缺氧内皮细胞介导肺动脉平滑肌细胞血小板源性生长因子mRNA表达

目的探讨缺氧时肺动脉内皮细胞对肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦ自分泌的影响。方法实验分３组：无血清培养组、常氧性内皮细胞条件培养液组及缺氧性内皮细胞条件培养液组。应用原位杂交和图像分析技术检测猪肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ表达。结果无血清培养的肺动脉平滑肌细胞有ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ弱表达;内皮细胞条件培养液明显增加肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦＡ和ＰＤＧＦＢ链ｍＲＮＡ表达,两者分别为无血清培养组的１．８倍和１．７倍（Ｐ＜０．０１）,为常氧内皮细胞条件培养液培养组的１．４倍和１．５倍（Ｐ＜０．０１）。结论缺氧时肺动脉内皮细胞可以介导肺动脉平滑肌细胞ＰＤＧＦ的自分泌,可能在缺氧性肺动脉高压血管构形改建中具有重要作用     

缺氧对肺动脉内皮细胞PDGF基因及PDGF－B链蛋白表达的影响

应用核酸杂交和定量免疫细胞化学分析技术研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子ＰＤＧＦ基因及ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白表达的影响。结果表明，缺氧能明显增强肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ＿Ｂ链ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达水平无明显改变。免疫细胞化学定量分析也证实ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白染色比正常对照明显增强，与ＰＤＧＦ－Ｂ链基因表达的改变基本一致。提示缺氧可以刺激肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ的表达。ＰＤＦＧ在缺氧引起的肺动脉高压血管构形改建中可能具有重要作用。     

缺氧诱导大鼠肺动脉PDGF和c—myc基因表达增强

为了研究生长因子和原癌基因在缺氧所致肺血管结构重建中的作用，我们选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，置于低压仓内模拟海拔５０００米高度持续缺氧７天和１４天。与平原对照组相比，缺氧７天时肺动脉血小板源生长因子Ａ链（ＰＤＧＦ－Ａ）基因表达水平略有升高，而后有下降趋势，缺氧１４天时ＰＤＧＦ－Ｂ链３．５ｋｂｍＲＮＡ表达显著升高。点杂交结果显示：ｃ－ｍｙｃ原癌基因正常时表达水平很低。结果表明，缺氧过程中，ＰＤＧＦ－Ａ链和     

缺氧诱导大鼠肺动脉PDGF和c－myc基因表达增强

为了研究生长因子和原癌基因在缺氧所致肺血管结构重建中的作用，我们选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠，置于低压仓内模拟海拔５０００米高度持续缺氧７天和１４天。与平原对照组相比，缺氧７天时肺动脉血小板源生长因子Ａ链（ＰＤＧＦ－Ａ）基因表达水平略有升高，而后有下降趋势；缺氧１４天时ＰＤＧＦ－Ｂ链３．５ｋｂｍＲＮＡ表达显著升高。点杂交结果显示：ｃ－ｍｙｃ原癌基因正常时表达水平很低。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ可见缺氧７天时有２．２ｋｂｍＲＮＡ转录，缺氧１４天时其含量进一步增加为正常的６倍。结果表明，缺氧过程中，ＰＤＧＦ－Ａ链和Ｂ链是顺序表达的，其表达水平与缺氧性肺血管结构重组过程有一定相关。ＰＤＧＦ的促增殖作用是通过ｃ－ｍｙｃ基因产物实现的。     

血小板源生长因子及其受体基因表达在低氧大鼠肺中的变化

本文观察了血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）Ａ、Ｂ链及其α、β受体基因表达在低氧大鼠肺中的变化。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交显示正常大鼠肺中可表达ＰＤＧＦ－Ａ链、Ｂ链和ＰＤＧＦ－α受体、β受体的ｍＲＮＡ。随着低氧时间的延长，ｍＲＮＡ水平迅速增加。ＰＤＧＦ－Ａ、Ｂ链ｍＲＮＡ均在低氧的第二天达高峰，分别为正常的１．５１倍及１．６９倍，且Ｂ链ｍＲＮＡ基本维持在该水平至第七天。ＰＤＧＦ－α、β受体的ｍＲＮＡ在低氧第     

