用不同浓度和不同方式进行刺激,以ELASA测定成骨细胞的分化指标;RT-PCR测定OPG基因的表达.结果与hPTH间歇刺激组相比,hPTH持续刺激组可明显抑制成骨细胞的分化成熟,且可明显抑制OPG mRNA的表达.这一作用在培养后6 d即出现,持续至第18 d.此外,hPTH抑制OPGmRNA的表达,以100ng/ml浓度最明显.结论持续PTH刺激可明显抑制成骨细胞的分化成熟和OPG基因的表达,这可能与慢性肾衰继发性甲状旁腺亢进骨病的发生密切相关.     

核心结合因子α1对成骨及促进骨折愈合作用研究进展

核心结合因子α1(Cbfa1)是成骨细胞发生和分化的特异性转录因子,能够诱导多潜能间充质细胞向成骨细胞表型分化,并激活骨钙蛋白、Ⅱ型胶原蛋白、骨桥蛋白、骨涎蛋白等成骨基因转录.成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白、肿瘤坏死因子α、糖皮质激素地塞米松、雌激素受体调节剂等多种因子和激素可上调或抑制Cbfa1的表达.随着深入的...     

地塞米松诱导成骨细胞凋亡的蛋白激酶C途径

背景：地塞米松以增加细胞周期时间的方法提高细胞凋亡来减少成骨细胞和骨细胞的数量。蛋白激酶C是细胞内信号传导通路的一种,与细胞凋亡有关已有相关文献报道。 目的：探讨地塞米松诱导成骨细胞凋亡在蛋白激酶C细胞内信号转导途径方向的机制。 方法：取胎鼠骨髓间充质干细胞进行成骨诱导,分为塞米松模型组、佛波醇组和星型胞菌素组。地塞米松模型组加入1×10^-6 mol/L地塞米松,佛波醇组加入1×10^-6 mol/L地塞米松和1×10^-7 mol/L佛波醇,星型胞菌素组加入1×10^-6 mol/L地塞米松和1×10^-7 mol/L星型胞菌素,观察不同干预组细胞的增殖或抑制,并对细胞膜及细胞质中蛋白激酶C含量的变化进行检测。 结果与结论：地塞米松可明显的诱导凋亡,加入佛波醇后凋亡明显增加,加入星形孢菌素后凋亡明显减少。加入地塞米松后胞浆的蛋白激酶C明显减少,包膜明显增加。加入地塞米松不同时间,胞浆和胞膜的蛋白激酶C变化在30 min最明显。说明地塞米松诱导成骨细胞凋亡的机制与蛋白激酶C有关,地塞米松为蛋白激酶C激动剂。细胞受到刺激后,胞浆的蛋白激酶C转移至包膜,胞浆中的蛋白激酶C量减少,包膜中的增加。     

糖皮质激素促间充质干细胞的成骨效应

背景：糖皮质激素是有效的免疫抑制和抗炎症药物而广泛应用于临床,然而长期服用后也会引起一些不良反应如骨质疏松症。糖皮质激素通过促进成骨细胞与骨细胞的凋亡,同时抑制间充质干细胞向成骨细胞分化,导致成骨细胞数量减少;然而在一定的条件下,糖皮质激素又能够促进间充质干细胞表达成骨细胞标志基因诱导其向成骨方向分化。 目的：对以地塞米松为代表的糖皮质激素在间充质干细胞成骨分化中发挥的作用以及可能的分子机制进行综述。 方法：由第一作者检索PubMed数据库1978至2012年有关地塞米松和间充质干细胞成骨分化的文献,英文关键词“Mesenchymal stem cell,dexamethasone,osteogenesis,osteoporosis,Runx2,BMP,Noggin,GILZ,glucocorticoid receptor”以不同的组合方式查找,排除重复性的研究,最终保留55篇进行归纳综述。 结果与结论：地塞米松能够调节Runx2,Noggin以及亮氨酸拉链蛋白等基因调控间充质干细胞成骨分化。当糖皮质激素作用于间充质干细胞时,可能由糖皮质激素受体介导其生理作用,也可能在糖皮质激素与其受体结合之前就受到11β-羟甾类脱氢酶的调节。另外,生理剂量(10^-8 mol/L)的地塞米松能促进间充质干细胞成骨分化,药理剂量(≥10^-7 mol/L)有抑制作用。     

