桃红芩连汤对脓毒症大鼠心肌高迁移率族蛋白B1的影响

目的观察脓毒症大鼠心肌高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肌钙蛋白Ⅰ(TnⅠ)的水平,探讨桃红芩连汤治疗脓毒症心肌损伤机制。方法 48只清洁级健康雄性Wistar大鼠随机分成假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)、脓毒症中药治疗组(ZY组),每组16只。于手术后24、48h分别检测TNF-α、IL-6、TnⅠ、HMGB1浓度,光镜观察心肌病理变化。结果与Sham组比较,CLP组在24、48hTNF-α、IL-6、TnⅠ及HMGB1水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.01);与CLP组同期比较,ZY组24、48h时TNF-α、IL-6、TnⅠ及HMGB1浓度均明显下降,差异亦有统计学意义(P0.05)。光镜下CLP组和ZY组可见心肌损伤,CLP组较ZY组损伤明显。结论桃红芩连汤可降低脓毒症相关炎症因子水平,对心肌有保护作用。     

电针足三里对脓毒症模型大鼠肠道Ghrelin及高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的探讨脓毒症模型大鼠血清及肠组织Ghrelin及高迁移率族蛋白B1（high mobility group protein,HMGB1）表达及电针足三里干预对其表达的影响。方法采用随机数字表法将48只Wistar雄性大鼠分为假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔术组（cecal ligaton and puncture, CLP组）、CLP加电针足三里组（electroacupanctrue, EA组）及CLP加Ghrelin受体阻断剂加电针组（GHSRA组）,每组12只。通过CLP术诱导制备严重腹腔感染致脓毒症模型。Sham组沿腹正中线切口后立即缝合腹壁切口。EA组于CLP术后20 min行持续针刺双侧足三里30 min（强度为2 mA, 2～100 Hz）, GHSRA组于电针前静脉注射Ghrelin受体阻断剂 ［D Arg1,D Phe5,D Trp7.9,Leu11］ substance P,用量为700 nmol/kg。注射开始20 min后行电针足三里治疗,操作同EA组。各组大鼠于CLP术后12 h取血标本,采用ELISA法测定血清HMGB1及Ghrelin含量,免疫组化法测定肠组织Ghrelin免疫阳性细胞数目,蛋白质印迹法（Western blot）检测肠组织HMGB1蛋白表达。结果与Sham组比较,CLP组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达显著增加（P<0.05）,Ghrelin水平及其免疫阳性细胞表达率显著降低（P<0.05）;与CLP组比较,EA组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达显著降低（P<0.05）,而Ghrelin水平及其免疫阳性细胞表达率显著增加（P<0.05）;与EA组比较,GHSRA组血清HMGB1水平及肠组织HMGB1蛋白表达增加（P<0.05）,但Ghrelin水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）;Sham、CLP和EA组大鼠血清HMGB1与Ghrelin水平呈负相关（r=－0.528, P<0.01）。结论电针足三里可抑制脓毒症模型大鼠肠道HMGB1蛋白表达,促进Ghrelin表达。Ghrelin受体阻断剂能阻滞电针对HMGB1的抑制作用,电针足三里的抗炎作用可能与Ghrelin有关。     

血必净通过高迁移率族蛋白1对热应激神经干细胞的保护作用研究

【目的】探讨血必净通过高迁移率族蛋白1（HMGB1）对热应激神经干细胞的保护作用机制。【方法】以43 ℃热刺激60 min建立热应激大鼠脑神经干细胞模型。实验分为7组,即阴性对照组、热应激组、非热应激+血必净（浓度25%）组、热应激+血必净低剂量（浓度5%）组,热应激+血必净中剂量（浓度15%）组、热应激+血必净高剂量（浓度25%）组、热应激+HMGB1抑制剂组。采用细胞计数试剂盒8（CCK-8）检测细胞增殖能力;采用Ac-DEVD-pNA底物法检测细胞 Caspase-3活性;采用蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测自噬相关蛋白p62、微管相关蛋白轻链3（LC3）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及凋亡相关蛋白、Caspase-3 表达水平;使用核蛋白/胞浆蛋白提取试剂盒提取细胞胞核、胞浆蛋白,Western Blot 检测胞内及胞浆内HMGB1表达水平。【结果】 选择热应激复温9 h 时间点与血必净高剂量用于后续实验。与阴性对照组比较,热应激组细胞 p62、LC3-up 表达量降低,p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1（胞浆）表达量增高（P＜0.01）;与热应激组比较,血必净处理组（热应激+高剂量血必净）p62、LC3-up、Caspase-3表达量进一步下降（P＜0.01）,p-mTOR、LC3-bottom、HMGB1（胞浆）的表达量进一步升高（P＜0.01）;与血必净处理组比较,HMGB1抑制剂处理组（热应激+HMGB1抑制剂）p62、p-mTOR、LC3、Caspase-3及HMGB1（胞浆）的表达量无显著性差异（P＞0.05）。【结论】 血必净可通过促进HMGB1胞浆转位诱导自噬抑制热应激脑神经干细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。     

