高脂肥胖大鼠血清瘦素,胰岛素及下丘脑细胞因子信号转导抑制因子-3基因表达的研究

目的观察高脂饮食肥胖大鼠血清瘦素,胰岛素水平及下丘脑细胞因子信号转导抑制因子-3基因(suppressors-of-cytokine-signaling 3,SOCS-3)表达变化及其关系,探讨高脂饮食肥胖大鼠引发瘦素抵抗及胰岛素抵抗的发生机制。方法以高脂饮食制备幼年雄性肥胖大鼠模型,采用放射免疫法检测各组大鼠血清瘦素、胰岛素及C肽浓度,葡萄糖氧化酶法检测血清葡萄糖水平,利用RT-PCR技术检测各组大鼠下丘脑SOCS-3基因表达水平。结果 (1)高脂饮食诱导的肥胖组大鼠体重明显高于对照组;(2)肥胖组大鼠血清瘦素、胰岛素,血糖及C肽水平明显升高,与对照组比较均有显著性差异;(3)肥胖组大鼠下丘脑SOCS-3的mRNA水平明显高于对照组;(4)肥胖组大鼠下丘脑内SOCS-3 mRNA水平分别与血清瘦素、胰岛素含量呈显著正相关。结论高脂饮食诱导的肥胖大鼠可出现瘦素抵抗和胰岛素抵抗以及SOCS-3基因表达上调。SOCS-3基因表达上调使瘦素及胰岛素受体后JAK-STAT信号转导通路抑制,可能参与了瘦素及胰岛素抵抗的发生机制。     

SOCS-3抑制对膳食诱导肥胖大鼠脂肪细胞PPARγ及aP2表达的影响

目的通过对膳食诱导肥胖大鼠脂肪细胞SOCS-3进行抑制,探讨是否可以恢复瘦素的抗脂肪合成作用。方法采用SOCS-3小发夹RNA（shRNA）慢病毒,感染瘦素抵抗肥胖大鼠成脂诱导分化后的脂肪细胞,检测SOCS-3的抑制效果。再采用50 nmol/L瘦素处理6 h,观察脂肪合成相关基因（PPARγ及aP2）mRNA表达的变化。结果 SOCS-3 shRNA慢病毒可有效抑制脂肪细胞SOCS-3 mRNA的表达,抑制率达50%。50 nmol/L瘦素处理6 h后,感染SOCS-3 shRNA慢病毒组PPARγ及aP2 mRNA的表达显著降低（P〈0.01）,空白对照组和感染阴性对照病毒组的表达无明显变化（P〉0.05）。结论通过抑制膳食诱导肥胖大鼠的脂肪细胞SOCS-3,在一定程度上可以解除脂肪细胞的瘦素抵抗。     

大鼠重组瘦素对成熟脂肪细胞细胞因子信号转导抑制因子3表达的影响

目的模拟肥胖者体内高瘦素环境,探讨瘦素处理脂肪细胞细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)mRNA及蛋白表达变化。方法分离SD雄性大鼠附睾成熟脂肪细胞,RT-PCR法检测瘦素长型受体(OB-Rb)mRNA表达,并采用0.5～500nmol/L重组大鼠瘦素处理分离的成熟脂肪细胞0、0.5、2和6h,RT-PCR法检测SOCS-3 mRNA表达。免疫沉淀及Western blot检测SOCS-3蛋白表达。结果成熟脂肪细胞可表达少量的OB-Rb;未经瘦素处理的脂肪细胞SOCS-3 mRNA和蛋白只有少量表达,瘦素浓度0.5nmol/L时SOCS-3表达无明显变化,当瘦素浓度在5、50及500nmol/L时,SOCS-3表达量随时间延长而增加。结论瘦素可对脂肪细胞产生直接作用,并且可以诱导SOCS-3的表达增加。     

