巨细胞病毒IgM抗体捕捉ELISA法的建立及其应用

建立巨细胞病毒（ＣＭＶ）ＩgＭ抗体捕捉ＥＬＩＳＡ法（ＡＣ－ＥＬＩＳＡ），并用该法 调查１９１７例杭州市不同人群的巨细胞病毒感染情况。结果显示：抗原浓度、抗ＣＭＶ抗体酶结合物浓度对所测得的标本ＯＤ值都有不同程度的，用最适的实验条件建立的ＡＣ－ＥＬＩＳＡ法检测杭州市不同人群，表明儿童组ＣＭＶ感染率高于成人组，工人组的感染率高于其他职业人群。以本方法测定ＣＭＶ－ＩgＭ抗体的敏感性和特异性较高，可广泛应用于     

重庆地区献血者巨细胞病毒感染率调查

目的：调查重庆地区献血人群中巨细胞病毒（CMV）的感染情况。方法：采用ELISA法测定CMV－IgM抗体。结果：重庆地区献血者中CMV－IgM抗体阳性率平均为18．0％，女性（26．7％）远高于男性（10．3％）；男性抗体阳性率在各年龄组差别不显著，女性抗体阳性率有随年龄增大而减小的趋势。结论：本地区献血人群中CMV感染率低于全国平均水平。     

汕头市畸形儿巨细胞病毒感染的检测

宫内病毒感染尤其是巨细胞病毒（CMV）感染是致畸的重要原因之一。为了解我市畸形儿病毒感染的状况，探讨CMV在致畸上的作用及相关性，本室从汕头市各医院收集了24例畸形儿（无脑儿、脊柱裂、异位心、多发性畸形、巨大肝等），取母、婴配对标本（包括羊水，母血、宫颈分泌物、乳汁及畸形儿心血、咽拭子）共128份进行常规病毒分离、鉴定，并用ELISA法测定母、婴血清中抗CMV、IgG、IgM抗体。结果从24例畸形儿中分离到CMV1例，HSV-2型1例，检出CMV-IgM3例（其中1例为CMV分离阳性），病毒检测阳性率为16.67%（4/24），而CMV占病毒感染的3/4。初步结果提示本市畸形儿病毒感染因素不容忽视，而在病毒感染中以CMV为主要病原。     

巨细胞病毒感染的实验室调查和研究

目的:针对我院近一年来巨细胞病毒感染的实验室诊断进行调查和研究。方法:统计我科2012年7月至2013年8月期间酶联免疫吸附(ELISA)法测定的巨细胞病毒IgM(HCMV-IgM)抗体阳性患者,以及对阳性患者进一步用实时荧光PCR(FQ-PCR)法检测巨细胞病毒DNA(HCMV-DNA)结果。结果:在此期间共检测HCMV-IgM4601例患者,其中HCMV-IgM阳性为108例,阳性率为2.35%(108/4601);108例HCMV-IgM阳性患者进一步进行FQ-PCR法检测患者血清和尿液HCMV-DNA,阳性为50例,阳性符合率为46.3%(50/108)。结论:HCMV感染患者实验室诊断不能仅依赖ELISA法检测抗体,必须进一步采用FQ-PCR方法检测DNA加以提高疾病诊断率效率,严防误诊误治的发生。     

ELISA法检测孕妇巨细胞病毒抗体

应用ＥＬＩＳＡ技术，对６０名正常育龄妇女，５８名正常孕妇、５３名有异常妊产史孕妇进行巨细胞病毒抗体ＣＭＶ－ＩｇＧ、ＣＭＶ－ＩｇＭ检测，结果正常孕妇及异常妊产史孕妇的ＣＭＶ－ＩｇＭ检出率分别为１２．１％和１７％，明显高于正常育龄妇女的ＣＭＶ－ＩｇＡ检出率１．７％，ＣＭＶ－ＩｇＧ检出率无显著性差异。     

ELISA检测脐血中巨细胞病毒IgM抗体诊断先天性巨细胞...

