二乙酰单肟和硝苯地平对梭曼中毒小鼠的保护

羟酸酯酶（ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ,ＣａＥ）,是一组能催化水解羟酸酯生成羟酸和乙醇的同工酶,在体内主要分布于肝、肺、血浆、小肠等组织器官。研究表明,梭曼中毒时不仅抑制乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）,而且还可逆性结合并抑制ＣａＥ。ＣａＥ与梭曼结合可使体内游离梭曼浓度降低,从而减轻梭曼对靶部位ＡＣｈＥ的抑制。因此ＣａＥ作为内源性毒剂清除剂已引起了人们的广泛重视。那么,通过加速梭曼抑制的ＣａＥ的重活化,或扩张外周血管增加血浆ＣａＥ与梭曼的结合,充分调动ＣａＥ在体内解毒潜力,可能对提高梭曼的防治水平有…     

血浆中游离梭曼的电鳐乙酰胆碱酯酶抑制测定法

梭曼是一种对体内乙酰胆碱酯酶 (ＡＣｈＥ)有强烈抑制作用的有机磷化合物。由于梭曼毒性强且在体内降解迅速 ,国外目前主要通过大进样量气相色谱或气 质联用方法来检测[1,2 ] ,其优点是 :(1)灵敏度较高 ,如检测下限可达1 5 ｐｇ/ｍｌ血浆 ;(2 )可以将梭曼的 4个异构体分开 ,以便研究各异构体在体内的动力学过程。不足之处是 :检测设备价格昂贵 ,样本的预处理过程比较繁琐 ,检测时间较长 ,不适合临床上对毒剂浓度的快速检测。基于ＡＣｈＥ活性抑制测定有机磷毒剂浓度的文献也有报道 ,优点是灵敏、简便[3 ] 。然而 ,该法在检测血浆中残留梭曼…     

Distribution of the scavenger esterases against organophosphorus compounds in human tissues

测定了人体各种组织中与有机磷化合物代谢有关的二异丙基氟磷酸酯酶（ＤＦＰａｓｅ），对氧磷酶，乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ），丁酰胆碱酯酶（ＢＣｈＥ）及羧基酯酶（ＣａＥ）的活性水平．结果表明：在肾脏，脾脏和肝脏中含有丰富的ＤＦＰａｓｅ，可催化水解梭曼．其他组织该酶活性均很低．除人血清外，其他组织均未测到对氧磷酶活性．ＡＣｈＥ和ＢＣｈＥ主要分布于中脑，桥脑，延脑，纹状体及丘脑等脑干区域，另外肝脏中ＢＣｈＥ的比活性也较高．ＣａＥ主要分布于肝脏组织中，肺脏中也有较高的ＣａＥ活性．以上结果对了解有机磷化合物在人体中的中毒及代谢提供了一定的理论基础     

有机磷杀虫剂氧化乐果和乐果对爪蟾胚胎神经肌肉细胞突触传递的影响

有机磷杀虫剂氧化乐果和乐果对爪蟾胚胎神经肌肉细胞突触传递的影响徐海滨贺锡雯谢佐平１何凤生（中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所，北京１０００５０；１清华大学生命科学与技术系，北京１０００８０）有机磷杀虫剂通过抑制乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）而产生毒性...     

模拟高原梭曼中毒大鼠脑M-AChR的变化

梭曼,抑制胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）,造成体内乙酰胆碱蓄积,是其主要的中毒机制。高原条件下梭曼毒性较平原明显升高,其胆碱能机制却未见报道。作者利用ＤＴＮＢ及放射性配基结合法,系统分析了模拟高原缺氧大鼠皮层、海马及纹状体在不同时相点（８,２４,７２ｈ）胆碱酯酶和毒蕈碱样乙酰胆碱受体（ＭＡＣｈＲ）的变化,并在此基础上研究了模拟高原梭曼中毒脑组织ＡＣｈＥ和ＭＡＣｈＲ的变化,指在探讨ＭＡＣｈＲ在高原缺氧脑损伤中的作用及高原条件下神经性毒剂毒性升高的机制,为缺氧相关疾病和高原神经毒中毒的预防及救治提供理论…     

Anionic subsite of active center of Torpedo acetylcholinesterase constructs a part of its conformati