高脂喂养肥胖大鼠下丘脑及肝脏内细胞因子信号转导抑制物-3 mRNA表达的研究

目的瘦素抵抗被认为是儿童肥胖症的主要发病机制。细胞因子信号转导抑制物-3（suppressors—of—cytokine—signaling3，SOCS3）作为瘦素受体后Janus蛋白激酶一信号转导及转录激活蛋白（JAK—STAT）信号传导通路的主要负性调节因子，可能参与瘦素抵抗的发生。本研究从瘦素受体基因表达和瘦素受体后Janus蛋白激酶-信号转录及转录激活蛋白传导通路水平，研究瘦素抵抗的可能发生机制。方法以高脂饮食制备幼年、雄性肥胖大鼠模型，利用半定量RT—PCR法检测肥胖大鼠下丘脑及肝脏组织内中细胞因子信号转导抑制物-3mRNA、瘦素长型受体（OB—Rb）mRNA表达的改变，探讨细胞因子信号转导抑制物-3mRNA表达与高瘦素血症及与瘦素长型受体mRNA表达的关系。结果与对照组相比，肥胖大鼠下丘脑及肝脏内，细胞因子信号转导抑制物-3表达升高（P〈0.01），并与血清瘦素水平呈正相关（r＝0.666，r＝0．790，P〈0．01）。肥胖组大鼠下丘脑及肝脏内，细胞因子信号转导抑制物-3mRNA（相对灰度值）与瘦素长型受体mRNA水平呈显著负相关（r=-0．526，r=-0.585，P〈0.05）。结论肥胖大鼠中枢及外周组织的细胞因子信号转导抑制物-3表达上调，使瘦素受体后JAK—STAT信号转导通路抑制，可能参与了瘦素抵抗的发生机制。     

饮食诱导肥胖大鼠脂肪细胞对瘦素反应影响

瘦素具有促进脂肪分解、调节体重作用,但许多肥胖者血清瘦素水平增高,说明存在瘦素抵抗.细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokinesignaling-3,SOCS-3)可由瘦素诱导产生,而SOCS-3又可抑制瘦素信号通路.     

高脂饮食大鼠脂肪组织SOCS-3及FAS表达

目的研究高脂饮食诱导产生的肥胖及肥胖抵抗大鼠脂肪组织细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)及脂肪酸合成酶(FAS)的mRNA表达情况。方法Wistar雄性大鼠31只,其中7只喂饲普通基础饲料作为对照组;24只喂饲高脂饲料,第8周末,按体重增量从高脂饲料组筛选出5只大鼠作为肥胖组,5只大鼠作为肥胖抵抗组。测定血清甘油三酯和总胆固醇,检测附睾脂肪组织SOCS-3及FAS的mRNA表达。结果肥胖组大鼠血清甘油三酯及总胆固醇水平分别为(0.982±0.228),(2.213±0.364)mmol/L,均显著高于对照组大鼠的(0.717±0.153),(1.784±0.175)mmol/L(P<0.05),总胆固醇水平也显著高于肥胖抵抗组的(1.711±0.190)mmol/L(P<0.05);肥胖组大鼠的SOCS-3及FASmRNA表达水平均显著高于对照组和肥胖抵抗组(P<0.05)。结论高脂饮食诱导产生的肥胖和肥胖抵抗大鼠在基因表达调控上可能存在差异,肥胖大鼠的生脂能力增强并可能存在瘦素信号转导通路的抑制。     

毒鼠强中毒鼠肝细胞因子信号转导抑制因子-3和肿瘤坏死因子-α的表达

为探讨细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达在毒鼠强中毒(TEMP)致多器官功能衰竭(MODS)中的作用,将30只健康雄性BALB/c小鼠随机分成TEMP模型组(n=10)、生理盐水对照组(n=10)、正常对照组(n=10),分别于中毒后2、6、12、24 h取小鼠的肝脏,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肝组织SOCS-3和TNF-αmRNA表达水平。结果显示,中毒后2、6、12和24 h肝组织中SOCS-3 mRNA表达量均明显高于对照组(P均<0.05),24 h达到峰值。TNF-αmRNA表达量均明显高于对照组(P均<0.05),12 h达峰值。相关分析显示,肝脏中SOCS-3 mRNA与TNF-αmRNA表达存在明显的正相关性(y=0.091+0.747x,r=0.912,F=261.2,P<0.01)。提示不同时间点TEM中毒小鼠肝脏中SOCS-3、TNF-αmRNA均升高且表达趋势一致。     

