HIV-1标准株资源库的初步建立与应用

目的构建代表我国HIV-1主要流行亚型的标准株,建立种子库和工作库。方法按照《病原微生物菌(毒)种标准株艾滋病病毒毒株建立技术规范》要求,复核鉴定分析病毒的基因型和表型。对6株HIV-1标准株进行逐级放大扩增培养,构建第二代种子库和第三代的工作库,液氮冻存。结果获得了6株HIV-1标准株,其中3株为CRF07BC(NRPC2.4.9003、NRPC2.4.9005、NRPC2.4.9006),1株为CRF01AE(NRPC2.4.9001),1株为CRF08BC(NRPC2.4.9002),1株为URF(NRPC2.4.9004)。表型检测6株病毒均为CCR5嗜性、非融合诱导型。TCID₅₀均大于1×10⁵/ml,p24抗原浓度均高于2 ng/ml,构建了每株不少于20支的种子库以及每株不少于50支的工作库,应用HIV-1标准株对抗病毒药物PEG2kC34、PEG5kC34、LP-19以及中和抗体LSEVh-LS-F进行评价。结论获得了涵盖我国主要流行亚型的HIV-1标准株6株,建立了HIV-1标准株资源库。填补了我国HIV-1标准株保藏的空白,为药物和疫苗评价提供了技术支撑。     

慢性乙型肝炎表面抗原携带者前S1/S2基因的相似株现象

为了解慢性ＨＢＶ携带者体内ＨＢＶ病毒的状况，以选择ＨＢＶ前Ｓ１／Ｓ２为研究区段，应用半巢式ＰＣＲ法从３例慢性ＨＢＶ携带者血清中扩增出ＨＢＶ前Ｓ１／Ｓ２基因，分别将其克隆于噬菌体Ｍ１３ｍｐ１８、Ｍ１３ｍｐ１９，每例随机筛选１０个阳性克隆，进行序列分析及遗传距离分析，结果发现：３例病人各克隆分别与同源性最好的ＨＢＶ野生株相比，存在着明显的碱基替代、缺失和插入。此类病人体内的ＨＢＶ株同源性差，克隆间最大的遗传距离为０．１２５。慢性ＨＢＶ携带者体内的ＨＢＶ株呈“相似株”分布。     

国外乙型肝炎病毒变异株的研究进展

近年来，国内外发现许多非典型乙型肝炎病例，他们缺乏ＨＢＶ血清学标志，研究分析表明这样的病人感染的是一些ＨＢＶ变异株，有的Ｓ基因或Ｃ基因或Ｘ基因发生突变，有的则可能多个基因区域存在突变，而且突变的类型也是多种多样的，这给乙型肝炎的预防、诊断治疗提出了新的问题。最突出的是漏检，ＨＢＶ变异株缺乏常规血清学标志；其次是疫苗免疫失败，由ＨＢｓＡｇ主蛋白组成的疫苗是有效的。但对变异株的作用较差或不起作用。ＨＢ     

人体自相似及其容错原则

人体具有典型的自相似性，这种自相似性遵从容错原则。本文从三个方面介绍了人体自相似现象，即解剖结构自相似，暂态动力学自相似及统计学自相似，并详述了容错原则的三种解释方案。     

Vague集相似度量及其在心电图自动识别中的应用

Vague集间的相似度量是Vague集中最重要的技术之一.我们在黄国顺等[10]的相关工作基础上提出了一种新的相似度量,并讨论了其在心电图自动识别中的应用.根据识别需要,从MIT心电图数据库获取了心电图特征参数,并用BP神经网络进行学习,运用这些特征参数和训练好的BP神经网络对心电图进行识别,识别准确率达到了99.04%.     

