山茱萸多糖通过上调Klotho表达和抑制PI3K/AKT通路对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响

目的探究山茱萸多糖通过上调Klotho表达和抑制PI3K/AKT通路对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响。方法分别以6.25、12.5、25 mg/mL山茱萸多糖作用于人肝癌细胞株HepG2,CCK8法检测细胞增殖能力,采用Hoechst 33258荧光染色以及流式AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;通过免疫印迹法检测增殖相关蛋白Ki67、凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3以及PI3K/Akt通路相关蛋白水平,并检测Klotho蛋白表达水平。结果与对照组相比,6.25、12.5、25 mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞克隆形成数显著下降(P0.05),且随山茱萸多糖浓度升高克隆形成数显著下降;与对照组相比,6.25、12.5、25mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞凋亡率显著升高(P0.05),且随山茱萸多糖浓度升高细胞凋亡率逐渐升高(P0.05);与对照组相比,6.25、12.5、25mg/mL山茱萸多糖组HepG2细胞中Bax、cleaved-caspase-3、Klotho蛋白表达升高(P0.05),Ki67、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达下降(P0.05),且呈剂量相关性。结论山茱萸多糖可能通过上调Klotho表达抑制PI3K/AKT通路活化,抑制HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡。     

妇科千金片对急性盆腔炎患者血清炎症介质表达的影响

目的观察妇科千金片对急性盆腔炎患者血清炎症介质（TNF-α、IL-2、IL-6、IL-8）表达的影响,探讨其抗炎性反应的作用机制。方法将72例急性盆腔炎患者随机分为两组,各36例。两组均采用常规方法治疗,观察组加用妇科千金片治疗,疗程均为14 d。观察两组临床疗效及治疗前后血清炎症介质表达的变化。结果观察组治疗总有效率为83.33%,明显高于对照组的69.44%（P〈0.05）;两组患者治疗前血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-2,IL-6,IL-8等炎症介质表达水平比较无明显差异,治疗后炎症介质表达水平均明显下降,且观察组下降更显著（P〈0.05）。结论妇科千金片治疗急性盆腔炎疗效显著,可明显减轻炎症介质介导的炎性反应,值得临床推广。     

妇科千金片对慢性盆腔炎模型大鼠卵巢组织caspase-3和caspase-8表达的影响

目的建立SD大鼠慢性盆腔炎模型,观察妇科千金片对大鼠慢性盆腔炎模型中卵巢组织半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-8(caspase-8)表达的影响,探讨妇科千金片治疗慢性盆腔炎的作用机制。方法采用混合菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及解脲脲原体)接种法,建立慢性盆腔炎模型,随机分成妇科千金片低、中、高(0.52,1.04和2.08g·kg-1)剂量组,中药妇炎康对照组(妇炎康0.41g·kg-1),假手术组、模型组和空白组7组。药物治疗后,取卵巢组织,运用免疫细胞化学法观察caspase-3和caspase-8表达情况。结果治疗21d后,与模型组比,妇科千金片低剂量组caspase-3蛋白光密度值升高,具有显著性差异(P<0.05),妇科千金片中、高剂量caspase-3蛋白光密度值明显升高,具有非常显著性差异(P<0.01);与模型组比,妇科千金片低、中、高剂量caspase-8蛋白光密度值明显升高,具有非常显著性差异(P<0.01)。结论妇科千金片可能通过升高caspase-3、caspase-8蛋白的表达,引发caspase级联反应,促使炎性细胞凋亡,从而减轻卵巢组织炎性损害。     

基于PI3K/Akt/mTOR通路探究七氟醚麻醉对大鼠神经细胞凋亡的影响

目的 探讨七氟醚麻醉对大鼠认知功能及神经细胞凋亡的影响。方法 取96只大鼠,随机分为对照组（吸入2 L·min-1氧气）、七氟醚低浓度组（吸入体积分数为1%的七氟醚+2 L·min-1氧气）、七氟醚中浓度组（吸入体积分数为2%的七氟醚+2 L·min-1氧气）、七氟醚高浓度组（吸入体积分数为4%的七氟醚+2 L·min-1氧气）,持续吸入6 h。用Morris水迷宫实验观察各组大鼠认知能力,用HE染色观察海马组织学形态,用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定海马组织中枢神经特异性蛋白（solubleprotein100β,S-100β）、神经元特异性烯醇化酶（neuron-speci fi cenolase,NSE）、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平,流式细胞术测定神经细胞凋亡情况,蛋白印迹法（Western blotting）测定海马组织B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bc...     