缺氧对肺动脉内皮细胞PDGF基因及PDGF—B链蛋白表面的影响

应用核酸杂交和定量免疫细胞化学分析技术研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子ＰＤＧＦ基因及ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白表达的影响。结果，缺氧能明显增强肺动脉内皮ＰＤＧＦ－Ｂ细胞边ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达水平无明显改变。免疫细胞化学定量分析与证实ＰＤＧＦ－Ｂ链蛋白染色比正常对照明显增强，与ＰＤＧＦ－Ｂ链基因表达的改变基本一致。提示缺氧可以刺激肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ的表达。ＰＤＦＧ在     

缺氧促进猪肺动脉内皮细胞sis／PDGF—B链基因的表达

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｓｌｏｔ－ｂｌｏｔ杂交技术研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）基因表达的影响，结果表明，缺氧能明显中肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ－Ｂ链ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ－Ａ链ｍＲＮＡ表达无明显影响，提示缺氧可能是体内刺激肺动脉内皮细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ－Ｂ链基因表达的因素之一，通过肺动脉平滑机细胞增生和收缩，在肺动脉高压血管改建中可能具有重要作用。     

慢性阻塞性肺病患者血浆血栓素B_2和6－酮－前列腺素F_（1α）含量的变化及其与肺动脉高压的关系

为了探讨慢性阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）患者血栓素Ａ_２（ＴＸＡ_２）和前列环素（ＰＧＩ_２）与肺动脉高压的关系，我们对伴有和不伴有肺动脉高压的３０例缓解期ＣＯＰＤ患者血浆中血栓素Ｂ_２（ＴＸＢ_２）及６－酮－前列腺素Ｆ_（１α）（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α））的含量变化进行了观察，还对７例伴肺动脉高压的ＣＯＰＤ患者不同病期的肺动脉平均压（ＰａＰ）、血浆ＴＸＢ_２及６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）．水平作了对比分析。结果发现，缓解期ＣＯＰＤ患者中，伴肺动脉高压者血浆ＴＸＢ_２明显增高，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）显著下降，ＴＸＢ_２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）明显增大，与不伴肺动脉高压者比较，差异非常显著（Ｐ均＜０．０１），而不伴肺动脉高压者的这些指标与正常人的比较，则无统计学意义（Ｐ均＞０．０５）；与急性期比较，ＣＯＰＤ患者缓解期ＰａＰ明显下降，ＴＸＢ_２亦显著降低，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）明显升高，ＴＸＢ_２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）缩小（Ｐ均＜０．０１）；相关分析发现，伴肺动脉高压者ＰａＰ与ＴＸＢ_２呈明显正相关，与６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ_（１α）呈负相关（ｎ＝２８，ｒ＝＋０．４６、－０．３９，Ｐ均＜０．０５）     

PDGF-B链基因表达的调控及其在常见心血管疾病中的意义

血小板源生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＰＤＧＦ）是机体普遍存在的促分裂剂,系由两种肽链（Ａ链、Ｂ链）组成的同型或异型二聚体。依不同的细胞来源,有３种形式：ＰＤＧＦ－ＡＡ,ＰＤＧＦ－ＡＢ和ＰＤＧＦ－ＢＢ。ＰＤＧＦ－Ａ链和－Ｂ链分别由ＰＤＧＦ－Ａ链基因和－Ｂ链基因编码。ＰＤＧＦ－Ｂ链主要由内皮细胞和巨噬细胞产生,其基因表达调控异常与常见心血管疾病的发生发展存在着密切关系,内皮细胞功能紊乱日益受到重视,而内皮细胞仅表达Ｂ链,本文就其表达调控,尤其是转录调控的研究进…     

缺氧促进猪肺动脉内皮细胞sis／PDGF－B链基因的表达

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｓｌｏｔ一ｂｌｏｔ杂交技术研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）基因表达的影响。结果表明，缺氧能明显增加肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ一Ｂ链ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ一Ａ链ｍＲＮＡ表达无明显影响。提示缺氧可能是体内刺激肺动脉内皮细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ一Ｂ链基因表达的因素之一，通过控制肺动脉平滑肌细胞增生和收缩，在肺动脉高压血管改建中可能具有重要作用。     

