套式聚合酶链反应加限制酶谱分析检测母婴垂直传播巨细胞病毒

目的：克服一次性ＰＣＲ假阳性及非特异性条带干扰。方法：建立套式ＰＣＲ技术，对１０５份母－脐配对血进行套式ＰＣＲ、病毒分离、特异性ＩｇＭ以及特异性ＩｇＡ测定。结果：母血ＨＣＭＶＤＮＡ阳性６份，脐血３份，母－脐传播率为３／６。３对被证实为母婴垂直传播ＨＣＭＶ的标本中，２对套式ＰＣＲ、病毒分离、特异性ＩｇＭ及ＩｇＡ均阳性，１对套式ＰＣＲ病毒分离，特异性ＩｇＡ阳性，但特异性ＩｇＭ阴性。结论：套式ＰＣＲ是一种敏感特异、简便快速、能早期诊断ＨＣＭＶ的检测手段，适用于孕妇及胎儿ＨＣＭＶ感染的监测。     

肾移植患者人巨细胞病毒的检测

采用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ方法对１１例肾移植者的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染情况进行了研究。在术前及术后的４周内，对其外周血及尿中病毒和血清中ＩｇＡ及ＩｇＭ抗体进行了连续检测。结果显示：有６例在移植后出现巨细胞病毒感染，感染率为５４％（６／１１）。血、尿中ＨＣＭＶＤＮＡ或ＨＣＭＶ抗体（ＩｇＡ或ＩｇＭ）阳性。提示：用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ方法对肾移植病人的ＨＣＭＶ感染情况进行监测，对预防和治疗ＨＣＭＶ感染和提高肾移植的成功率有着重要的意义。     

献血员血清抗－HCV－IgM检测及其意义

目的探讨献血员血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ与ＨＣＶ感染的关联性。方法献血员血清８３６份。以ＨＣＶ混合抗原包被聚苯乙烯反应板微孔，以辣根过氧化物酶标记的羊抗人ＩｇＭ单克隆抗体为酶标抗体，建立ＥＬＩＳＡ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ。以第二代ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ，以ＰＣＲ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ或抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性样品中的ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果２－巯基乙醇破坏试验及ＨＣＶ抗原抑制试验结果显示，以所建立的ＥＬＩＡＳ检测到的为ＨＣＶ特异ＩｇＭ，批内变异系数为３．４７％，批间变异系数为７．０６％。８３６份献血员血清中，有２份抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ阴性而抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。结论本研究中建立的ＥＬＩＳＡ可较好地用于检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ、献血员筛选及防止丙型肝炎传播。     

献血员血清抗－HCV－IgM检测及其意义

目的探讨献血员血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ与ＨＣＶ感染的关联性。方法献血员血清８３６份。以ＨＣＶ混合抗原包被聚苯乙烯反应板微孔,以辣根过氧化物酶标记的羊抗人ＩｇＭ单克隆抗体为酶标抗体,建立ＥＬＩＳＡ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ。以第二代ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ,以ＰＣＲ检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ或抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性样品中的ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果２－巯基乙醇破坏试验及ＨＣＶ抗原抑制试验结果显示,以所建立的ＥＬＩＡＳ检测到的为ＨＣＶ特异ＩｇＭ,批内变异系数为３．４７％,批间变异系数为７．０６％。８３６份献血员血清中,有２份抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ阴性而抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。结论本研究中建立的ＥＬＩＳＡ可较好地用于检测血清抗－ＨＣＶ－ＩｇＭ、献血员筛选及防止丙型肝炎传播。     

应用聚合酶链反应快速诊断巨细胞病毒感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测学龄前儿童尿标本中的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并和常规细胞培养（ＣＣＣ）、早期抗原检测（ＤＥＡ）两法进行了比较。结果表明，１０５份尿标本中有４１份ＣＣＣ出现ＨＣＭＶ特征性细胞病变（ＣＰＥ），其中３８份标本ＰＣＲ检测为阳性，敏感性为９２．７％；其余６４份ＣＣＣ阴性，有６份ＰＣＲ检测阳性，特异性为９０．６％。与ＤＥＡ相比，ＰＣＲ检测的特异性和敏感性分别为９３．６％，９５．２％；提示ＰＣＲ检测临床标本中ＨＣＭＶ，不仅敏感特异，而且与ＣＣＣ，ＤＥＡ两法相比快速简便。     