血必净注射液对脓毒症早期大鼠血浆蛋白水平的影响

目的:观察血必净注射液对脓毒症大鼠早期血浆总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)水平的影响,拟从分子生物学角度阐明可能存在的机制.方法:54只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、脓毒症组和血必净治疗组,尾静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPs)建立脓毒症模型.各组在建立模型后6,12,24 h作为观察点,测量各组的血浆总蛋白、白蛋白值;采用Western blot法对3组大鼠肝脏AMPK,eEF2蛋白进行检测.结果:与正常对照组比较,u)s尾静脉注射6,12 h后,脓毒症组、血必净组的TP及ALB尚无变化;但24 h后脓毒症组TP和ALB明显低于正常组(P<0.01),pho-AMPK,pho-eEF2在肝脏的表达也相应增加(P<0.01),而血必净组无明显变化;各组间总AMPK,eEF2均无统计学差异.与脓毒症组比较,血必净治疗组24 h TP,ALB明显升高(P<0.05),但稍低于对照组;血必净组pho-AMPK,pho-eEF2在肝脏的表达明显下降(P<0.05).结论:脓毒症早期应用血必净注射液可以通过AMPK途径抑制肝脏蛋白的分解,减少血浆蛋白的分解.     

血必净注射液对脂多糖诱导HMGB1胞外释放的影响

目的 研究血必净注射液对内毒素作用后细胞释放高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的影响.方法 采用巨噬细胞株RAW 264.7和正常大鼠肝细胞BRL-3A培养,观察2、10、50 mg/ml血必净注射液对200 ng/ml脂多糖诱导24 h后两种细胞培养上清液中HMGB1含量和巨噬细胞HMGB1 mRNA表达水平的影响.HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测.结果 血必净注射液50 mg/ml明显降低脂多糖诱导后巨噬细胞和肝细胞培养上清液中HMGB1含量(P<0.01)及巨噬细胞HMGB1 mRNA表达水平(P<0.01).结论 血必净注射液对内毒素作用后炎症介质HMGB1的胞外释放具有抑制作用.     

血必净注射液对脂多糖诱导HMGB1胞外释放的影响

目的 研究血必净注射液对内毒素作用后细胞释放高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的影响.方法 采用巨噬细胞株RAW 264.7和正常大鼠肝细胞BRL-3A培养,观察2、10、50 mg/ml血必净注射液对200 ng/ml脂多糖诱导24 h后两种细胞培养上清液中HMGB1含量和巨噬细胞HMGB1 mRNA表达水平的影响.HMGB1含量采用酶联免疫吸附试验检测.结果 血必净注射液50 mg/ml明显降低脂多糖诱导后巨噬细胞和肝细胞培养上清液中HMGB1含量(P<0.01)及巨噬细胞HMGB1 mRNA表达水平(P<0.01).结论 血必净注射液对内毒素作用后炎症介质HMGB1的胞外释放具有抑制作用.     

