溴虫腈对小鼠脾细胞和肝细胞DNA损伤作用

目的　探讨溴虫腈对小鼠脾细胞和肝细胞DNA的损伤作用。方法　将溴虫腈按 4 9,9 8及 19 6mg/kg 3个不同剂量 ,一次性灌胃染毒小鼠 ,2 4h后用单细胞凝胶电泳技术检测小鼠脾、肝细胞的拖尾率和DNA迁移距离。结果　脾细胞 3个剂量组拖尾细胞率和DNA迁移距离分别是对照组的 4 8～ 17 6倍 (P <0 0 0 1)和 1 6～ 2 9倍(P <0 0 5～ 0 0 1) ;肝细胞 3个剂量组的拖尾细胞率和DNA迁移距离分别是对照组的 7 5～ 10 4倍 (P <0 0 0 1)和2 0～ 2 8倍 (P <0 0 1～ 0 0 0 1) ;且表现出明显的剂量效应关系 (3者的r值依次分别为 0 995,0 9987和 0 9999,P <0 0 5) ;在相同剂量下 ,肝细胞拖尾细胞率比脾细胞均明显增高 (P <0 0 1) ;在 4 9mg/kg剂量水平 ,肝细胞的DNA迁移距离比脾细胞的DNA迁移距离也明显增高 (P <0 0 5) ;而在 9 8和 19 6mg/kg剂量水平 ,2种细胞的DNA迁移距离无显著性差异 (P >0 0 5)。结论　溴虫腈能引起小鼠脾脏和肝脏细胞DNA的损伤 ,且对肝细胞DNA损伤更严重     

甲醛吸入染毒对小鼠DNA损伤的影响

目的探讨甲醛吸入染毒对小鼠脾、肝、肺和肾组织细胞DNA的损伤作用。方法将40只健康昆明种小鼠随机分为5组,混合物静式吸入染毒,用不同剂量(0.0、0.75、1.5、3.0、6.0mg/m3)的甲醛染毒小鼠2周,第15天处理动物后,取脾、肝、肺、肾组织制成细胞悬液,用单细胞凝胶电泳实验观察其细胞DNA损伤水平。结果染毒后小鼠脾、肝、肺、肾组织细胞DNA出现损伤,且损伤程度与染毒剂量具有一定相关性。与空白对照组比较,3种组织细胞各剂量组细胞DNA拖尾率和彗星尾长均显著增加;随着甲醛染毒浓度的升高,脾、肝、肺和肾细胞拖尾率和彗星尾长增加。结论甲醛可引起小鼠的脾、肝、肺、肾组织细胞DNA损伤。     

溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA的损伤作用

[目的]探讨农药溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA是否有损伤作用及3种器官对溴虫腈的敏感性差异。[方法]溴虫腈按4.9、9.8、19.6mg/kg体重3个剂量,一次性灌胃染毒雄性小鼠,2 4h后用彗星试验检测3种脏器的彗星细胞率和彗星尾长。[结果]各剂量组的彗星细胞率和彗星尾长都显著增加(P <0 .0 5～P <0 .0 0 1) ;脾、肝、肾3种细胞的彗星细胞率及彗星尾长均具有剂量 反应或剂量 效应关系(前者r值依次为0 .9948,0 .9993 ,0 .9890 ,后者r值依次为0 .9999,0 .9999,0 .9898,P值均<0 .0 5 )。比较同剂量组不同器官之间的彗星细胞率,3个剂量组中均为肾细胞>肝细胞>脾细胞(P <0 .0 5～P <0 .0 1) ;比较同剂量组不同器官之间的彗星尾长,3个剂量组均为肾细胞>肝细胞>脾细胞(P<0 0 5 ) ,肝、脾细胞间差异无显著性。[结论]溴虫腈可诱发小鼠脾、肝、肾细胞DNA断裂损伤,肾细胞对溴虫腈致DNA断裂作用最为敏感。     