丹参素经PI3K/Akt/Bax信号通路对脓毒症大鼠脑损伤的改善作用

摘要：目的:探讨丹参素经磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（Akt）/促凋亡基因（Bax）信号通路对脓毒症大鼠脑损伤的改善作用。方法:100只SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、乌司他丁组（20 mg·kg-1）、丹参素低、高剂量组（40,80 mg·kg-1）,每组20只。除假手术组外,其余各组建立脓毒症模型。乌司他丁组、丹参素低、高剂量组给予相应药物灌胃,假手术组及模型组给予等体积的生理盐水,1次/d,持续给药7 d。实验结束后,评估大鼠神经功能,观察大鼠海马神经元病理结构,测定大鼠海马组织PI3K、Akt、Bax mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组Basso-BeattieBresnahan（BBB）评分、经过原平台位置的次数、原平台象限停留时间、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平明显降低,逃避潜伏期、Bax mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与模型组比较,乌司他丁组和丹参素低、高剂量组BBB评分、经过原平台位置的次数、原平台象限停留时间、PI3K、Akt mRNA和蛋白表达水平明显升高,逃避潜伏期、Bax mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与乌司他丁组比较,丹参素低剂量组各指标差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量组与其作用相似（P>0.05）。结论:丹参素可减轻脓毒症大鼠脑损伤,其机制与丹参素激活PI3K/Akt信号通路进而抑制Bax的表达有关。     

花红片、妇科千金片治疗盆腔炎性疾病后遗症湿热瘀结证的临床观察

目的:探究花红片、妇科千金片治疗盆腔炎性疾病后遗症湿热瘀结证的临床疗效。方法:随机抽取2015年3月~2016年11月某院收治的盆腔炎性疾病后遗症湿热瘀结证患者100例作为研究对象,将其分为实验组与对照组,其中对照组给予妇科千金片治疗,实验组给予花红片治疗,对比观察两组患者治疗效果。结果:实验组患者治疗总有效率为96.00%,显著优于对照组患者的86.00%,对比差异显著,具有统计学意义(P0.05);实验组患者的局部体征治疗总有效率为93.00%,显著优于对照组患者的70.00%,对比差异显著,具有统计学意义(P0.05);治疗后显示两种药物对两组患者白细胞总数、中性粒细胞、血色素、盆腔积液的影响差异无明显差异。结论:花红片与妇科千金片对盆腔炎疾病后遗症的湿热瘀阻证均具有良好的治疗效果,花红片治疗效果更佳,适用于湿热瘀阻偏重患者,而妇科千金片更适合于湿热瘀阻兼气虚患者。     

PI3K信号通路在LPS诱导RAW264.7细胞表达sTREM-1中的作用

目的：探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路在脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞表达可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)中的作用。方法培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7,采用相同浓度的LPS在不同时间诱导RAW264.7细胞,应用Western blot法分别检测PI3K蛋白表达水平,RT-PCR法检测PI3K mRNA表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞培养血清中sTREM-1表达水平。用不同浓度PI3K特异性抑制剂LY294002处理细胞,观察上述指标变化。结果 LPS可时间依赖性地诱导RAW264.7细胞PI3K蛋白、PI3K mRNA的表达;LY294002可浓度依赖性地抑制PI3K蛋白、PI3K mRNA的表达;LY294002阻断PI3K信号转导通路后,LPS对sTREM-1表达的诱导作用受到显著抑制,并且具有剂量依赖性。结论 LPS通过PI3K信号通路诱导RAW264.7细胞表达sTREM-1。     

