凝固酶试验鉴定葡萄球菌的影响因素

目的 探讨玻片法和试管法检测凝固酶的影响因素。方法 标准方法操作,比较两种血浆（人血浆和兔血浆）及三种抗凝剂（ＥＤＴＡ－Ｎａ２,ＥＤＴＡ－Ｋ２,柠檬酸钠）对结果的影响。结果 使用柠檬酸钠和ＴＤＴＡ－Ｎａ２抗凝的兔血浆和人乐,８株金黄色葡萄球菌均产生葡萄球菌凝固酶和聚集因子,而其它２６株葡萄菌包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、腐生葡萄球菌和人葡萄球菌不产生葡萄球菌凝固酶和聚集因子。结论 柠杠酸钠和ＥＤ     

凝固酶阴性葡萄球菌的鉴定

应用葡萄球菌鉴定简化生化检索表,对224株凝固酶阴性葡葡球菌进行鉴定,有98.2％可鉴定到种。它们分属于表皮葡萄球茵等8个种,其中以表皮葡萄球茵最多,占73.7％。本文对系统鉴定中各种糖类分解的观察时间进行了分析,建议以连续观察7天较为适宜。     

血浆凝固酶阴性葡萄球菌快速"两步一补"鉴定方法

目的 研究血浆凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）的生化反应特性，建立一种血浆凝固酶阴性葡萄球菌快速“两步一补”鉴定方法。方法 对临床分离的CNS菌株，运用“两步一补”法进行鉴定，然后随机抽取一定量的菌株，经双盲法用法国梅里埃API Staph试条进行复核。结果 该方法4h内能鉴定出54．8％的CNS，24h能鉴定出96．3％的CNS，48小时内能鉴定出全部CNS。随机抽取的80株CNS经过API Staph试奈进行复核，符合率100％。结论“两步一补”法鉴定CNS具有快速简单、准确可靠及成本低廉等优点，更适合基层医院推广应用。     

抗凝剂对葡萄球菌血浆凝固酶鉴定影响

目的为了解不同抗凝剂、(单、混合)血浆、不同时间对血浆凝固酶的影响，分别对EDTA-K2、EDTA-Na2、肝素、草酸钾、枸橼酸钠抗凝单血浆和混合血浆，立即、12h、18h、24h、36h、48h、60h、72h、96h、120h、144h不同时间观察血浆凝固等特点对结果判定影响。方法玻片法。结果EDTA-K2、草酸钾抗凝单、混血浆在不同时间凝固趋于一致而不变且混合血浆高于单血浆的凝固特点；EDTA-Na2单血浆较灵敏，在96h内凝块优于混合血浆凝固特点，在90h，混合血浆优于单血浆。EDTA-Na2单血浆易形成假阳性。枸橼酸钠抗凝的单、混血浆与EDTA-Na单血浆反应类同，形成假阳性。肝素抗凝混合血浆比单血浆凝固时间短、形成凝块絮状厚实、致密，单血浆形成絮状细沙粒样，保存144h外易形成假阴性。     

临床常见血浆凝固酶阴性葡萄球菌一步法快速鉴定

目的:临床常见血浆凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)一步法快速鉴定.方法:105CNS菌株临床送检的各类标本根据生化反应和耐药性,设计了一种快速简便,结果可靠,适用于一般实验室的一步鉴定方法.结果:采用CNS快速鉴定法与ID32Staph鉴定结果比较,表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、腐生葡萄球菌较高,符合率91%,其他菌株符合率79%,总符合率85%.结论:一步快速鉴定方法,可将临床常见CNS属间和属内鉴定18～24小时内同时完成,效果满意.     

葡萄球菌血浆凝固酶试验方法的探讨

目的 解决葡萄球菌凝固酶试验假阳性的问题，提高其检测的敏感性和特异性。方法 以试管法为金标准，对玻片法进行不同血浆稀释度试验和方法的评价。结果 检测８５株葡萄球菌凝固酶。其中检出金黄色葡萄球菌１９株，溶血葡萄球菌４０株，表皮葡萄球菌１４株，其它葡萄球菌１２株，对于玻片法不同的血浆稀释度，检出的诊断敏感性和特异性各有不同。结论 玻片法血浆浓度是否合适直接影响血浆凝固酶试验的诊断效率。通过ＲＯＳＥ曲线     