乙醇醛对小鼠脾淋巴细胞DNA损伤作用的研究

目的　观察乙醇醛对DNA的损伤作用。方法　采用单细胞凝胶电泳 (SCGE)技术检测不同浓度乙醇醛对小鼠脾淋巴细胞DNA的损伤程度。结果　当乙醇醛浓度为 0 0 1mmol L时即能引起脾淋巴细胞DNA链断裂损伤 ,DNA损伤率为 8% ,DNA平均迁移距离为 ( 14 32± 2 84 ) μm。随着乙醇醛浓度的升高DNA损伤率和DNA平均迁移距离均以浓度依赖方式增加。结论　乙醇醛可引起细胞DNA损伤     

用彗星试验检测苯并(a)芘致小鼠体细胞DNA的损伤

[目的]建立彗星试验检测苯并（a）芘腹腔染毒小鼠体细胞DNA损伤的方法。[方法]雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组和高、中、低剂量3个染毒组，每组4只。3个染毒组和溶剂对照组分别腹腔注射二甲基亚砜（0．01ml／g体重）和苯并（a）芘（250、125、62．50mg／g体重）。染毒3h后，处死小鼠，取出肝、肾和小肠组织制备单细胞悬液用于彗星试验。IMI彗星分析软件分析彗星尾距（oliver tail moment，TM）评价细胞DNA损伤的程度。[结果]高剂量组小鼠肝、肾和小肠细胞的彗星尾距值均增加，中、高剂量组小肠细胞的彗星尾距值均是溶剂对照组的5．22倍（P〈0．05）；中、高剂量组小鼠肾细胞的尾距值分别是溶剂对照组的8．27和7．16倍（P〈0．05）。高剂量组肝细胞的彗星尾距值是溶剂对照组的3．99倍。低剂量组仅小肠细胞的彗星尾距均值（1．285μm）增加（P〈0．05）。[结论]彗星试验可检测苯并（a）芘腹腔染毒小鼠肝、肾和小肠细胞的DNA损伤。     

氟对小鼠睾丸细胞DNA损伤与修复的研究

目的 :探讨氟的生殖遗传毒性。方法 :应用单细胞凝胶电泳试验 (SCGE)研究了氟化钠对离体小鼠睾丸细胞的DNA损伤与修复效应。结果 :氟化钠在 (0 .6 2～ 5 ) mm ol/ L 之间可引起小鼠睾丸细胞 DNA单链断裂 ,出现拖尾的彗星细胞。无论是拖尾细胞百分率 ,还是 DNA迁移长度都随氟化钠浓度的增加而增加 ,表现出明显的计量反应关系。此外 ,氟化钠所致的睾丸细胞 DNA损伤基本在 2 h内完全修复。结论 :在一定浓度下 ,氟化钠可引起离体小鼠睾丸细胞的 DNA损伤 ,可能是一种潜在的雄性生殖毒物。     

亚砷酸钠致脏器细胞DNA链断裂的实验研究

目的：观察不同剂量亚砷酸钠（NaAsO2）在不同时相引小鼠体内细胞DNA链断裂损伤的影响。方法：采用单细胞凝胶电泳法（SCGE）分别测定ICR小鼠皮下注射NaAsO20.4,2,10mg/kg后１,3,6h的脾脏、胸腺、骨髓和肝细胞的DNA链断裂损伤。结果：不同剂量亚砷酸钠注射后，可以发现２和10mg/kg NaAsO2可诱发脾细胞、胸腺细胞、骨髓细胞DNA断裂，各组出现的彗星细胞百分比明显高于对照组，同时DNA迁移距离也较对照组明显增大；而在染毒后不同时相观察的结果表明，NaAsO2诱发脾细胞出现DNA链断裂损伤在1h最为明显，而胸腺细胞和骨髓细胞相对较晚，DNA链断裂损伤高峰出现在染毒3h；染毒６h，各种组织细胞的DNA链断裂损伤开始减少，逐渐趋于正常。各剂量组及时间点均未观察到亚砷酸钠有诱导肝细胞DNA链断裂损伤作用。结论：2mg/kg和10mg/kgNaAsO2可诱发小鼠体内脾、胸腺和骨髓细胞的DNA链断裂损伤，但不同细胞对NaAsO2作用的反应性不完全一致。     

