基础核医学

电离辐射诱导细胞周期解偶联的实验研究；P糖蛋白抑制X射线诱导调亡及对线粒体膜电位的影响；辐射诱发肿瘤细胞旁效应的免疫学实验研究；腺病毒介导p53基因转染增加人胃癌细胞的放射敏感性；^60Co y射线对肝癌细胞株HepG2增殖和细胞周期的影响；人非小细胞肺癌细胞受照射后肿瘤坏死因子水平的变化；X射线照射诱导小鼠junB基因的表达；氟伐他汀防治放射性肺损伤的病理形态学研究；^32P胶体局部给药防治H22移植瘤淋巴道转移的实验研究；电离辐射调控脂质体介导的p16基因在HeLa细胞中的表达；低剂量y射线全身照射对猴免疫功能的影响；^45Ca标记复合钙化合物示踪钙生物动力学观察；电离辐射致中国仓鼠卵巢（CHO）细胞凋亡的研究；用核素法探测宫颈癌前哨淋巴结；杆状病毒介导NIS基因放射治疗甲状腺癌的实验研究；全反式维甲酸对甲状腺癌细胞NIS基因表达及摄碘水平的影响；电子射线照射大鼠胶原及自由基改变的研究；全脑照射后海马组织内氨基酸类神经递质含量的变化；y射线诱发小鼠皮肤汗腺癌中p53、MDM2基因的表达；富勒醇对^60Co y射线致小鼠损伤的防护作用。     

川芎嗪对急性放射损伤小鼠骨髓中LFA- 1、ICAM-1表达影响的研究

目的：探讨川芎嗪对急性放射损伤小鼠骨髓中LFA-1、 ICAM-1表达水平的影响及其促进骨髓造血重建的机制。方法:正常24只清洁级昆明小鼠随机分为3组：正常组、生理盐水组和川芎嗪组。正常组未作任何处理，将生理盐水组和川芎嗪组小鼠用6.0 Gy ［⁶⁰Co］γ射线1次性全身均匀照射，吸收剂量率为0.56 Gy/min。照射后即分别喂饲相同剂量的生理盐水（0.2 mL/只，每天2次）和川芎嗪（2 mg/只，每天2次），直至处死为止。在照射后第7、14、21 d处死小鼠，制备骨髓细胞悬液，培养基质细胞，用RT-PCR、Western blotting方法检测骨髓基质细胞ICAM-1mRNA及其蛋白表达水平，用流式细胞仪检测骨髓单个核细胞表面LFA-1表达水平。结果:6.0 Gy ［⁶⁰Co］ γ 射线照射后，川芎嗪组骨髓单个核细胞表面 LFA-1表达水平均显著高于生理盐水组(P<0.01或P<0.05) ；骨髓基质细胞ICAM-1mRNA及其蛋白表达水平均明显低于生理盐水组（P<0.01或P<0.05）。结论:川芎嗪加快辐射后骨髓单个核细胞表面LFA-1的表达，降低骨髓基质细胞ICAM-1的表达，从而改善骨髓微环境，促进造血重建。     

Wistar大鼠脊神经根拔除后脊髓前角NOS和GFAP的表达

目的观察Wistar大鼠脊神经根拔除后脊髓前角NOS阳性表达运动神经元和GFAP阳性表达神经胶质细胞的关系。方法对4-6周龄Wistar大鼠进行椎管外拔除第4腰神经根,术后1、3、5、7周灌注固定后,取L3-L5脊髓节段做冰冻切片,进行Nissl染色和一氧化氮合酶(NOS)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)进行免疫荧光标记。结果拔除后第1周内,运动神经元大量死亡,存活的运动神经元为对照侧的60%。而第3、5周持续缓慢下降,直到第7周存活率为对照侧的40%。NOS阳性表达运动神经元在损伤后第1周开始出现,第3周达到峰值,第5周开始下降。GFAP阳性表达神经胶质细胞在拔除后第1周损伤侧明显增加,第3周达到高峰,而第5、7周一直维持于高水平。结论脊神经根拔除后,GFAP阳性神经胶质细胞增加,可能参与了损伤后神经的修复及维持神经再生的微环境。     