血必净注射液治疗脓毒症的Meta分析

目的 评价血必净注射液对脓毒症患者白细胞计数(WBC)、血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板计数(PLT)的影响,从而了解血必净注射液对炎症及凝血系统的影响及用于辅助治疗脓毒症的临床疗效.方法 检索中国知网(CNKI)、维普(VIP)、万方数据库查找2008年1月至2011年9月发表的有关血必净注射液治疗脓毒症的相关研究,按照纳入与排除标准选择文献,提取资料,并采用RevMan4.2.9进行Meta分析.结果 共纳入18项随机对照临床试,治疗组共539例患者,对照组共541例患者.Meta分析结果显示,与对照组相比,血必净治疗组WBC计数降低[OR=-1.87,95％CI(-2.92,-0.81)],TNF-α浓度下降[OR=-5.67,95％CI(-6.63,-4.75)],PLT计数降低[OR=6.58,95％CI(4.01,9.16)].结论 现有结果表明,治疗组与对照组比较应用血必净注射液治疗脓毒症,患者血浆WBC计数、TNF-α浓度明显下降,PLT计数降低.     

血必净注射液治疗脓毒症的研究进展

脓毒症是一种由感染因素引起的全身炎症反应综合征,其本质为机体对感染性因素的反应。血必净注射液是在血府逐瘀汤的基础上研制而成的中成药制剂,由红花、川芎、赤芍、当归、丹参等中药组合而成,其有效成分包含川芎嗪、红花黄色素A、丹参素及阿魏酸等,具有溃散毒邪、活血化瘀和疏经通络的功用,能够调节免疫反应、拮抗内毒素及改善微循环障碍,临床上常应用于治疗脓毒症。文章将对血必净注射液的药理作用以及治疗脓毒症的作用机制展开综述。     

血必净对脓毒症患者细胞因子的影响

目的探讨血必净对脓毒症患者细胞因子的影响。方法将50例脓毒症患者随机分为对照组和治疗组各25例,2组均行常规抗休克和病因治疗。在此期础上治疗组用血必净100 mL静脉点滴,每天2次,共7 d;对照组则以等量生理盐水作为安慰对照。分别于不同时相(静脉注射前、注射后3 d和7 d)测试血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1、IL-6、IL-8水平。结果与对照组相比,治疗组应用血必净后不同时相点的TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8均明显降低(P<0.05或0.01)。结论血必净可降低脓毒症患者TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8的水平从而达到保护器官的作用。     

小儿止咳颗粒对急性肺损伤小鼠 高迁移率族蛋白B-1含量的影响

目的:观察小儿止咳颗粒对急性肺损伤小鼠晚期炎症介质高迁移率族蛋白B-1(high mobility group box-1 protein,HMGB-1)含量的影响。方法:将ICR小鼠随机分成6组,分别测定空白组和脂多糖(LPS)尾iv致小鼠急性肺损伤后24,36,48,72,96 h血清中HMGB-1的含量,确定其含量最高的时间点。将ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、小儿止咳颗粒高、中、低剂量组,醋酸地塞米松组;除空白组外,各组尾iv LPS造成急性肺损伤模型,给药组分别ig给予小儿止咳颗粒5.4,2.7,1.35g·kg-1及醋酸地塞米松0.5 mg·kg-1,空白组ig给予等量生理盐水,在iv LPS 72 h测定各组小鼠血清中HMGB-1的含量。结果:iv LPS后72 h,小鼠血清中HMGB-1的含量最高,在该时间点,与模型组相比小儿止咳颗粒高、中、低剂量均能够抑制HMGB-1含量的增高(P<0.05)。结论:小儿止咳颗粒对晚期炎症介质HMGB-1含量的增高具有一定的抑制作用,这可能是其发挥治疗小儿上呼吸道感染后咳嗽作用的机制之一。     