目的：研究电鳐乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）结构功能关系，探讨ＡＣｈＥ负矩部位是否是其构象决定簇的一个组成部分．方法：用ＥＬＩＳＡ及酶抑制实验观察ＡＣｈＥ负矩部位探针２ＰＡＭ对ＡＣｈＥ与其ＭｃＡｂ３Ｆ３之间的免疫反应性的影响．结果：ＭｃＡｂ３Ｆ３不能与２ＰＡＭ及ＡＣｈＥ的复合物反应；２ＰＡＭ浓度依赖性地降低ＭｃＡｂ３Ｆ３对ＡＣｈＥ的抑制率；但不能解离ＡＣｈＥ与３Ｆ３构成的抗原抗体复合物．结论：电鳐ＡＣｈＥ活性中心负矩部位构成其活性中心构象抗原决定簇的一部分．     

电鳐乙酰胆碱酯酶活性中心负矩部位构成其构象决定族的一部分

目的：研究电鳐乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）结构功能关系，探讨ＡＣｈＥ负矩部位是否是其构象决定簇的一个组成部分。方法：用ＥＬＩＳＡ及酶抑制实验观察ＡＣｈＥ负矩部位探针２－ＰＡＭ对ＡＣｈＥ与其ＭｅＡｂ ３Ｆ３之间的免疫反应性的影响。结果：ＭｃＡｂ３Ｆ３不能与２－ＰＡＭ及ＡＣｈＥ的复合物反应；２－ＰＡＭ浓度依赖性地降低ＭｃＡｂ ３Ｆ３对ＡＣｈＥ的抑制率；但不能解离ＡＣｈＥ与３Ｆ３构成的抗原抗体复合物。结论     

氟化钠对小鼠全血乙酰明碱酯酶影响的动态观察

氟化钠对小鼠全血乙酰明碱酯酶影响的动态观察吴南屏，赵忠良，康富敏，韩宝红氟中毒患者有明显的乙酰胆碱蓄积症状，表明氟可抑制乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）的活性，但文献报道染氟早期对ＡＣｈＥ活性影响结果不一［１－３］。本实验拟通过动态观察氟对小鼠全血ＡｃｈＥ活...     

柳珊瑚酸对乙酰胆碱酯酶的抑制作用

目的：研究柳珊瑚酸（ｓｕｂｅｒｏｇｏｒｇｉｎ，Ｓｕｂ）抗乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）作用的选择性，可逆性和动力学。方法：制备大鼠和人红细胞膜，大鼠脑和蚯蚓背肌提取液作为ＡＣｈＥ组织样品，人血浆为丁酰胆碱酯酶（ＢｕＣｈＥ）样品；比色法测酶活力，结果：Ｓｕｂ明显抑制上述样品的ＡＣｈＥ活力，其Ｐ／５０各为４．０３，４．９２，３．８２和４．６７，对ＢｕＣｈＥ无抑制作用，Ｓｕｂ与ＡＣｈＥ一起孵温后，酶活力性，３     

神经性毒剂对人脑乙酰胆碱酯酶的抑制及肟类药物的重活化作用

本文观察了神经性毒剂沙林，梭曼，塔崩和ＶＸ对纯化人脑乙酰胆碱酯酶的抑制作用及肟类药物对这些毒剂抑制的酶的体外重活化作用。结果表明，毒剂抑制人脑乙酰胆碱酯酶的ｐＩ５０为７．９一９．１，毒剂的抑制能力为：梭曼＞沙林≈ＶＸ＞塔崩，脂类药物氯磷定，双解磷，双复磷和ＨＩ一６对沙林和ＶＸ抑制的人脑乙酰胆碱酯酶的重活化作用非常显著，但对梭曼和塔崩抑制的酶则弱，且不同药物对这两种毒剂抑制的乙酰胆碱酯酶的重活化作用也明显不一样，与大鼠脑乙酰胆碱酯酶的实验结果相似。     

Inhibitory effects of huperzine B on cholinesterase activity in mice

目的：测试石杉碱乙的抗胆碱酯酶作用并与他克林进行比较．方法：比色法用于测定胆碱酯酶活性．结果：石杉碱乙和他克林对ＢｕＣｈＥ和ＡＣｈＥ抑制的ＩＣ５０值的比率分别为６５８和０５４．石杉碱乙对乙酰胆碱酯酶有更强的选择性抑制作用．石杉碱乙灌胃对脑内ＡＣｈＥ的抑制作用明显强于他克林．而他克林对ＢｕＣｈＥ的抑制作用强于石杉碱乙,并有严重副反应．单次灌胃石杉碱乙在４小时内对脑内ＡＣｈＥ产生较为稳定的抑制作用．结论：与他克林比较石杉碱乙是乙酰胆碱酯酶的高选择性抑制剂,灌胃时药效高,毒性低．     