坎离生血汤对60Coγ射线致贫血小鼠骨髓CD34+细胞数的影响

目的：观察验方坎离生血汤对^60Coγ射线致贫血小鼠骨髓有核细胞数及CD34^＋细胞数的影响。方法：取雄性昆明种小鼠180只，分成3批次，即给药3d、7d、11d。每批次分为正常组、模型组、坎离生血汤（小、中、大剂量）组、升白胺组。除正常组外，其余各组均通过^60Coγ射线造模。各批给药时间完成后，处死小鼠取股骨骨髓涂片，分别进行吉姆萨染色，以及CD34^＋细胞免疫组化染色，然后用Irnag e Pro软件进行图像分析。     

低剂量γ射线辐照对血清一氧化氮及一氧化氮合酶水平的影响

目的：观察低剂量γ射线照射人离体外周血对血清中一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）水平的影响。方法：采集10份健康献血员全血，肝素抗凝，然后采用γ射线照射，照射剂量率为17Gy／min，总吸收剂量为1Gy，分别于照射前及照射后1h，2h采用分光光度法检测血清中NO含量和NOS活性。结果：经γ射线照射1h后，血清中NO及NOS水平与照射前比较明显升高（P〈0.01）；照射后2h，血清中NOS水平与照射后1h比较无统计学差异（P〉0、05），但是还明显高于照射前的水平（P〈0．01）；在照射后2h，血清中NO含量与照射后1h比较明显降低（P〈0.01），但仍明显高于照射前水平（P〈0．01）。结论：采用剂量为1Gy的γ射线照射外周血，可引起血清中NO水平及NOS活性的显著升高．从而为低剂量辐照自体血回输对肿瘤的辅助治疗提供了理论支持。     

放射损伤小鼠骨髓组织黏附分子ICAM-1的表达和基质细胞黏附能力的变化及川芎嗪对其影响的研究

目的：探讨放射损伤小鼠骨髓组织黏附分子ICAM-1的表达和基质细胞黏附能力的变化及川芎嗪对其影响。方法：健康昆明小鼠经6．0 Gy^60 Coγ照射后立即喂饲川芎嗪并设对照组和正常组，在放射损伤后第3、7、14和21天检测其骨髓有核细胞（BMMNC）和骨髓成纤维细胞集落形成单位（CFU-F），骨髓黏附分子ICAM-1的表达水平以及骨髓基质细胞黏附能力。结果：川芎嗪能够减轻放射损伤小鼠骨髓有核细胞、骨髓成纤维细胞集落形成单位（CFU-F）和骨髓基质细胞黏附能力的下降。照射后第3、7天骨髓黏附分子ICAM-1的表达水平显著增高，并且川芎嗪组ICAM-1表达水平高于对照组；但照射后第14天川芎嗪组ICAM-1表达水平开始下降；而照射组ICAM-1表达水平仍持续增高，照射后第21天川芎嗪组ICAM-1表达水平恢复正常（P〉0．05），而对照组才开始下降，二者比较有显著差异（P〈0．01）。结论：急性放射损伤早期骨髓黏附分子ICAM—1呈高表达。川芎嗪促进放射损伤小鼠骨髓造血恢复的机制可能是通过改变黏附分子的表达并进而影响黏附功能实现的。     

施万细胞和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响

目的探讨施万细胞(SCs)和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L-NNA联合应用能否促进脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生。方法20只成年大鼠分为对照组、SCs组、L-NNA组和SCs L-NNA组。在SCs L-NNA组动物T11脊髓段半横断后在损伤处植入施万细胞，术后腹腔内注射L-NNA。结果脊髓半横断后30d，对照组L1脊髓段损伤侧背核神经元数量减少，其胞体皱缩，NOS表达阳性。SCs组存活的神经元增加的同时其NOS表达增强，胞体也发生皱缩。L-NNA组和SCs L-NNA组存活的神经元也增加，但NOS表达降低，其胞体皱缩得到改善。各组中仅在SCs L-NNA组L1脊髓损伤侧背核观察到有被FG标记的神经元胞体，提示其再生轴突穿越损伤区到达头端脊髓组织。结论SCs和L-NNA都可促进脊髓半横断背核受损伤神经元的存活；两者联合应用能更好地促进受损伤背核神经元存活及其轴突再生。     