幼年肥胖大鼠血管内皮细胞功能障碍与炎症因子的关系

【目的】探讨高脂饮食诱导的肥胖大鼠血管内皮细胞功能障碍与炎症因子的关系。【方法】18只三周龄断乳期雄性SD大鼠随机分为高脂饲料喂养的肥胖组和普通饲料喂养的对照组,高脂组10只,对照组8只,共喂养12周,然后处死全部大鼠,测定lee指数;脂肪湿重;空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG);血脂指标:总胆固醇(totalcholesterol,TC)、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)、高密度脂蛋白(high densitylipoprotein,HDL);血管内皮因子:血清一氧化氮(nitric oxide,NO);C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)及IL-6。【结果】肥胖组大鼠lee指数、脂肪湿重、CRP、IL-6、TG及FPG高于对照组(P<0.05或<0.01),而NO和HDL明显低于对照组(P<0.01),直线相关分析显示CRP和IL-6与NO呈负相关(P<0.05)。【结论】肥胖大鼠存在血管内皮功能损伤及糖脂代谢紊乱,脂肪细胞分泌的CRP、IL-6等炎症因子在肥胖发病过程中...     

营养性幼年肥胖雌性大鼠模型的建立

[目的]模拟营养性肥胖儿童的饮食特点,建立一种适合儿童肥胖研究的幼年大鼠营养性肥胖模型。[方法]将30只SD雌性刚离乳大鼠按体重随机分成模型组和对照组,模型组给予改良的高酯饲料喂养,对照组给予普通饲料喂养,8周后测定两组组大鼠的体重、体长和血清瘦素指标。[结果]8周后模型组的体重为和血清瘦素水平分别为(276±15.59)g,(3.60±0.49)μg/L,对照组的体重和血清瘦素水平分别为(252±19.93)g,(3.20±0.36)μg/L,经统计学检验模型组的均高于对照组(P均﹤0.05);而两组的体长差异无统计学意义(P﹥0.05)。[结论]改良的高脂饲料配方组成较为合理,致肥率为50%,致肥效果较好。     

幼年雌性SD大鼠营养性肥胖模型的建立

目的建立一种适合儿童肥胖研究的幼年大鼠营养性肥胖模型。方法45只刚离乳SD雌性大鼠按区组随机分为对照组、肥胖A组与B组,A组在给予普通饲料的基础上添加由黄豆芽、奶粉、猪油、鸡蛋、鱼肝油组成的高能量饲料,B组自由进食合成高脂饲料,喂养45 d后观察三组大鼠体重、Lee’s指数、腹腔内脂肪重量及其重量系数、肝脏体比、血脂、血糖、胰岛素、瘦素等肥胖相关指标。结果肥胖A组摄入的总能量及蛋白、脂肪量明显高于其他两组,A组体重4周末就明显高于对照组,6周末显著高于B组;A组的Lee’s指数、腹腔内脂肪重量及其重量系数、肝脏体比也明显高于其他两组,A组的肥胖率高于B组;但血脂、血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数三组间无显著差异,血瘦素水平A组明显高于对照组与B组,且与体重呈正相关。结论自由进食普通饲料的基础上,每天15 g/只的高能量饲料的喂饲方式可诱导幼年雌性SD大鼠营养性肥胖模型。     