单细胞凝胶电泳法检测二硫化碳染毒小鼠精子DNA损伤

目的　用碱性单细胞凝胶电泳技术检测CS2 染毒小鼠精子DNA损伤 ,研究CS2 的遗传毒性。方法　用单细胞凝胶电泳法 ,以DNA断裂分级及DNA彗星尾长和尾矩来评价CS2 对精子DNA的损伤。结果　CS2 染毒剂量组均出现DNA彗星的拖尾率增加 (分别为 6 7.14 %、84 .2 9%和 91.0 0 % )、损伤强度指数增高 (分别为 5 0 7、6 5 6和 74 5 )、DNA头部百分比减少 (分别为 84 .5 5 %、73.84 %和5 5 .71% )、彗星尾长 (分别为 5 .87、8.81、13.4 9μm)及尾矩 (分别为 1.30、1.6 3、2 .6 6 μm)增加 ,与阴性对照组比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　单细胞凝胶电泳能够快速、敏感地检测CS2 染毒小鼠精子DNA损伤 ,该方法可用于环境致癌物和致突变物的检测。     

甲基叔丁基醚致DNA损伤的体内和体外研究

目的 探讨甲基叔丁基醚（MTBE）对动物致癌的机制.方法 小鼠经呼吸道染毒MTBE 20 d后,取肝、肾、肺细胞进行单细胞凝胶电泳（SCGE）、DNA交联试验及肺和肾组织中丙二醛（MDA）含量测定.对体外培养的大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞进行SCGE、DNA交联试验和程序外DNA合成试验（LDS）.结果 MTBE 1 440、4 968 mg/m^3组染毒小鼠肝细胞、各剂量组肾细胞、4 968 mg/m^3组肺细胞DNA迁移距离均大于阴性对照组;肝细胞DNA迁移距离与MTBE浓度有剂量-反应关系（r=0.997,P=0.003）.MTBE1 440、4 968 mg/m^3组雌性小鼠及4 968 mg/m3组雄性小鼠肾MDA含量高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.MTBE浓度＞0.050mmol/L时,大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞DNA迁移距离较阴性对照组增加,差异有统计学意义（P＜0.05）,且DNA迁移距离与MTBE浓度有剂量-反应关系（r肺=0.967,T肝=0.963,均P＜0.05）;5.0、10.0 mmol/L MTBE组大鼠肺Ⅱ型细胞、肝细胞的3H-TrR掺入量每分钟脉冲数（CPM）均高于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;各剂量组小鼠肝细胞、大鼠肺Ⅱ型细胞和肝细胞的DNA交联率与阴性对照组的差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 MTBE对DNA有损伤作用,细胞DNA断裂和脂质过氧化是其引起动物肝、肾肿瘤的可能机制之一.     

二氯乙烷对小鼠DNA损伤的器官特异性及时效关系研究

为了研究 1,2 二氯乙烷 (DCE)的遗传毒性、探测其致癌的靶器官 ,应用组织匀浆提取细胞核进行彗星试验 ,检测了DCE灌胃染毒 3、8、2 4h后对小鼠肝、肺、肾、脾、骨髓、睾丸、胃、肠、膀胱和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用及修复动力学改变。实验结果 :1)DCE在小鼠体内遗传毒性的靶器官是肝、肺、肾、骨髓、结肠及胃粘膜细胞和外周血淋巴细胞 ;2 )DNA损伤和修复的动力学改变在器官间存在较大的差异 ,DNA损伤明显且修复较慢的器官或组织 (肺、胃和血液系统 )与其致癌的靶器官有较好的一致性。提示 :体内多器官的彗星试验对确定体内遗传毒性和预测致癌的靶器官是非常有用的 ;对暴露DCE的生物和人群 ,外周血淋巴细胞在彗星试验的拖尾 ,可作为体内DNA损伤效应的生物标志。     