p53基因表达在辐射诱导骨髓细胞凋亡和修复中作用研究

目的 探讨p53基因表达在辐射导的骨髓细胞凋亡和修复中的改变与作用。方法 经^60Coγ射线以5．5Gy全身辐射78只LACA小鼠。于照后4wk内分批活杀，将骨髓分别进行HE染色和超薄切片，并进行P53蛋白LSAB免疫组化染色和突变型p53(mtp53)cDNA-DNA原位杂交。结果 照射后小鼠骨髓出现明显损伤及损伤后重建现象；照射后6h,造血细胞凋亡显著，并出现凋亡的典型改变；P53蛋白于造血细胞凋亡及修复时均明显增多，而mtp53DNA仅于修复期呈阳性。结论 p53基因表达与了辐射诱导的骨髓细胞凋亡和凋亡后的修复过程。     

穹窿海马伞损伤对前脑NOS阳性神经元的影响

本研究用NADPH－d组织化学方法，对成年大鼠一侧穹窿海马个切断后前脑NOS阳性神经元的变化进行了计量学分析。结果表明：损伤1周后，损伤侧内侧隔核和斜角带垂直支的NOS阳性神经元数分别减少到71．79％和85．86％，细胞面积缩小到86．34％和92．71％，细胞灰度值增大到111．86％和120．37％；损伤后2周，损伤侧内侧隔核和斜角带垂直支的NOS阳性神经元数量持续下降，分别减少到63．95％和73．56％，细胞面积缩小到61．78％和89．77％，灰度值增大到116．78％和128．96％；损伤后3、4周，损伤侧两核的NOS阳性神经元的变化和第2周时类似，数值保持在较稳定的水平。提示受损的前脑NOS阳性神经元发生退变。     

嗅鞘细胞移植和左旋硝基精氨酸对大鼠脊髓损伤后背核神经元存活及其轴突再生的影响

目的 探讨嗅鞘细胞(OECs)移植和一氧化氮合酶(NOS)抑制剂左旋硝基精氨酸(LNNA)对大鼠脊髓损伤后,背核神经元存活及其轴突再生的影响.方法 将20只大鼠行脊髓半横断术后分为对照组、OECs组、L-NNA组和OECs L-NNA组.OECs L-NNA组在脊髓损伤处移植嗅鞘细胞,并注射L-NNA.术后30d时,应用NADPH酶组织化学、免疫组织化学、中性红染色、HE染色和荧光金逆行标记等方法,观察4组大鼠L1背核神经元存活及其轴突再生情况.结果 1.0ECs组、L-NNA组L1背核神经元存活数量均高于对照组,且分类计数显示,这两组对脊髓背核大、中、小神经元的存活均有促进作用,而OECs L-NNA组的促存活作用最显著.2.0ECs组和OECs L-NNA组脊髓损伤处可见再生的轴突,且L1背核可观察到被荧光金逆行标记的神经元胞体.3.与对照组比较,OECs组L1背核NOS阳性神经元增加,L-NNA组NOS阳性神经元减少,OECs L-NNA组NOS阳性神经元数量差异不明显.结论 嗅鞘细胞移植和L-NNA均可促进脊髓受损伤背核神经元的存活,两者联合应用可更好地促进受损伤的背核神经元存活及其轴突再生.     