ROS/PARP-1/AIF信号通路在糖皮质激素诱导的MC3T3-E1细胞凋亡过程中的作用研究

目的通过用地塞米松诱导小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)的凋亡,建立激素性股骨头坏死的细胞模型,探讨抗氧化剂(N-乙酰-L-半胱氨酸,NAC)和钙蛋白酶的抑制剂(PD151746)对MC3T3-E1细胞抑制凋亡的作用和可能机制的研究。方法 CCK-8检测NAC和PD151746不同药物浓度对MC3T3-E1细胞增殖的影响,选择合适的药物浓度。细胞分组:正常组(10%FBS),激素组(地塞米松1×10~(-6) mol/L),NAC组(NAC1 mmol/L+地塞米松1×10~(-6) mol/L)和PD151746组(简称PD组,PD 10 mol/L+地塞米松1×10-6 mol/L),流式细胞仪检测细胞凋亡率和ROS含量,激光扫描共聚焦显微镜检测各组ROS荧光强度和钙离子荧光强度,Western blot测定细胞蛋白AIF、PARP-1和Cyt-c的表达水平。结果 CCK-8结果显示,NAC和PD151746的实验浓度分别取1 mmol/L和10 mol/L。流式细胞仪检测凋亡率结果显示,激素组、NAC组和PD组的凋亡率与正常组比较,差异有统计学意义(0.05),激素组与NAC组、PD组比较差异有统计学意义(0.05)。流式细胞仪和激光扫描共聚焦显微镜检测各组ROS含量,结果显示激素组荧光强度最高,与NAC组和PD组比较明显增高(0.05),其他三组与正常组比较差异也具有统计学意义(0.05)。激光扫描共聚焦显微镜检测钙离子荧光强度,与NAC组和PD组比较明显增高(0.05),其他三组与正常组比较差异也具有统计学意义(0.05)。Western blot检测各组AIF、PARP-1和Cyt-c的表达水平,激素组、NAC组和PD组的凋亡率与正常组比较,差异有统计学意义(0.05),激素组与NAC组、PD组比较差异有统计学意义(0.05)。结论 NAC能抑制地塞米松诱导的ROS产生,PD151746能有效抑制钙蛋白酶的活性,抑制PAPR-1/AIF的释放,抑制成骨细胞凋亡,ROS/PARP-1/AIF通路参与了地塞米松诱导MC3T3-E1细胞的凋亡过程。     

极低频三角形电磁场对成骨细胞的影响

目的:观察三角形极低频电磁场对新生大鼠颅盖骨成骨细胞增殖与分化的影响.方法:采用频率为15Hz、不同强度、不同形状的三角形电磁场作用于成骨细胞,测量成骨细胞的增殖与碱性磷酸酶活性(ALP).结果:频率为15 Hz, 强度为4 mT～5 mT,三角形电磁场能够显著提高成骨细胞的增殖率和ALP的活性,而强度为8 mT时则显著抑制成骨细胞的增殖与ALP的活性;不同形状的三角形电磁场也明显影响成骨细胞的功能,其中以p为38%、85%对成骨细胞的影响最为明显.结论:电磁场的生物学效应依赖于其参数特征.     

NFATc1-ERK5通路介导流体剪切力促进成骨细胞BMP7表达

目的:探讨成骨细胞中NFATc1与ERK5调控关系,并研究流体剪切力(FSS)调节BMP7表达的信号通路。方法:实验分为6组,即空白组、FSS组、Cs A(Cyclosporin,NFATc1抑制剂)组、XMD8-92(ERK5抑制剂)组、FSS+Cs A组、FSS+XMD8-92组。用Western Blot方法检测不同干预条件下NFATc1、ERK5、p-ERK5以及BMP7蛋白表达水平并进行比较。结果:12 dyn/cm~2FSS作用45 min能够显著提高NFATc1、p-ERK5在成骨细胞内水平,400 nmol/L Cs A干预30 min能够有效抑制NFATc1表达量升高以及ERK5磷酸化,但5μmol/L XMD8-92作用1 h仅能够抑制ERK5磷酸化,而对NFATc1没有作用。此外,FSS促进MC3T3-E1细胞中BMP7表达量升高,Cs A和XMD8-92任何一种抑制剂均能显著阻止BMP7表达。结论:FSS在成骨细胞中通过NFATc1来调控ERK5磷酸化,BMP7为ERK5下游靶点受NFATc1-ERK5通路调控。     