血竭醇提物对大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影响

目的:研究血竭醇提物对大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影响。方法:采用只保留穿支血管切断其他血管的方法复制大鼠穿支皮瓣模型,造模成功后,将大鼠分为模型组(外敷,生理盐水)和血竭醇提取物(EESD,血竭素含量为75.08mg/g)组(外敷,0.21 g/cm~2),每组10只,连续敷药7 d,每天1次。敷药7 d后测定各组大鼠穿支皮瓣存活率、皮瓣微血管密度。将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧缺糖16 h后复氧复糖复制HUVEC缺氧缺糖/复氧复糖细胞模型,造模成功后,将细胞分为正常组、模型组和血竭素高、中、低浓度组(2.5、1.0、0.5μg/m L),于复氧复糖培养24 h后,采用显微镜观察各组细胞的形态,采用MTT法和比色法分别测定各组细胞的活性和细胞中一氧化氮(NO)的含量,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blot法检测丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达水平,PI3K蛋白的表达以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度。结果:在大鼠实验中,与模型组比较,EESD组大鼠穿支皮瓣存活率、微血管密度均显著增加(P<0.01)。在细胞试验中,与正常组比较,模型组HUVEC细胞存活率、NO含量,PI3K、Akt、eNOS mRNA的表达水平,PI3K蛋白的表达以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度均显著降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,血竭素高、中、低浓度组HUVEC细胞的存活率、NO含量,PI3K、Akt、eNOS m RNA的表达水平,PI3K蛋白的表达以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:EESD可提高大鼠穿支皮瓣模型的存活率,其机制可能与激活PI3K/Akt/eNOS通路保护内皮细胞有关。     

基于PI3K/Akt信号通路探讨姜黄素诱导A549细胞凋亡的机制

目的 观察并探讨姜黄素对非小细胞肺癌A549细胞的作用及其机制。方法 将A549细胞分为空白组(正常培养)和低、高剂量实验组(分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)及激动药+低、高剂量实验组(先用50μmol·L^-1 Recilisib Sodium干预24 h后，再分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)、抑制药+低、高剂量实验组(先用25μmol·L^-1 PI3K-IN-1干预24 h后，再分别用40、80μmol·L^-1姜黄素干预48 h)。用MTT法测定细胞增值率；用流式细胞术测定细胞凋亡情况；用实时荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)mRNA的相对表达水平；用蛋白质印迹法检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达水平。结果 空白组、低剂量实验组、高剂量实验组、激动药+低剂量实验组、抑制药+低剂量实验组、激动药+高剂量实验组、抑制药+高剂量实验组的细胞活力分别为(100...     

中医药调控PI3K/AKT信号通路防治慢性心力衰竭研究状况

慢性心力衰竭(CHF)是各种心血管疾病的终末期表现,是各种心脏结构或功能疾病所造成的心室充盈和(或)射血分数受损的一组综合征。该病的发病机制复杂多样,大多与细胞凋亡的活性增强有关。磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路参与CHF的发生、发展和病理形成。相关研究表明,PI3K/AKT通路是中药治疗CHF的关键靶通路。本文对近年来中药调控PI3K/AKT通路干预CHF的机制和作用进行分析和总结,发现中药提取物、中成药及中药复方均可改善CHF的心肌细胞损伤,其作用机制与细胞凋亡、炎症因子、氧化应激和心室重构密切相关。同时创造性地总结了PI3K/AKT通路在防治CHF中存在的对立性争议,并分析了产生争议原因,以期为CHF的治疗和新药研发提供新思路。     

小红参乙酸乙酯提取物调控PI3K/AKT/GSK3-β通路对心肌缺血再灌注损伤大鼠雌激素的影响

目的 研究小红参乙酸乙酯提取物通过调控磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-OH kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/糖原合成酶激酶3-β(glycogen synthase kinase 3-β,GSK3-β)通路对心肌缺血再灌注损伤大鼠雌激素的影响。方法 选取SPF级SD雌性大鼠50只,空白组10只,建模中死亡10只,随机分为模型组、低剂量组、高剂量组,每组10只。对照组不做任何处理,模型组、低剂量组、高剂量组进行心肌缺血再灌注损伤模型建模,建模成功后模型组不做任何处理,低剂量组、高剂量组分别给予小红参乙酸乙酯提取物灌胃,其剂量分别为56.7 mg/kg、280 mg/kg。观察大鼠心肌损伤[肌钙蛋白I(CTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)]、氧化应激[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)]、一氧化氮(NO)、内皮-氧化氮合酶(eNOS)含量、性激素、PI3K/AKT/GSK3-β信号通路表达量情况。结果 与空白组比较,模型组、低剂量组、高剂量组cTnI、CK-...     