人体自相似及其容错原则

人体具有典型的自相似性（ｓｅｌｆ－ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ），这种自相似性遵从容错（Ｅｒｏｒ－ｔｏｌｅｒａｎｃｅ）原则。本文从三个方面介绍了人体自相似现系，即解剖结构自相拟、暂态动力学自相似及统计学自相似，并详述了容错原则的三种解释方案。最后说明了生物进化论与容错原则的关系。     

采用反向遗传学技术构建H5亚型禽流感疫苗株

目的构建重组H5亚型禽流感疫苗株。方法采用RT-PCR技术，分别扩增鹅源高产禽流感病毒A／Goose／Dalian／3／01（H9N2）的6条内部基因片段、高致病性禽流感病毒株A／Goose／HLJ／QFY／04（H5N1）的血凝素（HA）基因和N3亚型参考株A／Duck／Germany／1215／73（H2N3）的神经氨酸酶（NA）基因，并对HA1和HA2连接肽处的5个碱性氨基酸（R-R-R-K-K）的编码序列进行缺失与修饰，然后分别构建这8个基因的转录与表达载体，将其共转染293T／MDCK混合培养细胞单层，对拯救出的重组病毒进行表型分析。结果利用反向遗传学技术拯救出了全部基因都源于禽流感病毒的疫苗株，其基因序列符合设计要求包括删除HA基因的毒力相关序列，疫苗株的表型为H5N3。结论构建成功重组禽流感疫苗株rH5N3，为制备H5亚型禽流感疫苗打下了坚实的基础。     

我国分离的甲病毒YN87448株基因组序列的初步分析

我国分离的甲病毒ＹＮ８７４４８株基因组序列的初步分析周国林梁国栋李蕾付士红金奇张海林黄文丽侯云德作者单位：１０００５２北京中国预防医学科学院病毒基因工程国家重点实验室（周国林梁国栋李蕾付士红金奇侯云德）；云南省流行病防治研究所（张海林黄文丽）。１９９...     

杆状病毒表达载体及其应用

体外克隆和外源基因表达是现代分子生物学研究的主要手段。８０年代以来，杆状病毒表达载体日益得到重视，本文就杆状病毒载体特点及应用情况加以综述。     

自杀的概念及其危险因素

自杀是人类十大死亡原因之一，全世界每年大约有４０－６０万人自杀死亡，其中青少年自经逐年上升。导致自杀杀的因素是多方面的，重点是自杀的预防。本文系统地讨论了自杀的基本概念、概念的变 自杀的有关危险因素。     

呼吸道合胞病毒逃逸株对单克隆抗体预防的抗性比较

目的 Palivizumab（PZ）是目前临床使用的惟一一个预防人类感染性疾病的单克隆抗体，本研究评估不同逃逸株在棉鼠体内对PZ预防的抗件。方法在细胞培养系统中筛选获得PZ逃逸株，测定其全长F基因序列，用微量中和法评估逃逸株对PZ的抗性，在棉鼠模型体内观察逃逸株对PZ预防的抗性差异。结果筛选获得的PZ逃逸株于F蛋白内第268位氨基酸（F212）和272位氨基酸（MP4、MS312、MS412和MS512）发生替换。用Western blot检测发现所有逃逸株PZ识别位点抗原性改变。F212复制能力受损，而其他逃逸株复制能力与A2母株接近。与A2原型株比较，MP4和MS412在体内外对PZ的中和活性具完全抗性。F212体外对PZ中和活性显示不完全抗性，但大剂量PZ在棉鼠体内仍能有效预防F212感染。结论不同PZ逃逸株体内对PZ的预防效应可能具有不同程度的抗性，某些逃逸株即使在PZ筛选压力下产生，亦不一定导致临床后果。     