Cytomegalovirus IgM (CMV IgM) antibodies of 582 cord sera from 6 hospitals in Chengdu were detected by direct ELISA and indirect ELISA. Twenty-seven cases with CMV IgM antibody positive were detected from 582 cord sera. Twenty-five and 15 cases were found to have CMV IgM antibody by direct ELISA and indirect ELISA, respectively (P greater than 0.05). Indirect ELISA for detection CMV IgM antibody was only interfered by high concentration of CMV IgG and rheumatoid factor. Children with CMV IgM antibody positive were followed-up to 5-6 months. Hearing loss was detected by impedance audiology in only 2 cases. But the other physical and mental examinations were normal. The result showed that the prevalence of congenital CMV infection is 4.6% in our study and direct ELISA method is more specific and sensitive than indirect ELISA method to detect CMV IgM antibody in cord serum.     

承德市孕妇人巨细胞病毒IgM捕获ELISA法血清学检查

人类巨细胞病素 (cytomegalo virus,CMV)可引起胎儿宫内感染 ,可以造成流产、早产、死胎或胎儿生长发育迟缓、畸型等一系列严重后果。为了控制、预防孕妇和胎儿的宫内感染 ,排除胎儿发育异常 ,确保胎儿健康发育和安全分娩 ,我们采用捕获 ELISA方法 ,对我市 5 2名门诊孕妇常规体检者进行了血清检测 ,试图对我市孕妇 CMV活动性感染情况做出初步评价 ,现将有关结果报告如下。1　材料和方法1.1　血清标本　取自我妇科门诊产前检查者 ,主要是本市孕妇 ,年龄 2 2～ 35岁 ,门诊检查排除心脏、肝脏、肾脏等疾病和其它传染病。血清按常规方法分…     

婴幼儿人巨细胞病毒感染154例PCR与ELISA检测比较

目的:探讨采用不同的定量方法及不同的标本检测婴幼儿人巨细胞病毒(HCMV)感染阳性率。方法:采用荧光定量PCR法和ELISA定量法分别对154例疑感染HCMV住院患儿进行HCMV DNA和HCMV IgM抗体的定量检测,其中对73例患儿的血及尿标本同时进行HCMV DNA的检测。结果:血和尿HCMV DNA同时检测,尿检出率明显高于血;血和尿HCMVDNA检出率明显高于血清HCMV IgM;两种方法的联合检测进一步提高阳性率。结论:两种方法同时检测可提高HCMV的检出率;尿标本HCMV DNA的检出率明显高于血标本,采用尿标本更方便,且阳性率高。     

上海地区育龄妇女中巨细胞病毒感染的调查

用间接EIJSA方法对上海地区1048名育龄期妇女血清进行了人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus HCMV)航体的检测,结果HCMV-IgG抗体阳性率为93.5%,提示HCMV在育龄期妇女中的感染相当普遍。16～18岁、20～29岁和30～45岁三个年龄组,HCMV-IgG抗体阳性率分别为54.9%、89.7%和95.4%,表明HCMV的感染率随年龄增长而增加。该调查还同时表明HCMV感染与社会经济情况及婚姻状况有关。     

ELISA检测脐血中巨细胞病毒IgM抗体诊断先天性巨细胞病毒感染的探讨

作者用直接和间接ELISA方法,对成都市6所医院初生婴儿582例的脐应进行了巨细胞病毒(CMV)IgM抗体检测。结果:两种方法检出CMV IgM抗体阳性者共27扮,阳性率4.6％,其中用直接ELISA检测,阳性者25份,间接ELISA阳性者为15份。前者明显优于后者(P<0.05),表明其敏感性高,特异性强。CMV IgM抗体阳性儿临床随访至5～6月龄,2例听力异常,1例眼底可疑异常。     