八氯二丙醚吸入染毒对小鼠DNA的损伤作用

目的　研究八氯二丙醚吸入染毒对小鼠外周血细胞和肝、脾、肺细胞DNA的损伤作用 ,了解其损伤的可能靶部位。方法　用八氯二丙醚对小鼠进行静式吸入染毒 ,采用微量血单细胞凝胶电泳技术(SCGE) ,检测不同染毒浓度 (2 82 ,5 6 4 ,112 8mg/m3 )及不同染毒时间 (每天 1h ,连续染毒 3,6 ,9,12 ,15d)八氯二丙醚对小鼠外周血细胞的DNA的损伤情况。结果　染毒后小鼠血细胞DNA出现了明显损伤 ,表现为第 3天时DNA损伤程度最高 ,随后第 6天、 9天、 12天、 15天损伤降低并趋于稳定。肝、肺及脾细胞DNA亦出现了明显损伤 ,且存在明显的剂量 -反应关系 (P <0 0 5 ) ,其中以肺细胞DNA损伤程度最重。结论　八氯二丙醚吸入染毒可引起小鼠外周血细胞及肝、脾、肺细胞DNA的损伤 ,提示肺细胞可能是主要靶细胞     

丙烯酰胺对小鼠脏器细胞DNA损伤及修复作用

目的研究丙烯酰胺的遗传毒性,探测其遗传毒性的靶器官。方法应用彗星试验检测50mg/kg丙烯酰胺腹腔注射染毒0、3、6、12和24h后小鼠肺、肝、脾、肾、睾丸、骨髓和外周血淋巴细胞的DNA损伤情况。结果丙烯酰胺染毒后不同时间,可引起小鼠肝、脾、睾丸、骨髓和外周血淋巴细胞彗星尾长、尾部DNA百分含量及尾矩的显著增加,随时间延长有下降趋势;未观察到对肺和肾脏细胞的明显影响。结论丙烯酰胺可以诱导小鼠多种组织细胞的DNA损伤,机体对丙烯酰胺造成的遗传损伤有一定的修复能力。     

药物对急性羰基镍中毒大鼠肝细胞损伤的治疗作用

目的 评价药物对急性羰基镍中毒大鼠肝细胞DNA损伤的影响.方法 将SD大鼠分为正常对照组(10只)、染毒组(10只),治疗组为甲泼尼龙组(20mg/kg)、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDC)组(100mg/kg)、亚硒酸钠组(10 μmol/kg)、参附回阳汤组(0.25ml)、甲泼尼龙组(20mg/kg)+DDC(100mg/kg)组,每组40只.除正常对照组外,其余各组大鼠静态吸入250mg/m3羰基镍染毒30min,分别于染毒后4 h和30 h给药,3 d和7 d取材,每组各10只,采用单细胞凝胶电泳试验检测药物对肝细胞DNA损伤的影响,电子显微镜观察大鼠肝细胞超微结构改变.结果 与染毒组比较,甲泼尼龙组、DDC组、亚硒酸钠组、参附回阳汤组及甲泼尼龙+DDC组染毒4 h和30 h给药,观察3、7 d时彗星尾长均减小,差异有统计学意义(P＜0.05);与正常对照组比较,亚硒酸钠组、参附回阳汤组4 h给药及DDC组、亚硒酸钠组、参附回阳汤组及甲泼尼龙+DDC组30 h给药,观察3 d时彗星尾长均明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).除甲泼尼龙组4 h给药,观察7 d时彗星尾长差异无统计学意义(P＞0.05)外,其他各组4 h、30 h给药,观察7 d时彗星尾长均明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).与染毒组比较,甲泼尼龙组、DDC组、亚硒酸钠组、参附回阳汤组及甲泼尼龙+DDC组4 h和30 h给药,观察3、7 d时彗星Olive尾距均减小,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);与正常对照组比较,4h和30 h给药亚硒酸钠组、参附回阳汤组(观察3、7 d)及DDC组(观察7 d),30 h给药DDC组(观察3d)和甲泼尼龙+DDC组(观察7 d)时彗星Olive尾距明显增大,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).肝细胞超微结构观察显示,与染毒组比较,甲泼尼龙组、DDC组和甲泼尼龙+DDC组4 h给药,观察3 d时胞质内细胞器及细胞核损伤已基本恢复到接近正常水平.结论 甲泼尼龙、DDC和甲泼尼龙+DDC具有较强促进急性羰基镍中毒后大鼠肝细胞损伤的修复作用,且早期治疗效果明显优于晚期.

