白藜芦醇抑制内质网应激改善高脂小鼠肾损伤的机制研究

目的 探究白藜芦醇(RSV)通过抑制内质网应激反应改善高脂小鼠慢性肾损伤的作用及其分子机制。方法选取18只C57BL/6J小鼠将其均分为3组,分别为对照组(CTRL组)、高脂组(HL组)、白藜芦醇组(RSV组),构建高脂模型。RSV组给予高脂饮食的同时进行RSV 5 mg/(kg·d)灌胃干预,18周后检测3组小鼠的体质量、空腹血糖(FBG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、尿酸(UA)和血尿素氮(BUN)的水平,采用HE、PAS染色观察小鼠肾组织的形态学变化,采用Western blot和RT-PCR法观察小鼠肾组织中内质网应激标志物CHOP、GRP78蛋白及m RNA的表达。结果 在给予RSV干预后,RSV组小鼠体重、FBG、LDL-C水平均低于HL组,HDL-C水平高于HL组,血清中UA和BUN均降低,肾组织形态学变化有所改善,内质网应激标志物CHOP、GRP78蛋白及m RNA的表达降低。结论 RSV主要通过抑制内质网标志物CHOP、GRP78的表达,改善高脂饮食诱导的慢性肾损伤。     

炎症状态下高脂介导的内质网应激在系膜细胞损伤中的作用及机制

目的观察炎症状态下高脂介导的内质网应激在人肾脏系膜细胞(HMCs)损伤中的作用,并探讨高脂在肾脏损伤中的作用机制。方法体外培养HMCs,分为对照组、高脂组、炎症组、高脂+炎症组、高脂+炎症+4-苯基丁酸(4-PBA)干预组(4-PBA干预组),分别培养24、48和72h。用油红O染色观察HMCs胞内脂质沉积水平;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖变化;实时荧光定量PCR检测GRP78、纤连蛋白(FN)mRNA水平;免疫细胞化学半定量分析糖调节蛋白78(GRP78)蛋白水平。结果 (1)与对照组比较,高脂组、炎症组、高脂+炎症组HMCs胞内脂质沉积增多(P均<0.01),细胞增殖增快,且呈时间依赖性(P均<0.01),同时FN mRNA表达升高(P均<0.01);与高脂+炎症组比较,4-PBA干预组胞内脂质沉积减少(P均<0.01),细胞增殖减慢(P均<0.01),且FN mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01)。(2)与对照组比较,高脂组、炎症组、高脂+炎症组GRP78mRNA和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);而4-PBA干预组GRP78mR-NA和蛋白表达较高脂+炎症组降低(P均<0.01)。(3)在24、48及72h,细胞脂质沉积水平与其增殖、GRP78蛋白及FN mR-NA水平均呈正相关(P均<0.01),GRP78蛋白表达水平与细胞增殖和FN mRNA水平呈正相关(P均<0.05)。结论炎症状态下,高脂可通过启动HMCs内质网应激致细胞损伤。     

高脂饮食抑制胰岛素受体和胆囊收缩素受体在小鼠肝脏中的表达

目的:在高脂饮食（HFD）小鼠中研究肝脏中胰岛素受体（IR）、胆囊收缩素（CCK）受体（CCKR）的表达和 胰腺中胰岛素的储量。方法:用含15%和30%脂肪的两种HFD和对照餐（5%脂肪）喂养3组小鼠（15～16只/组）12周,用 蛋白印迹法检测IR和CCKR在肝脏中的表达;用免疫组化和ELISA测定胰腺中β细胞群落和胰岛素含量;测定门静脉和外 周血CCK和胰岛素水平。结果:15%和30% HFD使肝IR、CCKR的表达水平均下降（均P<0.05）。HFD还使胰岛β细胞面积 增加（对照组:54.57±2.72;15%HFD:68.74±1.72;30%HFD:71.61±2.32;均P<0.05）。此外,30%HFD还增加胰腺 胰岛素的储量并提升门静脉血浆中胰岛素的水平。结论:HFD降低小鼠肝脏IR和CCKR的表达,增加胰腺胰岛素储量。     

