蜂胶对牙龈卟啉单胞菌及牙龈成纤维细胞的影响

目的了解蜂胶对牙龈卟啉单胞菌（porphyromonas gingival，Pg）生长的抑制作用及对人牙龈成纤维细胞的毒性作用。方法采用液体稀释法测定蜂胶对Pg的最小杀菌浓度（MBC），用MTT法测定不同浓度蜂胶作用24h后牙龈成纤维细胞的细胞相对增殖率（RGR），了解蜂胶作用24h后细胞连续7d的增殖回复情况。结果蜂胶对取的MBC为1．56g／L，相当于0．125～0．25mg／L的奥硝唑。蜂胶浓度为MBC时RGR达到70％以上；4g／L蜂胶组的RGR为52．1％，作用细胞24h后，连续7d细胞数持续增加，吸光度逐渐接近阴性对照组。结论蜂胶对Pg的生长有显著抑制作用，且细胞毒性较小，毒性作用可逆。     

绿茶提取物对牙周膜细胞活性影响的体外研究

目的 评价绿茶提取物(GTE)在体外对牙周膜成纤维细胞活性的影响,评估其作为脱位牙保存介质的可能性.方法 取正畸患者拔出的天然牙牙周膜成纤维细胞,在DMEM培养基中培养后分别置DMEM培养基、汉斯平衡盐溶液(HBSS)、牛奶、低渗蔗糖溶液及GTE中,37℃孵育.于实验后第1、2、4、24 h分别以MTT法测定各培养基中细胞浓度.结果 GTE组细胞浓度明显高于蔗糖组(1、2、4、24 h,P＜0.05)、HBSS组(2、4、24 h,P＜0.05)、DMEM组(2h,P＜0.05)和牛奶组(4 h,P＜0.05).结论 GTE能有效的保护牙周膜细胞,是脱位牙保存的良好介质.     

壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞的毒性研究

目的 了解壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞的毒性作用,为其治疗牙周病提供依据.方法 人牙龈成纤维细胞在不同浓度的壳聚糖温敏凝胶中体外培养24h、48h、72h、96h.用MTT法测定细胞相对增殖率(RGR),判断细胞毒性的级别.结果 各组细胞不同时间点相对增殖率均在96%～144%之间,各浓度的壳聚糖水凝胶材料浸提液的细胞毒性均为0级或1级,完全符合生物材料的安全评价标准.结论 壳聚糖温敏凝胶对人牙龈成纤维细胞无毒性,用于牙周病局部治疗具有进一步的研究价值.     

蜂胶与氢氧化钙单独用药的细胞毒性研究

目的:研究蜂胶与氢氧化钙(Ca(OH)2)对人牙龈成纤维细胞的细胞毒性作用.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法分别评价蜂胶与Ca(OH)2溶液对人牙龈成纤维细胞相对增殖率的影响,用五级毒性分类法评级,并对结果进行统计分析.结果:0.1%～0.6%蜂胶与Ca(OH)2各稀释溶液毒性级均为1～2级,二者之间无显著性差异.结论:蜂胶与Ca(OH)2均对人牙龈成纤维细胞的毒性较小,是治疗口腔疾病的安全药物.     

常用根管消毒药物对人牙龈成纤维细胞的毒性

目的：观察根管消毒药物甲醛甲酚(FC)、樟脑酚(CP)、氢氧化钙饱和液、氢氧化钙药尖及中药制剂洁尔阴的细胞毒性及毒性的可逆性。方法：人牙龈成纤维细胞(HGF)于含不同浓度的5种消毒药物中体外培养,通过MTT法测细胞增殖率、回复度及ALP活性。结果：①FC、CP对HGF的增殖有显著抑制作用,且随药物浓度增大抑制作用增强,细胞的回复度和ALP活性降低。②洁尔阴、氢氧化钙饱和液、氢氧化钙药尖对HGF增殖及ALP无显著抑制作用。结论：FC、CP细胞毒性大,且细胞毒性不可逆。洁尔阴、氢氧化钙饱和液、氢氧化钙药尖无细胞毒性。     

pH值与三种不同根管冲洗液细胞毒性的相关性

目的研究应用MTT测定法评估对MTAD、17%EDTA和2.6%NaOCl不同时间点的pH值对人牙周膜成纤维细胞的细胞毒性的影响.方法将人类牙周膜成纤维细胞浸泡于冲洗液中,1、6和12 h后测定细胞活性,培养基的pH值及使用酶标仪测定每种培养基的光吸收值.结果 2.6%NaOCl的细胞毒性显著低于17%EDTA和MTAD,同时所有的冲洗液的细胞毒性先上升后下降,且在12 h细胞毒性最低,pH与细胞毒性均存在显著相关.结论冲洗液细胞毒性与pH值的变化趋势一致,pH值的变化可能会导致冲洗液细胞毒性的改变.     