Abstract：

Objective To assess the curative effects of different drugs on liver cell damage of rats induced by acute nickel carbonyl poisoning. Methods In present study 220 SD rats were divided into control group (10 rats), carbonyl nickel group (10 rats),20 mg/kg methylprednisolone group (40 rats), 100 mg/kg DDC group (40 rats), 10 μmol/kg sodium selenite group (40 rats),0.25 ml shenfuhuiyangtang group (40 rats) and 20 mg/kg methylprednisolone with 100 mg/kg DDC group (40 rats ). All rats except for control group inhaled passively 250 mg/m3 carbonyl nickel for 30 minutes. At 4h and 30h after exposure, the drugs were given intraperitoneally to the rats. On the 3rd and 7th days after exposure, the liver samples were taken from 10 rats each group. The DNA damage of liver cells was detected using comet assay, the ultrastructure changes in liver cells were examined under an electronmicroscope. Results Compared to carbonyl nickel group, the tail lengths of liver cells in 5 groups administrated at 4h or 30h and tested on the 3rd or 7th day after exposure decreased significantly (P＜0.05). Compared to the control group, the tail lengths of liver cells in sodium selenite and shenfuhuiyangtang groups administrated at 4h after exposure or sodium selenite,shenfuhuiyangtang and methylprednisolone with DDC groups administrated at 30h after exposure increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01 ), when tested on the 3rd day after exposure. Except from methylprednisolonesub-group administrated at 4h and tested on the 7th day after exposure, the tail lengths of liver cells in other groups administrated at 4 h or 30 h and tested on the 7th day after exposure increased significantly (P＜0.05).Compared to carbonyl nickel group, the Olive moment of liver cells in 5 groups administrated at 4 h or 30 h tested on the 3rd or 7th day after exposure decreased significantly (P＜0.05 or P＜0.01 ). Compared to the control group, the Olive moment of liver cells in following groups (selenite and shenfuhuiyangtang groups administrated at 4 h or 30 h and tested on the 3rd or 7th day after exposure, DDC group administrated at 4h or 30h and tested on the 7th day after exposure, DDC group administrated at 30 h and tested on the 3rd day after exposure, and methylprednisolone with DDC group administrated at 30 h and tested on the 7th day after exposure) increased significantly (P＜0.05 or P＜0.01). As compared with carbonyl nickel group, the ultrastructure observation indicated that the nucleus and other organelles of liver cells in methylprednisolone,DDC and methylprednisolone with DDC groups administrated at 4h and tested on the 3rd day were access to normal levels. Conclusion The results of present study showed that methylprednisolone, DDC and methylprednisolone with DDC could improve obviously the repair of rat liver cell damage induced by acute carbonyl nickel poisoning, and the curative effects of early treatment were better than those of later treatment.     