酶联免疫吸附试验检测巨细胞病毒IgM抗体影响因素探讨

本文讨论了酶联免疫吸附试验(ELISA)检测CMV IgM抗体各种影响因素,并引入正交试验方法。我们评价抗原和酶标板的预处理、封板液、包被时温对测定结果的影响顺序和程度。结果表明:预处理和封板步骤在酶标试验中非常重要。用正交试验得出的最佳条件确定抗晾最佳包被浓度较常规方法更快速,准确。     

酶联免疫吸附试验检测人叶酸受体抗体IgM方法的建立及评价

目的 建立酶联免疫吸附试验(ELISA)检测人血浆叶酸受体抗体IgM的方法。方法 将从正常分娩健康产妇的胎盘中提取、纯化人叶酸受体蛋白稀释至5 ng/μl,作为抗原包被96孔板,以羊抗人IgM作为二抗,以健康人混合血浆作为标准品,浓度设定为1。采用ELISA检测人血浆叶酸受体抗体IgM水平,并评价该方法的灵敏度、精密度和稳定性。分别以人叶酸受体蛋白和牛源叶酸结合蛋白作为包被蛋白,检测24例健康新生儿母亲和20例神经管畸形患儿母亲的血浆标本叶酸受体抗体IgM水平,比较两种包被蛋白的检测结果。结果 ELISA方法可以检测的人血浆叶酸受体抗体IgM浓度为6.25×10-4~8.00×10-2,最低检测限为3.12×10-4。该方法检测高、中和低浓度血浆叶酸受体自身抗体IgM的批内差异分别为6.61%、3.50%和5.12%,批间差异分别为4.54%、5.49%和5.44%,此方法检测不同稀释倍数样品中叶酸受体自身抗体IgM浓度的测定值均在均数±10%范围内。人叶酸受体包被检测板测得的健康新生儿母亲(t=-11.9,P<0.001)及神经管畸形患儿母亲(t=7.35,P<0.001)的叶酸受体抗体IgM浓度均显著高于牛源叶酸结合蛋白包被检测板的测定值。结论 本研究成功建立了检测人血浆叶酸受体抗体IgM的ELISA方法,该方法以人叶酸受体蛋白作为包被蛋白,检测灵敏度高,精密度好,结果稳定。     

93例贫血患者病因分析

肾移植术后巨细胞病毒（CMV）感染具有较高的发病率和病死率，早期准确的检测有利于临床治疗，本文就CMV感染的检测方法尤其是感染早期的几种诊断方法进行阐述。     

蛋白芯片技术检测肺炎支原体IgM抗体的应用评价

目的评价蛋白芯片技术检测肺炎支原体IgM抗体的临床适用性。方法分别用蛋白芯片技术和酶联免疫吸附试验检测40例肺炎支原体患者血清肺炎支原体IgM抗体。结果蛋白芯片技术检测肺炎支原体IgM抗体灵敏度与酶联免疫吸附试验无显著差差异（x2=0．2,P〉0．05）,特异性显著高于酶联免疫吸附试验（X2=4．3,P〈0．05o结论蛋白芯片技术检测肺炎支原体IgM抗体具有操作简单、特异性强、数据可存性、设备要求低等优点,适合医院的临床需要,值得推广应用。     

几种CMV相关物检测对诊断肾移植患者CMV感染的评价

目的 比较血中pp65抗原、DNA和IgM抗体检测对肾移植患者巨细胞病毒（CMV）活动性感染的诊断价值,为临床上对CMV感染的诊断和治疗提供参考.方法 收集83位肾移植患者的血标本（共302份）,分离血浆和多型核白细胞,血浆用于CMV-DNA（定性PCR）和IgM抗体（ELISA）检测,白细胞用于pp65抗原血症检测（荧光免疫法）.结果 CMV-DNA阳性率为36.1%,CMV IgM抗体阳性率20.2%,CMV pp65抗原阳性率为38.5%.pp65抗原阳性细胞数与病人的临床症状密切相关.结论 pp65抗原阳性细胞数能反应CMV的数量,可监测早期活动性CMV感染及疗效观察,检测方法特异,灵敏,操作简单,适合临床实验室应用.     