云南白药对体外培养人牙周膜成纤维细胞C-fos、C-jun基因表达的影响

［摘要］目的　研究云南白药水溶液对牙周膜成纤维细胞C-fos、C-jun基因表达的影响，探讨云南白药水溶液促进人牙周膜成纤维细胞（HPDLFs）增殖和成骨分化的可能机制．方法　原代培养HPDLFs，取第4～6代细胞用于实验．分为空白对照组，云南不同浓度云南白药水溶液组，阳性对照组．各组细胞与云南白药水溶液共培养4h，采用反转录聚合酶链反应检测C-fos和C-jun mRNA的表达．结果　RT-PCR 的结果说明，与空白对照组相比，云南白药水溶液能促进HPDLFs细胞C-fos和C-jun mRNA 的表达．且促进作用呈浓度依赖性，与对照组比较，各组差异有统计学意义（P＜0.05）．结论　云南白药水溶液能够上调HPDLFs中C-fos、C-jun的表达．云南白药水溶液可能通过上调C-fos、C-jun的表达促进HPDLFs的增殖和成骨分化，促进骨形成．     

甘草酸二铵对脂多糖诱导下人牙周膜成纤维细胞表达前列腺素E_2的影响

目的脂多糖（LPS）干预下,不同浓度甘草酸二铵（Diammonium glycyrrhizinate,DG）对人牙周膜成纤维细胞（HPDLFs）表达前列腺素E2（PGE2）的影响。方法取用组织块法原代培养的人牙周膜成纤维细胞,对细胞进行形态学及免疫学鉴别后,以浓度为10 mg/L的LPS进行诱导,用不同浓度的甘草酸二铵进行干预,采用免疫组织化学方法检测PGE2在HPDLFs中的表达变化。结果不同浓度甘草酸二铵能够下调同一浓度LPS诱导的HPDLFs表达的PGE2,随甘草酸二铵浓度的增加PGE2的表达量呈逐渐减弱趋势（P〈0.05）。结论甘草酸二铵可能对LPS诱导的HPDLFs致炎症过程中表达PGE2有重要的抑制作用,为临床牙周病治疗提供新的科研资料。     

TNF-α对人牙周膜成纤维细胞RANKL/OPG mRNA表达的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）对人牙周膜成纤维细胞（HPDLFs）的核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）及其饵受体骨保护素（OPG）mRNA表达的影响,了解TNF-α在破骨细胞性骨吸收调节中的作用机制。方法 将体外培养的人牙周膜成纤维细胞用不同浓度的TNF-α处理24h,通过半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）来观察人牙周膜成纤维细胞OPG、RANKL mRNA表达强度变化。结果 TNF-α上调人牙周膜成纤维细胞的RANKLmRNA表达,RANKL／OPG比率呈上升趋势。结论TNF-α通过调节人牙周膜成纤维细胞的RANKL／OPG的比值可间接地调节破骨细胞分化和活性,从而影响骨代谢。     

SIM法羟基磷灰石涂层钛种植材料的细胞毒性试验

[目的]检测表面诱导矿化(SIM)法羟基磷灰石涂层钛种植材料的细胞毒性,以评价材料的生物学性能.[方法]本实验将商业纯钛及SIM法羟基磷灰石涂层钛种植材料的浸提液按浓度各分成100%、50%、25%3组,通过MTT比色法,计算人口腔成纤维细胞与各组材料浸提液共培养24 h、72 h或120 h后的相对增殖率,从而判定材料的细胞毒性级别.[结果]各组受试材料浸提液的细胞相对增殖率分别为97.0%～100.7%,它和商业纯钛的细胞毒性都为0级,而阳性对照组细胞毒性分别为3级(24 h)或4级(72、120 h).[结论]SIM法羟基磷灰石涂层钛种植材料无体外细胞毒性,可能具有良好的生物安全性和生物相容性.     

颌面部赝复用硅橡胶老化后体外细胞毒性研究

目的 研究颌面部赝复用硅橡胶老化后的体外细胞毒性.方法 以A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶作为受试材料,根据GB/T3512-2001分别制备24、48、72 h老化试件.以小鼠成纤维细胞(L-929)培养液为浸提介质,参照GB/T16886.5-2003制备相应浓度的浸提液培养L-929细胞.根据试件的老化时间和浸提液的浓度进行实验分组,同时设立阴性和阳性对照.于加入浸提液后的2、4、7 d分别收集细胞,MTT法检测细胞增殖,以测得的吸光度值(D490nm)计算细胞相对增殖率并以此评价受试件的毒性程度.结果 加入浸提液后2、4 d,SEI老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性为2级.加入浸提液后7 d,A.2186老化48 h 100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级;SEI老化48 h 50%和100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级.除A-2186老化24 h 50%浓度组外(细胞毒性为0级),其余各组细胞毒性评价均为1级.结论 老化48 h后,液态双组份SEI硅橡胶表现出轻微的细胞毒性;老化72 h后,A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶均有一定的细胞毒性.建议临床使用赝复体的患者定期更换赝复体.     

