高效液相色谱法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法（HPLC）测定方法。方法色谱柱为Hypersil BDS C18（250mm×4.6mm,5μm）柱;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇（87∶13）,流速1ml/min;紫外检测波长236nm;以甲硝唑为内标,采用乙腈和硫酸锌沉淀蛋白后直接进样。结果万古霉素、去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,万古霉素回归方程为Y=0.0873X-0.0061,r=0.9999;去甲万古霉素回归方程为Y=0.1000X-0.0004,r=0.9997;线性范围1.0～50.0mg/L。日内相对标准编差（RSD）小于4.8%,日间RSD小于6.6%;万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为102.41%,100.44%,104.69%,平均提取回收率分别为87.54%,89.86%,88.13%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为99.46%,98.88%,99.47%,平均提取回收率分别为78.13%,77.41%,76.45%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定及相关科研的应用。     

决银颗粒中绿原酸和丹皮酚的含量测定

目的 建立高效液相色谱法测定决银颗粒中绿原酸和丹皮酚含量的方法.方法 采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为20℃,检测波长为327 nm,以外标法测定决银颗粒中绿原酸的含量;采用ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(55∶45)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为20℃,检测波长为274 nm,以外标法测定决银颗粒中丹皮酚的含量.结果 绿原酸在0.0177～4.54 μg的范围内线性关系良好(r=0.9990),平均回收率为98.92％(RSD=1.25％);丹皮酚在0.0461～4.61 μg之间的线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为101.98％(RSD=1.32％).结论 该方法简便、可靠,可用于决银颗粒的质量控制.     

HPLC法测定复方阿司匹林双层片的含量

目的 建立以高效液相色谱法测定复方阿司匹林双层片中的对乙酰氨基酚、咖啡因和阿司匹林含量的方法.方法 色谱柱为Agilent ZORBAX SB C18柱(150 mm ×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(用冰醋酸调节pH值至3.0)(15:85);流速为1.0 ml/min;柱温为40℃;检测波长为280 nm;进样量为20μl.结果 对乙酰氨基酚、咖啡因、阿司匹林的线性范围分别为9.976～498.8 μg/ml(r=1.000 0)、2.632～131.6μg/ml(r=1.000 0)、18.36-918μg/ml(r=1.000 0);平均回收率分别为99.6%(RSD=0.32%)、99.7%(RSD=0.26%)、99.3%(RSD=0.27%).结论 本方法简单、快速、准确,可用于复方阿司匹林双层片的含量测定.     

HPLC法测定复方甘草片中甘草酸两种差向异构体的含量

目的 建立测定复方甘草片中18α-甘草酸和18β-甘草酸含量的方法.方法 采用反相高效液相色谱法进行测定,色谱柱为Diamonsil C18(4.6mm×250mm,3μm);流动相为甲醇-1％冰醋酸(56∶44);流速为1.0ml/min;检测波长为250nm,温度为50℃.结果 采用反相高效液相色谱法测定18α-甘草酸和18β-甘草酸线性范围分别为3.6～39 μg/ml (r=0.999 2)和1.8～39 μg/ml (r=0.999 6),表明其线性关系良好;平均回收率分别为98.93％ (RSD 2.36％)和100.02％ (RSD 2.04％).结论 采用反相高效液相色谱法测定复方甘草片中18α-甘草酸和18β-甘草酸的含量,该方法简便、快速、灵敏、准确、具有良好的重复性和回收率,可作为该制剂的质量控制方法.     

HPLC法测定万古霉素和去甲万古霉素血清药物浓度

目的建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素的HPLC测定方法 ,用于万古霉素和去甲万古霉素血药浓度临床监测。方法色谱柱为Shim-pack（150×4.6 mm,5μm）,流动相为甲醇∶磷酸二氢钾缓冲液（pH=3.2）=19∶81,检测波长为236 nm,流速1 ml/min,柱温为35℃,万古霉素和去甲万古霉素互为内标。结果万古霉素和去甲万古霉素的保留时间分别为4.835 min和4.020 min;标准曲线回归方程分别为Y=32.16624X-2.117683,r=0.9997（n=3）,Y=51.53402X-2.958621,r=0.9992（n=3）;线性范围均为2.5~100μg/ml;方法回收率〉95%,绝对回收率〉80%,日内和日间RSD〈6.2%。结论本测定方法快速、准确、简便,适用于万古霉素和去甲万古霉素的临床常规血药浓度的监测。     

高效液相色谱法同时测定血清中硝西泮、氯硝西泮的探讨

目的:建立一种同时测定血清中硝西泮与氯硝西泮的方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱条件: ZORBAX 300SB-C8柱,柱温25℃,流动相:甲醇-水-乙腈=12∶68∶20,流速:1ml/min,检测波长:254nm;内标:150mg/L氢化可的松溶液.结果:两药在5～200μg/L的浓度范围内,药物-内标峰面积比(Y)与浓度(X)呈线性关系,最低检出浓度均为1μg/L;日内精密度分别为:硝西泮RSD=2.7%,氯硝西泮RSD=2.5%;硝西泮平均回收率为94.8%～104.0%,RSD为0.9%～3.2%;氯硝西泮平均回收率为96.3%～105.0%,RSD为1.2%～3.7%.结论:本方法快速、准确,适合对血清中两药的定性、定量分析.     