人巨细胞病毒部分抗原基因的克隆及表达

目的克隆表达人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）特异性强的抗原决定簇基因,制备特异性抗原。方法从感染HCMV的细胞上清液中提取病毒基因组DNA,用PCR扩增HCMVpp150（ppUL32）、gp52（UL44）、pp65（ppUL83）、ppUL80a蛋白IgM抗原决定簇编码区DNA序列,将其克隆至pMD-18T载体并测序,然后克隆至表达载体pGEX-4T-1诱导表达,采用免疫印迹法（Western blotting）检测表达产物的抗原性。结果经序列测定各基因片段序列正确,并在pGEX-4T-1表达载体中得到了高效表达,表达的融合蛋白经Western blotting和ELISA分析,具有良好的抗原性,能够与HCMV IgM阳性血清发生特异性反应。结论通过基因工程技术可以有效地获取纯度较高、特异性强的HCMV抗原。为HCMV感染者的早期诊断提供检测用抗原。     

临检样本中甲型和戊型肝炎病毒IgM抗体检测的比较

目的比较分析临检样本中甲型和戊型肝炎病毒IgM抗体（抗HAV-IgM和抗HEV-IgM）检测状况。方法收集非流行年份成人临床检验样本32600份。采用酶免疫法（EIA）捕捉抗体法检测抗-HAV IgM，EIA间接法检测抗-HEV IgM。结果32600份中送检抗-HAV IgM者为1785份，阳性34例，阳性率为1．9％，送检抗-HEV IgM者1820份，阳性88例，阳性率为4．84％。比较分析显示，抗-HEV IgM阳性率相对较高（x^2=23．668，P〈0．01），且具有季节上相对分散，年龄上以30岁以上为主，性别上男女相差相对较小等特点。结论非流行年份成人临床检验样本中，抗HAV-IgM和抗HEV-IgM检出率相对较低，但相对甲型肝炎来说，戊型肝炎更值得广泛注意。     

亚甲基蓝/光化学法灭活血浆巨细胞病毒的初步研究

目的 探讨亚甲基蓝／光化学法对血浆CMV灭活的效果。方法 应用ELISA对献血者进行CMV-IgM抗体筛选，应用荧光定量PCR检测仪对亚甲基蓝／光化学法处理的CMV-IgM抗体阳性血浆进行CMV核酸检测。结果 在166例血浆标本中，经ELISA检测发现33例CMVIgM抗体阳性，阳性率为19．9％；在33例CMV-IgM抗体阳性血浆中，经亚甲基蓝／光化学法灭活后，定量PCR检测特定的CMVDNA片段拷贝数为0。结论 初步证明用亚甲基蓝／光化学法对血浆CMV可能有一定的灭活作用。     

肺炎支原体抗体IgM阳性患儿831例临床分析

目的分析肺炎支原体感染患儿的临床及实验室资料,为诊断和治疗肺炎支原体感染提供依据。方法采用ELISA法检测以发热、呼吸道疾病住院患儿肺炎支原体IgM,被动凝集法检测血清肺炎支原体混合抗体。透射比浊法检测C反应蛋白（CRP）,半定量检测降钙素原（PCT）,对其中831例肺炎支原体IgM阳性患儿分年龄段进行对比分析。结果肺炎支原体感染患儿男女构成间差异无统计学意义（P〉0．05）,而患儿的季节分布间差异有统计学意义（P〈0．01）。肺炎支原体感染惠儿中肺炎支原体肺炎占74．2％。肺炎支原体感染患儿血清CRP异常率48．2％与PCT的异常率18．3％比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论肺炎支原体感染的患儿以学龄儿童为主;在诊治时,不能仅局限于呼吸系统;肺炎支原体感染辅助诊断中PCT的临床意义优于CRP。