Iptakalim, a novel ATP-sensitive potassium channel opener, inhibits pulmonary arterial smooth muscle cell proliferation by downregulation of PKC-α

Iptakalim is a new ATP-sensitive potassium (K ATP ) channel opener, and it inhibits the proliferation of pulmonary arterial smooth muscle cells (PASMCs) and pulmonary vascular remodeling. However, the underlying mechanism remains unclear. In the present study, we found that iptakalim significantly decreased pulmonary artery pressure, inhibited pulmonary ariery remodeling and PKC-α overexpression in chronic hypoxia in a rat pulmonary hypertension model. Iptakalim reduced hypoxia-induced expression of PKC-α, and abolished the effect of hypoxia on PASMC proliferation significantly in a dose-dependent manner in vitro. Moreover, these effects were abolished by glibenclamide, a selective K ATP channel antagonist. These results indicate that iptakalim inhibits PASMC proliferation and pulmonary vascular remodeling induced by hypoxia through downregulating the expression of PKC-α. Iptakalim can serve as a novel promising treatment for hypoxic pulmonary hypertension.     

NF-κB的活性和iNOS基因表达在低氧性肺动脉高压中的变化

目的：探讨NF-κB的活性及iNOS基因表达在低氧性肺动脉高压（HPH）发病过程中的变化。方法：复制低氧性肺动脉高压大鼠模型，用免疫组化、原位杂交、半定量逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和Western blot等方法进行检测。结果：iNOS mRNA在腺泡内肺动脉（IAPA）的表达，低氧28 d（H28d）组染色强于正常（N）组、低氧5 d（H5d）组和低氧14 d（H14d）组。半定量RT-PCR证实低氧肺组织iNOS mRNA含量在H28d组分别是N组、H5d组和H14d组的2.1倍、1.9倍和1.8倍。H28d组肺组织NF-κB的核染色增多，I-κBα的含量在N组、H5d组和H14d组分别是H28d组的2.7倍、2.8倍和2.5倍。结论：在HPH中NF-κB的激活可能与低氧肺血管构建及iNOS mRNA的表达有关。     

慢性低氧性肺动脉高压大鼠肾上腺髓质素前体N端20肽的变化

目的：探讨慢性低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建时肾上腺髓质素前体N端20肽（PAMP）的变化。方法:将18只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和低氧组，每组各9只。常压低氧2周后，以右心导管法测定肺动脉平均压（mPAP），检测右心室与左心室加室间隔比值 ［RV/(LV+S)］，观测肺血管显微和超微结构的变化。并且以放免法测定血浆中PAMP含量，以免疫组化法检测肺组织中PAMP表达，以原位杂交检测肺组织中肾上腺髓质素（ADM） mRNA的表达。结果: 低氧组大鼠mPAP及RV/（LV+S）均明显高于对照组（均P<0.01）。光镜下，肺小血管肌化程度明显增强，肺中、小型肌型动脉相对中膜厚度明显增加。电镜下，肺腺泡内动脉内皮细胞增生、肿胀，内弹力层粗细不均，平滑肌细胞肥厚、向合成表型转化。并且低氧组大鼠血浆PAMP含量明显高于对照组（P<0.01），肺动脉PAMP表达和ADM mRNA表达均明显增强。结论：低氧后肺动脉PAMP表达和血浆PAMP含量的上调可能参与了慢性低氧性肺动脉高压和肺血管结构重建的形成。     

肾上腺髓质素缓解大鼠低氧性肺动脉高压

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对大鼠低氧性肺动脉高压的防治作用及机制。方法雄性Wistar大鼠18只,分为对照组、低氧组和低氧 ADM组,每组6只。持续皮下注射ADM1-50后,测定平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数RV/(LV S)、肺小动脉病理及形态计量学和体循环平均压(mSBP),放免法测定肺动脉血浆ADM水平,原位杂交测定肺动脉ADMR mRNA的表达。结果①低氧组大鼠mPAP,RV/(LV S),管壁厚度与血管外径比值(MT%)及管壁面积与血管面积比值(MA%)均显著升高(P<0.01);ADM组显著缓解以上变化(P<0.01)。②低氧组与低氧 ADM组肺动脉血浆ADM浓度均高于对照组,且低氧 ADM组较低氧组ADM浓度低(P<0.05)。③低氧组与低氧 ADM组的ADMR mRNA表达较对照组增强(P<0.01)。结论持续皮下注射ADM对慢性低氧所致的肺动脉高压及肺血管重塑有预防和部分逆转作用。     

