99mTc—HSA（FSA）药盒的制备研究

目的 研制一种快速、简便、可靠的~99nzTc标记的心血池显像剂.方法 用二氧硫脲(FSA)作人血清白蛋白(HSA)还原剂,用放射性直接标记方法制备~99nzTc标记一步法药盒,测定该药盒及其标记产物的~99nzTc-HSA的理化性质、还原蛋白巯基(-SH)数目及生物性能.结果 对还原后的HSA进行了~99nzTc的标记,放化纯度大于95%,标记后室温放置24小时,放化纯度仍大于95%,体外稳定性很好,小鼠体内分布血中浓度高且较稳定.结论 采用该方法制备的药盒明显提高了~99nzTc-HSA在小鼠体内血中浓度,与~99nzTc-二亚乙基三胺五乙酸一人血清白蛋白(~99nzTc-DTPA-HSA)小鼠体内分布数据二者无显著差异,宜于临床进一步研究.     

~(99)mTc标记抗CEA单克隆抗体肠癌放射免疫断层显像的临床研究

本文报告~(99m)Tc标记抗CEA单克隆抗体对12例大肠癌患者作放射免疫显像的临床结果。我们对一种新方法(Schwarz法)进行改良,制备出~(99m)Tc标记抗体.经Seph-adex G25凝胶柱层析法及纸层析法检测标记率为90％～95％,应用前不需进一步纯化。在注射标记物后6h～20h,用SPECT进行     

急性缺氧大鼠的心输出量和局部血流量

以~(99m)Tc标记蟾蜍红细胞(~(99m)Tc-RBC)作为生物微球,用参考血样本方法(RSM)测定急性缺氧大鼠的心输出量(CO)和局部血流量(LBF)。大鼠在麻醉条件下进行人工通气,用10%O~2—90%N_2混合气体通气20分钟造成急性缺氧,左心室内注入~(99m)Tc-RBC 4～6万,从股动脉收集参考血样本(RS)测定CO和LBF,实验结果表明,在人工通气条件下,急性缺氧使大鼠的心率(HR)减慢、CO降低,和以冠状血流和脑血流增加及内脏血流减少为主的血流重新分配。     

新型~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7靶向肿瘤血管Anxa1分子探针的制备及SPECT显像

目的制备针对肿瘤血管表面受体Annexin A1(Anxa1)分子探针~(99m)Tc-二乙三胺五乙酸(DTPA)-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-精氨酸-天冬氨酸-天冬酰胺(GGGRDN)-异亮氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-亮氨酸-色氨酸-谷氨酰胺-精氨酸(IFLLWQR,IF7),进行体外肿瘤细胞(人脑星形胶质细胞瘤U87细胞)实验;探讨~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7在荷瘤小鼠体内的生物学分布规律,并利用单光子发射计算机体层摄像术(SPECT)进行显像研究。方法将100μg DTPA-GGGRDN-IF7溶于10μL二甲基亚砜(DMSO)中,充入氮气保护。加入10μL 1 mg/mL氯化亚锡(SnCl2)溶液(pH 4.0),再加入约111 MBq(3 mCi)Na~(99m)TcO_4,37℃水浴反应30 min,经C_(18)柱淋洗后制备~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7。取样注入分析型高效液相色谱(HPLC)仪分析~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7的放射化学纯度及体外血清稳定性。将U87细胞与~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7共同孵育后,测定放射性计数并计算摄取率。取30只4～5周龄18～20 g荷瘤裸鼠,建立U87荷瘤裸鼠模型,进行~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7的体内分布实验及SPECT显像。结果 ~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7标记产率大于95%,放射化学纯度大于95%。在大鼠血清中37℃保温2 h后性状稳定,放射化学纯度大于92.3%。U87细胞在体外对~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7摄取在60 min时达峰值(6.85%±0.97%),过量的GGGRDN-IF7可以明显降低细胞的摄取。体内分布实验结果显示,药物均在血浆清除较快,肝肾摄取高,主要从肝肾排泄。SPECT显像结果表明,肿瘤部位呈明显放射性浓聚态,注射2 h后肿瘤对~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7摄取值为(3.56±0.44)%ID/g。结论 ~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7合成简便,放射化学纯度高,易于推广;U87细胞对~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7具有较强亲和力;SPECT显像表明肿瘤明显浓聚~(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7,体内生物分布理想,靶向性强,有望用于肿瘤显像。     

^99mTc—MIBI,^99mTc—MDP肿瘤阳性显像

(~99m)Tc-MIBI、(~99m)Tc-MDP由于细胞增殖代谢及血流供应的改变等多种因素的作用而浓集于肿瘤病灶.作为肿瘤阳性显像剂,可用于乳腺癌、骨肿瘤、肺癌、颅内肿瘤、甲状腺癌、鼻咽癌的诊断,具有较好的临床实用价值.     