中国大陆EV71病毒分离株的分子流行病学研究

目的了解1987-2010年中国大陆肠道病毒71型（EV71）分离株的分子流行病学特点及其种系进化、基因分型和遗传变异性。方法从GenBank/NCBI上获得中国大陆来源的具有完整VP1或近似完整VP1基因的核苷酸序列信息的413株EV71毒株进行分析,采用MEGA5.0软件,构建系统进化树,计算相同或不同基因型及基因亚型毒株的核苷酸与氨基酸的相似性。结果 1987-2010年,中国大陆20个省、市或地区均分离到具有完整VP1序列的毒株,且2008年以来数量陡增;中国大陆流行的主要是C型,只有2008年安徽和2009年湖北发现了A型;各基因型在43、58、142、164、167、184、240、249、292等氨基酸位点发生了特异性变异;从健康人体内分离的HQ129932毒株与其他序列比较,氨基酸无特异性变异。结论 C型株可能具有更强的传染力;氨基酸位点变异对于EV71病毒进化有重要意义;VP1基因与疾病的严重程度无明显关联;应加强C4a亚型疫苗候选疫苗株对其他基因型毒株的交叉保护作用研究。     

水痘-带状疱疹病毒临床分离株基因型别分析以及与Oka疫苗株的区别

目的 运用分子生物学方法 对从水痘或带状疱疹患者皮肤疱疹液中分离得到的水痘-带状疱疹(VZV)株进行基闪型研究,并区分感染是南野牛株还是由Oka疫苗株引起的.方法 从水痘或带状疱疹患者的皮肤水疱液中分离VZV,然后利用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析对病毒株的ORF38、54、62和R5可变区基因进行分析.结果 在所分离的19株VZV中,存在PstⅠ+ Bgl Ⅰ+ R5A和Pst Ⅰ+ Bgl Ⅰ+RSB两种基因型,其中Pst Ⅰ+ Bgl Ⅰ+ R5A占52.7%,Pst Ⅰ+ Bgl Ⅰ+R5B占47.3%,没有发现与Oka疫苗株相同的基因型.结论 本研究中所分离的VZV毒株均系野生株,它们的基因型与欧洲、美国、日本的VZV分离株均不相同.利用病毒基因组中ORF38和ORF62区域的单一核苷酸多态性,能够区分疫苗株和野毒株.     

甲型肝炎病毒TZ84株单克隆抗体在甲肝病毒抗原检测中的应用

目的 研究甲型肝炎病毒TZ84株单克隆抗体在甲肝病毒抗原检测中的应用，以期代替现有试剂中的多克隆抗体，得到灵敏度高、特异性好、重复性和准确性好的甲肝抗原检测试剂。方法 采用双抗体夹心法将甲肝多抗包被96孔酶标板后，加入甲肝抗原，分别用酶标单抗和酶标多抗两种方法进行检测甲肝抗原．对单抗试剂的真实性和可靠性进行评价。结果 单抗试剂的灵敏度为100％、特异度为100％，变异系数均小于15％。结论 单抗试剂可用于甲肝抗原的定性和定量检测，结果准确可靠。     

药物功能模式相似度及其聚类

对现有已知药物的功能模式进行分析,可以帮助发现其可能的新应用,指导联合用药或预测药物的未知毒副作用.提出将药物化学结构信息和GO注释信息结合,分析药物功能模式相似度.药物化学结构和GO注释信息下载自DrugBank数据库,其中GO注释信息包括生物过程、分子功能和细胞定位等3个分支.计算现有4886种药物的功能模式相似度,并对其进行聚类分析.基于Tanimoto系数计算药物化学结构相似度,基于语义分析计算药物GO注释中3个分支的相似度.分别使用Logistic回归、算术均值、几何均值将上述4个药物相似度结合,得到反映多方信息的复合相似度.将一种药物与所有其他药物的相似度向量作为该药物的特征谱,对药物进行层次聚类.使用药物解剖学、治疗学及化学分类( ATC)的标准评价不同的相似度和聚类结果.结果显示:药物化学结构相似度与基于GO的3个分支的相似度均线性相关,表明药物的结构信息能在一定程度上反映功能信息;Logistic回归复合相似度能够很好地反映两个药物是否属于同一个ATC分类;基于GO注释生物过程分支语义相似度和几何均数复合相似度聚类结果与ATC分类第一层次强关联.所提出的方法结果可靠,可望用于辅助药物发现和预测不良反应.