大肠癌ras癌基因、p53抑癌基因突变与临床研究

大肠癌是常见的恶性肿瘤之一 ,其发生发展是一个多基因多阶段的变化过程。其中癌基因突变激活及抑癌基因失活起重要作用。近年研究表明 ,Ｋ -ｒａｓ癌基因激活和 ｐ５３抑癌基因突变或缺失与大肠癌的发生及发展密切相关。本文以聚合酶链反应 -单链构象多态性 (ＰＣＲ -ＳＳＣＰ)分析法同时检测了大肠癌Ｋ -ｒａｓ、ｐ５３基因突变 ,旨在探讨两者间的相关性及其与大肠癌患者临床、病理特征的关系 ,从分子生物学水平探讨大肠癌的发病机制。１材料与方法５０例大肠癌患者的组织标本均为本院外科于大肠癌根治术中取材 ,同时以病变旁的正常大肠粘…     

大肠癌原发性耐药与p53、ras基因突变的关系

多药耐药基因ｍｄｒ1在正常大肠组织及其肿瘤中表达水平均较高 ,表现为天然性耐药 (ＭＤＲ)。然而大肠癌何以表现为天然性ＭＤＲ ?化疗药物通过何种机制致使ｍｄｒ1出现高表达 ?目前尚无定论。越来越多的分子生物学研究显示 ,肿瘤细胞对化疗应答的敏感性多取决于细胞的基因型 ,而非化疗制剂的基因毒性。通过基因型预测肿瘤化疗敏感性正被人们所认识。我们通过定量ＲＴ ＰＣＲ及ＰＣＲ ＳＳＣＰ技术 ,研究大肠癌ｍｄｒ1基因表达与ｒａｓ和ｐ5 3基因突变的关系 ,为大肠癌多药耐药的基因逆转提供理论依据。一、资料与方法标本取自我院 1998～ 1…     

甲状腺组织中H—ras基因突变及蛋白表达的预后价值

对５４例甲状腺癌标本分别用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测Ｈ－ｒａｓ基因第１２位密码子的突变及免疫组化法检测ｐ２１ｒａｓ蛋白，并用时序检验分析ｒａｓ基因害变和ｐ２１ｒａｓ蛋白表达与甲状腺癌的关系，结果发现，甲状腺癌中１８例有ｒａｓ基因突变和４９例有ｐ２１蛋蛋白过度表达。     

门静脉血K—ras,p53基因突变与大肠癌肝转移的关系

目的：探讨门静脉血Ｋ－ｒａｓ，ｐ５３基因突变与大肠癌肝转移的关系。     

肺癌组织中p53,K—ras,p53,p16基因的改变

目的 探讨ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ、ｐ１５、ｐ１６基因在肺癌组织中改变情况及多基因联合检测在肺癌诊断中的价值。方法 对５９例肺癌组织和１４例肺部良性组织,应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染法检测ｐ５３基因第５～８外显子突变情况;应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法对Ｋ－ｒａｓ基因突变进行检测;并应用ＰＣＲ法检测ｐ１５、ｐ１６基因纯合缺失情况。结果肺癌组织中ｐ５３、ｐ１５、ｐ１６基因改变频率分别为３７．３％、１１．９％、２３．     

鼻咽癌中p53例基因突变的研究

目的：探讨鼻咽癌中ｐ５３基因突变情况。方法：用非同闰素不对称ＰＣＲ－单链构象多态性技术（ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ），分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中Ｐ５３基因第５、６、７和８外显子（ｅｘｏｎ）的基因突变，并对其中ｅｘｏｎ８突变的ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１进行ＤＮＡ测序。结果：在２０例鼻咽癌活检组织中没有发现突变；但在鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２、ＳＵＮＥ－１和瘤株ＳＵＮＴ－１中存在第８外显子     