颌面部赝复用硅橡胶老化后体外细胞毒性研究

目的 研究颌面部赝复用硅橡胶老化后的体外细胞毒性.方法 以A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶作为受试材料,根据GB/T3512-2001分别制备24、48、72 h老化试件.以小鼠成纤维细胞(L-929)培养液为浸提介质,参照GB/T16886.5-2003制备相应浓度的浸提液培养L-929细胞.根据试件的老化时间和浸提液的浓度进行实验分组,同时设立阴性和阳性对照.于加入浸提液后的2、4、7 d分别收集细胞,MTT法检测细胞增殖,以测得的吸光度值(D490nm)计算细胞相对增殖率并以此评价受试件的毒性程度.结果 加入浸提液后2、4 d,SEI老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性为2级.加入浸提液后7 d,A.2186老化48 h 100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级;SEI老化48 h 50%和100%浓度组及老化72 h 50%和100%浓度组的D490nm均较阴性对照组显著降低,评价细胞毒性均为2级.除A-2186老化24 h 50%浓度组外(细胞毒性为0级),其余各组细胞毒性评价均为1级.结论 老化48 h后,液态双组份SEI硅橡胶表现出轻微的细胞毒性;老化72 h后,A-2186硅橡胶和液态双组份SEI硅橡胶均有一定的细胞毒性.建议临床使用赝复体的患者定期更换赝复体.     

凹土玉米芯垫料提取物对细胞存活率的影响

目的 研究凹土玉米芯垫料物质的细胞毒性.方法 将凹土玉米芯、玉米秸、普通刨花垫料物质的丙酮提取物分别加到小鼠成纤维细胞、小鼠S180-S2D9细胞中体外培养,孵育72 h后测定每个培养孔细胞的总蛋白量,计算细胞的存活率.结果 随着垫料物质丙酮提取物质量浓度的增加,S180-S2D9细胞及小鼠成纤维细胞存活率逐渐降低,其中普通刨花组降低最显著,凹土玉米芯组变化最小,玉米秸组降低程度居中.丙酮提取物质量浓度相同时,凹土玉米芯组的S180-S2D9细胞及小鼠成纤维细胞存活率均显著高于玉米秸组和普通刨花组(P＜0.05或P＜0.01).结论 普通刨花的细胞毒性最大,凹土玉米芯的细胞毒性最小,玉米秸、普通刨花垫料物质均有细胞毒性,其毒性显著高于凹土玉米芯.     

复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞增殖的影响

目的 观察不同浓度复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLC)生长及ki-67表达的影响.方法组织块法培养原代HPDLC,MTT法检测HPDLC在复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂的不同浓度(0、1.25、2.5、5、10、20 g/L...     

正畸不锈钢种植体的细胞毒性评价

目的 评价正畸不锈钢种植体的细胞毒性.方法 选择人成骨样细胞系MG-63作为细胞毒性的实验对象,用倒置相差显微镜观察细胞在不锈钢种植体和钛合金种植体浸提液中的生长情况,通过MTT试验检测细胞在培养24 h和48 h的光密度值和细胞相对增殖率,评价不锈钢种植体的细胞毒性.结果 钛合金种植体组的光密度值高于不锈钢种植体组,但两者之间无统计学差异.细胞在两种种植体浸提液中均生长旺盛,形态正常,钛合金种植体组细胞相对增殖率高于不锈钢种植体组,两组细胞毒性分级均为0级.结论 不锈钢种植体与钛合金种植体的细胞毒性无统计学差异,符合口腔正畸材料临床应用的要求.     

成骨生长肽对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响

目的:研究成骨生长肽(Osteogenic growth peptide,OGP)对体外培养的人牙周膜细胞增殖和细胞总蛋白含量的影响.方法:在体外培养的人牙周膜细胞中加入不同浓度的OGP(10-11～10-7mol/L),用MTT法检测细胞的增殖率;考马斯亮蓝染色法检测细胞内总蛋白含量的变化.结果:OGP在该浓度范围内时,对人牙周膜细胞的增殖率有明显的促进作用(P<0.05),并且在该浓度范围内时,能叫显增加人牙周膜细胞总蛋白的合成(P<0.05),最佳作用浓度为10-9mol/L.结论:OGP可促进人牙周膜细胞的增殖活性,同时可以增强细胞总蛋白的合成,提示OGP在牙周组织再生领域中具有良好的应用前景.     

茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的 观察茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响.方法 采用组织块培养法培养原代人牙周膜成纤维细胞并传代,经免疫组化SABC法检测角蛋白和波形丝蛋白鉴定,取5～8代细胞用于实验;按茶多酚不同浓度分1 mg/ml(B组)、0.5mg/ml(C组)、0.25mg/ml(D组)、0.125mg/ml(E组)、0.0625mg/ml(F组)组和空白对照组(A组),采用细胞计数法、MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞DNA含量.结果 不同浓度茶多酚均促进人牙周膜成纤维细胞的增殖和DNA合成(P＜0.05),茶多酚作用的最适浓度为0.5 mg/ml,最佳作用时间为48 h.结论 茶多酚对人牙周膜成纤维细胞增殖具有明显的促进作用.     

蜂胶黄酮对大鼠颅骨成骨细胞增殖分化及BMP2表达的影响

目的 探讨蜂胶黄酮对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖分化以及骨形态发生蛋白2(BMP2)表达的影响.方法 提取新生大鼠颅骨成骨细胞制作体外培养模型,用不同浓度的蜂胶黄酮刺激分离培养的大鼠成骨细胞,然后用噻唑蓝(MTT)法测定蜂胶黄酮对体外培养成骨细胞的增殖作用,用氨基安替吡啉测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,并通过免疫组织化学方法 观察成骨细胞BMP2的表达.结果 添加蜂胶黄酮体外培养24 h后,100μg/L剂量组较对照组有明显的提高;48 h后,5、10和100μg/L剂量组与对照组比,增殖率均显著提高;添加蜂胶黄酮的中剂量组和高剂量组的BMP2表达在24 h和48 h都显著高于零剂量组.培养72 h后,10、50和100μg/L剂量组与对照组比,增殖率均有明显的提高;50μg/L和100μg/L剂量组与对照组相比ALP活性均显著性提高.结论 蜂胶黄酮可以增加成骨细胞的增殖和分化,促进骨组织的形成,可用来预防骨质疏松症.     

纳米羟基磷灰石/聚酰胺66与人胚胎成纤维细胞的生物相容性研究

目的:研究新型骨修复重建复合材料纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(n-HA/PA66)对人胚胎成纤维细胞可能存在的细胞毒性,为该材料应用于临床提供实验依据.方法:采用人胚胎成纤维细胞,经材料及材料浸提液分别与细胞共培养等方式对n-HA/PA66进行细胞毒性测试,细胞形态观察法观察各组细胞在24h、48h、72h、5天各时相点的细胞形态学变化,细胞生长抑制法(MTT比色法),测定各组1,2,4,7天细胞的相对增殖率.结果:材料表面的细胞黏附生长良好,各浸提液组和直接接触组分别与阴性对照组进行两两比较,各组对细胞的增殖均无显著影响(P＞0.05),各浸提液组和直接接触组分别与阳性对照组进行两两比较显示有显著差异(P＜0.05),材料的细胞毒性为0～1级.结论:体外试验结果显示,n-HA/PA66与人胚胎成纤维细胞相容性好,符合GB/T16886.5-1997-ISO 10993-5:1992规定的医用材料相应标准[1].     

奥硝唑不同剂型抗阴道毛滴虫作用的比较研究

目的研究奥硝唑原料药、凝胶剂和栓剂在体内外抗阴道毛滴虫的作用。方法体内实验:在小鼠阴道内连续多日注入不同浓度奥硝唑、奥硝唑凝胶或奥硝唑栓剂和虫体,停药1 d后取阴道灌洗液涂片观察有无活动的阴道毛滴虫。体外实验:将阴道毛滴虫培养后分别接种到在含不同浓度奥硝唑、奥硝唑凝胶和奥硝唑栓剂的细胞培养板孔中,于不同时间在倒置显微镜下观察虫体形态变化,计数死虫百分率。结果体内试验中连续5 d注入药物和虫体的奥硝唑原料药组、奥硝唑凝胶剂组、奥硝唑栓剂组镜检阳性率均为0(0/20),而无药对照组阳性率为100%(20/20),差异有统计学意义(P0.01)。体外实验中药物作用滴虫24 h后,各种药物的最低有效抑虫浓度(虫体100%死亡)依次为:奥硝唑凝胶0.0025 mg/ml,奥硝唑原料0.0049 mg/ml,奥硝唑栓剂0.0195 mg/ml。结论奥硝唑凝胶剂具有良好的体内外抗阴道滴虫作用,其作用优于奥硝唑栓剂。