葡萄糖对成骨细胞体外发育和葡萄糖载体1表达的影响

目的 探讨葡萄糖对成骨细胞体外发育和葡萄糖载体1表达的影响.方法 组织块培养法培养新生大鼠颅骨成骨细胞,再将成骨细胞分两组培养:正常浓度组(含5.5 mmol/L葡萄糖培养液)和高浓度组(含25.5 mmol/L葡萄糖培养液).四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,茜素红S钙染色法检测骨结节形成,反转录(RT)PCR和Western免疫印迹检测成骨细胞葡萄糖载体1 mRNA和蛋白表达情况.结果 与正常浓度葡萄糖相比,高浓度葡萄糖在第3、4、5天显著促进成骨细胞的增殖[ (0.390 0±0.002 4)比(0.320 0±0.012 7),( 0.540 0±0.009 4)比(0.440 0±0.004 6),( 0.720 0±0.001 3)比(0.600 0±0.006 1),均P＜0.05],但抑制其矿化和骨结节形成.正常浓度组形成肉眼可见的钙化结节要早于高浓度组(第9天比第14天).实验最后ld(第32天),高浓度组的骨结节数明显少于正常浓度组(P＜0.05).与正常浓度组相比,高浓度葡萄糖使成骨细胞葡萄糖载体l mRNA和蛋白的表达增加.结论 高浓度葡萄糖刺激成骨细胞增殖但抑制细胞矿化可能直接引起成骨细胞骨形成障碍.高浓度葡萄糖引起成骨细胞葡萄糖载体1表达的改变可能在骨质量变化过程中起重要作用.     

地塞米松对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的:研究地塞米松对缺血再灌注损伤及细胞凋亡的防治作用。方法:健康豚鼠,随机分成正常组、假手术组、地塞米松干预后假手术组、模型组和干预组(地塞米松术前腹腔注射)。后2组各在缺血30 min、再灌注6 h及24 h取材。用TUNEL法观察耳蜗缺血及不同时间段内再灌注的细胞凋亡情况,并与地塞米松干预后进行比较。结果:干预组的螺旋神经节及螺旋器(Corti器)较模型组在每个时间点上凋亡小体减少。结论:地塞米松可通过抑制诱导型一氧化氮合酶使凋亡细胞明显减少。     

糖皮质激素治疗癫癎的机制及其与白细胞介素-2受体关系探讨

目的 :研究糖皮质激素治疗癫的机制及其与白细胞介素 2受体 (IL 2R)的关系。方法 :用腹腔注射美解眠制作大鼠癫模型 ,致前后分组分别给予地塞米松 ,观察大鼠出现癫发作的潜伏期及持续时间 ,并用脑电图仪和免疫细胞化学方法研究地塞米松对癫大鼠脑电图和皮层及海马区IL 2Rβ免疫反应阳性细胞的影响。 结果 :对照组无癫发作。致前给予地塞米松组大鼠较癫组大鼠癫发作潜伏期延长 (12 .2 5± 1.6 3对 3.85± 0 .81min) ,持续时间缩短 (9.6 8± 3.16对 14 .98±2 .18min) (P <0 .0 1) ,脑电图高电位样波发放减少 ,顶区皮层和海马IL 2Rβ免疫反应阳性细胞数减少 (5 .31± 1.11对 12 .84± 1.5 3,2 .80± 0 .76对 6 .79± 1.14个 ) (P <0 .0 1)。致后给予地塞米松组 ,上述指标与癫组相比 ,差异无显著意义 (13.86± 2 .31对 12 .84± 1.5 3,5 .89± 0 .95对 6 .79± 1.14个 )(P >0 .0 5 )。结论 :糖皮质激素抑制癫发作与其快速膜效应及通过IL 2对免疫 神经 内分泌网络的调节有关。     

不同免疫抑制剂对全血细胞单核细胞趋化蛋白1分泌的影响

背景:器官移植后的患者常规使用地塞米松、他克莫司、环孢素A和麦考酚酸等临床常用的免疫抑制剂,其作用机制各不相同。有关不同免疫抑制剂对单核细胞趋化蛋白1的作用尚未见报道。目的:观察不同免疫抑制剂对全血细胞分泌单核细胞趋化蛋白1的影响。方法:取健康志愿者全血与不同免疫抑制剂(他克莫司,环孢素A,地塞米松,麦考酚酸,每种免疫抑制剂又分为低、中、高3个质量浓度)作用6h后,用佛波酯联合离子霉素刺激6h,比较不同免疫抑制剂组及免疫抑制剂联合使用单核细胞趋化蛋白1的水平。以全血单独培养作为对照。结果与结论:麦考酚酸和他克莫司不能有效抑制单核细胞趋化蛋白1的分泌;1,10mg/L地塞米松、0.05,1.25mg/L环孢素A均能够显著抑制单核细胞趋化蛋白1的分泌。因此,地塞米松和环孢素A可能通过抑制单核细胞趋化蛋白1的水平抑制单核巨噬细胞在免疫系统中发挥作用的。联合使用5μg/L他克莫司、10mg/L麦考酚酸和1mg/L地塞米松或者联合使用0.25mg/L环孢素A、10mg/L麦考酚酸和1mg/L地塞米松都可以有效抑制单核细胞趋化蛋白1的分泌,而上述免疫抑制剂单用时,仅地塞米松能有效抑制单核细胞趋化蛋白1的分泌。     

