胃癌组织P53、PCNA蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的探讨P53、PCNA蛋白表达和胃癌细胞凋亡关系及其它们在胃癌发生发展中的可能作用。方法采用TUNEL及流式细胞术分别检测60份胃癌、癌旁正常黏膜组织细胞凋亡和P53、PCNA蛋白表达。结果胃癌组织细胞凋亡率明显低于癌旁正常组织（〈0.01）;P53、PCNA蛋白在胃癌组织中的表达率明显高于癌旁正常组织（〈0.01）。胃癌P53阳性组细胞凋亡率低于P53阴性组,而PCNA平均荧光强度高于P53阴性组。低分化胃癌病例其P53、PCNA蛋白高于高中分化的病例。有淋巴结转移的胃癌病例其P53、PCNA蛋白高于无淋巴结转移的病例。结论胃癌组织中癌细胞凋亡明显受到抑制,胃癌组织中P53高表达及细胞增殖活跃状态在胃癌的发生发展过程中起重要作用。     

Caspase-9和Bax在胃癌中的表达以及与凋亡的关系

目的：探讨Caspase-9和Bax在胃癌发展中的作用以及二者的表达与细胞凋亡的关系。方法：应用免疫组织化学S-P法检测Caspase-9和Bax在57例胃癌及48例非癌胃黏膜组织的表达,用原位末端标记法（TUNEL法）检测相应胃组织细胞凋亡。结果：Caspase-9蛋白在胃癌组织中阳性表达率为40.35%,较非癌胃黏膜组织的阳性表达率70.83%明显降低（P〈0.05）;Bax蛋白在胃癌组织中阳性表达率为35.09%,明显低于非癌胃黏膜组织的72.92%（P〈0.05）。Caspase-9蛋白阳性表达者细胞凋亡指数（AI）值（11.20±3.39）%与其阴性者AI值（6.22±2.45）%比较差异有显著性（P〈0.05）;Bax蛋白阳性表达者AI值（12.54±3.60）%,与其阴性者AI值（7.18±1.25）%比较差异有显著性（P〈0.05）。在不同类型胃癌组织中,高中分化腺癌、低分化腺癌、黏液癌的AI值分别为（5.72±1.25）%、（2.54±0.98）%、（3.28±1.42）%,其中高中分化腺癌和后二者之间有统计学差异（P〈0.05）。结论：Caspase-9和Bax可能与胃癌的发生或发展相关;推测Bax激活Caspase-9的线粒体通道受抑可能参与胃癌的发生。     

Bax mRNA在胆管癌组织中的表达及意义

目的检测胆管癌组织中BaxmRNA表达及细胞凋亡，探讨BaxmRNA表达与细胞凋亡的关系及其在胆管癌发生、发展中的作用。方法用原住分子杂交法检测32例胆管癌组织及10例癌旁组织BaxmRNA表达；用原位末端TUNEL法检测相应组织中细胞凋亡。结果癌旁组织的BaxmRNA阳性表达率明显高于癌组织（P〈0．05）；癌旁组织的凋亡指数AI明显高于癌组织（P〈0．05）；在胆管癌组织中，BaxmRNA阳性表达率与其凋亡指数及凋亡阳性细胞的分布均呈正相关（P〈0．05）。结论胆管癌组织中的细胞凋亡受到抑制，BaxmRNA表达低下或缺失参与了胆管癌的发生、发展过程。     

胃癌组织P53、P63蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的：探讨P53、P63蛋白表达及细胞凋亡在胃癌发生发展中的可能机制。方法：选择57例手术切除的胃癌及胃癌旁组织,用免疫组化方法检测组织中的P53、P63蛋白表达,同时用Tunel方法检测胃癌组织中的凋亡细胞。结果：胃癌组织P53、P63蛋白表达率显著高于胃癌旁组织（P〈0.05）;低、未分化型腺癌表达率显著高于高、中分化型腺癌（P〈0.05）;有淋巴转移显著高于无转移组（P〈0.05）;P53、P63高表达的癌组织,细胞凋亡指数减少,早期胃癌低于晚期胃癌（P〈0.05）。结论：胃癌组织P53、P63蛋白高表达,可能延缓细胞凋亡;细胞凋亡机制障碍可能是胃癌增生失控的基础。     