低水平辐射对大鼠血浆和某些腺体中cAMP和cGMP水平的影响

本研究分二批进行,第一批用成年雄性大鼠每天接受X射线全身照射50mGy/次和100mGy/次,剂量率为15mGy/分,6次/周,共照5周(30次),累积剂量分别为1.5Gy和3.0Gy。受照大鼠睾丸重量在停照后4周内呈持续性减轻,以照射剂量大,停照时间长者,减轻最明显(相当于对照43.9%)。睾丸中cAMP含量于停照后1周升高,以100mGy组明显(P<0.01),停照后2周仍显著高于对照(P<0.05),停照后4周回降到正常较低水平。而血浆和肾上腺中cAMP和胸上腺中cGMP含量无明显变化。第二批实验动物条件与第一批相同,每天接受16.3mGy,~(60)Coγ射线全身照射,剂量率为45.3pGy/分,6次/周,每次照射6小时,在照射6、10、14、18、22周,累积剂量分别为0.59、0.98、1.37、1.76、2.15Gy时与相应对照组比较,垂体、睾丸中cAMP含量及睾丸重量无显著差别,证实慢性小剂量全身照射对睾丸组织的损伤主要取决于剂量率大小,剂量率愈大损伤愈明显。     

大鼠端脑内一氧化氮合酶阳性神经元的发育

目的研究大鼠胚胎时期及生后早期一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元在端脑的分布,探讨一氧化氮（NO）在脑发育过程中的作用。方法应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶（NADPH-d）组织化学方法观察孕14d起至生后14d大鼠端脑内NOS阳性神经元的形态和分布。结果孕14d没有观察到阳性神经元。孕15d纹状体腹外侧已有NOS阳性表达。孕17d在大脑皮质、梨状皮质观察到NOS阳性神经元,但胞体小,树突短,且分支少。随着年龄的增长神经元的胞体数目增多、染色增强或维持一定的水平。到孕20d,NOS阳性神经元分布广泛,梨状皮质、纹状体腹外侧及终纹床核均有大量NOS阳性神经元,其胞体明显增大,树突分支复杂化,长度增加。在生后,除上述脑区的阳性神经元进一步发育分化,大脑皮质和纹状体的NOS阳性纤维相互编织成疏密不等的纤维网外,在胼胝体、海马也观察到NOS阳性神经元。到生后14d,NOS阳性神经元的分布模式总体上已与成年大鼠相似。结论NOS阳性神经元在端脑独特的表达模式提示NO在脑发育和成熟过程中扮演重要角色。     

间充质干细胞可能通过调控免疫细胞促进再生障碍性贫血小鼠骨髓的造血功能

目的:探讨间充质干细胞(MSCs)影响再生障碍性贫血小鼠造血功能的可能免疫机制。方法:30只小鼠分3组,分别为单纯照射组、再障模型组、MSCs治疗组,建立再生障碍性贫血小鼠模型。单纯照射组仅经5Gy[60Co]γ射线照射,再障模型组经5Gy[60Co]γ射线照射后输注DBA/2小鼠胸腺淋巴结细胞1×106cell/只,MSCs治疗组经5Gy[60Co]γ射线照射后输注DBA/2小鼠胸腺淋巴结细胞1×106cell/只,3d后输注人骨髓MSCs1×106cell/只。观察各组小鼠外周血象、骨髓及外周血CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+、NK细胞变化及与造血的关系。结果:经5Gy[60Co]γ射线照射后,单纯照射组、MSCs治疗组外周血象第7d开始下降,21d血象恢复正常。再障模型组外周血象第7d开始持续性下降,至21d血象仍未恢复。照射后7d,各组小鼠间外周血CD4+细胞、CD8+细胞、CD4+/CD8+无明显差异,但MSCs治疗组NK细胞低于单纯照射组和再障模型组(P0.05)。照射后14d3组CD4+细胞比例均明显下降,CD8+细胞则表现不同,再障模型组与MSCs治疗组CD8+细胞比例明显高于单纯照射组,至照射后21d,MSCs治疗组CD8+、NK细胞与单纯照射组相近、而模型组则明显高于单纯照射组和MSCs治疗组;MSCs治疗组小鼠股骨病理切片中脂肪细胞比例明显低于再障模型组,与单纯照射组结果一致。结论:MSCs输注可能通过调控免疫细胞影响再生障碍性贫血小鼠骨髓造血功能。     