凝固酶阴性葡萄球菌粘附因子的检测及其临床意义

凝固酶阴性葡萄球菌 (ＣＮＳ)在体外培养时 ,能产生一种粘附于管壁的粘液样物质 ,此生长物为非荚膜 ,松散地粘附于ＣＮＳ表面 ,称为细胞外粘物质 (ＥＳＳ)。ＥＳＳ能使ＣＮＳ包裹并受到保护 ,并能抵抗宿主的免疫防御作用 ,抑制和干扰正常的免疫应答 ,减弱或直接抑制抗生素的作用 ,对临床治疗具有指导意义。1　材料与方法1 .1　标本来源我院 2 0 0 0 -2 0 0 1年住院和门诊病人经培养确证为ＣＮＳ引起感染的菌株 1 52株。1 .2　试剂3 %阿辛蓝 :阿辛蓝 3 ｇ ,先用无水乙醇 1 0ｍｌ溶解 ,再加ＤＷ至 1 0 0ｍｌ即可。1 .3　培养基ＴＳＢ培养基 :…     

凝固酶阴性葡萄球菌医院感染的研究

目的 :防治凝固酶阴性葡萄球菌医院内感染。方法 :用经典生理生化鉴定方法 ,对各种临床标本分离到的96株凝固酶阴性葡萄球菌 (CNS)进行种的鉴定、药敏试验和葡萄球菌粘质的检测。结果 :分离到 7种CNS ,其中表皮葡萄球菌占 5 5 .2 % ,溶血葡萄球菌占 2 9.2 %。青霉素耐药率为 6 9.8% ,甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌占CNS的5 8.3 % ,产葡萄球菌粘质菌株占 84.4%。结论 :临床感染CNS中表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌占绝大多数。CNS对多种抗生素耐药 ,治疗其感染应以药敏结果为依据。可选用万古霉素、利福平、丁胺卡那霉素、环丙沙星等药物治疗。     

29例新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症临床分析

目的分析新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症临床特点、病原菌构成和耐药情况,指导临床诊断,合理使用抗生素。方法回顾性分析29例新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症的临床和实验室资料。结果新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症临床表现主要为发热、黄疸、惊厥和拒乳等,实验室检查无特异性,29株凝固酶阴性葡萄球菌中表皮葡萄球菌居首位,几乎全部对青霉素耐药,对红霉素、氨苄西林／舒巴坦、头孢唑啉、苯唑西林耐药率在80％以上,对万古霉素、利福平、左旋氧氟沙星、力奈唑烷和呋喃妥因高度敏感,尚未发现对万古霉素耐药。结论新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症临床特征缺乏特异性,仔细观察和及时血培养有助于早期正确诊断,并可根据血培养药敏结果,选用敏感抗生素,以减少细菌耐药性的产生。     

基因扩增和3种表型筛查法检测耐甲氧西林葡萄球菌的应用评价

目的比较4种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的阳性检出率、灵敏度和特异度,以便临床检测MRS时选择。方法用Vitek-32全自动细菌鉴定仪法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁纸片扩散法和mecA基因检测法分别检测175株葡萄球菌中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),经行×列表资料的χ2检验比较阳性检出率,并以mecA基因检测法为"金标准"计算其他3种方法的灵敏度和特异度。结果4种方法检出MRSA的阳性率无差别(χ2=1.640,P>0.05),但检测MRCNS的阳性率有差别(χ2=9.478,P<0.05),其中Vitek-32全自动细菌鉴定仪法和苯唑西林琼脂稀释法检出MRCNS的阳性率高于mecA基因检测法;3种表型检测法检测MRSA的灵敏度和特异度分别为100%、96.3%、96.3%和88.2%、100%、100%,检测MRCNS的灵敏度均为100%,特异度分别为50%、46.1%和65.4%。结论最终判定MRS时,要考虑到mecA基因和苯唑西林最低抑菌浓度两个因素,并区别对待mecA基因介导的MRS和非mecA基因介导的MRS。     

金黄色葡萄球菌DNA提取方法的研究

目的:建立一种简易的金黄色葡萄球菌DNA提取方法。方法:用4种不同的细菌DNA提取方法提取金黄色葡萄球菌DNA,用琼脂糖凝胶电泳及PCR检测提取物并比较结果。结果和结论:溶菌酶能有效的降解金黄色葡萄球菌细胞壁,且用溶菌酶破壁后提取的DNA适于PCR实验,本研究成功的得到一种简易的、改良的金黄色葡萄球菌DNA的提取方法。     

两种方法治疗成人远端锁骨骨折疗效分析

目的 :探讨治疗锁骨远端骨折的两种方法的优缺点。方法 :分析自 1998年至今 78例用锁骨钩钢板或克氏针张力带治疗锁骨远端骨折的疗效。结果 :两组在手术时间及手术出血两方面无显著性差异。在术后疼痛缓解及肩关节功能恢复上 ,术后 1周无显著性差异 ,术后 2、4、12周有显著性差异。结论 :锁骨钩钢板在治疗锁骨远端骨折时在疼痛缓解及肩关节外展功能恢复方面明显好于克氏针张力带。     