Omi/HtrA2和Caspase-9在食管癌中的表达及与凋亡的关系

目的探讨在食管鳞癌中Omi/HtrA2、Caspase-9蛋白的表达及其与癌细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法对80例经病理确诊为食管鳞癌病例的正常组织、癌旁组织及癌组织进行Omi/HtrA2和Caspase-9蛋白免疫组化分析。采用TUNEL法检测细胞凋亡水平,并分析食管癌中Omi/HtrA2和Caspase-9的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系。结果 1 Omi/HtrA2、Caspase-9在食管鳞癌组织阳性表达率分别为76.25%、58.75%,在癌旁组织中的阳性表达率分别为27.50%、72.50%,在正常组织中的阳性表达率分别为22.50%、85.00%;Omi/HtrA2、Caspase-9在食管鳞癌组织中的阳性表达率与其在癌旁组织、正常组织中蛋白的阳性表达率分别进行比较,差异均有统计学意义(P0.05);癌旁组织与正常组织的Omi/HtrA2和Caspase-9蛋白阳性表达率进行比较,差异均无统计学意义(P0.05)。2 Omi/HtrA2蛋白表达阳性组癌细胞凋亡指数(18.186±1.331)‰,明显高于阴性组凋亡指数(5.108±1.783)‰(P0.01);Caspase-9蛋白表达阳性组细胞凋亡指数为(17.763±0.675)‰,明显高于阴性组细胞凋亡指数(11.619±0.712)‰(P0.05)。结论 Omi/HtrA2在食管癌中高表达,而Caspase-9在食管癌中低表达,两者在促进食管癌细胞凋亡中有相反的调节作用。     

胃癌中bcl-2表达及临床病理意义

目的：通过观察bcl-2蛋白在胃癌组织及癌旁组织中的表达,探讨bcI-2所介导的细胞凋亡在胃癌发病中的作用。方法：应用免疫组化染色检测42例胃癌患者胃癌组织及癌旁组织中bcl-2蛋白的表达。结果：bcl-2在胃癌组织及癌旁组织的阳性表达分别为66.7%和28.6%。在胃癌组织中bcl-2的表达高于癌旁组织,有显著性差异（P〈0.05）。bcl-2的表达与胃癌分化程度有关（P〈0.05）,而与临床病理分期,淋巴结转移无关（P〉0.05）。结论：bcI-2所介导的细胞凋亡与胃癌发生和演进有关。     

bcl-2和 bax 蛋白在肝癌组织的表达与细胞凋亡指数的关系

目的 :研究bcl 2及相关蛋白bax在肝癌组织中的表达与细胞凋亡指数之间的关系。方法 :对2 9例人肝细胞癌及癌旁组织分别进行bcl 2、bax的免疫组织化学研究 ,原位细胞凋亡检测采用TUNEL方法 ,计数阳性细胞数。结果 :bax在肝癌细胞中呈低表达 ,阳性率为 2 0 .7% ,与在癌旁组织中的表达 (65 .1 % )相比存在统计学差异 (P <0 .0 1 )。Bcl 2在肝细胞癌与癌旁组织中均呈低表达 ,表达率分别为 1 7.2 %和2 4.1 % ,二者间不存在统计学差异。Bcl 2和bax的阳性表达率与肝癌组织学分级无明显相关性。细胞凋亡指数在肝癌细胞中的表达率 (1 0 .3 2 %± 4.87% )低于在癌旁组织中的表达 (1 6.1 4%± 4.92 % ) (P <0 .0 1 )。在肝细胞癌和癌旁组织中 ,bax阳性组与阴性组细胞凋亡指数间有统计学差异 (P <0 .0 1 ) ,bcl 2阳性组与阴性组细胞凋亡指数无统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :bcl 2和bax的变化影响肝细胞的凋亡状态 ,bax起到更关键的作用。凋亡指数有可能成为判定肝细胞癌变的指标 ,且与组织学分级有关     