饮酒通过内质网应激促进小鼠乳腺癌恶性进展

目的 通过动物实验及体外实验探索饮酒是否促进乳腺癌恶性进展,且这一作用是否与其诱导的慢性应激有关。方法 利用小鼠乳腺癌移植瘤模型,体内观察2%乙醇慢性处理的小鼠乳腺癌E0771细胞对体内细胞生长转移的影响;利用体外细胞学实验观察0.2%乙醇慢性诱导对小鼠乳腺癌细胞E0771增殖、迁移及非锚定生长能力的影响;同时用分子生物学方法探索细胞内ROS水平及慢性内质网应激蛋白如p-eIF2a、Bip、XBP1-s等蛋白表达水平是否发生改变。结果 与对照组相比,饮酒组小鼠体内肿瘤生长速度加快,转移增加;体外酒精处理可以显著促进乳腺癌细胞增殖、迁移等恶性生物学行为,酒精慢性处理可以诱导ROS、内质网应激活化蛋白p-eIF2a、Bip、XBP1-s表达上升。结论 饮酒可能通过诱导乳腺癌细胞内质网应激促进其恶性进展。     

高脂膳食对C57小鼠肝脏内质网应激及PAI-1表达的影响

目的研究高脂膳食致C57小鼠脂肪肝内质网应激及其纤溶酶原激活物抑制物1(plasminogen activator in-hibitor-1,PAI-1)的变化。方法采用高脂膳食诱导代谢综合征(胰岛素抵抗、脂肪肝、肥胖)小鼠模型(HF组,n=10),以正常普食喂养的小鼠为对照组(NF组,n=12),喂养25周,检测各组小鼠血清中空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINs)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、PAI-1、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测各组小鼠肝组织中C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、PAI-1mRNA的表达。苏木精-伊红染色观察肝组织的形态学改变。结果 HF组肝脏病理检测提示中度脂肪肝,血清中FBG、FINs、TC、TG、PAI-1、ALT、AST均较NF组呈不同水平增高(均P<0.05),同时,肝组织中CHOP、PAI-1mRNA表达水平也明显上调(均P<0.01)。结论高脂膳食喂养可诱发C57小鼠脂肪肝内质网应激;PAI-1mRNA表达增高且活性增强,可能参与了脂肪肝内质网应激。     

水飞蓟宾对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响

目的：探讨水飞蓟宾对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响。方法：利用高脂饮食（ＨＦ）胰岛素耐受（ＩＲ）大鼠模型,观察水飞蓟宾对ＩＲ的治疗作用,与胰岛素增敏剂ＣＳ－０４５进行对照研究。用等热量ＨＦ饲养正常大鼠４周,分别以水飞蓟宾和ＣＳ－０４５灌胃治疗３周,测定动物体质量、血压、血糖、胰岛素、血脂、组织糖原、三酰甘油（ＴＧ）及胰岛素敏感性（Ｋ值）。结果：ＨＦ饲养４周时,大鼠胰岛素、血脂明显升高,肝脏和肌肉ＴＧ含量升高,糖原含量下降,胰岛素敏感性下降（Ｋ值为５．６３±０．７２）,与正常对照组（７．７７±０．３５）比较,差异有显著性意义（Ｐ＜０．０１）,７周时Ｋ值进一步下降。水飞蓟宾和ＣＳ－０４５治疗３周后,胰岛素敏感性改善,Ｋ值为５．０９±０．３９ｖｓ６．２２±０．５６（Ｐ＜０．０１）,组织糖原含量明显增加（Ｐ＜０．０１）。结论：水飞蓟宾能改善ＨＦ大鼠的胰岛素敏感性,其机制可能与水飞蓟宾促进糖原合成有关。     

滁菊对高脂饮食性高血糖症的预防作用

目的观察饮用滁菊对高脂饮食诱导的高血糖症的影响。方法采用高脂饲料饲喂小鼠8周后诱导高血糖症动物模型。同时,给予0.2 mg/ml,0.4 mg/ml浓度的滁菊水提液干预,分光光度计法检测干预后对高脂饮食诱导的高血糖的影响。结果与对照相比,高脂饮食组小鼠的血糖浓度显著升高;而滁菊水提液干预呈浓度依赖性地抑制高脂饮食诱导的高血糖效应。结论饮用滁菊可有效预防高脂饮食诱导的高血糖症。     