锌金属硫蛋白对镉致肝肾损伤的修复作用研究

目的：探讨锌金属硫蛋白（Zn-MT）对镉所导致的肝肾毒性的修复作用。方法：以小鼠为研究对象，建立镉中毒动物模型，然后经口给予不同剂量的Zn-MT,测定并分析肝、肾组织中脂质过氧化代谢产物丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH－Px）活性及电镜下观察肝肾组织形态学变化。结果：Zn-MT可明显降低肝、肾组织中MDA水平，使肝、肾组织中SOD、GSH－Px活力有一定程度的恢复，且上述作用呈明显的剂量－反应关系；电镜下观察到给予Zn-MT后，肝、肾组织形态学病变得到一定程度的恢复。结论：Zn-MT可对镉所致的肝肾组织脂质过氧化损伤起到一定的修复作用。     

氯乙烯致大鼠DNA损伤与DNA损伤修复酶和p53蛋白的表达

目的研究氯乙烯（VC）对大鼠原代肝细胞DNA的损伤作用,及对DNA损伤修复酶（rMSH2和XPD）和抑癌蛋白p53表达的影响;探索VC所致DNA损伤的修复和调控机制。方法大鼠腹腔注射VC,隔日染毒,染毒剂量分别为5,10和20mg／kg。单细胞凝胶电泳测肝细胞DNA损伤,免疫组化法测肝脏DNA损伤修复酶的表达。结果彗星细胞数目随染毒剂量增加而增加,彗星发生率与VC染毒剂量问存在明显的相关关系。rMSH2表达随染毒剂量增加而减少．XPD和p53的表达随染毒剂量增加而增加。VC致DNA损伤与XPD表达具有相关关系。结论VC可导致肝细胞DNA发生损伤,且存在剂量一反应关系;DNA损伤修复酶和p53蛋白参与修复VC所致的DNA损伤。     

氯乙烯致大鼠肝细胞DNA损伤与DNA修复基因表达

目的　研究氯乙烯 (VCM)对大鼠肝细胞DNA的损伤作用 ,及对DNA损伤修复酶 [O6 甲基鸟嘌呤 DNA甲基转移酶 (MGMT)、X线修复交叉互补基团 1(XRCC1)和X线修复交叉互补基团 3(XRCC3) ]表达的影响 ;探索VCM所致DNA损伤的修复机制。方法　采用腹腔注射VCM染毒 ,实验组按不同染毒剂量分为 3个剂量组 ,分别为低剂量 5mg kg、中剂量 10mg kg和高剂量 2 0mg kg ,染毒12周 ,以单细胞凝胶电泳 (彗星试验 )测DNA损伤 ,免疫组化法测DNA损伤修复酶的表达。结果　低、中和高剂量组大鼠肝细胞DNA损伤细胞百分率分别为 11.75 %、12 .38%和 17.6 3% ,均高于对照组(5 .6 7% ) ,且中、高剂量与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。MGMT和XRCC1表达随染毒剂量增加而减少 ,而XRCC3的表达随染毒剂量的增加而增加。VCM致DNA损伤与XRCC3表达有相关关系 (r=0 .4 38,P =0 .0 6 7)。结论　VCM可导致肝细胞DNA发生损伤 ,且存在剂量 -反应关系 ;DNA损伤修复酶参与修复VCM所致的DNA损伤。     

组织细胞对氧化损伤的敏感性及修复能力的研究

目的：探讨体内多种组织细胞对DNA氧化损伤效应的敏感性及损伤后的自身修复能力。方法：以H2O2作为氧化损伤剂，对离体的小鼠肝，肾，脾细胞进行染毒，用慧星试验观察各种细胞的DNA氧化损伤效应与修复动力学改变。结果：H2O2能诱导三种细胞DNA氧化损伤，其损伤的敏感性依次为：脾细胞＞肾细胞＞肝细胞，修复试验显示肝细胞修复能力最强，修复时间最短，脾细胞次之，而肾细胞在2h内几乎无修复。结论：体内组织细胞对氧化损伤的敏感性及修复能力差异很大，彗星试验在一定程度上可以检测外源化学物的DNA氧化损伤效应。