胃癌组织中血管生成素-2基因的表达和微血管密度研究

目的探讨血管生成素-2（Ang-2）基因在胃癌组织中的表达、微血管密度（MVD）与胃癌生物学行为之间的关系。方法采用免疫组化SP方法,检测64例胃癌组织、22例癌旁正常组织、20例胃良性疾病组织中血管生成素（Ang-2）,以CD34作为血管内皮细胞标记物,对CD34阳性血管进行MVD计数。结果 Ang-2在胃癌组织中的阳性表达率为68.75%,在癌旁正常组织和胃良性病变组织中的阳性表达率分别为22.27%、40.00%,差异有统计学意义（P〈0.01）;Ang-2表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移、临床分期呈正相关（P〈0.05）,Ang-2阴性表达者5年总生存期明显高于Ang-2阳性表达组（分别为50.00%及18.75%,P〈0.05）;胃癌组织、癌旁组织和胃良性病变组织中MVD分别为33.69±11.60、10.65±3.00和17.20±1.98,3者比较差异有统计学意义（P〈0.01）;MVD与浸润深度、淋巴结转移、远处转移及临床分期呈正相关（P〈0.01）,而与肿瘤大小、分化程度、有无脉管侵犯无相关（P〉0.05）;MVD≤33的胃癌患者总生存期较MVD〉33患者明显延长（分别为45.45%及16.67%）,差异有统计学意义﹙P〈0.05）。经相关分析,Ang-2阳性表达率与MVD呈正相关（r=0.618,P〈0.01）。结论 Ang-2的表达和MVD与胃癌的生长、浸润、转移及预后有一定的相关性。     

Survivin在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Survivin在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法,检测45例胃癌和20例癌旁组织中Survivin的表达水平。结果Survivin在胃癌组织中的表达率为71.1％（32／45）,明显高于在癌旁组织中的表达率（4.4％）,差异有显著性（P〈0.01）。Survivin的表达与肿瘤的分化程度、浆膜侵犯、淋巴结转移密切相关（P〈0.05）,高分化癌明显高于中、低分化癌（P〈0.05）,有淋巴结转移癌明显高于无淋巴结转移癌（P〈0.05）;Survivin的表达与性别、年龄、肿瘤大小等因素无关（P〉0.05）。结论Survivin通过抑制胃癌细胞凋亡,对胃癌的发生,发展起重要作用,Survivin表达阳性的胃癌有较强的侵袭性和预后不良。     

FADD在喉癌的表达及临床意义

【目的】探讨FADD在喉癌组织中的表达情况及其与临床的关系。【方法】应用免疫组织化学方法检测30例喉鳞状细胞癌组织、20例喉乳头状瘤组织、20例癌旁正常粘膜组织中FADD的表达情况。【结果】（1）FADD在喉鳞状细胞癌组、喉乳头状瘤组及癌旁正常粘膜组中的阳性表达率分别为76.7%、90.0%、95.0%,阳性表达率总体有统计学意义（P〈0.05）。（2）FADD的阳性表达率在喉癌I~II期的阳性表达率为95.2%,III~IV期为50.0%,有统计学意义（P〈0.05）;在高分化癌组织中的阳性表达率为94.4%,中低分化癌组织中的阳性表达率为25.0%,有统计学意义（P〈0.05）。FADD阳性表达率与患者性别、年龄、不同临床分型及是否伴有淋巴结转移均无关,无统计学意义（P〉0.05）。【结论】FADD在喉癌的发生发展中起着重要的作用,癌组织中FADD的检测对临床预后的判断有一定的指导意义。     