HPLC法同时测定承德产山楂叶4种成分的含量

目的：：建立高效液相色谱法同时测定承德产山楂叶中牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷和槲皮素含量的方法。方法：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为0.5%甲酸水-乙腈-甲醇-四氢呋喃溶液,梯度洗脱;流速1.0ml/min;检测波长370nm;柱温30℃。结果：牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、金丝桃苷和槲皮素的线性范围分别为9.38-300μg/ml、15.9-510μg/ml、4.51-144μg/ml、0.28-9.0μg/ml;平均加样回收率分别为100.2%(RSD=1.8%)、99.6%(RSD=1.5%)、99.4%(RSD=2.0%)、100.8%(RSD=1.5%)。结论：含量测定结果显示不同产地山楂叶中四种黄酮类成分含量的差异较大(RSD为9.98-31.39%）。     

银黄注射液质量标准的改进

目的:完善银黄注射液的质量标准.方法:采用高效液相色谱法同时测定绿原酸和黄芩苷的含量,色谱柱为Agilent-C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(30∶60);检测波长:绿原酸为327 am,黄芩苷为276 nm;流速1.0 ml/min;进样量20μl;柱温30℃.结果:绿原酸在0.01083～0.10830 mg/ml范围内线性关系良好(r=0.99944),平均回收率为100.24%,RSD为1.54%;黄芩苷在0.01515～0.15150 mg/ml范围内线性关系良好(r=0.99999),平均回收率为100.48%,RSD为0.79%.结论:本方法简便、快捷、结果准确,可用于银黄注射液的质量控制.     

离子对HPLC测定牙周康胶囊中甲硝唑和芬布芬含量

目的:建立同时测定牙周康胶囊中甲硝唑和芬布芬含量的离子对HPLC方法。方法:采用依利特Hypersil ODS(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以0.02mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇(80∶20,含0.01mol/L庚烷磺酸钠),用磷酸调pH至3.5为流动相,检测波长285nm,采用峰面积外标法。结果:甲硝唑和芬布芬线性范围分别为21～100μg/ml(r=0.9999)和16～79μg/ml(r=0.9999);平均回收率分别为100.2%(RSD=0.93%)和100.4%(RSD=0.44%)。结论:采用离子对HPLC法测定牙周康胶囊中甲硝唑和芬布芬含量,方法准确,操作简便,回收率高。     

HPLC法间接测定肿瘤患者外周血DPD的活性

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)间接测定肿瘤患者外周血二氢尿嘧啶脱氢酶(DPD)活性的方法.方法 采用HPLC法测定肿瘤患者血浆中内源性物质二氢尿嘧啶(H2U)和尿嘧啶(U)的比值,间接估算DPD的活性.色谱柱:Xterra RPC18 (250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钠(pH4.0),比例为5∶95;流速为1.0 mL/min,H2U和U检测波长分别为204 nm、260 nm.结果 H2U线性范围为62.5 ～2 000μg/L,线性方程为:Y=7.48×10 -4X+ 1.24×10-1,r=0.999 7(n=6),批内RSD小于7.7％,批间RSD小于13.8％,方法学回收率为99.63％ ～ 103.02％;U线性范围为15.625 - 500 μg/L,线性方程为:Y=3.42×10-3X+2.58×10-2,r=0.999 3(n=6),批内RSD小于8.3％,批间RSD小于13.4％,方法学回收率为98.38％～109.08％.结论 本方法可用于肿瘤患者外周血DPD活性的常规监测.     