~(99m)锝-亚甲基二磷酸盐骨定量测定在骨质疏松症中的研究进展

骨质疏松症(OP)发病率逐年增加,骨质疏松性骨折引发的高致残率及高致死率已成为我国乃至全球面临的重大医疗卫生问题。放射性核素~(99m)锝-亚甲基二磷酸盐(~(99m)Tc-MDP)骨定量测定能提供全身或局部骨骼骨代谢或转化的信息。本文就放射性核素~(99m)Tc-MDP骨定量测定方法进行简述,以期能为临床诊疗提供参考。     

^99mTc—NOEt心肌显像的最佳显像时间的研究

目的:研究~(99m)Tc-NOEt(NOEt:N—乙氧基—N—乙基氨荒酸钠)的最佳负荷显像时间及再分布显像时间,方法:32例CAD患者及8例正常对照者进行~(99m)Tc-NOEt动态心肌断层SPECT显像研究,分析心肌显像质量及心肌显像结果 结果:~(99m)Tc-NOEt心肌显像质量随时间的递增而明显改善,但再分布显像时间过长反而造成部分心肌显像质量下降;~(99m)Tc-NOEt再分布现象可能发生较早.结论:建议负荷心肌显像时间直在15分钟进行,再分布显像在2小时进行,最好不超过4小时.     

肺亲肿瘤显像鉴别良恶性病变的观察

71例诊断为肺部肿瘤的患者,进行了~(99m)Tc-MIBI~(99m),Tc-Glu~(99m),Tc-HMPAO,肺亲肿瘤显像。检出率各为77.8％,50％,80％;准确率各为90.8％,58.3％,和80％;特异性各为70％,14.3％,0％。SPECT显像对肺小肿瘤检出率明显高于平面显像,~(99m)Tc-MIBI检出最小肿物为1.5cm。纵隔淋巴转移,锁骨上淋巴转移部位可清楚显示,注射后2小时延迟SPECT显像比早期SPECT显像更易揭示肺恶性病变,~(99m)Tc-MIBI对5例肺癌合并陈旧结核病人的病灶能清晰显示而结核病灶未见显影。结果证明在肺部疾病中~(99m)Tc-MIBI是有亲肺癌特征,并有可能用于肺良恶性病变的鉴别诊断。     

血管紧张素在培养乳鼠心肌细胞肥大发生中的作用

本实验用~3H-TdR和~(14)C-uR双标记掺入和单个心肌细胞(MC)平均蛋白质含量测定,以及图像分析系统直接测定单个MC体积等方法,就血管紧张素Ⅰ、Ⅱ(AⅠ、AⅡ)对培养乳鼠MC的DNA、RNA和蛋白质合成的影响及其在心肌肥大发生中的作用进行了初步研究。结果表明:AⅠ(3×10~(-9)M)和AⅡ(5×10~(-10)M)     

肝受体显像剂~(99m)Tc-NGA的制备和动物实验初步报告

肝功能受损时,血浆中去唾液酸糖蛋白含量显著增加,肝结合蛋白(HBP)降低,肝血流量减少。为了研究肝功能受损时HBP的变化及与肝病的相互关系,我们制备了放射性核素~(99m)Tc标记的能同HBP结合的配     

异硫氰酸荧光黄直接标记小鼠腹水McAb的新方法

<正> 高质量FITC标记抗体的制备是免疫荧光试验的关键之一,但其制备过程中受到抗体纯度及其活性、标记试剂及标记程序,特别是荧光素与蛋白质的比例等影响。Goding氏报道了一种简便的改良标记程序,用于标记提纯的兔抗小鼠IgM免疫球蛋白,效果良好。鉴于单克隆抗体(McAb)的匀质性、其理化特性不及常规免疫血清稳定,往往在提纯过程中抗体变性较大。作者将 Goling氏方法进一步改进后用于将FITC直接标记小鼠腹McAb获得了较为满意的结果,现报告如下。     

SHNH法和NHS-MAG3法标记的99mTc-寡聚核苷酸的比较

比较研究采用联肼尼克酰胺(Hydrazino Nicotinamide Derivative, SHNH)法和N-羟基琥珀酰胺基S-乙酰巯基乙酰三氨基乙酸(N-hydroxysuccinimidyl S-acetylmercaptoacetyltriglycline,NHS-MAG3)法以99mTc标记反义寡聚核苷酸(Antisense Oligonucleotide,ASON)的标记物的放射化学和生物学特性.合成SHNH和NHS-MAG3后,分别以SHNH和NHS-MAG3为双功能络(螯)合剂,用99mTc标记ASON;比较标记物99mTc-SHNH-ASON和99mTc-MAG3-ASON的体内外稳定性、兔血浆蛋白结合、正常BALB/C小鼠体内分布及结肠腺癌HT29细胞摄取的情况.结果显示,采用NHS-MAG3法标记的标记物99mTc-MAG3-ASON的标记率和稳定性明显高于SHNH法标记的标记物99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05)、血浆蛋白结合率显著低于99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05);99mTc-MAG3-ASON在血液、心脏、胃、肠的分布显著低于99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05),而在肝、脾的分布略低于99mTc-SHNH-ASON(P＞0.05),但在肾的分布显著高于99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05);99mTc-MAG3-ASON的HT29细胞摄取率显著高于99mTc-SHNH-ASON(P＜0.05).因此,采用NHS-MAG3法的标记物99mTc-MAG3-ASON的放射化学和生物学特性明显优于SHNH法的标记物99mTc-SHNH-ASON.     