套式聚合酶链反应检测丙肝病毒核酸

对７０例血清谷丙转氨酶（ＡＬＴ）异常、疑是丙型肝炎（ＨＣＶ）患者血清标本，用ＨＣＶ基因５＇非编码区引物作套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ），扩增产物为２６０ｂｐ，结果显示５２例丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）阳性，１８例阴性，阳性率为７４．２％。１０例助血员血样ＨＣＶ－ＲＮＡ均为阴性。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，阳性ＰＣＲ产物为ＨＣＶ－ＲＮＡ所特异。作者认为，采用高保守区核苷酸序列引物作套式ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ，可提高实验的敏感性和特异性。     

妊娠早期妇女巨细胞病毒感染状况的研究

目的：检查孕妇绒毛巨细胞病毒（ＣＭＶ）感染，了解孕妇ＣＭＶ的早期感染状况。方法：采用ＥＬＩＳＡ、ＰＣＲ、病毒分离方法检测３２例早孕妇女血清ＣＭＶ－ＩｇＭ、宫颈和绒毛ＣＭＶ－ＤＮＡ。结果：孕妇血清ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率９．３８％（３／３２）；宫颈ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率为１２．５％（４／３２）；绒毛ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性１例，分离阳性１例，阳性率为６．２５％（２／３２）；２例绒毛ＣＭＶ感染，但血清及宫颈检查正常。结论：妊娠早期绒毛的ＣＭＶ感染率为６．２５％，母亲血清和宫颈检查正常并不能排除胎儿先天感染的可能。     

抗-HCV阴性献血员丙肝病毒感染及意义

目的：探讨抗－ＨＣＶ阴性献血员隐匿性ＨＣＶ感染情况。方法：采用逆转录套式ＰＣＲ检测１００例抗ＨＣＶ阴性献血员血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果：血清中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性２例,ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性６例;有１例血清及ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。结论：抗－ＨＣＶ阴性的献血员中仍有少数存在ＨＣＶ输血传播的可能,对献血员仅筛查抗－ＨＣＶ是不够的,应对血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－     

用多聚酶链反应检测母乳HBV和CMV在乳源筛选中的意义

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测产妇初乳中ＨＢＶＤＮＡ和ＣＭＶＤＮＡ。结果显示：母血ＨＢＶＭ阴性者其初乳全呈ＰＣＲ阴性;母血ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ及ＨＢｃＡｂ阳性者其初乳排毒率为８１２５％;ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｂ及ＨＢｃＡｂ阳性者其初乳排毒率为４５２４％;仅ＨＢｅＡｂ与ＨＢｃＡｂ阳性者其初乳排毒率为２３０８％。说明产妇体内ＨＢＶ复制活跃、乳汁排毒率高,传播给婴儿的危险性大。母血ＣＭＶＩｇＭ阳性者其初乳ＣＭＶＤＮＡ阳性率为４２８６％～７０００％,传播给婴儿的可能性较大。提示母乳入库条件应为母血ＨＢＶＭ及ＣＭＶＩｇＭ阴性且ＨＢＶＤＮＡ与ＣＭＶＤＮＡ阴性者。ＰＣＲ是筛选乳源特异而敏感的方法     

应用聚合酶链反应快速诊断巨细胞病毒感染

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测学龄前儿童尿标本中的巨细胞病毒（ＨＣＭＶ），并和常规细胞培养（ＣＣＣ）、早期抗原检测（ＤＥＡ）两法进行了比较。结果表明，１０５份尿标本中有４１份ＣＣＣ出现ＨＣＭＶ特征性细胞病变（ＣＰＥ），其中３８份标本ＰＣＲ检测为阳性，敏感性为９２．７％，其余６４份ＣＣＣ阴性，有６份ＰＣＲ检测阳性，特异性为９０．６％，与ＤＥＡ相比，ＰＣＲ检测的特异性和敏感性分别为９３．６％，９５．     