选择性PI3K抑制剂的研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）是细胞内重要的信号转导分子,在细胞存活、增殖和分化过程中起重要调节作用。PI3K是PI3K/AKT/mT0R信号转导通路中的关键节点蛋白,调控着重要的生命活动。现已证实磷脂酰肌醇3-激酶（PI3Ks）是潜力巨大的药物治疗靶点,特别是PI3Kα现己成为抗肿瘤治疗的重要靶点之一。目前己有多种针对PI3Ks的抑制剂进入临床研究。然而现有抑制剂的化学类型不多且选择性不高、临床应用受局限。因此积极研究和开发结构新颖的PI3K选择性抑制剂对于疾病的靶向治疗具有重要意义。本文将对选择性PI3K抑制剂在抗肿瘤方面的研究进展作一综述。     

塞克硝唑联合妇科千金片治疗慢性盆腔炎的疗效观察

目的探讨塞克硝唑联合妇科千金片治疗慢性盆腔炎的临床疗效。方法 94例慢性盆腔炎患者随机分为两组,每组47例,其中,治疗组给予塞克硝唑联合妇科千金片联合治疗;对照组给予左氧氟沙星和甲硝唑治疗,14d为1个疗程,疗程,治疗后比较两组临床总有效率,观察其不良反应发生情况和复发率。结果治疗组临床总有效率明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间均未见明显不良反应发生。随访6个月治疗组复发率明显低于对照组(P<0.05)。结论采用塞克硝唑联合妇科千金片治疗慢性盆腔炎疗效确切,值得在临床推广。     

妇科千金片联合抗生素治疗慢性盆腔炎的疗效分析

目的观察妇科千金片治疗慢性盆腔炎的疗效,并对比观察中西医结合治疗的临床疗效。方法对在我门诊确诊的慢性盆腔炎患者随机分成3组:治疗组(妇科千金片联合青霉素800万U,0.9%氯化钠注射液,甲硝唑200mL),对照组1(单用妇科千金片),对照组2(单用抗生素青霉素800万U,0.9%氯化钠注射液,甲硝唑200mL),1个月判断疗效,观察症状改善及有效率。结果治疗组明显优于对照组,治疗组与对照组1、对照组2之间两两比较,均有统计学差异(P<0.05)。结论妇科千金片联合抗生素治疗慢性盆腔炎有良好的疗效。     

HCV-F基因在hepG2细胞中的表达以及对PI3K的影响

探讨丙型肝炎病毒(HCV)F基因对PI3K表达的影响.应用PCR技术从含有HCV全长开放阅读框的质粒中获得HCV-F基因片段,利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0(-)中.通过酶切、PCR及测序鉴定,HCV-F基因已正确插入到pcDNA3.0(-)中,再利用脂质体转染HepG2细胞.经RT-PCR及Western blot检测,HCV的F基因在HepG2细胞中获得表达,而且在表达重组HCV-F的转染HepG2细胞中,检测到PI3K蛋白的表达.实验表明HCV-F可在体外激活PI3K及其信号通路.     

EGFR和PI3K在进展期胃癌中的表达及临床意义研究

目的探讨进展期胃癌组织中EGFR和PI3K蛋白表达与临床病理参数的相关性及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色方法检测68例胃癌组织及15例正常胃黏膜组织中EGFR和PI3K蛋白的表达。结果在68例进展期胃癌组织标本中,EGFR和PI3K蛋白的阳性表达率分别为58.82%和76.47%,在正常胃黏膜中均未见其阳性表达。EGFR阳性表达与淋巴结转移、远处转移及临床TNM分期有关（P〈0.05）;PI3K阳性表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、远处转移及临床TNM分期有关（P〈0.05）。结论联合检测EGFR和PI3K蛋白表达有助于阐释进展期胃癌发生发展、浸润转移的机制,并可作为评估胃癌恶性生物学行为及预后的参考指标。     

LY294002对类脂A诱导的人冠状动脉内皮细胞缝隙连接蛋白43表达的影响

目的 探讨LY294002对类脂A(KLA)诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAEC)缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法 用CCK8法检测0、0.01、0.05、0.10、0.20 mg/L KLA和0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L磷酸肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂——LY294002对HCAEC活力的影响。将HCAEC采用简单随机分组法分为空白对照组(Con组)、Toll样受体4(TLR4)激动组(KLA组)、PI3K抑制组(LY组)和KLA+LY组，采用Western Blot法检测各组HCAEC TLR4、PI3K、Cx43蛋白表达水平。结果 0.01、0.05 mg/L KLA HCAEC存活率与0 mg/L比较，2.5μmol/L LY294002 HCAEC存活率与0μmol/L比较，差异均无统计学意义(P>0.05);0.10、0.20 mg/L KLA HCAEC存活率均明显低于0 mg/L,5.0、10.0、20.0μmol/L LY294002 HCAEC存活率均明显低于0μmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05)。KL...