消渴通冠汤对糖尿病合并冠心病患者高迁移率族蛋白B1和血清网膜素1水平的影响

目的:探讨消渴通冠汤配合西医常规疗法治疗糖尿病合并冠心病的疗效及对高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和血清网膜素-1水平的影响。方法:将92例患者采用随机按数字表法分为对照组和中西医结合组各46例。对照组给予西医综合治疗措施:包括控制血糖和血压,口服阿司匹林肠溶片,0.1/次,1次/d;酒石酸美托洛尔片,50 mg/次,1次/d;辛伐他汀片,10 mg/次,1次/d,晚餐后服用;硝酸甘油片,0.5 mg/次,舌下含服,必要时服用。中西医结合组在对照组治疗的基础上加服消渴通冠汤,1剂/d。两组疗程均为3个月。检测治疗前后空腹血糖(FBG),空腹胰岛素(FINS),糖化血红蛋白(Hb Alc),HMGB1和血清网膜素1水平,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);进行治疗前后心电图检查,记录观察期内心绞痛发作次数和硝酸甘油片用量;进行治疗前后血脂检测及气阴两虚兼血瘀证评分。结果:治疗后中西医结合组中医证候疗效有效率为96.65%,对照组为80.43%,中西医结合组优于对照组(P0.05);治疗后中西医结合组FINS,HOMA-IR和Hb Alc低于对照组(P0.01);治疗后中西医结合组甘油三酯(TG)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)恢复正常例数多于对照组(P0.05);治疗后中西医结合组每周心绞痛发作次数和硝酸甘油用量少于对照组(P0.01),硝酸甘油停减率为84.8%,高于对照组的65.2%(P0.05);治疗后两组血清HMGB1水平比治疗前降低,中西医结合组低于对照组(P0.01);治疗后两组血清网膜素1水平较治疗前上升,中西医结合组高于对照组(P0.01)。结论:在西医常规治疗的基础上加用消渴通冠汤能改善胰岛素抵抗,提高胰岛素敏感性,调节脂代谢,改善冠心病症状;其作用机制可能与下调HMGB-1促炎症介子水平,提高血清网膜素-1水平有关。     

新痹痛灵对胶原诱导性关节炎大鼠及其滑膜组织中HMGB1 mRNA表达的影响

目的:观察新痹痛灵对胶原诱导性关节炎大鼠及其滑膜组织中HMGB1 mRNA的影响。方法:新痹痛灵方中饮片经相关工艺提取后制为浸膏;将SD大鼠72只随机分出12只为正常组,其余进行胶原诱导性关节炎(CIA)造模,再将造模大鼠随机分为模型组,新痹痛灵高、中、低剂量组(3.2,1.6,0.8 g·kg-1·d-1)以及雷公藤多苷片组(0.008 g·kg-1·d-1),各组大鼠于二次免疫后当天开始ig给药,连续给药21 d。容积法测量大鼠关节体积,病理切片观察,RT-q PCR检测滑膜组织HMGB1mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠关节肿胀明显(P0.01),滑膜组织HMGB1 mRNA的表达明显增加(P0.01);与模型组比较,新痹痛灵高剂量组的关节肿胀于14,21 d明显减轻(P0.05,P0.01),且滑膜组织HMGB1 mRNA的表达明显降低(P0.01)。关节病理切片显示新痹痛灵各剂量组及雷公藤多苷片组病变较模型组均有不同程度减轻。结论:新痹痛灵可减轻CIA大鼠关节肿胀、降低滑膜组织中HMGB1 mRNA的表达,通过抑制HMGB1而减少相关炎症通路的激活可能是新痹痛灵治疗类风湿关节炎的机制之一。     

丹皮酚对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中HMGB1表达的影响

目的:探讨丹皮酚(paeonol,Pae)对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中HMGB1表达的影响。方法:清洁SD大鼠40只随机分为4组(n=10):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、丹皮酚低剂量组(PaeLD组)及丹皮酚高剂量组(PaeHD组)。建立大鼠心肌缺血再灌注模型。TTC染色法检测大鼠梗死心肌体积,Tunnel法检测心肌缺血坏死区细胞凋亡;免疫印迹检测缺血坏死组织HMGB1的表达。结果:PaeLD及PaeHD组与I/R组相比,心肌梗死体积减小,凋亡细胞减少;心肌组织HMGB1水平明显减少。其中PaeHD组更明显。结论:丹皮酚能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻大鼠HMGB1表达有关。     

丹皮酚对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中HMGBl表达的影响

目的：探讨丹皮酚（paeonol,Pae）对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中HMGBl表达的影响。方法：清洁sD大鼠40只随机分为4组（／2=10）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I／R组）、丹皮酚低剂量组（PaeLD组）及丹皮酚高剂量组（PaeHD组）。建立大鼠心肌缺血再灌注模型。TTC染色法检测大鼠梗死心肌体积,Tunnel法检测心肌缺血坏死区细胞凋亡;免疫印迹检测缺血坏死组织HMGBl的表达。结果：PaeLD及PaeHD组与lfR组相比,心肌梗死体积减小,凋亡细胞减少;心肌组织HMGBl水平明显减少。其中PaeHD组更明显。结论：丹皮酚能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻大鼠HMGBl表达有关。     