抗HCV-IgM抗体测定及临床初步应用

将市售ＨＣＶ－ＩｇＧ诊断试剂盒加以改良，建立了ＨＣＶ－ＩｇＭ抗体检测方法，与抗ＨＢｃ－ＩｇＭ，抗ＨＢｓ－ＩｇＭ，抗ＣＭＶ－ＩｇＭ，抗ＲＶ－ＩｇＭ，ＲＦ及抗核抗体（ＡＮＡ）阳性血清均不起反应。正常人群中抗ＨＣＶ－ＩｇＭ阳性率为１．５％（１／６８），抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性的４３例血透患者检出抗ＨＣＶ－ＩｇＭ１４例（３２．６％），１２例输血后肝炎抗ＨＣＶ－ＩｇＭ全部阳性。以上结果表明，抗ＨＣＶ－ＩｇＭ可作为输血后ＨＣＶ感染的一个敏感指标     

献血员中巨细胞病毒感染的PCR检测与分析

目的：揭示献血员中巨细胞病毒９ＨＣＭＶ）感染状况,并探讨用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对献血员的血液进行ＨＣＭＶ检测和筛的可行性。方法：采用ＰＣＲ对１１９名献血员血清中ＨＣＶＭ－ＤＮＡ进行检测,同时与ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＣＭＶ－ＩｇＭ、ＩｇＧ的结果相比较。结果：献血员中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ、ＨＣＭＶ－ＩｇＭ、ＩｇＧ阳性率ＨＣＭＶ＝ＤＮＡ阳性率随年龄增大而增高。结论：献血员中存在关ＨＣＭＶ感染;年龄较     

60例散发性急性病毒性肝炎的病原学分型

对６０例已排除甲型、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染的急性病毒性肝炎患者，以酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测抗－ＨＣＶ、抗－ＨＥＶ、抗－ＨＥＶ－ＩｇＭ、ＨＤＶ－Ａｇ、抗－ＨＤＶ－ＩｇＭ，抗－ＨＤＶ、抗－ＣＭＶ－ＩｇＭ及抗－ＥＢＶ－ＩｇＭ，同时应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果表明：１３．３％（８／６０）为丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染，６１．７％（３７／６０）为戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）感染，     

ELISA检测血清戊型肝炎病毒IgM型抗体

用ＥＬＩＳＡ检测血清抗ＨＥＶ－ＩｇＭ。３０份抗ＨＥＶ－ＩｇＧ阳性急性肝炎患者血清中，抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性１３份，阳性率４３．３％，抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性结果可被加入的ＤＴＴ所阻断，但不受ＨＡＡｇ，ＨＢｃＡｇ或ＨＢｅＡｇ的影响。因此抗ＨＥＶ－ＩｇＭ的特异性较高，对戊型病毒性肝炎的诊断有一定价值。     

ELISA检测血清戊型肝炎病毒IgM型抗体

用ＥＬＩＳＡ检测血清抗ＨＥＶ－ＩｇＭ。３０份抗ＨＥＶ－ＩｇＧ阳性急性肝炎患者血清中，抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性１３份，阳性率４３．３％。抗ＨＥＶ－ＩｇＭ阳性结果可被加入的ＤＴＴ所阻断，但不受ＨＡＡｇ，ＨＢｃＡｓ或ＨＢｅＡｇ的影响。因此抗ＨＥＶ－ＩｇＭ的特异性较高，对戊型病毒性肝炎的诊断有一定价值。     

病毒性心肌炎患者的病原及病毒抗体和抗原核酸的研究

目的：探讨病毒性心肌炎患者１２９例，对照组４０例，血甭中柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）的中和抗体、ＩｇＭ抗体及其核糖核酸（ＲＮＡ）基因的关系。同时对白细胞（ＷＢＣ）、咽拭子、尿、血清中的ＲＮＡ阳性检测率的比较。方法：咽拭子分离病毒；微量法测血清中和抗体，间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测ＩｇＭ抗体；用反转录－结合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测ＣＢＶ特异性核糖核酸（ＲＮＡ）。结果：分离出病毒３２株     