新的乙酰胆碱酯酶抑制剂

胆碱能假说为阿尔茨海默病的治疗提供了初步可行的方法。在增强胆碱能传递的不同治疗方法中，抑制乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）是目前改善尊病胆碱能缺陷与症状的最成功的方法。ＡＣｈＥ抑制剂他克林是美国ＦＤＡ批准用于治疗阿尔茨海默型老年性痴呆的第一个药物，盐到ｄｏｎｅｐｅｚｉｌ最近刚获准上市，而ＳＤＺ－ＥＮＡ－７１３尚在审批中，目前已获得了有关ＡＣｈＥ抑制剂复合物晶体学结构方面的大量信息，计算机辅助分子模型设计正     

模拟高原梭曼中毒大鼠脑脂肪酸的变化

脑是梭曼攻击的重要靶器官,高原缺氧可导致脑水肿,二者对脑组织的复合效应尚不清楚。研究模拟高原缺氧条件下梭曼中毒大鼠脑组织游离脂肪酸（ＦＦＡ）浓度和脑含水量变化规律。方法：于低压氧仓内复制大鼠梭曼中毒模型,于冰上分离左右两脑半球,一侧脑组织取脑湿重,烘干后称取干重,计算脑含水量。另一侧脑组织制备匀浆,以生化法分别测定ＡＣｈＥ活性和ＦＦＡ。结果：高原缺氧条件下,０８和１０９ＬＤ５０梭曼中毒大鼠脑组织ＡＣｈＥ活性呈持续严重抑制,中毒后３０ｍｉｎ,两组动物脑ＡＣｈＥ活性分别为对照组的４０％和３０％。…     

抗人脑乙酰胆碱酯酶单克隆抗体

本文报道３个对人红细胞乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）无免疫交叉反应性的抗人脑ＡＣｈＥ单克隆抗体．用纯化的人脑ＡＣｈＥ抗原多次多途径免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ－Ａｇ１４小鼠骨髓瘤细胞融合，建立了３个分泌抗人脑ＡＣｈＥ单克隆抗体（均为ＩｇＭ）的杂交瘤细胞株（Ｂ１０，Ｈ１１，Ｅ１１），小鼠腹水抗体的滴度分别为１：９６０００．１：４８０００和１：２４０００．３个抗人脑ＡＣｈＥ单克隆抗体与天然电鳐电器官ＡＣｈＥ有明显的免疫交叉反应，而与人红细胞膜ＡＣｈＥ无免疫交叉反应．３个杂交瘤细胞株经３－６个月稳定传代后冻存于液氮中，一年后复苏，细胞生长良好，分泌抗体水平未见下降．     

离体大鼠膈肌标本上梭曼引起终板区持续性去极化的机理分析

在离休大鼠膈肌标本上，细胞内记录终板区微电泳给乙酰胆碱（ＡＣｈ）的电位，以ＡＣｈ电位幅度为突触后反应性指标，观察了梭曼中毒后间接串刺激产生终板区持续性去极化反应的性质并分析了其产生的机理。持续性去极化过程中不仅串终板电位消失，ＡＣｈ电位也消失，持续性去极化之后ＡＣｈ逐渐恢复。在正常大鼠和肉毒毒素Ａ中毒大鼠膈肌标本上，梭曼中毒后，串ＡＣｈ电位（５－１０Ｈｚ）也可诱发与持续性去极化性质相同的去极化反应，结果表明，持续性去极化主要是突触后Ｎ型ＡＣｈ受体对高浓度ＡＣｈ的一种反应，不支持突触前ＡＣｈ“再生性”释放的假说。     

抗电鳐乙酰胆碱酯酶单克隆抗体2E6的交叉免疫反应性^1

用乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）偶联的ＡＨ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ免疫亲和层析法提纯了抗丁氏双鳍电鳐ＡＣｈＥ单克隆抗体２Ｅ６（ＩｇＧ１）。用配基亲和层析法纯化了人脑，人红细胞，牛脑，牛红细胞，比目鱼肌肉及石纹电鳐电器官的ＡＣｈＥ。用酶抗原免疫测定法及固相免疫测定法观察了２Ｅ６与这些脊椎动物ＡＣｈＥ的交叉免疫反应性。结果显示２Ｅ６与石纹电鳐，人脑，牛脑及比目鱼肌肉ＡＣｈＥ有明显的交叉免疫反应性，说明２Ｅ６     