二氮嗪通过抑制内质网应激作用降低软骨细胞凋亡的研究

目的 探讨二氮嗪对H₂O₂诱导的软骨细胞凋亡的机制研究。 方法 每组取3只SD大鼠膝关节软骨细胞进行原代培养,将软骨细胞分成6组,分别为对照组(A组),H₂O₂损伤组(B组),H₂O₂+100 μmol/L二氮嗪组(C组),H₂O₂+200 μmol/L二氮嗪组(D组),H₂O₂+300 μmol/L二氮嗪组(E组),H₂O₂+400 μmol/L二氮嗪组(F组)。A组细胞不做特殊处理,B组用400 μmol/L双氧水在37℃恒温箱内孵育8 h,C、D、E、F组分别用100、200、300、400 μmol/L的二氮嗪在37℃的恒温箱内预处理30 min,再用400 μmol/L的H₂O₂孵育8 h,用CCK8法检测各组软骨细胞的活性,用流式细胞仪检测各组软骨细胞凋亡情况,用RtPCR检测软骨细胞功能情况,用免疫荧光、Western Blot检测凋亡和内质网应激相关蛋白的表达情况。 结果 ①CCK8法检测各组细胞的活性率从大至小依次为A组> E组> D组> F组> B组;②流式细胞仪检测各组软骨细胞凋亡率由大至小依次为B组> F组>D组> E组> A组;③RtPCR检测软骨细胞二型胶原蛋白(Coll-Ⅱ)、Caspase-3和聚集蛋白聚糖酶(aggrecanase)表达量,表达量大至小依次为A组> E组> D组> F组> B组;各组聚集蛋白聚糖酶表达量大至小依次为B组> F组> D组> E组> A组;④免疫荧光检测软骨细胞中CHOP蛋白的表达量,各组表达量依次是B组> F组> A组;⑤Western bolt检测各组软骨细胞中Caspase-3、Bax、CHOP蛋白的表达情况,表达量依次为B组> F组> A组。 结论 二氮嗪通过抑制内质网应激作用,从而减少H₂O₂诱导的大鼠软骨细胞的凋亡。      

姜黄素对内质网应激诱导小鼠肝损伤的保护作用

目的 探讨姜黄素对内质网应激(ERS)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 建立衣霉素诱导ERS的肝损伤模型,测定肝损伤小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平、肝匀浆中还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量及肝指数.实时荧光定量PCR法检测小鼠肝组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78/Bip) mRNA表达及半定量免疫组化法检测肝组织GRP78/Bip蛋白水平,并行肝组织病理学检查.结果 姜黄素能降低衣霉素诱导ERS肝损伤小鼠血清中ALT、AST水平和肝组织匀浆中MDA含量;提高肝组织匀浆中SOD、GSH活性;同时姜黄素能明显抑制肝组织中GRP78/Bip mRNA和蛋白的表达.HE染色结果显示姜黄素能明显改善模型组小鼠肝脏组织病变范围与程度,使炎细胞浸润减少.结论 姜黄素可能通过抗氧化作用对ERS诱导的肝损伤小鼠发挥保护作用.     

2型糖尿病小鼠内质网应激对耳蜗毛细胞退行性变的影响

目的：探讨内质网应激（ERS）对1%链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠耳蜗毛细胞退行性变的影响,阐明其作用机制。方法：选取清洁级1月龄雄性昆明小鼠20只,随机分为对照组和模型组,模型组小鼠采用腹腔注射40 mg·kg^-1STZ建立2型糖尿病模型。尾静脉采血测定小鼠空腹血糖,通过听觉脑干反应（ABR）检测小鼠的ABR阈值,耳声发射测试（OAE）实验检测OAE阈值,应用小鼠耳蜗铺片技术计算小鼠耳蜗外毛细胞的缺损率,采用Western blotting法检测小鼠耳蜗毛细胞中GRP78、caspase-12、p-ERK和Nrf2蛋白表达水平。结果：与对照组比较,第2次注射STZ后7和14 d模型组小鼠空腹血糖差异无统计学意义（P>0.05）,21、28和35 d空腹血糖明显升高（P<0.05）,35 d达到最高值。与对照组比较,模型组小鼠在8、12和24 kHz各个频率的ABR阈值明显升高（P<0.05）。与对照组比较,低频刺激下模型组小鼠OAE阈值无明显变化（P>0.05）,在中频和高频刺激下模型组小鼠OAE阈值明显升高（P<0.05）。小鼠耳蜗外毛细胞缺损主要集中在底回端,耳蜗中回和顶回外毛细胞缺损较少;与对照组比较,模型组小鼠耳蜗中的底回外毛细胞缺损率明显升高（P<0.05）,中回和顶回外毛细胞缺损率略有升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,模型组小鼠耳蜗毛细胞中GRP78和caspase-12蛋白表达水平升高（P<0.05）,p-ERK和Nrf2蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论：ERS能够引起糖尿病小鼠耳蜗外毛细胞缺损率和ABR脑干听力阈值升高,并降低p-ERK和Nrf2的蛋白表达水平,提示ERS可促进2型糖尿病小鼠耳蜗毛细胞的退行性病变。     