巨细胞病毒特异性转移因子对其活动性感染孕妇的防治

①目的研制人巨细胞病毒特异性转移因子（ＨＣＭＶ－ＳＴＦ），并试用于ＨＣＭＶ－ＩｇＭ和（或）ＩｇＡ阳性孕妇，观察其临床防治效果。②方法将ＨＣＭＶ－ＡＤ１６９株病毒感染人二倍体细胞，制备抗原，免疫成猪，待猪的免疫指标明显提高并稳定后，取脾及淋巴结，制备ＨＣＭＶ－ＳＴＦ，并用于治疗ＨＣＭＶ－ＩｇＭ和（或）ＩｇＡ阳性孕妇，采用间接ＥＬＩＳＡ法测血清ＨＣＭＶ－ＩｇＭ和ＩｇＡ，同时对羊水、脐血和婴儿尿做ＰＣＲ检测。③结果制备的ＨＣＭＶ－ＳＴＦ符合肌肉注射用药制剂标准，同时具有明显的促进ＬＡＣＡ小鼠脾细胞分化增殖效应。临床疗效验证表明，治疗组和对照组其血清ＩｇＭ及ＩｇＡ转阴率分别为７４．００％和６．６７％，两组比较差异有显著性（χ２＝１９１．１２，Ｐ＜０．０１）；治疗组和对照组先天性感染率分别为８．０４％和２２．２２％，两组比较差异有显著性（χ２＝９．９５，Ｐ＜０．０１）。④结论ＨＣＭＶ－ＳＴＦ对孕妇活动性巨细胞病毒感染及胎儿先天性感染有明显的防治作用。     

突发性耳聋患者血清中人类巨细胞病毒和单纯疱疹病毒的检测

采用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ方法对３０例突发性耳聋（突聋）患者血清中人类巨细胞病毒 （ＨＣＭＶ）和单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）进行了检测。结果显示：７例（２３％）ＨＣＭＶ ＤＮＡ阳性，４例 ＨＣＭＶ抗体（ＩｇＡ或 ＩｇＭ）升高或 ＩｇＭ升高，２例 ＨＣＭＶ和 ＨＳＶ ＤＮＡ均阳性，相应抗体水平高于 正常，治疗后１月复查部分病例转阴。提示：用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ方法对突聋患者病毒感染情况的检 测，对于探讨突聋的发病机制和治疗有重要意义。     

巨细胞病毒宫内感染的初步研究

目的：寻找巨细胞病毒宫内感染产前诊断的途径。方法：应用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，对２４例妊娠患有巨细胞病毒（ＣＭＶ）活动性感染的产妇，分娩的新生儿脐血抗ＣＭＶ－ＩｇＭ型抗体和羊水及尿液ＣＭＶ－ＤＮＡ进行检测。结果：２４例ＣＭＶ活动性感染孕妇中有１４例发生宫内感染，宫内感染率５８．３％，与对照组比较有高度显著性差异。宫内感染儿羊水ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率７８．６％，显著高于脐血ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率．孕妇尿液排毒状态与宫内感染的发生无明显关系。结论：宜将ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性孕妇视为有宫内感染潜在危险的对象；羊水ＰＣＲ－ＣＭＶ检测可望成为产前诊断ＣＭＶ宫内感染的有效手段。     

逆转录—半套式聚合酶链反应检测汉坦病毒RNA及其临床初步应用

目的：建立可用于汉坦病毒检测的ＲＴ－ＰＣＲ方法，并对其临床应用进行初步研究，方法：比较７６－１１８株和ＳＲ－１１株Ｓ基因序列，选择其保守区设计半套式引物，通过病毒培养上清及患者血清的扩增检测进行ＰＣＲ方法的敏感性，特异性及临床应用研究。结果所建立的ＲＴ－ＰＣＲ方法可检出１．２５ＰＦＵ的病毒量；对照组（正常细胞培养上清和正常人血清）经扩增检测为阴性，８６份级ＩＦＡ检测抗ＨＶ－ＩｇＭ阳性的肾综合征出血