肺癌患者吸烟量与痰液细胞p53和Ki—ras基因突变的关系

目的　了解痰液细胞癌基因突变是否与肺癌患者的吸烟量有相关性。方法　将痰液 0 .5毫升加入痰处理液制备细胞沉淀液 ,酚氯仿提取DNA ;应用SSCP PCR银染和RFLP PCR方法对痰液中p5 3、K ras突变情况进行检测。统计肺癌患者的香烟消耗量 ,分析p5 3、K ras突变与吸烟量的关系。结果　在确诊的 110例肺癌中 ,存在p5 3或K ras基因突变者有 76例 ,突变率达 69.1% ,其中 16例为p5 3和K ras基因均有突变。全组中有 71例重度吸烟者吸烟指数 (≥ 40 0支·年 ) ,71例中 5 5例有p5 3或K ras基因突变 ,突变率达 77.5 % ,显著高于非吸烟组 (P <0 .0 0 1) ;p5 3和K ras突变患者的平均吸烟指数分别达到 861和 63 0支·年 ;而未突变的平均吸烟指数为 2 84和 5 5 4支·年 ,二者之间有显著性差异 ( χ2 =3 6.5 6,P =0 .0 0 2 ,双尾检验 )。结论　痰液细胞癌基因突变检测具有简便、实用、可行的特点 ,吸烟的肺癌患者中癌基因突变率显著高于非吸烟的肺癌患者 ,提示吸烟尤其是重度吸烟可能是支气管癌基因突变的主要原因之一 ,值得临床进一步开展深入的研究。     

甲状腺癌中H—ras基因12密码子突变及p21^ras蛋白表达的临床意义

甲状腺癌中Ｈｒａｓ基因１２密码子突变及ｐ２１ｒａｓ蛋白表达的临床意义李晓曦１陈国锐１赵国华２赵国强２吴惠茜２关键词甲状腺肿瘤基因ｒａｓｐ２１ｒａｓ蛋白中图号Ｒ７３６．１近年来的研究表明，ｒａｓ原癌基因突变激活是细胞转化的关键因素之一，与多种肿瘤的发...     

肝细胞癌p53基因突变初步研究

本文应用快速银染多了矣酶链反应单链构像多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）方法检测了３０例肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中ｐ５３基因变异情况。结果１３例癌组织中有异常电带，其中２闰于第５外显子，各有３例位于第６和第７外显子，位于第８显子有５例，ｐ５３基因变异的病例乙型肝炎表面抗原均阳性，实验结果表明：本技术能有效检测出基因突变；肝细胞癌中ｐ53基因突变率较高且有多个位点；肝细胞癌ｐ５３基因突变可能与乙型肝炎病毒感染有关     

肺癌患者癌组织和痰液细胞中p53和K-ras基因突变的研究

目的 检测肺癌组织和肺癌患者痰液脱落细胞中ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ基因突变情况,比较联合检测ｐ５３、Ｋ－ｒａｓ和单一检测ｐ５３或Ｋ－ｒａｓ基因在肺癌诊断中的价值。方法 应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染法检测了５９例肺癌组织、癌旁肺组织、１４全肺部良性病变肺组织及患者痰液脱落细胞中ｐ５３基因第５～８外显子、Ｋ－ｒａｓ基因第１外显子突变。结果 肺癌组织中ｐ５３基因突变率为３７．３％（２２／５９）,痰液脱落细胞为３     

鼻咽癌中p53基因突变的研究

目的：探讨鼻咽癌中ｐ５３基因突变情况。方法：用非同位素不对称ＰＣＲ－单链构象多态性技术（ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ），分析了鼻咽癌活检组织、细胞株和裸鼠移植瘤中ｐ５３基因第５、６、７和８外显子（ｅｘｏｎ）的基因突变，并对其中ｅｘｏｎ８突变的ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１进行ＤＮＡ测序。结果：在２０例鼻咽癌活检组织中没有发现突变；但在鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２、ＳＵＮＥ－１和瘤株ＳＵＮＴ－１中存在第８外显子突变，而ＨＫ１为第５外显子突变。ＤＮＡ测序发现ＳＵＮＥ－１和ＳＵＮＴ－１的突变点在ｅｘｏｎ８的密码子（ｃｏｄｏｎ）２８０上，由ＡＧＡ（精氨酸）→ＡＣＡ（苏氨酸）。结论：ｐ５３基因突变热点的ｅｘｏｎ５、６、７和８可能在鼻咽癌变过程中没有重要意义，而在裸鼠移植瘤和细胞株建立过程中起重要作用。ＥＢＶ由于和鼻咽癌的关系密切，在鼻咽癌中可能存在ＥＢＶ编码蛋白与ｐ５３结合或蛋白表达被ＥＢＶ抑制等其他途径使ｐ５３失活。     

