反相高效液相色谱法测定鼠肝微粒体中依普黄酮及其在代谢研究中的应用

目的　建立鼠肝微粒体中依普黄酮的反相高效液相色谱测定法,以研究依普黄酮的体外代谢。方法　本法中依普黄酮与鼠肝微粒体共孵育之后用氯仿提取,采用地非三唑为内标,以Nova parkC₁₈柱为分析柱,乙腈0.1%醋酸溶液(60∶40)为流动相,流速1.0mL·min^-1,紫外检测波长为250nm。结果　依普黄酮在1～100μg·mL^-1内线性关系良好(r=0 .9998)。检测限为0.02μg·mL^-1(S/N≥3) ,定量限为0.1μg·mL^-1(RSD<5.0% ,S/N=8,n=3)。方法回收率达96 .90 %～112 .8% ,日内,日间RSD分别<8.0%和<10% (n=5)。结论　此法简便,准确,可用于依普黄酮的体外代谢研究     

反相高效液相色谱法测定依普黄酮的含量

本文应用反相高效液相色谱法，以萘为内标，建立了测定依普黄酮含量的方法，用μＢｏｎｄａｐａｋＣ＿（１８），１０μｍ色谱柱，甲醇－水（７５：２５）为流动相，Ｍ９９０光电二极管阵列检测器，２４６ｎｍ检测。在０．０１～０．４０ｍｇ／ｍｌ范围内，峰面积比与浓度呈良好的线性关系，ｒ＝０．９９９９。平均回收率为（１００．２±１）％，方法简便、准确、灵敏。     

反相高效液相色谱法测定人肝微粒体中帕洛诺司琼的含量

目的:为了研究帕洛诺司琼的体外代谢,建立人肝微粒体中帕洛诺司琼的反相高效液相色谱测定法。方法:帕洛诺司琼与人肝微粒体共孵育之后,以Nova-park C18(5μm,200×4.6mm)柱为分析柱,甲醇- 0.01 mol/L磷酸二氢钾缓冲盐(80:20,v/v)为流动相,流速1.0mL/min,紫外检测波长为240nm。结果:帕洛诺司琼在5-100μmol/L范围内线性关系良好(r=0.999 8)。检测限为0.2μmol/L(S/N≥3),定量限为1.0μmol/L(RSD=4.81%,n=3)。方法回收率为96.0%-103.0%,日内、日间RSD分别<7.0%和<10% (n=5)。结论:此法简便,准确,可用于研究帕洛诺司琼的体外代谢。     

米氮平在鼠肝微粒体中的体外代谢研究

目的:通过不同诱导剂预处理鼠肝,研究米氮平在肝微粒体中的代谢主要受何种酶影响,同时研究米氮平对介导其自身代谢的P450酶亚型是否有影响,为米氮平的临床合理应用提供科学依据。方法:将米氮平与不同诱导剂诱导的鼠肝微粒体进行体外孵育代谢,以乙腈中止反应,样品用25%氨水碱化后以环己烷提取。用RPHPLC测定剩余的米氮平含量,流动相为甲醇水(含10mmol·L-1NH4AC,5mmol·L-1SDS,pH3.5)6238(VV),检测波长为307nm。结果:本文测定方法回收率高,日内和日间精密度均良好,符合生物样本检测要求。苯巴比妥诱导的鼠肝微粒体对米氮平的代谢具有明显的催化作用,利福平也有一定的催化能力,米氮平诱导的鼠肝微粒体与对照组对米氮平的代谢无明显差异。结论:由苯巴比妥诱导的P450酶亚型(主要为细胞色素P4503A4)和利福平诱导的P450酶亚型(主要为细胞色素P4502C92C19,同时也对P4503A4有一定的诱导作用)在米氮平的体外代谢中起着重要作用;而米氮平诱导组对于米氮平代谢无明显影响,预示米氮平对介导其自身代谢的P450酶亚型无明显的诱导或抑制作用。     