急性肝衰竭大鼠肝组织SOCS表达及意义

目的研究急性肝功能衰竭(acute liver failur,ALF)大鼠肝组织细胞因子信号转导抑制因子(SOCSs)基因表达的动态变化及意义。方法腹腔注射D-胺基半乳糖(D-GalN)、脂多糖(LPS)建立急性肝衰竭大鼠模型,D-GalN和LPS剂量分别为800 mg/kg和8μg/只,分别在注射D-GalN、LPS后2,6,12,24,48 h 5个时间点留取大鼠血及肝脏标本。观察大鼠肝功能及肝脏病理变化;逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测动物肝组织中SOCS-1和SOCS-3mRNA表达;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果肝衰竭大鼠肝组织SOCS-1和SOCS-3mRNA表达均明显上调,在造模后2 h即明显高于对照组,分别于6,12 h达高峰值。血清TNF-α、IL-6产生均显著增多(P<0.01),均于造模后6 h达峰值。结论急性肝功能衰竭可诱导体内SOCSs表达上调,其改变与TNF-α、IL-6水平的改变密切相关,提示其可能参与急性肝功能衰竭时炎症反应平衡的调节过程。     

瘦素抵抗肥胖大鼠脂肪组织SOCS-3、PPARγ及ACO mRNA水平的探讨

目的观察高脂饮食诱导的肥胖瘦素抵抗大鼠细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及乙酰辅酶A氧化酶(ACO)mRNA表达水平的变化。方法30只Wistar雄性大鼠,6只为对照组喂饲基础饲料,24只为高脂组喂饲高脂饲料,第8周末按体重增量从高脂组中筛选出8只大鼠作为肥胖组,测定对照组和肥胖组大鼠血清瘦素,附睾脂肪组织中SOCS-3,PPARγ以及ACO mRNA表达。结果肥胖组大鼠体重以及血清瘦素水平均显著高于对照组(P<0.05);肥胖组脂肪组织SOCS-3、PPARγ mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),而ACO mRNA则显著低于对照组(P<0.05)。结论高脂饮食诱导的肥胖大鼠存在瘦素信号转导通路的抑制,脂肪酸氧化能力降低,脂肪合成能力增强。     

营养性肥胖对大鼠睾丸发育的影响

目的用高脂高热量饲料配方建立营养性肥胖大鼠动物模型,观察营养性肥胖对雄性大鼠睾丸发育的影响。方法用改进的高脂、高热量饲料喂养3周龄SD雄性大鼠6周,观察大鼠体重、睾丸重量、光镜下睾丸组织结构改变,以及血中睾酮(T)和雌二醇(E2)水平,并与对照组进行比较。结果喂养3周后,实验组大鼠平均体重较对照组超重29%,6周后超重30%。光学显微镜下可见实验组大鼠睾丸大部分曲精小管发育欠佳,管腔中4层细胞稀疏,层次紊乱;实验组E2明显高于对照组,TE2明显低于对照组(P<0.05)。结论高脂、高热量饮食可以引起大鼠营养性肥胖;营养性肥胖影响了大鼠的睾丸发育,可能和血中雄性激素水平相对降低有关。     

矢车菊素-3-葡萄糖苷对肥胖大鼠低度炎症反应及胰岛素敏感性的影响

目的 观察矢车菊素-3-葡萄糖苷(cyanidin-3-glucoside, C3G)对肥胖大鼠血清炎症因子(TNF-α、IL-6和MCP-1)及胰岛素敏感性的影响。方法 3周龄雄性SD大鼠30只, 随机分为对照组(n=8)和高脂饮食组(n=22), 分别予以普通饲料及高脂饲料喂养5周。肥胖造模成功的17只大鼠再随机分为肥胖组(n=8)和C3G组(n=9)。C3G组予C3G 100 mg/(kg·d)灌胃, 其余组予等量生理盐水灌胃。实验结束时准确称量大鼠体重及内脏脂肪质量, 全自动生化分析仪测定空腹血糖(fasting glucose, FPG), 放免法测血清胰岛素(fasting insulin, FINS), ELISA测血清脂联素及TNF-α、IL-6、MCP-1水平, 并计算内脏脂肪比和胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index, IAI)。结果 肥胖组和C3G组大鼠体重、内脏脂肪比和血清TNF-α、IL-6、MCP-1水平明显高于对照组(P均<0.05), 而C3G组上述指标明显低于肥胖组(P均<0.05)。肥胖组和C3G组血清脂联素水平及IAI明显低于对照组(P均<0.05), 而C3G组上述指标明显高于肥胖组上述指标。结论 C3G能明显增加肥胖大鼠的胰岛素敏感性, 其可能与增加血清脂联素水平及降低血清炎症因子(TNF-α、IL-6、MCP-1)水平有关。     