从细胞水平研究龟鹿二仙含药血清在治疗骨质疏松中的作用

从细胞水平研究龟鹿二仙含药血清在治疗骨质疏松中的作用.(1)用酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞.碱性磷酸酶(ALP)染色进行鉴定,通过对成骨细胞增殖、胰岛素样生长因子(IGF-1)分泌的检测来考察成骨细胞功能.(2)用1,25(OH)2D3诱导骨髓单核细胞获得破骨细胞,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定破骨细胞.电镜扫描观察破骨细胞形成的骨凹陷情况;同时检测TRAP( )细胞数和破骨细胞TRAP活性.(3)用血清药理学方法制备龟鹿二仙含药血清,分别加入不同剂量组10%含药血清进行干预,观察该中药血清对上述成骨细胞和破骨细胞功能指标的影响.龟鹿二仙高剂量组血清可促进成骨细胞增殖,增加IGF-1的分泌量.而中剂量组血清可明显抑制骨髓细胞向破骨细胞的转化,抑制骨凹陷形成,降低细胞内TRAP的活性.本研究表明龟鹿二仙具有显著的抗骨质疏松作用.     

健骨颗粒促进成骨细胞增殖的分子机制

背景：ERK是依赖于Ras途径激活的一个蛋白激酶,在成骨细胞增殖和分化过程中发挥重要作用。而PD98059是MEK特异性抑制剂,它可通过抑制MEK的活性来抑制ERK的磷酸化,从而起到阻断ERK信号通路的作用。目前有关ERK在大鼠成骨细胞增殖和分化过程中的作用研究甚少。ERK在健骨颗粒促进大鼠成骨细胞增殖和分化过程中调控的作用更未被阐明。 目的：观察ERK信号转导通路在健骨颗粒促成骨细胞增殖和分化过程中的作用。 方法：取第3代SD大鼠头盖骨成骨细胞,空白组加入生理盐水血清;中药组加入最佳浓度的健骨颗粒含药血清;阻滞剂组添加PD98059阻断剂,中药加阻断剂组添加PD98059阻断剂与健骨颗粒含药血清。用MTT法测定细胞的增殖能力,比色法测碱性磷酸酶、羟脯氨酸水平。收集细胞实时荧光定量PCR-SYBR GREEN法检测Cbfa1、Ⅰ型胶原、OSX mRNA的表达,Westren blot法检测成骨细胞ERK的表达情况。 结果与结论：添加PD98059阻断剂后,阻滞剂组和中药加阻滞剂组中ERK的表达显著低于空白组和中药组。阻断剂组的成骨细胞内碱性磷酸酶、羟脯氨酸的表达以及Cbfa1、Ⅰ型胶原、OSX mRNA表达显著低于空白组和中药组。ERK在健骨颗粒促进大鼠成骨细胞增殖和分化过程中发挥重要作用,ERK信号通路可能是健骨颗粒促进成骨细胞增殖和分化的主要途径。     

热休克反应对热暴露大鼠心血管系统的保护作用及机制

目的:探讨热休克反应(HSR)对热暴露大鼠心血管系统的保护作用及机制。方法:本研究分为两个实验:①HSR对热暴露大鼠心血管系统的保护作用。SD大鼠随机分为两组:热休克组(HSgroup),对照组(SCgroup)。HS组给予热休克预处理,而SC组则否。两组常温恢复20h后予以热暴露至动物死亡,其间监测记录血压、心电。运用chart软件,获取平均动脉压、生存时间等数据。②该作用的心肌丙二醛机制。SD大鼠随机分为3组:HSgroup、SCgroup和常温对照组(NCgroup)。NC组不予任何处理。前两组处理方法同实验一,但在热暴露至73min时终止实验,并检测此时心肌丙二醛含量。结果:①HS组生存时间显著长于SC组,且休克出现较晚;②HS与SC组热暴露早期血压无明显差异,60min后,前者显著高于后者;③热暴露至73min时,SC组心肌丙二醛含量显著高于NC组。而HS组心肌丙二醛含量低于SC组,并与NC组无显著差异。结论:HSR通过抑制热暴露大鼠心肌丙二醛的生成,对其心血管系统起到了明显的保护作用。     