Bcl-2、Bax在胃癌及胃癌前病变中的表达与细胞凋亡的关系

目的 探讨胃癌及胃癌前病变组织中Bcl-2、Bax的表达情况及其与细胞凋亡的相互关系.方法 采用免疫组织化学SP法分别检测10例正常胃黏膜、60例慢性萎缩性胃炎伴肠化生、30例异型增生、50例胃癌中Bcl-2、Bax蛋白的表达情况,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL法）检测组织切片中细胞凋亡的情况.结果 慢性萎缩性胃炎伴肠化生、异型增生、胃癌中Bcl-2蛋白表达阳性率分别为31.7％,43.3％,62.0％,均显著高于正常胃黏膜（P＜0.01）.慢性萎缩性胃炎伴肠化生、异型增生中Bax蛋白阳性率分别为55.0％,30.0％,其阳性率均显著高于胃癌（P＜0.01,P＜0.05）.Bcl-2蛋白表达阳性慢性萎缩性胃炎伴肠化生、异型增生和胃癌中凋亡细胞指数（AI）显著低于Bcl-2蛋白阴性组（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达阳性率与AI值呈负相关.Bax蛋白表达阳性慢性萎缩性胃炎伴肠化生、异型增生和胃癌中AI显著高于Bax蛋白阴性组（P＜0.05）,Bax蛋白表达阳性率与AI值呈正相关.结论 胃黏膜癌变过程中,AI、凋亡调控基因Bcl-2和Bax的比值逐渐增加,说明它们在胃癌演变过程中可能起重要作用.     

胃癌组织中KiSS-1和基质金属蛋白酶-9蛋白及mRNA的表达

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1及基质金属蛋白酶9（MMP-9）与胃癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组织化学SP法和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例胃癌及40例正常胃黏膜组织中KiSS-1及MMP-9蛋白和mRNA的表达情况,分析其与胃癌患者各临床病理特征的关系及二者的相关性。结果胃癌组织中KiSS-1蛋白的阳性表达率（52.5%）低于正常胃黏膜组织（95.0%）（P〈0.05）,并且其低表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。胃癌组织中MMP-9蛋白的阳性表达率（77.5%）高于正常胃黏膜组织（52.5%）（P〈0.05）,并且其高表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P〈0.05）。胃癌组织中KiSS-1 mRNA的阳性表达率及表达水平（57.5%,0.869±0.063）均低于正常胃黏膜组织（92.5%,1.103±0.152）（P〈0.05）,并且其低表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。胃癌组织中MMP-9 mRNA的阳性表达率及表达水平（75.0%,1.083±0.137）均高于正常胃黏膜组织（47.5%,0.902±0.035）（P〈0.05）,并且其高表达与肿瘤浸润深度和淋巴结转移密切相关（P〈0.05）。KISS-1与MMP-9蛋白和mRNA的表达均呈负相关（P〈0.05）。结论 KiSS-1的低表达和MMP-9的过表达可能与胃癌的浸润、转移有关。二者有望成为判定胃癌侵袭和转移能力的指标。     

凋亡指数在不同宫颈病变组织中的表达及其预测新辅助化疗疗效的作用

目的：探讨正常宫颈组织、CIN组织及化疗前后宫颈鳞癌组织凋亡指数（apoptosisindex,AI）的表达及临床意义。方法：选取11例正常宫颈组织,23例宫颈病变CIN组织,30例宫颈鳞癌组织,应用TUNEL法检测组织AI。结果：化疗临床有效率为80％;正常宫颈组织、CIN组织及化疗前宫颈鳞癌组织中的A1分别为2．55±0．64、14．00±3．16和7．13±1．27（F=127．659,P〈0．05）,差异有统计学意义;化疗前后宫颈鳞癌组织A1分别为7．13±1．27和17．88±4．39（t=-1．736,P〈0．05）,差异有统计学意义;化疗前后有效组和无效组宫颈鳞癌组织AI变化值分别为12．21±4．38和4．95±2．69（t=3．849,P〈0．05）,差异有统计学意义。结论：新辅助化疗能诱导宫颈鳞癌细胞凋亡,AI增高预示疗效较好。     