高糖诱导的心肌细胞损伤的内质网应激机制研究

目的:本文对高糖诱导的心肌细胞损伤的内质网应激机制研究,为临床治疗提供借鉴.方法:心肌细胞随机分为3组:对照组、高糖组和4-BPA组.高糖组给予高糖处理12h,4-BPA组细胞在高糖处理的第6h给予4-BPA处理.免疫印迹法分析各组细胞内质网应激蛋白CHOP、BIP、PERK的表达.结果:高糖引起心肌细胞内质网应激蛋白CHOP、BIP、PERK的增强表达,且与对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01);4-BPA处理后上述蛋白的异常表达得到部分改善,且与高糖组相比,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:高糖损伤心肌细胞可能是通过激活细胞内内质网应激信号通路实现.     

视神经萎缩症蛋白1通过抑制氧化应激减少高糖高脂诱导的心肌细胞凋亡

目的 研究高糖高脂对心肌细胞的影响及视神经萎缩症蛋白1(optical atrophy-1,OPA1)在其中的具体作用.方法 将高糖培养基培养的小鼠心肌细胞分为3组:高糖+0、200、400 μmol/L软脂酸钠组,并分别干预8h和16 h.采用siRNA敲低心肌OPA1表达,进一步将400 μmol/L软脂酸钠组分为对照组、OPAl siRNA干预组、Scra siRNA干预组、OPA1 siRNA+NAC干预组.通过流式细胞仪检测各组心肌细胞在不同时间点的凋亡水平,q-PCR法检测心肌细胞中OPA1mRNA的表达情况,DHE染色法与ELISA试剂盒测定心肌细胞中活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平.结果 心肌细胞凋亡水平随着软脂酸钠的浓度和干预时间逐渐增加(P＜0.05).与对照组相比,高脂干预明显抑制心肌细胞中OPA1的表达,同时显著地促进ROS生成(P＜0.05).通过OPA1 siRNA干扰OPA1的表达水平后,高脂诱导的心肌细胞凋亡与ROS生成进一步增加(P＜0.05);相反地,抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)逆转了上述OPA1抑制所导致的心肌细胞凋亡.结论 高脂血症会进一步增加糖尿病心肌细胞的易损性,OPA1可以通过抑制氧化应激反应促进伴有高脂血症糖尿病条件下的心肌细胞存活.     

大黄素对糖尿病大鼠肠平滑肌内质网应激及调控机制的研究

目的 探讨大黄素对糖尿病大鼠肠平滑肌细胞凋亡机制及调控机制.方法 SD大鼠分为对照组、糖尿病组与大黄素组,成模10周时,检测小肠推进率;TUNEL法测肠平滑肌细胞凋亡;免疫组织化学测细胞葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)及Caspase-12蛋白表达.结果 糖尿病组与大黄素组大鼠于成模后出现多尿、多饮、多食、体质量减轻症状;血糖水平显著增高(P＜0.05).成模10周时,与对照组比较,糖尿病组大鼠小肠推进率显著下降(P＜0.05),肠平滑肌细胞凋亡率、GRP78、Caspase-12蛋白表达显著增加(P＜0.05).与糖尿病组比较,大黄素组小肠推进率显著增高(P＜0.05),肠平滑肌细胞凋亡率、GRP78、Caspase-12蛋白表达显著降低(P＜0.05).结论 内质网应激途径介导了糖尿病大鼠肠平滑肌细胞凋亡;大黄素可能降低糖尿病大鼠肠平滑肌内质网应激介导的细胞凋亡,从而改善肠动力.     