合并2型糖尿病冠心病患者血清HMGB1与糖化白蛋白表达水平的关系

目的 探讨合并2型糖尿病的冠心病患者血清高迁移率族蛋白1（HMGB1）水平与平均血糖水平的关系.方法 164例冠心病患者分为两组：合并2型糖尿病冠心病组及不合并2型糖尿病冠心病组,检测患者的HMGB1和糖化白蛋白（GA）浓度.结果 与不合并2型糖尿病冠心病组相比较,合并2型糖尿病冠心病组空腹血糖[（7.98±1.15）mmol/L vs（4.83±1.07）mmol/L]及GA表达水平[（19.35±4.04）% vs（10.18±3.65）%]均增高（P〈0.05）.合并2型糖尿病冠心病患者组超敏C反应蛋白（hs-CRP）明显高于不合并2型糖尿病冠心病组[（5.82±1.15）mg/L vs（3.18±0.98）mg/L,P〈0.05）].合并2型糖尿病冠心病组血清HMGB1水平亦明显高于不合并2型糖尿病冠心病组[（8.91±1.36）ng/mL vs（5.09±0.91）mg/mL,P〈0.05）].合并2型糖尿病冠心病组血清HMGB1水平与GA水平间呈明显正相关（r=0.505,P〈0.05）.结论 合并2型糖尿病冠心病患者血清HMGB1水平与GA水平间呈正相关,血糖水平的升高可能促进HMGB1的表达增加.     

黄芪甲苷在体外对高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T淋巴细胞免疫功能的影响

目的在前期实验基础上,明确经高迁移率族蛋白B1（HMGB1）刺激的小鼠调节性T细胞（Treg）对CD4^＋CD25^-T淋巴细胞免疫功能的影响,观察黄芪甲苷（AST IV）对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用。方法随机将CD4^＋CD25^-T细胞分为对照组、Treg组、（HMGB1＋Treg）组、（HMGB1＋AST IV＋Treg）组。4组均于培养后72 h检测脾脏CD4^＋CD25^-T细胞增殖活性及CD4^＋CD25^-T细胞孵育上清液中IL-4、IFN-γ表达水平。结果 Treg组CD4^＋CD25-T细胞增殖活性受到抑制（P〈0.01）,其上清中IFN-γ表达水平较对照组明显下降（P〈0.01）,IL-4表达水平较对照组显著增加（P〈0.01）;HMGBI＋Treg组CD4^＋CD25-T细胞增殖活性受抑制程度明显逆转（P〈0.01）,与Treg组比较,（HMGB1＋Treg）组IFN-γ表达水平明显升高（P〈0.01）,IL-4表达水平显著下降（P〈0.01）;与（HMGB1＋Treg）组比较,（HMGB1＋AST IV＋Treg）组CD4^＋CD25^-T细胞增殖受抑制程度显著加重（P〈0.01）,IFN-γ表达水平明显降低（P〈0.01）,IL-4水平显著上升（P〈0.01）。结论 HMGB1在体外可明显降低小鼠Treg免疫抑制能力,而黄芪甲苷可拮抗此抑制作用,表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。     