微小染色体维持蛋白5在胃癌、癌前病变及正常胃黏膜组织中的表达及临床病理学意义

目的探讨微小染色体维持蛋白5(MCM5)在胃癌、癌前病变及正常胃黏膜组织中的表达及对肿瘤生物学行为的影响。方法采用免疫组织化学SP法对57例胃癌组织、32例癌前病变组织和20例正常胃黏膜组织进行MCM5表达的检测。结果 MCM5在胃癌、癌前病变及正常胃黏膜组织中的阳性率分别为87.7%、78.1%、0.0%,癌前病变及胃癌组织中MCM5的阳性率均显著高于正常胃黏膜组织(P<0.01);MCM5在胃癌组织中的强阳性率高于癌前病变组织(P<0.01);MCM5在胃癌组织表达的总阳性率与分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期无关(P>0.05),但胃癌低分化组织中MCM5表达的强阳性率明显高于高、中分化组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MCM5可以作为癌前病变及胃癌诊断的有效标志物。     

Runx3和Survivin在胃癌中的表达及其相关性

目的：探讨Runx3、survivin蛋白在胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法：应用免疫组化SABC方法,检测Runx3、survivin蛋白在8例正常胃粘膜、15例异型增生、47例胃癌组织中的表达。结果：Runx3、survivin在正常胃黏膜、异型增生及胃癌组织中的阳性表达率分别87.5%、53.3%、36.2%和0%、33.3%、70.2%。Runx3的表达与胃癌的分化程度、淋巴结转移、浸润深度有关（P〈0.05）;survivin的表达与胃癌组织学分类、淋巴结转移相关（P〈0.05）,（2）Runx3与sur-vivin在正常胃粘膜（P〈0.010,r=-0.6255）和胃癌组织中的表达呈负相关（P〈0.05,r=-0.3271）。结论：Runx3、survivin表达在胃癌的发生、发展中起着不同程度的作用,联合检测Runx3和survivin蛋白的表达更能反映胃癌的生物学行为,优于单项检测。     

原发性病理性十二指肠胃反流患者胃黏膜TNF-α和COX-2的表达及其与细胞凋亡的关系

[目的]研究原发性病理性十二指肠胃反流(duodenogastric reflux,DGR)患者胃黏膜组织中的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达状态及其与细胞凋亡的关系,探讨原发性病理性十二指肠胃反流的发病机理.[方法]应用脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口末端标记技术和免疫组化方法分析86例原发性病理性DGR和42例正常对照胃黏膜细胞凋亡、肿瘤坏死因子-α和环氧合酶-2的表达.[结果]原发性病理性DGRTNF-α表达指数显著高于正常对照组(P＜0.05),Hp阳性亚组TNF-α表达指数显著高于Hp阴性亚组(P＜0.05).原发性病理性DGR组COX-2表达指数显著高于正常对照组(P＜0.05),Hp阳性和Hp阴性亚组之间COX-2表达指数无显著性差异(P＞0.05).原发性病理性DGR组TNF-α的表达与凋亡指数呈正相关(r=0.705,P=0.000),COX-2的表达与凋亡指数呈正相关(r=0.584,P=0.000).[结论]原发性病理性DGR胃黏膜TNF-α和COX-2表达增加,诱导胃黏膜细胞凋亡.Hp感染未加重原发性病理性DGR所致胃黏膜细胞凋亡反应.     