Fas、Bcl-2在放射损伤小鼠骨髓细胞的表达及意义和川芎嗪对其影响的研究

目的：探讨放射损伤小鼠骨髓细胞Fas、Bcl-2的表达和骨髓细胞凋亡以及川芎嗪对其影响。方法：健康昆明小鼠经6.0Gy^60Coγ照射后立即喂饲川芎嗪并设对照组和正常组，在放射损伤后第3、7、14、21天检测其骨髓细胞Fas、Bcl-2的表达和骨髓细胞凋亡率。结果：照射后骨髓细胞Fas表达增强，Bcl-2表达减弱，骨髓细胞凋亡增加，但川芎嗪能够减轻放射损伤后小鼠骨髓细胞凋亡率，与对照组有显著差异。结论：放射损伤后小鼠骨髓细胞Fas、Bcl-2的表达变化在细胞凋亡过程中起重要作用。川芎嗪具有减轻放射损伤后小鼠骨髓细胞凋亡的作用。     

灵芝孢子和一氧化氮合酶抑制剂对大鼠脊髓损伤后背核、红核神经元存活及轴突再生的影响

目的探讨灵芝孢子和一氧化氮合酶（NOS）抑制剂（L-NNA）联合应用能否促进脊髓半横断后受损伤的背核和红核神经元存活及其轴突再生。方法30只成年雌性大鼠被分为对照组、L-NNA组、灵芝孢子低剂量组、灵芝孢子低剂量＋L-NNA组、灵芝孢子高剂量组和灵芝孢子高剂量＋L-NNA组。灵芝孢子高剂量＋L-NNA组动物在T11脊髓段半横断后注射L-NNA和胃饲高剂量灵芝孢子。结果脊髓半横断后30d,对照组L1脊髓损伤侧背核神经元数量减少,NOS表达阳性。L-NNA组和灵芝孢子低剂量组损伤侧背核神经元增加,但NOS表达降低。灵芝孢子低剂量＋L-NNA组和灵芝孢子高剂量组损伤侧背核神经元明显增加,NOS表达显著降低。灵芝孢子高剂量＋L-NNA组损伤侧背核神经元最多,NOS表达最低,而且有些神经元胞体被荧光金标记。对照组和L-NNA组损伤侧红核神经元密度降低。灵芝孢子低剂量组和灵芝孢子低剂量＋L-NNA组损伤侧红核神经元密度提高。灵芝孢子高剂量组和灵芝孢子高剂量＋L-NNA组损伤侧红核神经元密度明显提高。结论灵芝孢子和L-NNA都能促进脊髓半横断后受损伤背核神经元的存活,两者联合应用能更好地促进受损伤的背核神经元存活及其轴突再生。灵芝孢子也能促进受损伤的红核神经元存活。     

血小板第4因子对急性放射损伤小鼠骨髓细胞凋亡的影响

目的：研究血小板第4因子（platekt factor 4．PF4）对用5．0 Gy ^60COγ 照射损伤小鼠骨髓细胞凋亡的影响及其作用机制。方法：30只雄性BALB／c小鼠随机分为3组：正常对照组（6只）、PF4处理组（12只）和照射组（12只）。在照射前26、20h分别给PF4处理组小鼠腹腔注射40μg／kg的PF4，再用5．0Gy的^60COγ射线全身均匀照射。照射后4、20h应用流式细胞术（FCM）测定小鼠骨髓细胞的凋亡率；并用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax的表达。结果：照射后4、20hPF4处理组的小鼠骨髓细胞的凋亡率低于照射组，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。Western blot检测显示照射后4、20h照射组小鼠骨髓细胞Bax的表达要比正常对照组和PF4处理组的表达要高。结论：PF4可以抑制辐射所致小鼠骨髓细胞的凋亡。此保护机制可能与促凋亡蛋白Bax表达的下调有关。     

参麦注射液对60Co照射小鼠血液系统作用的研究

目的：观察参麦注射液(SMI)对于放射性损伤所致的小鼠血虚证的治疗作用。方法：采用^60Co照射小鼠，造成小鼠白细胞减少模型，即产生小鼠血虚证。评价SMI对于^60Co所致的小鼠血虚证的治疗作用。结果：SMI对^60Co照射所致小鼠血虚证症状如虚汗多、寒战、精神萎靡有一定程度的抑制作用，尤其对^60Co照射所致小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞数的减少有明显对抗作用，与模型组比较有显性差异(P＜0．05)。试验还显示，照射后四天SMI大、中剂量组小鼠骨髓有核细胞数与阴性对照组无显性差异，说明其骨髓造血功能比较活跃，提示SMI对放射性损伤所致小鼠血虚证有一定的保护和治疗作用，对于小鼠白细胞减少有较好的治疗效果。结论：SMl对小鼠放射性损伤所致血虚证有一定的保护和治疗作用。     