脊椎动物乙酰胆碱酯酶的多糖抗原决定簇及其抑制性单克隆抗体

抗丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）的抑制性单克隆抗体ＩＨ１１（ＩｇＭ），丁氏双鳍电鳐，石纹电线电器官，比目鱼肌肉，大鼠脑，牛脑，人脑，牛红细胞及人红细胞ＡＣｂＥ均以不同的亲和层析法提纯。用酶抗原免疫测定法及酶联免疫吸附测定法检测了１Ｈ１１与上述脊椎动物的ＡＣｈＥ的交叉免疫反应性．结果表明，１Ｈ１１可与石纹电绥，比目鱼肌肉，大鼠脑、牛脑及人脑ＡＣｈＥ有交叉免疫反应。显示了１Ｈ１１所针对的抗原决定簇在进化中的高度保守性。１Ｈ１１与人，牛红细胞ＡＣｈＥ及人丁酰胆碱酯酶（ＢＣｈＥ）无交叉免疫反应性。提示哺乳类脑ＡＣｈＥ与红细胞ＡＣｈＥ及人ＢＣｈＥ有不同的抗原决定簇。１Ｈ１１对电鳐及电鳗ＡＣｈＥ活性产生明显抑制。但对其它几个脊椎动物的ＡＣｈＥ活性无抑制．表明１Ｈ１１所针对的抗原决定簇在电鳐ＡＣｈＥ的三级结构中靠近其活性中心，而在其它脊椎动物的ＡＣｈＥ中刚远离其活性中心．ＡＣｈＥ阴离子部位抑制剂依酚氟铵不影响抗原抗体反应，表明１Ｈ１１不结合在阴离子部位。Ｎ－糖苷酶Ｆ处理使ＡＣｂＥ去糖基化后。１Ｈ１１不再能与ＡＣｈＥ结合，表明至少１Ｈ１１所识别的抗原决定簇的主要部分是Ｎ－多醣．抑制性单克隆抗体１Ｈ１１对脑ＡＣｈ?     

抗电鳐乙酰胆碱酯酶单克隆抗体2E6的交叉免疫反应性

用乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）偶联的ＡＨＳｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ免疫亲和层折法提纯了抗丁氏汉结电线ＡＣｈＥ单克隆抗体２Ｅ６（ＩｇＧ１）．用配基亲和层忻法纯化了人脑，人红细胞，牛脑．牛红细胞，比目鱼肌肉及石纹电线电器官的ＡＣｈＥ．用酶抗原免疫测定法及固相免疫测定法观察了２Ｅ６与这些脊椎动物ＡＣｈＥ的交叉免疫反应性．结果显示２Ｅ６与石纹电鳐，人脑．牛脑及比目鱼肌肉ＡＣｈＥ有明显的交叉免疫反应性．说明２Ｅ６针对的抗原决定簇在进化中高度保守．２Ｅ６与人和牛红细胞ＡＣｈＥ及人血清丁酰胆碱酯酶无交叉免疫反应性．２Ｅ６与电鳐ＡＣｈＥ结合后严重地抑制酶对硫代乙酰担碱的催化作用．但２Ｅ６对哺乳类ＡＣｈＥ无抑制作用．推测２Ｅ６针对的抗原决定簇在电鳐ＡＣｈＥ分子上靠近其活性中心．而在其它几个酶分子上则远离活性中心．     

抗还原并烷化的AChE单克隆抗体识别的抗原决定基

电器官还原并烷化的乙酰胆碱酯酶（ＲＡ－ＡＣｈＥ）的溴化氰裂解肽或又经胃蛋白酶切割的肽与抗ＲＡ－ＡＣｈＥ单克隆抗体Ｅ９、Ｆ６及Ｆ１２仍有抗原抗体反应。经溴化氰及胰蛋白酶割的肽与３者反应消失。氧化破坏ＲＡ－ＡＣｈＥ糖侧链、溴化氰裂解的ＲＡ－ＡＣｈＥ又经酶切除糖侧链后，与３者反应无变化。Ｅ９、Ｆ６及Ｆ１２所识别的抗原决定簇是多肽型，不是多糖型。     

急性有机磷中毒AChE活性及ACh含量变化的相关性

近年来，随着有机磷农药中毒病例增多，急性有机磷中毒ＡＣｈＥ活性及ＡＣｈ变化的相关性中毒起因和程度各异，临床上暴露出不少问题。一是ＡＣｈＥ活性恢复较慢与体征不符，在疗效观察、临床用药，治愈指标上难以量化参考；二是部份中毒患者对阿托品耐受量增加，在酶活性持续低下时易造成用药失控而中毒。为了探讨这些问题我们对不同程度ＤＤＶＰ中毒小鼠及中毒患者全血ＡＣｈＥ活性及ＡＣｈ含量以及两者间的相关化进行了初步观察。在急性中毒初始，ＡＣｈＥ活性抑制较灵敏。如小鼠１１２ＬＤ５０ＤＤＶＰ中毒１５ｍｉｎ后，ＡＣｈＥ活性抑…