肿瘤多药耐药与p53、ras基因异常表达的关系

肿瘤的多药耐药性（multidrug resistance,MDR）是目前抗肿瘤研究的热点,多种肿瘤的耐药细胞中有多药耐药基因（mdr-1）和（或）多药耐药相关蛋白基因（mrp）的表达增高[1～4],它们的过度表达除受化疗药物的诱导与激活外,还受到其他一些因子的调节。现已证实,乳腺癌、胰腺癌、大肠     

ki—ras和野生型p53 mRNA在人胚胎多种组织中表达的研究

目的 探讨ki-ras和p53基因在胚胎形成和发育过程中的作用。方法 采用RNA斑点杂交法研究ki-ras和p53基因各胚胎组织中的表达情况。结果 斑点杂交显示ki-ras和p53基因在人胚胎多种组织中均有表达，但表达水平各不一致。ki-ras基因在胚胎发育第4～5个月间为表达最低点，以后各组织中的表达随胚龄增加而上升；p53基因则在胚胎发育第4～5月间为表达最高点，以后随胚龄增加其表达水平下降。结论 提示ki-ras和p53基因在人胚胎的形成和发育过程中可能起着较为重要的作用。     

Ki—67,p53和c—erbB—2在涎腺肿瘤中的表达及其分析

目的 探讨Ｋｉ－６７、ｐ５３和ｃ－ｅｒｂＢ－２在涎腺肿瘤中的表达及意义。方法 应用免疫组织化学方法对３２例涎遥良、恶性肿瘤的Ｋｉ－６７、ｐ５３和ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白表达进行研究。结果 Ｋｉ－６７在腺肿瘤中的总阳性表达率为５７．２％,其中Ｗａｒｔｈｉｎ瘤力１１．２％,多形性腺瘤为８．３％,粘液表皮样癌为１８．３％,腺样囊性癌为１９．４％,涎腺良、恶性肿瘤的Ｋｉ－６７阳性表达率存在显著性差异（Ｐ〈     

妊娠滋养细胞疾病c—Ha—ras基因突变及ras p21蛋白表达的研究

目的：探讨ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变及ｐ２１蛋白表达与妊娠滋养细胞疾病（ＧＴＤ）发生发展的关系。寻找具有特异性的可预测ＰＴＤ的诊断标记。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法及ＳＰ免疫组化法,对９０例ＧＴＤ组织中ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因第１外显子点突变及其产物ｐ２１表达进行检测,以正常足月新鲜胎盘３０例为对照。结果：所有正常胎盘组织ｒａｓ突变及ｐ２１表达均为阴性。     

PCR-SSCP方法检测乳腺癌中p53基因突变

p53基因是发现较早且研究较多的抑癌基因,大量研究表明,p53基因突变与多种肿瘤的发生与发展密切相关,其突变位点主要集中于第5～8外显子.本实验采用PCR-SSCP的方法对58例乳腺癌及8例良性乳腺肿瘤组织进行了p53基因第5～8外显子的突变分析,以期对p53基因突变与乳腺癌的相关性作进一步探讨.     

p53基因突变在胃癌发生中的作用

胃癌的发生发展是多基因参与、多步骤进行的过程。而p53基因突变作为一种重要抑癌基因失活方式，在其中发挥了重要作用。现综述近年来在胃癌中发现的p53基因突变类型、方式、地区差异性及与多种因素之间的关系等方面研究进展。     

吸烟与肺癌p53基因突变相关性研究进展

从吸烟与肺癌的关系、肺癌p53基因突变、吸烟与肺癌p53基因突变的相关性研究等方面进行阐述，对吸烟患肺癌P53基因突变的频率和类型、吸烟与肺癌P53基因突变存在的量效关系、密切相关、相关、不确定和无关等内容进行了综述，以期对我国开展这些工作有所启示。     

肝细胞癌p53基因突变及其临床意义

抑癌基因p53具有广谱抑癌作用，该基因失活是细胞发生癌变的重要因素。p53基因失活的机制是多种的，其中突变是其失活的主要原因之一〔1〕。第7外显子是p53基因突变的热点区之一，在黄曲霉毒素高污染区的肝癌存在该外显子第249位密码子特异突变〔2〕。本实验应用PCR－SSCP同位素技术和PCR直接序列分析对我国重庆地区肝细胞癌p53基因第7外显子突变进行检测，并探讨其临床意义。1材料和方法1．1临床资料28例肝细胞癌均为我院肝胆外科住院病人并长期居住本地，男24例，女4例，年龄21～73岁，平均48岁。有肝炎、肝硬化史24例，长期饮酒史5例…