Remodeling of fetoplacental arteries in rats due to chronic hypoxia

The increased fetoplacental vascular resistance due to chronic hypoxia cannot be explained by simple hypoxic vasoconstriction, as it sustains to some degree after recovery in normobaric environment. To verify a hypothesis that fetoplacental arteries undergo remodeling of their walls similar to remodeling of pulmonary arteries in hypoxic pulmonary hypertension, we used a model of the chronically hypoxic rat placenta. Han Wistar pregnant rats were exposed to 14-day hypoxia (10% of oxygen) during the 6th to 19th day of pregnancy. Chronic hypoxia elicited in both intraplacental (prelabyrinthine) and chorionic plate (insertion) arteries significant narrowing of their lumina. Irregular thickening of their adventitia due to an increase in collagen fibers as well as ground substance was observed; reticular fibers were fragmented. Because of remodeling of fetoplacental arteries, a model of chronically hypoxic rat placenta could simulate human preplacental hypoxia and consequent effects.     

低氧大鼠肾上腺髓质素对其前体N端20肽和肺血管结构重构的影响

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对低氧性肺动脉高压大鼠肺血管结构重构和肾上腺髓质素前体N端20肽(PAMP)的影响。方法24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、低氧组、低氧 ADM组,每组各8只。低氧 ADM组大鼠,通过微量渗透泵皮下持续给予ADM(300 ng/h)。用放免法测定血浆中PAMP含量,用免疫组化法检测肺组织中PAMP表达。结果低氧2周后,大鼠肺动脉平均压、右心室与左心室加室间隔的比值、肺动脉相对中膜厚度和面积较对照组均明显增高(P<0.01),超微结构也发生了明显改变。并且低氧组大鼠血浆PAMP含量明显升高,肺动脉PAMP表达明显增强。而ADM可显著缓解上述变化。结论ADM分子内调控参与了ADM对于低氧性肺动脉高压的干预机制。     

肺血管顺应性的变化和结构重组在肺动脉高压形成中的作用

本实验观察了慢性低压缺氧不同时间对大鼠肺血管顺应性和结构的影响,结果表明缺氧4天肺血管顺应性下降,伴有肺泡区非肌性小血管肌化增加;缺氧15天顺应性继续下降,肌化小血管数进一步增加,同时平滑肌中层增厚;缺氧40天顺应性、肌化小血管数和平滑肌厚度不再继续改变。提示缺氧性肺动脉高压的发展和维持与肺血管顺应性及结构的重组有关。     

西拉普利对低氧大鼠肺动脉和心肌细胞增殖的抑制作用

目的：探索cilazapril 对低氧大鼠肺血管和心肌细胞增殖的抑制机理。 方法： 采用生化、放射免疫、免疫组织化学、细胞凋亡标记和血流动力学技术研究低氧肺血管及心肌细胞增殖和结构重建。 结果： （1）低氧大鼠mPAP显著增高，伴有肺动脉血管管腔狭窄、管壁增厚，心肌肥大，R/L+S增高。（2）B组、C组大鼠肺动脉和右心肌细胞增殖指数（PI）均分别明显高于A组，而C组明显低于B组。ET-1免疫组化染色阳性细胞主要分布在肺动脉血管壁和心肌细胞上，染色程度由强到弱依次为B组>C组>A组。（3）B组大鼠ET-1水平和ACE活性明显高于A组，而C组显著低于B组。（4）直线相关分析显示ET-1、ACE分别与R/(L+S)、mPAP、肺动脉PI、心肌PI呈正相关；多元回归分析显示ET-1和ACE可能是影响PI的主要因素。 结论： 低氧大鼠存在细胞过度增殖状态，继发肺血管、右心结构重建是低氧性肺动脉高压发病机理之一。Cilazapril通过抑制ACE和ET-1的促增殖作用，阻止肺血管及心肌重建，对低氧性肺动脉高压的防治有一定作用。