地非三唑在鼠肝微粒体中的体外代谢

目的　为了解地非三唑 (Dip)在不同预处理的鼠肝微粒体中主要受何种酶代谢影响 ,为其临床合理应用和进一步开发利用提供科学依据。方法　将Dip与 6种不同诱导剂〔苯巴比妥 (PB)、地塞米松(Dex)、β 萘黄酮 (BNF)、Dip、吡啶和空白对照〕诱导的鼠肝微粒体进行体外共孵育 ,用氯仿终止反应 ,以地西泮为内标 ,采用反相高效液相色谱 (RP HPLC)法测定孵育后剩余的Dip的含量。结果　BNF诱导的鼠肝微粒体对Dip代谢具有强烈的催化活性 ,Dip诱导的微粒体的催化能力次之 ,PB诱导组也有一定的催化能力 ,其他几种诱导剂诱导的微粒体对Dip代谢能力与对照组无明显差别。测得Dip在BNF诱导的鼠肝微粒体中的Km 为 (6 0 .5± 1.3) μmol·L- 1,vm 为 (5 .6± 0 .4 )mmol·g- 1·min- 1。结论　由BNF诱导的鼠肝微粒体 (主要为细胞色素P4 5 0 1A)和PB诱导的鼠肝微粒体 (主要为细胞色素P4 5 0 2B)在Dip的体外代谢中可能起主导作用 ;Dip诱导的鼠肝微粒体对其自身的代谢也起了重要作用。     

反相高效液相色谱法测定血清中的甲硝唑及其代谢产物

本文建立了快速分离与测定血清中甲硝唑及其代谢产物的反相高效液相色谱法。固定相为Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ柱，以甲醇－水（２７：７３）作流动相，流速１．２ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长３１８ｎｍ。血样用甲醇除蛋白。甲硝唑平均回收率为９９．６％，日内和日间相对标准偏差分别为３．７％和４．０％。最低检出浓度为０．０２５μｇ／ｍｌ，线性范围０．０５～２０μｇ／ｍｌ（γ＝０．９９９９）。用本法研究了甲硝唑在大鼠体内的药动学。     

反相离子对高效液相色谱法及在药物分析中的应用

本文介绍了反相离子对高效液相色谱法的原理及此方法的特点，并例举了大量药物分析的实例进行了分析。     

餐时血糖调节剂米格列奈钙的RP-HPLC法人肝微粒体药物浓度测定

目的:建立人肝微粒体中米格列奈的高效液相色谱测定法.方法:采用Diamonsil-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.02 mol·L-1KH2PO4缓冲液(pH 4.0)(43:57);流速为1.0 mL·min-1;紫外检测波长为210 nm;进样量为20 mL.结果:米格列奈最低检测限为2 μmol·L-1;线性范围为5～1 000 μmol·L-1(r=0.999 9);最低定量浓度为5μmol·L-1(RSD<5%,n=5);低、中、高3种浓度日内、日间RSD(n=5)分别为1.9%,1.6%,1.4%和3.8%,4.0%,3.8%;绝对回收率平均为94.4%,相对回收率平均为101.2%.结论:本实验建立的人肝微粒体中米格列奈的高效液相测定方法操作简便、结果准确.     

Enantioselective metabolism of camazepam by rat liver microsomes

Camazepam [3-(N,N-dimethyl)carbamoyloxy-7-chloro-1-methyl-1,3-dihydro-5-phenyl-2H-1,4-benzodiazepin-2-one, CMZ] possesses anxiolytic, anticonvulsant, muscle relaxant and hypnotic properties. CMZ is clinically used as a racemate. The enantioselective metabolism of racemic CMZ by rat liver microsomes was studied. Major metabolites were isolated by normal-phase and reversed-phase liquid chromatography (LC) and further characterized by UV absorption, mass, and circular dichroism spectral analyses, and by chiral stationary phase LC analysis. Following anin vitro incubation of rac-CMZ, the unmetabolized CMZ was found to be enriched in the (S)-CMZ, indicating that the Renantiomer was enantioselectively metabolized. Two of the most abundant metabolites, formed by hydroxylation and demethylation of a methyl group of theN,N-dimethylcarbamyloxy side chain, were found to be enriched in the Renantiomer. The results indicated that the (R)-CMZ was metabolized at a faster rate than (S)-CMZ by rat liver microsomes.     