复方丹参注射液对门脉高压性胃病模型大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡的影响

目的 观察复方丹参注射液对门脉高压性胃病（PHG）模型大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡的影响.方法 采用一期部分门静脉缩窄法制备PHG大鼠模型,雄性SD大鼠70只,电脑随机抽取分为3组：A组（PHG造模＋复方丹参注射液）30只、B组（PHG造模＋0.09%氯化钠溶液）30只、C组（假手术＋0.09%氯化钠溶液）10只.造模后各时段（5、10、15、20、30、45d）处死大鼠,取胃底黏膜组织,检测各组大鼠胃黏膜组织病理学变化、上皮细胞凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA表达及原位末端标记（TUNEL）染色测凋亡指数（apoptotic index,AI）的变化.结果 A组的胃黏膜破坏明显减轻.B组胃黏膜组织中Bcl-2表达水平则显著下调,在第20天达最低值0.12±0.09,其后趋于稳定;Bax表达水平显著上调,并在第20天达到高峰6.12±0.39,其后趋于稳定;AI值上升,第20天最高（11.08±1.62）%,后趋于稳定.A组小鼠Bcl-2及Bax表达水平及AI值发生改变,20d时各值分别为：（1.09±0.21）、（1.12±0.17）、（5.32±1.07）%,各时间点与B组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）.而C组20d时Bcl-2、Bax表达水平、AI值分别为：（0.98±0.10）、（0.86±0.11）、（4.32±0.08）%,与A组相比差异无统计学意义（P ＞0.05）,但与B组比较差异有统计学意义（均P＜0.01）.结论 复方丹参注射液能明显减轻PHG模型大鼠胃黏膜损伤并抑制上皮细胞凋亡,对PHG模型大鼠胃黏膜具有保护作用.     

β-tubulinⅢ及survivin蛋白在胃癌中的表达及相互关系的研究

目的 探讨β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulinⅢ）、生存素（survivin）在各期胃癌组织中的表达及两者之间的相互关系.方法 检测60例不同分期、分化程度胃癌组织标本中（胃癌组） β-tubulinⅢ、survivin的表达情况,并与30例正常无病变的胃黏膜标本（对照组）作比较.利用Bradford法定量检测β-tubulinⅢ与survivin在不同分化程度胃癌组织中的表达.结果 胃癌组β-tubulinⅢ阳性表达率36.7%,明显高于对照组的0%（P＜0.01）;胃癌组survivin阳性表达率58.3%,明显高于对照组的3.3%（P＜0.01）.β-tubulinⅢ在高、中、低分化胃癌组织中的表达率分别为11.11%、33.33%、44.44%,而survivin在高、中、低分化胃癌组织中的表达率分别为33.33%、53.33%、66.67%,差异有统计学意义（P＜0.05）.胃癌组织中β-tubulinⅢ与survivin表达的相关性,经Spearman分析两者呈正相关（P＜0.05）.结论 胃癌组织标本中存在β-tubulinⅢ、survivin的高水平表达,且与组织分化程度有关,两者表达呈正相关,β-tubulinⅢ、survivin可能共同导致了胃癌肿瘤细胞的异常增殖和异常凋亡,β-tubulinⅢ和survivin抑制剂与基因治疗可能会成为今后胃癌防治的一个主要方向.     

肝再生磷酸酶3基因与胃癌恶性进展相关性研究

目的：检测肝再生磷酸酶3（PRL-3）mRNA在胃癌、癌旁正常组织及其转移灶中的表达,探讨其与胃癌发生发展以及侵袭转移的生物学行为之间的关系。方法：半定量PCR测定22例胃癌组织及其相对应的癌旁正常组织、6例远处转移灶PRL-3 mRNA相对表达水平,并分析其表达水平与临床病理学指标的关系。结果：22例胃癌组织中PRL-3基因表达量较相应癌旁正常组织中高,但差异无统计学意义（0.95±0.24 vs 0.85±0.27,P〉0.05）。6例转移灶PRL-3基因表达量（2.04±0.44）显著高于原发肿瘤（1.26±0.26）（P〈0.05）。PRL-3基因表达水平与肿瘤远处转移有相关性（P〈0.05）,而与肿瘤大小、分化程度、浸润深度及性别无关（P〉0.05）。结论：PRL-3基因在胃癌恶性进展中起重要作用,PRL-3可能成为判断胃癌转移高危因素的一个生物学标志物。