99Tcm-Herceptin的放射性标记与显像研究

目的探索HER2阳性胃癌显像剂99Tcm-Herceptin的标记方法,并进行荷瘤动物模型的显像研究。方法分别采用2-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-ME)法和2-亚氨基噻吩(2-iminothiolane,2-IT)法标记赫赛汀(Herceptin)。评价不同标记方法对抗体活性和标记率的影响。通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)测定标记抗体99Tcm-2-IT-Herceptin的体外稳定性。建立HER2阳性胃癌动物模型,并进行显像研究。结果 2-IT法标记Herceptin具有较高的标记率(>95%),且不会破坏抗体的完整性。标记抗体具有较高的体外稳定性。荷瘤动物模型注射99Tcm-2-IT-Herceptin 24h后,可以得到清晰的肿瘤显像结果。结论 99Tcm-2-IT-Herceptin具有较高的标记效率和体外稳定性,对所采用的HER2阳性动物模型具有靶向性,可能进一步开发成为新型HER2阳性胃癌显像剂。     

~3H、~(14)C-TdR双标记法的改进

测定细胞增殖周期是细胞生物学工作内容之一,对肿瘤基础理论及治疗尤具有重要意义。测定细胞增殖周期的方法很多,每种方法均有其一定的优点与局限性。一般认为~3H、~(14)C-TdR双标记法对于测定细胞T_m及T_a是使用材料(动物或细胞)少、方法较简便、效果较稳定可靠的方法。 ~3H、~(14)C-TdR双标记法的基本操作过程是:在取材之前一定时间,先作~3H-TdR标记,间隔一定时间后,再作~(14)C-TdR标记。取材制片后,进行涂核乳胶、曝射(曝光)、显影、定影;然后     

~(99m)Tc-MIBI双时相联合延迟断层显像在原发性甲状旁腺功能亢进术前定位诊断中的价值

目的探讨~(99m)锝-甲氧基异丁基异腈(~(99m) Tc-MIBI)双时相联合延迟断层显像在原发性甲状旁腺功能亢进(PHPT)术前定位诊断价值。方法选择经病理确诊为PHPT患者62例,其中男性20例,女性42例;年龄21~68岁,平均年龄38.5岁。静脉注射~(99m) Tc-MIBI 370 MBq后行双时相显像,然后再行颈胸部断层显像;同期行颈部超声和计算机断层扫描(CT),所有影像诊断均与术后病理诊断进行比较,对3种检查结果进行分析。结果 ~(99m) Tc-MIBI双时相联合延迟断层显像诊断PHPT 58例,病灶检出率93.55%;其中1例甲状旁腺瘤内伴有囊性变和3例甲状旁腺增生~(99m) Tc-MIBI双时相联合延迟断层显像未被检出。颈部超声诊断PHPT 40例,病灶检出率为64.52%(40/62)。CT诊断PHPT 42例,病灶检出率为67.74%。超声和CT对3例异位甲状旁腺病灶未检出。~(99m) Tc-MIBI双时相联合延迟断层显像对病灶检出率高于超声和CT,与超声、CT相比,差异有统计学意义(χ~2=15.77、13.23,P 0.05)。超声对病灶检出率与CT比较,差异无统计学意义(χ~2=0.144,P 0.05)。结论 ~(99m) Tc-MIBI双时相联合延迟断层显像在术前定位诊断中具有较高的临床价值。     

应用改良~(125)Ⅰ—UdR释放试验测定杀伤T细胞的细胞毒作用

自Brunner等介绍以~(51)Cr标记靶细胞的同位素释放法测定杀伤T细胞(CTL)的细胞毒作用以来,~(51)Cr释放法已成为测定CTL杀伤能力的常规。但~(51)Cr标记靶细胞的自发释放(SR)率高(1～2%/小时),不适用于较长培育时间的细胞毒试验。近年来~(111)In-oxine标记靶细胞被介绍来代替~(51)Cr标记,其优点为SR低(0.25     