高效液相色谱法同时测定黄龙胶囊中4种成分的含量

目的建立同时测定黄龙胶囊中4种蒽醌成分含量的方法,提高已有标准。方法采用Aglient XDBC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.05%磷酸(86:14)为流动相,流速:1.0 ml/min,柱温:35℃,检测波长:254 nm。结果芦荟大黄素在16.28～162.8μg/ml(r=0.9994),大黄酸在10.25～102.5μg/ml(r=0.9997),大黄素在10.89～108.9μg/ml(r=0.9996),大黄酚在14.95～149.5μg/ml(r=0.9999)线性良好;平均回收率分别为98.9%(RSD=0.67%)、99.3%(RSD=1.56%)、101.5%(RSD=2.53%)、100.9%(RSD=0.40%)。结论该方法简便、可靠、准确,可用于黄龙胶囊的质量控制。     

人血清中万古霉素浓度的改良监测方法

目的：优化HPLC测定人血清中万古霉素浓度的方法.方法：在不同流动相配比、沉淀剂及柱温条件下,高效液相色谱法测定血万古霉素浓度,确定最佳的色谱条件和操作方法.结果：在色谱条件为色谱柱C18（250.0 mm×4.6 mm,5μm）、流动相磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.2）-乙腈（90：10,v/v）、流速1.0 ml/min、检测波长236 nm、柱温35℃的情况下,万古霉素浓度在4.47～60.83 mg/L范围内线性关系良好（r=0.9 943,n=5）,回收率在85％～115％范围内;日内、日间RSD＜15％,在定量下限附近RSD＜20％.结论：优化后,操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度测定.     

RP-HPLC法测定不同产地鸡骨草中齐墩果酸与熊果酸的含量

目的 建立同时测定鸡骨草中齐墩果酸和熊果酸含量的高效液相色谱方法 ,并对不同产地药材中含量进行了测定.方法 采用Hyporsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以0.03 mol/L磷酸二氢钾和磷酸的缓冲溶液(pH=3.0)-甲醇(12∶ 88)为流动相,流速1.0 ml/min;检测波长210 nm.结果 齐墩果酸和熊果酸分别在0.253-2.53 μg和0.68-6.8 μg范围内线性关系良好,r分别为0.999 8和0.999 6,平均回收率分别为97.4%(RSD=2.72%)和98.8%(RSD=2.97%).结论 该方法 简便快速,结果 准确可靠,可用于鸡骨草的质量控制.     

HPLC法测定桑叶中芦丁、绿原酸和槲皮素

目的 建立同时测定桑叶药材中芦丁、绿原酸和槲皮素的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)柱;流动相为乙腈:甲醇:0.01 mol/L醋酸铵液(100 ml中含0.2 ml三乙胺,用冰醋酸调pH至3.50±0.05);流速1.0 ml/min;柱温为25 ℃;检测波长为350 nm.结果 芦丁线性范围为0.196~1.960 μg,r=0.9998,样品的平均加样回收率为97.0%,RSD 2.69%;绿原酸线性范围为0.158~1.580 μg,r=0.9995,样品的平均加样回收率为96.9%,RSD 2.10%;槲皮素线性范围为0.0848~0.848 μg,r=0.9992,样品的平均加样回收率为96.2%,RSD 2.90%.结论 该法简便,准确,可作为桑叶中芦丁、绿原酸、槲皮素的含量测定.     

反相高效液相色谱法测定兔房水中万古霉素含量

目的:应用反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术,建立定量检测兔房水万古霉素的方法.方法:房水样品中加入适量10%硫酸锌,高速离心,蛋白质沉淀后进行RP-HPLC检测.检测条件:分析柱为C8柱;流动相为甲醇(A)-醋酸(B),梯度洗脱.兔眼结膜囊内滴入纳米-万古霉素滴眼液后于120 min收集房水样本检测万古霉素浓度.结果:房水中药物峰与杂质峰分离良好,在0.5～20.0μg/ml范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系.1、10、18 μg/ml 3种浓度的平均回收率为(98.670±0.321)%,日内和日间RSD分别为(3.40±1.30)%,(3.80±2.20)%.兔眼房水中万古霉素药物浓度在滴入纳米-万古霉素滴眼液后120 min为:0.83±0.05μg/ml.结论:建立了简便、敏感的检测房水中万古霉素的RP-HPLC方法,可用于眼内万古霉素药代动力学研究.     

RP-HPLC法测定小鼠血清及脏器中白藜芦醇浓度

目的 建立可快速测定小鼠血清及部分脏器匀浆中白藜芦醇浓度的RP-HPLC法.方法 取血清或组织匀浆液0.1 ml,加入1.0 ml乙醚提取两次,每次振荡,离心(6 400 r/min,10 min),取有机层在40 ℃水浴中氮气流吹干,残渣用100 μl甲醇混悬溶解,取上清液20 μl进样.选用分析柱:Kromasil C18(150 mm×416 mm,5 μm);流动相:甲醇:水(48: 52);流速:1 ml/min;柱温:室温;柱压:12 kPa;检测波长:303 nm;进样体积:20 μl.结果 各工作曲线线性范围为0.25～25 μg/ml,最低检测浓度为100 ng/ml(S/N≥3).各样品平均绝对回收率大于88%,方法回收率在96%～100%之间,日内和日间精密度的RSD均小于10%.结论 此方法经济、可靠、简单、快速,可用于白藜芦醇血药浓度分析及动物体内分布研究.     