金黄色葡萄球菌的3种凝固酶鉴定方法研究比较

目的 评价3种鉴定金黄色葡萄球菌方法的敏感度和特异性.方法 临床分离的651株革兰阳性球菌,经革兰染色、触酶试验、VITEK2鉴定后,对试管法、玻片法、乳胶血凝法(slidexstaph-kit),鉴定葡萄球菌3种实验方法进行评价.3种实验方法结果不一致的菌株进行重复试验.用VITEK2作为“金标准”,比较其他3种凝固酶方法的敏感度、特异性、准确性.结果试管法1株菌鉴定假阳性;玻片法有8株菌鉴定假阳性,乳胶血凝法有株4假阳性.结论 试管法敏感度和特异性最好,其次是乳胶血凝法,玻片法的假阳性较高.     

多重聚合酶链反应用于检测、鉴定耐甲氧西林葡萄球菌的研究

目的 建立一种快速的多重聚合酶链反应(PCR)方法，用于检测葡萄球菌对甲氧西林的耐药性，同时对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的种进行鉴定。方法 对临床分离的武汉地区金黄色葡萄球菌80株。表皮葡萄球菌70株，其余凝固酶阴性葡萄球菌60株，提取其基因组DNA，针对金黄色葡萄球菌独有的femA基因，表皮葡萄球菌的种特异性序列，决定葡萄球菌对甲氧西林耐药性的mecA基因，和细菌共有的16srRNA基因的保守序列设计四对引物。同时加入PCR体系中对相应片段进行扩增。结果 在210株葡萄球菌中，mecA基因检测结果与苯唑西林敏感试验结果的一致率为96．2％。mecA基因阳性但苯唑西林敏感的5个菌株，通过由低到高浓度的苯唑西林筛选培养后。均表现出耐药性。mecA基因阴性但苯唑西林耐药的3个菌株，经过对阿莫西林-克拉维酸敏感性试验后，被证明是β-内酰胺酶的高产株。结论 此多重PCR方法不仅可以对临床分离葡萄球菌菌株的甲氧西林耐药性作出判断。同时还可以对金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌做出种的鉴定，是一种高效、敏感、特异性高的检测技术。     

三种精子染色法的染色效果比较

目的评价一种新的精子染色方法BASO（改良Diff-Quik）法在精子顶体检测中的应用。方法收集60例不育症男性精液,用BASO法、改良巴氏法和瑞姬氏混合染色法,同时进行染色,比较其固定和染色时间均数,并分析其精子顶体不完整率检测的差异。结果BASO法固定和染色约需7min,明显短于改良巴氏法和瑞姬氏混合染色法,而精子顶体不完整率检测的差异无显著性。结论BASO法操作步骤简单省时,可用于临床精子标本的染色,分析精子形态及精子顶体完整性。     

食（饮）具大肠菌群两种检测方法比较

目的对食（饮）具消毒卫生标准GB14934—94细菌指标大肠菌群检测方法——纸片法和发酵法的检验方法进行比较。方法用大肠杆菌标准菌株（ATCC25922）对两种检验方法进行实验。结果在菌量很小的情况下,大胃肠菌群发酵法阳性率与大肠菌群纸片法阳性率结果相差甚远。结论两种方法检测大肠菌群,当菌量〈1cfu／mL时结果有明显差异。     

葡萄球菌属诱导型克林霉素耐药及基因型分析

目的测定葡萄球菌属对红霉素及克林霉素的耐药性,分析红霉素诱导克林霉素耐药的发生率以及耐药基因的类型。方法用K-B法检测葡萄球菌属对红霉素及克林霉素的耐药性,依据CLSI2011年推荐的D试验方法,测定红霉素对克林霉素的诱导耐药表型,并采用聚合酶链反应PCR技术检测耐药基因型。结果2009~2011年红霉素和克林霉素同时耐药（cMLSB）菌株占葡萄球菌的比例分别是48.9%、52.0%、61.2%,随着时间的增长有升高的趋势。而D试验阳性（iMLSB）菌株占所检测葡萄球菌属的比例随着时间的增长有下降的趋势,分别是19.6%、18.5%、11.9%。这两种趋势在金黄色葡萄球中表现尤为明显。D试验阳性（iMLSB）菌株在对红霉素耐药而克林霉素敏感的葡萄球菌株所占的比例在三个不同时间段分别是58.2%、56.6%、56.5%。耐药基因分析表明：红霉素核糖体甲基化酶基因ermC是诱导耐药的主要基因。结论临床微生物实验室应开展D试验,检测葡萄球菌属中红霉素对克林霉素的诱导耐药,指导临床医生更合理使用抗菌药物。