脑震荡鼠大脑多巴胺转运体变化研究

为了进一步探讨脑震荡(cerebral concussion,CC)大鼠认知行为障碍的神经生物学基础,本实验观察了CC大鼠多巴胺转运体(dopamine transporters,DAT)的变化规律。用自制金属单摆式闭合性脑损伤打击装置复制脑震荡大鼠模型48只,随机分为伤后1、2、4、8、16、24d六个实验组,另设一正常对照组(n=8)。运用抗DAT抗体SP法行免疫组化染色,并测定大脑前额叶皮质(PFC)、尾壳核(CPu)、伏隔核(Acbc)、内侧隔核(MS)、斜角带垂直臂核(VDB)、斜角带水平臂核(HDB)、梨形皮质(Pir)、顶叶皮质(CPL)、海马CA1-3、丘脑中央背内侧核(MD)、丘脑背外侧核(LD)、下丘脑腹内侧核(VMH)和杏仁核等16个脑区DAT阳性表达物的光密度值。结果表明,与正常对照组相比脑震荡后大鼠多个脑区DAT阳性表达物呈下调变化。PFC、CPu-2、MS、LD、MD的DAT阳性表达物在伤后第2d表达最低;CPu-1、VDB、HDB、CPL、CA1、CA2、CA3、VMH和杏仁核的DAT阳性表达物在伤后第4d表达最低;Pir的DAT阳性表达物在伤后第8d表达最低;Acbc的DAT阳性表达物在伤后第16d表达最低。各脑区恢复时间各不相同,至24d基本恢复正常。以上结果提示DAT可在大鼠不同脑区广泛表达;脑震荡后其在多个脑区呈下调性改变,提示多巴胺转运体的伤后变化可能参与了脑震荡后的认知障碍。     

去卵巢后大鼠基底前脑NOS阳性神经元的变化及雌激素的作用

目的　研究基底前脑NOS阳性神经元在大鼠去卵巢之后的时程变化 ,为雌激素类药物替代防治绝经后老年性痴呆提供理论依据。方法　将 6 9只 3月龄雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢对照组及雌激素替代治疗组 ,各 2 3只 ,分别在术后 3d、1周、2周、4周、8周处死 ,脑切片用NADPH d组化方法染色 ,观察并和计数基底前脑各区NOS阳性神经元 ,并进行统计分析。结果　各组大鼠基底前脑各区NOS阳性神经元数目在去卵巢后先上升 ,2周时达到高峰 ,以后假手术组及雌激素替代组NOS阳性神经元数目逐渐下降 ,8周时达正常水平。去卵巢对照组斜角带核水平支及垂直支NOS阳性神经元数目却保持较高水平 ,在 8周时与假手术组及雌激素替代治疗组之间差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　去卵巢后基底前脑NOS阳性神经元表达增加 ,而雌激素替代治疗对其有保护作用。     

低剂量γ射线照射提高外周血单个核细胞IL-12分泌并降低IL-10的分泌

目的探讨低剂量γ射线照射对外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10及IL-12的影响。方法分离人PBMC,经17 Gy/minγ射线照射后进行体外培养。采用吖啶橙染色鉴定细胞存活情况,ELISA检测培养0、20、40、60、80 h的PBMC上清中IL-10和IL-12的水平。结果与未照射PBMC相比,低剂量γ射线照射的PBMC在体外培养24 h后,吖啶橙染色显示照射后的PBMC存活细胞略有减少;ELISA检测结果表明培养上清中IL-10含量显著降低,而IL-12含量明显增加。结论低剂量γ射线照射PBMC可引起IL-12水平升高、IL-10水平降低。