Effects of eicosapentaenoic acid on hepatic dyslipidemia and oxidative stress in high fat diet-induced steatosis

Abstract

We investigated the ability of eicosapentaenoic acid (EPA) to prevent high-fat diet (HFD)-induced obesity and non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). Male C57BL/6J mice were fed standard chow (5.3% fat content), an HFD (32.0% fat content) or an HFD?+?EPA (1?g/kg/day EPA for the last 6 weeks) for 12 weeks. Serum total cholesterol, hepatic triglyceride and total cholesterol levels were significantly increased in the HFD group, in comparison with those of normal mice (p?<?0.01). In contrast, hepatic triglyceride and total cholesterol levels were significantly decreased in the HFD?+?EPA group, in comparison with those of the HFD group (p?<?0.05). In addition, EPA decreased the body weight of obese mice and improved hepatic function. Hepatic superoxide dismutase activity and glutathione levels were significantly decreased in obese mice, but increased with EPA administration. Our data suggest that EPA supplementation has a beneficial effect on NAFLD progression.     

大豆异黄酮对高脂去卵巢大鼠肝脏脂质的影响

目的　观察大豆异黄酮 (SI)对进食高脂饲料的去卵巢大鼠脂质和肝组织过氧化状态的影响。方法　 50只SD大鼠随机分为 5组 ,分别接受假手术 +基础饲料 ;去卵巢 +高脂饲料 ;去卵巢 +高脂饲料 +SI 3个剂量组 2 0 ,60 ,180mg/ (kg·bw·d)处理 ,实验期 8周。 结果　与模型组比较 ,SI可显著抑制高脂饲料所致的去卵巢大鼠肝脏和血清甘油三酯水平升高 (P <0 .0 5) ,但对肝脏总胆固醇变化无影响 (P >0 0 5)。与假手术组和模型组比较 ,SI降低肝脏MDA含量均有显著性差异 (P <0 0 1)。结论　SI对去卵巢大鼠肝脏高甘油三酯有降低作用 ,并能改善高脂饮食所致的肝脏过氧化状态异常 ,减轻对机体的过氧化损伤     

MCHR1基因沉默对3T3-L1细胞诱导分化的影响

摘要:目的　运用RNA干扰技术沉默黑色素浓集激素受体1（Melanin-Concentrating Hormone Receptor 1,MCHR1）基因的表达,观察其对3T3-L1细胞诱导分化的影响,为肥胖症的基因治疗提供新思路。方法　用含绿色荧光蛋白的重组载体sh-MCHR1,通过脂质体法转染3T3-L1细胞。细胞诱导分化的同时用黑色素浓集激素（Melanin-Concentrating Hormone,MCH）干预,并在不同时点对脂滴进行油红O染色。采用RT-PCR以及Western blot分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（Peroxisome Proliferator-Activated Receptor γ,PPAR γ）、CCAAT/增强子结合蛋白-α（CCAAT/ Enhancer-Binding Protein α,C/EBPα）和脂肪酸结合蛋白2（adipocyte protein 2,ap2）mRNA和蛋白的表达。结果　重组载体sh-MCHR1成功转染;与阴性转染组相比,sh-MCHR1转染组d 10后,油红O 染液相对OD510值显著下降（P＜0.05）;PPARγ、C/EBPα和ap2 mRNA的表达量分别在d 6、d 8和d 8后显著下降（P＜0.05）;3者蛋白的表达量均在d 8后显著下降（P＜0.05）。结论　shRNA沉默MCHR1基因可减缓3T3-L1细胞诱导分化,其可能通过抑制PPARγ、C/EBPα和ap2的表达而实现。