脂蛋白脂肪酶基因敲除小鼠糖脂代谢与脂肪组织内质网应激研究

目的研究脂蛋白脂肪酶(LPL)基因敲除小鼠糖脂代谢特点及脂肪组织内质网应激情况。方法以LPL基因敲除杂合子小鼠(LPL+/-组,n=8)和野生型(WT)C57小鼠(对照组,n=8)作为实验对象,两组再分为16周龄组(n=4)和50周龄组(n=4)。测定血清三酰甘油(TG)和游离脂肪酸(FFA)水平;腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)监测血糖变化,计算葡萄糖曲线下面积(AUCg)和稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),评价胰岛素敏感性及胰岛β细胞功能;采用Real-Time PCR技术检测皮下脂肪和内脏脂肪组织中内质网应激相关因子(Bip、ATF4、ATF6和CHOP)的表达。结果 50周龄LPL+/-组小鼠血清TG和FFA水平均显著高于50周龄对照组小鼠,血清FFA水平明显高于16周龄LPL+/-组小鼠(P<0.05)。IPGTT结果显示:50周龄LPL+/-组小鼠IPGTT30、60 min血糖及AUCg均显著高于50周龄对照组(P<0.05),且IPGTT15～120 min血糖和AUCg均显著高于16周龄LPL+/-组(P<0.05)。与16周龄LPL+/-组比较,50周龄LPL+/-组小鼠HOM...     

Hydrogen sulfide regulates vascular endoplasmic reticulum stress in apolipoprotein E knockout mice

Background  Atherosclerosis is an important cardiovascular disease, becoming a major and increasing health problem in developed countries. However, the possible underlying mechanisms were not completely clear. In 2009, our research group first discovered that hydrogen sulfide (H₂S) as a novel gastrotransmitter played an important anti-atherosclerotic role. The study was designed to examine the regulatory effect of hydrogen sulfide (H₂S) on endoplasmic reticulum stress (ERS) in apolipoprotein E knockout (apoE^-/-) mice fed a Western type diet.

Methods  C57BL/6 mice and homozygous apoE^-/- mice were fed a Western type diet. C57BL/6 mice were injected intraperitoneally with normal saline (5 ml/kg per day) as control group. The apoE^-/- mice were treated with the same dose of normal saline as the apoE^-/- group, injected intraperitoneally with sodium hydrosulfide (NaHS, an H₂S donor, 56 μmol/kg per day) as the apoE^-/-+NaHS group and injected intraperitoneally with DL-propargylglycine (PPG, a cystathionine-γ-lyase inhibitor, 50 mg/kg, per day) as the apoE^-/- +PPG group. After 10 weeks, the mice were sacrificed and the plasma lipids were detected. Sections of aortic root from these animals were examined for atherosclerotic lesions by HE and oil red O staining. The aortic ultrastructure and microstructure were analyzed with the help of light and electronic microscope. Glucose-regulated protein 78 (GRP78), caspase-12, copper-andzinc-containing superoxide dismutase (Cu/ZnSOD) and Mn-containing superoxide dismutase (MnSOD) protein expression in aortic tissues were detected with immunohistochemistry. The level of intracellular reactive oxygen species (ROS) were measured by using a commercial assay kit.

Results  Compared with control mice, apoE^-/- mice showed increased plasma levels of total cholesterol (TC), triglyceride (TG) and low density lipoprotein (LDL), decreased high density lipoprotein (HDL), increased aortic plaque size, destroyed ultra-structure of aortic tissue, and increased expression of GRP78 and caspase-12 proteins. Compared with apoE^-/- mice, H₂S donor-treated apoE^-/- mice showed a decreased plasma LDL level, lessened plaque necrosis and attenuated aortic ultra-structural disorder. H₂S donor-treatment induced GRP78 expression but suppressed caspase-12 expression in aortic lesions. However, compared with apoE^-/- mice, PPG treated apoE^-/- mice showed enlarged plaque size, more severe ultrastructural disorder of the aortic tissue and reduced GRP78 staining in aortic lesions. The plasma lipids and the staining of caspase-12 in apoE^-/- + PPG rats did not significantly differ from those in the apoE^-/-mice. Consistently, H₂S induced SOD expression, accompanied by a reduced level of ROS.

Conclusion  H₂S plays a regulatory role in aortic ERS and reduces atherosclerotic lesions in apoE^-/- mice fed with a Western type diet.

     

内质网应激在UCH-L1抑制剂诱导细胞凋亡中的作用

目的探讨内质网应激(ERS)在泛素羧基末端水解酶-1(UCH-L1)抑制剂导致的细胞损伤过程中的作用。方法采用50μmol/L的UCH-L1抑制剂处理人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞。于处理前(对照组)和处理后不同时间点(2、4、6、12、24h),分别采用MTT比色法和Western blotting法检测细胞活力和ERS相关蛋白Bip/Grp78、Xbp-1、p-eIF2α及其促凋亡转录因子CHOP/Gadd153的表达。结果MTT比色法检测发现,50μmol/LUCH-L1抑制剂处理后4h,SK-N-SH细胞活力下降43.1%(P<0.05),且随处理时间的延长继续呈现显著下降趋势(P<0.01)。Western blotting检测显示,经50μmol/LUCH-L1抑制剂处理后,SK-N-SH细胞ERS相关蛋白Bip/Grp78、p-eIF2α和Xbp-1表达分别于处理后2、4、6h时显著增加;转录因子CHOP/Gadd153表达则在处理后2h和4h时略有增加,6h后达到高峰。结论在UCH-L1抑制剂诱导的细胞凋亡过程中,ERS是导致细胞损伤的路径之一。     