三黄茵赤汤通过调节HMGB1信号通路防治急性小鼠肝损伤

目的:探究三黄茵赤汤通过调控高迁移率族蛋白B1(HMGB1)信号通路对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的防治作用及机制。方法:随机将48只KM小鼠分为正常组,模型组,三黄茵赤汤低、中、高剂量组及促肝细胞生长素组,建立四氯化碳(CCl4)诱导小鼠急性肝损伤模型。三黄茵赤汤低、中、高剂量组分别以剂量为16,32,48 g·kg~(-1)·d~(-1)的药物灌胃,促肝细胞生长素组给予促肝细胞生长素20 mg·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射。小鼠肝组织切片病理学变化用苏木精-伊红(HE)染色观察;相关酶试剂盒测定小鼠血清中肝功能指标-丙氨酸氨基转移酶(AST)和天冬氨酸氨基转移酶(ALT)的活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)测定小鼠血清中白细胞介素6(IL-6)的表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠组织中HMGB1,天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3),凋亡相关分子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关x蛋白(Bax)和Toll样受体4(TLR4)的蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组明显升高血清中AST,ALT(P 0. 05)和IL-6的水平(P 0. 05)以及增加肝组织中HMGB1,TLR4和Caspase-3表达(P 0. 05)并下调Bcl-2/Bax(P 0. 05);与模型组比较,三黄茵赤汤各剂量组均能有效减轻小鼠肝脏的病理损害,降低血清中AST,ALT水平和降低IL-6的表达(P 0. 05),不同程度降低降低肝组织匀浆中HMGB1,TLR4和Caspase-3蛋白的表达(P 0. 05),并提高Bcl-2/Bax(P 0. 05),呈剂量依赖性。结论:三黄茵赤汤可能通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路,减轻细胞炎症反应,抑制细胞凋亡达到防治小鼠急性肝损伤的作用,HMGB1可能成为防治急性肝损伤的新靶点。     

大黄通过调控紧密连接蛋白治疗大鼠脓毒症

目的:探究大黄治疗脓毒症大鼠的分子机制。方法:100只Wistar大鼠随机分为假手术组,模型组,大黄高、中、低剂量组(150,100,50 mg·kg~(-1)),除假手术组只暴露盲肠,不进行结扎与穿孔,其余各组采用盲肠结扎法制作大鼠脓毒症模型,记录各组大鼠死亡情况,采用细菌16S rRNA实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)检测大鼠结肠及肠系膜淋巴结、血液中金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌数量,采用q PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测大鼠结肠紧密连接蛋白紧密连接相关蛋白-1(ZO-1)和闭锁蛋白(Occludin)水平。结果:与假手术组比较,脓毒症模型组大鼠病死率最高,不同标本的金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌检出率和数量明显升高,ZO-1和Occludin mRNA及蛋白表达明显降低(P0.01);与模型组比较,大黄高、中剂量组大鼠病死率降低,大鼠不同标本的上述两细菌检出率和数量有所减低,细菌移位情况减少,大鼠结肠的ZO-1和Occludin mRNA及蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论:大黄可调控结肠紧密连接蛋白表达保护肠黏膜屏障,从而抑制脓毒症大鼠细菌移位治疗脓毒症。     

辣椒碱对肝癌SMMC-7721细胞增殖及HMGB1,IL-6表达的影响

目的：观察辣椒碱对肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,并探讨其作用的分子机制。方法：设立辣椒碱（50,100,150,200,250,300 μmol·L^-1）组以及空白组,采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法检测辣椒碱（50,100,150,200,250,300 μmol·L^-1）作用SMMC-7721细胞24,48,72 h后的细胞活性;采用光学倒置显微镜观察辣椒碱（150,200,250 μmol·L^-1）作用SMMC-7721细胞形态的变化;实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测辣椒碱（150,200,250 μmol·L^-1）作用SMMC-7721细胞24 h后细胞中高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和白细胞介素-6（IL-6） mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测辣椒碱（150,200,250 μmol·L^-1）作用SMMC-7721细胞24 h后细胞培养上清中HMGB1和IL-6的水平。结果：与空白组比较,辣椒碱50,100 μmol·L^-1组作用24,48,72 h差异均无统计学意义;其余辣椒碱（150,200,250,300 μmol·L^-1）作用不同时间点,增殖抑制率均明显升高（P<0.05）,且具有明显的浓度和时间依赖效应;与空白组比较,辣椒碱（150,200,250 μmol·L^-1）组SMMC-7721细胞均出现不同程度地形态学改变,表现为细胞变圆、皱缩,贴壁差,脱落增多,给药浓度越高,效果就越明显;与空白组比较,辣椒碱（150,200,250 μmol·L^-1）组SMMC-7721细胞中HMGB1,IL-6 mRNA表达明显下调（P<0.05）,上清中HMGB1和IL-6分泌明显降低（P<0.05）。结论：辣椒碱对肝癌SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,潜在机制可能与其抑制细胞HMGB1和IL-6的表达与分泌有关。