葛根素干预小鼠成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA的表达CSCD

背景:研究证实葛根素对小鼠卵巢以及与睾丸切除所致骨质疏松具有很好的防治作用,但关于葛根素对成骨细胞分化的影响却少有报道。目的:观察葛根素对成骨细胞碱性磷酸酶mRNA、骨涎蛋白mRNA、骨桥蛋白mRNA以及骨钙素mRNA表达的影响情况。方法:体外培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞,随机分为3组。空白对照组仅更换培养基;葛根素组更换为含有葛根素1×10-6 mol/L培养基;雌二醇组更换为含有雌二醇1×10-7 mol/L培养基。RT-PCR法测定MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶、骨涎蛋白、骨桥蛋白、骨钙素mRNA的表达结果与结论:葛根素和雌二醇能够延长碱性磷酸酶表达时间,在第12天达到高峰;葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增加骨涎蛋白mRNA的表达。葛根素和雌二醇在第5天和第12天能够减少骨桥蛋白的表达;葛根素和雌二醇在第10天和第12天能够增强骨钙素表达。结果表明葛根素能够通过影响成骨细胞分化相关特征性蛋白mRNA表达,促进成骨细胞的分化,可能是葛根素抗骨质疏松的重要的细胞分子机制之一。     

长链非编码RNA H19抑制地塞米松致成骨细胞凋亡的作用

背景：激素性股骨头坏死的发病机制尚不清楚,成骨细胞凋亡与其关系密切。目的：探讨长链非编码RNA H19(long Non-Coding RNA H19,lncRNA H19)在地塞米松促进成骨细胞凋亡中的作用。方法：培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,分为对照组(不处理)和地塞米松组(1μmol/L地塞米松处理24 h),采用Western blot检测各组细胞Bax、Bcl-2和细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2/ERK1/2)蛋白的表达,流式细胞术和细胞活力染色检测细胞凋亡情况,qRT-PCR检测lncRNAH19的表达。转染lncRNA H19阴性对照(ad-NC)和lncRNA H19过表达质粒(ad-lncRNA H19)并给予地塞米松干预24 h后,采用细胞活力染色、Western blot和流式细胞术检测MC3T3-E1细胞凋亡情况;使用MAPK-ERK通路抑制剂PD98059处理MC3T3-E1细胞24 h,Western blot检测各组细胞Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果与结论：(1)与对照组相比,地塞米松组MC3T3-E1细胞凋亡率升高,lncRNA H19相对...     

海鞘醇衍生物SC002抗肿瘤相关分子机制的研究

目的:探讨海鞘醇衍生物002(简称SC002)抗肿瘤相关分子机制.方法:应用Western blot检测SC002作用于肿瘤细胞后,VEGF、P53、P21、Bcl-2等肿瘤相关信号分子表达水平的变化;进一步应用ELISA检测SC002对荷瘤小鼠血清中的VEGF和实体瘤组织中Caspase-3,8,9活性的影响.结果:SC002可明显诱导P53的表达,而降低BCL-2的表达,但对p21没有作用;SC002可降低荷瘤小鼠血清中VEGF的含量,同时对瘤体组织中VEGF蛋白表达水平也有抑制作用,但对Caspase-3,8,9的活性无明显影响.结论:SC002可通过激活抑癌基因p53,抑制抗凋亡基因Bel-2和促血管生成因子VEGF等多种途径,发挥抗肿瘤的活性,这一发现将为SC002作为新型的抗肿瘤药物提供重要的实验依据.     

诺帝滴眼液抑制碱烧伤诱导大鼠角膜新生血管分子机制的初步研究

目的 初步探索0.1%诺帝滴眼液对角膜新生血管(corneal neovascularization,CRNV)抑制作用的分子机制.方法 建立大鼠碱烧伤角膜新生血管模型,分空白溶液组、0.1%诺帝滴眼液组、0.1%地塞米松滴眼液组.采用免疫组化及RT-PCR法检测VEGF、flk-1蛋白及mRNA表达.结果 治疗组及地塞米松组VEGF蛋白表达少于空白溶液组(P<0.05).7 d、14 d VEGF mRNA抑制率分别为:治疗组58.60%,74.60%;地塞米松组76.88%,80.95%.flk-1 mRNA抑制率:治疗组66.27%,69.63%;地塞米松组72.16%,74.81%.结论 0.1%诺帝滴眼液明显降低角膜VEGF和其受体flk-1 mRNA蛋白表达,通过下调VEGF受体量,间接减少VEGF受体后信号转导及效应蛋白合成,抑制了CRNV的发生.