反相高效液相色谱法测定地红霉素的含量

报道反相高效液相色谱法测定地红霉素含量的方法。采用ODS柱 (15 0× 4 6mm) ,以磷酸三乙胺缓冲液 乙腈 甲醇 (35∶45∶2 0 )为流动相 ,使用紫外检测器 ,于 2 15nm波长处测定。线性范围为 1 0～ 9 0g·L-1(r =0 9999) ,RSD =0 9% (n =9)。检测限为 5 0× 10 -2 mg。本法可对地红霉素中的 (9)S 红霉胺、16 (R) 地红霉素、16 (S) 地红霉素的等组分进行分离测定 ,具有快速、简便、灵敏、准确的特点     

大鼠血浆中双嘧达莫的反相高效液相色谱法检测

目的 建立大鼠血浆中双嘧达莫的检测方法.方法 采用RP-HPL C法测定大鼠血浆中的药物浓度,色谱柱为Lichrospher C18(4.6×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-冰乙酸(75∶25∶0.5 v/v).结果 在0.1～8 mg/L-1范围内双嘧达莫峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9995),最低检测限为0.01 mg/L-1,绝对回收率为85.8%～94.3%,准确度为94.9%～104.7%,日内RSD为2.2%～6.6%,日间RSD为5.9%～11.4%.结论 本测定方法灵敏、准确、简便,适合于双嘧达莫的药代动力学研究.     

RP-HPLC测定立复欣注射液的含量

目的：建立一种快速简便的反相HPLC法测定立复欣注射液的含量,同时考察25度立复欣注射液在5％GS,0．9％NS和10％GNS中的稳定性,方法：采用Lichrospher 100(RP-8.5um*250mm)柱,以甲醇－乙腈－0．04M KH2PO4溶液（31．5：31．5：37）为流动相,流速1ml/min,柱温40度,254nm柴外检测;观察溶液的外观并用酸度计测定其PH值,结果：回收率为100．5：37）为流动相,流速1ml/min,柱温40度,254nm紫外检测,观察溶液的外观并用酸度计测定其PH值,结果：回收率为100．87％,RSD＝1．4％（n=5),在4－120mg/l范围内,峰面积对浓度呈良好的线性关系,r=0\99989,25度下样品在输液中的PH值,含量及颜色在0－6h内均无明显变化。结论：本法简速,灵敏底高,准确性好;25度,6h内样 在上述输液中稳定性好。     

反相高效液相色谱法测定肾炎汤中淫羊藿苷的含量

目的：反相高效液相色谱法(RP-HPLC)法测定肾炎汤中淫羊藿苷的含量。方法：Hypersil C18柱，流动相为乙腈．水(27：73)，在270nm波长处检测。结果：淫羊藿苷的线性范围为0.07-0.63μg，r=0.9999，平均加样回收率为99％。结论：方法简便，精密度和稳定性好，适用于测定肾炎汤中淫羊藿苷的含量。     

大鼠肝微粒体中葛根素的液相色谱-质谱测定法及药物代谢动力学

目的建立大鼠肝微粒体中葛根素及其代谢物的液相色谱质谱测定法,并研究葛根素在大鼠肝微粒体中的药物代谢动力学。方法色谱柱为Waters C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇水(体积比为50∶50),通过电喷雾电离源(ESI),以正离子方式进行检测。结果方法的回收率为95.6%~96.8%,其日内、日间的RSD分别为4.9%~7.6%和3.7%~6.2%,葛根素的质量浓度在0.5~20 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系。在温孵时间0~40 min内、微粒体蛋白质量浓度在0.5~2.0 g.L-1内,葛根素呈线性消除,随着肝微粒体蛋白质量浓度的增大,葛根素呈线性消除,葛根素可被肝微粒体代谢成大豆苷元。其代谢机理为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)依赖性的氧化代谢。还原型烟酰胺二核苷酸(NADH)对葛根素代谢基本没有催化作用。结论葛根素在大鼠肝微粒体内被迅速代谢,大鼠肝微粒体P450酶参与了葛根素的代谢。     

反相高效液相色谱法测定鹿衔草中梅笠草素的含量

目的建立测定中药鹿衔草中活性成分梅笠草素含量的反相高效液相色谱法。方法采用CosmosilPacked5 C18 ARII色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,以乙腈水（72：28）为流动相,流速为1．0mL·min^-1,检测波长为254nm,柱温为室温。结果梅笠草素在10．17～203．4μg·mL^-1与峰面积线性关系良好,平均回收率为101．8％,RSD为1．4％。结论该方法简便快速、结果准确、重现性好,可以用于鹿衔草药材及相关制剂的质量评价。