利拉鲁肽对高脂诱导肥胖小鼠瘦素、脂肪分布及含量的影响

目的 观察利拉鲁肽对高脂诱导的C57BL/6小鼠肥胖模型瘦素、体内脂肪含量及分布的影响。 方法 4周龄C57BL/6小鼠60只,随机分为正常对照组(n=15)和高脂喂养组(n=45)。高脂喂养组给予40%脂肪含量高脂饲料喂养,正常对照组给予普通饲料喂养,构建肥胖小鼠模型至20周龄时,将造模成功的高脂喂养组随机分为利拉鲁肽组、饮食干预组(普通饲料喂养)和继续高脂喂养组(高脂饲料喂养),每组15只。利拉鲁肽组腹腔注射利拉鲁肽(稀释于双蒸水中)［100 μg/(kg·d)］,饮食干预组、继续高脂喂养组和正常对照组腹腔注射生理盐水［0.017 mL/(kg·d)］。监测记录各组体质量。药物干预12周后于10%水合氯醛麻醉下处死全部小鼠,利用磁共振测定小鼠体内脂肪含量,采用竞争法测定外周血瘦素含量,酶法测定外周血血脂水平。 结果 利拉鲁肽组体质量最低,与正常对照组、饮食干预组、继续高脂喂养组相比差异有统计学意义(P<0.05);利拉鲁肽组瘦素水平下降,与饮食干预组、继续高脂喂养组差异有统计学意义(P<0.05);利拉鲁肽组血脂水平下降,甘油三酯含量与正常对照组、继续高脂喂养组相比差异有统计学意义(P<0.05),总胆固醇含量仅与继续高脂喂养组差异有统计学意义(P<0.05);利拉鲁肽组脂肪总含量、肠系膜脂肪、附睾脂肪、肾周脂肪、肩胛下脂肪、皮下脂肪与其他各组比较均差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 利拉鲁肽可明显减轻肥胖小鼠的体质量、降低瘦素水平,有降脂和调节脂肪分布的作用。     

热打击可通过调控内质网应激通路促进神经细胞凋亡

Objective To explore the role of endoplasmic reticulum stress in heat stress-induced apoptosis of human neuroblastoma SH-SY5Y cells. Methods SH-SY5Y cells were incubated at 43 ℃ for 2 h followed by further culture at 37 ℃ for 0, 3 h, or 6 h. With the cells cultured at 37 ℃ as the control, the cells exposed to heat stress were examined for morphological changes under optical microscope and changes in cell viability using CCK-8 assay. Flow cytometry was performed for detecting apoptosis of the cells following heat stress, and intracellular Ca2 + level in the cells was determined using flow cytometry and immunofluorescence confocal microscopy. The mRNA expression levels of caspase-12, BIP and XBP-1 in the cells were detected using qRT-PCR, and the protein expressions of caspase-12, BIP, P- JNK, JNK and XBP-1 were examined using Western blotting. The effect of pretreatment with 4-PBA on cell apoptosis following heat stress was analyzed with Western blotting. Results SH-SY5Y cells showed obvious cell shrinkage immediately after the exposure to heat stress, followed then by gradual cell stretching over time. The cell viability decreased significantly after heat stress (P=0.001), and the intracellular Ca2+ level increased significantly at 0 h and gradually recovered the normal level at 3 and 6 h. Heat stress induced significant increase in the protein expression of cleaved caspase-3 and time-dependent increase of caspase-12 (P=0.002) and BIP (P=0.008) expression at both the protein and mRNA levels. The expression of P-JNK/JNK protein increased significantly at 0 h (P=0.003) followed by gradual decrease; the expression levels of XBP-1 protein and mRNA gradually decreased after heat stress (P=0.005, P=0.002). Pretreatment with 4-PBA significantly reduced the expression level of cleaved caspase-3 in SH-SY5Y cells following heat stress. Conclusion Heat stress induces apoptosis of SH- SY5Y cells by triggering endoplasmic reticulum stress and the imbalance of intracellular calcium ion homeostasis.