高效液相色谱法测定银杏磷脂胶囊中总黄酮醇苷的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定银杏磷脂胶囊中总黄酮醇苷的含量的方法。方法以Hypersil C18(4.6mm×200mm,5um)为色谱柱;以甲醇-0.4%磷酸溶液(50:50)为流动相;检测波长:360nm;流速:1.0ml/min;结果总黄酮醇苷(槲皮素、山奈素和异鼠李素)的线性范围分别为7.53-120.5lg.ml-1(r= 0.9998)、7.46-119.36μg.ml~1(r=0.9995)、5.05-80.77μg.ml~(-1)(r=0.9996)。平均回收率分别为101.5%,RSD为1.4%。结论该方法快速、准确、重现性好,可作为银杏磷脂胶囊中总黄酮醇苷的含量的方法。     

散风解表颗粒剂质量控制方法研究

目的:拟建立散风解表颗粒质量控制方法.方法:采用薄层色谱法对赤芍和金银花进行定性;用高效液相色谱法对芍药苷和绿原酸进行含量测定.结果:用薄层色谱法对赤芍进行鉴别,展开剂为三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶18∶10),以0.5％香草醛硫酸-乙醇溶液(1∶6)为显色剂,加热至斑点清晰;金银花的展开剂为乙酸丁酯-甲酸-水(7∶2.5∶2.5),365 nm紫外灯下观察.芍药苷的色谱条件为Kromasil C18(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(18∶82);流速:0.8 mL/min;检测波长:230 nm;柱温:室温;进样量:20 μL.金银花的色谱条件为Kromasil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(25∶75∶1∶0.1),流速:0.8 mL/min,λ=328 nm,柱温:室温.芍药苷在30～90μg/mL范围内呈线性关系,80％、100％、120％回收率分别为103.80％、102.18％、99.95％,RSD分别为0.44％、1.04％和1.34％;绿原酸在5～25 μg/mL的浓度范围内与峰面积线性良好,r=0.999 7 (n=3),80％、100％、120％的加样回收方法中,平均回收率分别为101.29％、99.14％和97.28％,RSD分别为1.62％、0.30％和1.18％(n=3).结论:所建立的方法简便、可靠、快捷,可作为该制剂的质量控制方法.     

双波长高效液相法同时测定双香排石颗粒中的马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B

目的 建立高效液相双波长切换法同时测定双香排石颗粒中马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B的含量.方法 采用Alltima C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-甲醇(1∶3)(A)-0.1％磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱;柱温为35℃;流速为1.0 ml/min;进样量为20 μl;马钱子苷、断氧化马钱子苷和当药苷检测波长为240 nm,迷迭香酸和木通苯乙醇苷B检测波长为330 nm.结果 马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B在给定浓度范围内线性范围分别为5.91～118.20 μg/ml(r=0.9995)、4.10 ～ 82.00 μg/ml (r=0.9991)、8.13～162.60tμg/ml (r=0.9993)、12.57 ～ 251.40 μg/ml (r=0.9998)和4.95 ～ 99.00 μg/ml(r=0.9997),线性关系良好;平均加样回收率(n=6)和RSD值分别为96.88％(1.31％)、99.09％(1.47％)、98.29％(1.59％)、98.82％(1.42％)和97.51％ (0.86％).结论 本文建立的双波长HPLC方法同时测定双香排石颗粒中马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B含量.方法灵敏度高、简便、准确、重现性好,为评价双香排石颗粒质量控制提供可靠方法.     

茶碱血清浓度测定(HPLC)法的改进

目的 :改进血清中茶碱浓度的 HPL C测定方法。方法 :血清经处理后 ,采用日本岛津 Shim- pack VP- ODS(2 5 0 L×4 .6 )柱 ,国产 C1 8保护柱 ,流动相为甲醇 -水 -三乙胺 -冰醋酸 (2 0∶ 6 0∶ 0 .4∶ 0 .3) ,检测波长 2 5 4 nm。结果 :茶碱浓度在3.4～ 4 0 .8μg/ ml呈现良好的线性关系 ;高中低 3种浓度的日内 RSD(n=5 )分别为 2 .35 % ,1 .4 1 % ,2 .6 1 % ,日间 RSD(n=5 )分别为 3.97% ,1 .87% ,2 .2 4 %。萃取平均回收率为 74 .6 4 % ,方法回收率平均为 99.2 6 %。结论 :本方法灵敏度高 ,操作简便易行 ,结果准确可靠 ,能满足茶碱血药浓度的测定