以间接碘标记法制备瘦素标记抗原的研究

目的:以间接碘标记法制备瘦素(leptin)的标记抗原(125I-leptin),建立瘦素的放射免疫分析(RIA)并用于临床。方法:先以氯胺T(ch-T)法标记对羟基苯丙酸琥珀酰亚胺脂(Bolton-hunter试剂,BH试剂)制备125I-BH,然后于冰浴中与leptin进行联结制备125I-leptin。结果:125I-leptin的放射性比活度为1 43MBq/μg,125I的总标记率为37 8%,用以建立的RIA各项技术指标均满足临床要求。结论:由于以间接法制备125I-leptin,减少了leptin与氧化剂、还原剂和放射性碘的接触,避免了对其抗原性的损伤,从而制备出具较高标记率和较高放射性比活度的125I-leptin。     

应用国产~(125)I标记胰高糖素的方法探讨

随着标记工作的广泛开展,尤其是对蛋白质及多肽激素的标记,实践中几乎绝大部分均应用放射性核素~(125)Ⅰ与~(131)Ⅰ。由于这些放射性核素作为标记有二个优点:其一标记具有较高的比度;其二普通放射性实验室均能采用该种简单、易行的标记方法。近年来应用核素~(125)Ⅰ标记的化合物不仅在品种上,而且在数量上越来越多。~(125)Ⅰ衰变过程中放出的γ射线可以用一般井型闪烁仪测量,其半衰期为60天,同位素丰度接近100％,而且标记一次制得的产品使用时间较长。然而采用~(125)Ⅰ标记常会遇到一个棘手的问题——利用国产~(125)Ⅰ源取得稳定的高标记率产品比较困难。我们从1979年5月着手对胰高糖素采用国产~(125)Ⅰ标记的反应条件做了一点研究,初步取得了较好的结果。现总结报道如下。     

制备脂质体包裹的99m锝标记c-myc mRNA反义寡聚核苷酸的研究

探讨脂质体包裹的 99m-锝标记 c- myc m RNA反义寡聚核苷酸的制备方法 ,为反义显像和反义治疗的实验研究奠定基础。合成 15 bp的反义寡聚核苷酸 (DNA)和双功能螯合剂 -联肼尼克酰胺衍生物 ,DNA与双功能螯合剂偶联后 ,用 99m锝标记 ,然后用 C1 8Sep- Pak反相柱进行纯化 ,根据纯化结果 ,绘制淋洗曲线 ,计算标记率。再用阳离子脂质体对纯化产物进行包裹 ,获得脂质体包裹的 99m锝 - DNA。用纸层析测定脂质体包裹的 99m锝 - DNA的放射性化学纯度及与水、血清孵育后的稳定性。结果 ,不同放射性活度的 99m Tc O4 - 标记时的标记率为 :14 80 MBq时为 6 3.37%± 3.5 1% ,74 0 MBq时为 6 2 .5 2 %± 3.6 9% ,5 92 MBq时为 5 9.82 %± 5 .12 % ,经 χ2检验无显著性差异。脂质体包裹 99m Tc- DNA的放射化学纯度 =96 .4 7%± 3.0 1% ,与水、血清孵育后脱落的 99m Tc极少 ,可见 99m Tc- DNA的稳定性极好。由此可见 ,以脂质体作载体 ,联肼尼克酰胺衍生物作为双功能螯合剂 ,可制备脂质体包裹的 99m锝标记的单链寡聚核苷酸     

~(125)Ⅰ标记抗MIF单克隆抗体制备及其生物学活性的研究

目的:建立125Ⅰ标记抗巨噬细胞移动抑制因子(MIF)单克隆抗体(mAb)方法,探讨其在体内外生物学活性。方法:①利用Iodogen法,Na125Ⅰ标记Anti-mMIF mAb,用Sephadex G-25柱凝胶过滤层析法分离纯化,测定其标记率。纸层析法测定放射化学纯度和稳定性。②采用ELISA和改良MMI鉴定其免疫活性及生物学活性。③观察小鼠体内的生物学分布情况。结果:①标记的最佳条件为Iodogen 40~100μg、抗体20~50μg[Iodogen(m)∶抗体(m)=2∶1],加入Na125I15~30 MBq、室温反应10~15 min,标记率为(90.40±3.34)%,放射化学纯度为(97.60±1.14)%,比活度为12.2~26.0 MBq/μg;标记物4℃条件下放置3周后放射化学纯度仍为90.36%。②125Ⅰ-mMIF mAb能与抗原MIF特异性结合,较好地保持其免疫活性及生物学活性。③体内生物学分布,在肺、肝、脾、肾内具有较高的放射性计数。结论:Iodogen法获得高标记率和放射化学纯度的125Ⅰ-mMIF mAb,具有很好的体外稳定性,其在体内外保持较好的生物学活性。为进一步应用125I-mMIF mAb进行放射免疫显像和靶向治疗奠定了实验基础。