抗精子抗体ELISA检测法及其应用

建立了用精子可溶性抗原包被的ELISA法,检测了100例处女血清,均为阴性,17例有生育能力者和1000例不育患者血清的阳性率分别为5.9％和22％,抗体检出率符合国外多数学者的结果。重复性试验定性符合率达97％。表明用该法检测抗精子抗体具有敏感、特异、稳定等特点,可获较为满意的结果。     

尿调蛋白酶联免疫吸附试验检测方法的建立及其在IgA肾病中的应用

目的:建立尿尿调蛋白的酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assays,ELISA)检测方法,并对IgA肾病患者的尿尿调蛋白水平监测进行进一步验证。方法:以多克隆抗体作为包被抗体,单克隆抗体作为检测抗体,建立尿调蛋白的快速双抗夹心检测方法,检测其精确性及重复性,随机选取55例尿液标本,同时以商品化试剂盒与本实验方法进行检测,比较166例IgA肾病患者和正常人的尿尿调蛋白水平。结果:获得的标准曲线为0.78～12.5μg/L,实验室内变异系数为7.5%,实验室间变异系数为7.9%。55例尿液标本的商品化试剂盒与本实验方法结果比对,相关系数为r=0.615,P<0.001;166例IgA肾病患者的尿尿调蛋白/尿肌酐比值低于正常人。结论:尿尿调蛋白的ELISA检测方法灵敏,重复性较好,可运用于大样本的人群检测,IgA肾病患者的尿尿调蛋白分泌低于正常人。     

尿调蛋白酶联免疫吸附试验检测方法的建立及其在IgA肾病中的应用

目的：建立尿尿调蛋白的酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assays, ELISA）检测方法,并对IgA肾病患者的尿尿调蛋白水平监测进行进一步验证。方法：以多克隆抗体作为包被抗体,单克隆抗体作为检测抗体,建立尿调蛋白的快速双抗夹心检测方法,检测其精确性及重复性,随机选取55例尿液标本,同时以商品化试剂盒与本实验方法进行检测,比较166例IgA肾病患者和正常人的尿尿调蛋白水平。结果：获得的标准曲线为0.78~12.5 μg/L,实验室内变异系数为7.5%,实验室间变异系数为7.9%。55例尿液标本的商品化试剂盒与本实验方法结果比对,相关系数为r=0.615,P<0.001;166例IgA肾病患者的尿尿调蛋白/尿肌酐比值低于正常人。结论：尿尿调蛋白的ELISA检测方法灵敏,重复性较好,可运用于大样本的人群检测,IgA肾病患者的尿尿调蛋白分泌低于正常人。     

IEST和快速ELISA诊断华支睾吸虫病的效果比较

应用成虫石蜡切片抗原作免疫酶染色试验(IEST)和快速酶联免疫吸附试验(Q—ELISA)对比检测了52份华支睾吸虫病患者和50份健康人血清,两法的阳性率分别为96％和94％,假阳性率分别为4％和6％。应用IEST和Q—ELISA检测50份血吸虫病患者和20份卫氏并殖吸虫病患者血清,其交叉反应率分别为6％、8％和5％、5％。结果表明两法诊断华支睾吸虫病均有较高的敏感性和特异性。Q—ELISA更适台于现场应用。     

ELISA法快速检验HBsAg

目前临床上对乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的检验使用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,但操作时间长,不能满足临床急诊需要。本文利用ELISA法快速检验HBsAg,结果与常规法符合率100％,现介绍如下。     

尿调素的免疫调节作用

本文报道有关尿调素在体外实验中对中性粒细胞、淋巴细胞和补体功能影响的研究结果：①尿调素浓度＞１００ｍｇ／Ｌ时促进中性粒细胞对白色念珠菌的吞噬作用；②抑制分离的Ｔ淋巴细胞的转化，但对未分离的Ｔ淋巴细胞的转化及分泌ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ的功能无影响；③对ＳＲＢＣ免疫的小鼠脾细胞和分泌ＣＭＶ单抗的杂交瘤细胞分泌抗体的功能无影响；④对补体经典途径的激活无影响。提示至少在体外实验中，尿调素没有明确的免疫抑制功能     

尿微量白蛋白ELISA结果在正常人群中的分布及临床意义

目的 应用建立的ELISA抗原竞争法测定不同年龄段正常人及糖尿病患者尿微量白蛋白水平.方法 建立EUSA抗原竞争法.用同类进口试剂盒对本方法进行质虽评价;检测682例正常人及60例糖尿病患者随意尿中微量白蛋白含量.结果 尿微量白蛋白标准曲线线性良好,本法测得正常人尿微量白蛋白参考值范围为0～27.9mg/L,平均值为9.68mg/L,男女人群间无显著性差异.正常人14～20岁年龄段尿微量白蛋白为35.2mg/L,60岁和70岁以上两个老年组分别为34.4mrCL和36.9mg/L;60岁以上糖尿病患者的尿微量自蛋白含量显著高于同龄对照组.结论 正常人尿微量白蛋白参考值范围为0～27.9mg/L.青春期及60岁以上正常人尿微量白蛋白浓度可达34.4～36.9mg/L:60岁以上糖尿病患者的尿微量白蛋白高于同龄正常人群.     

尿调素与妊娠的关系

以亲和层析柱法自正常孕妇尿液提取尿调素（UrM），用双抗体夹心ELISA法对正常非孕妇、正常孕妇、不孕、流产者夫妇和妊娠高血压综合征（妊高征）的孕妇尿中UrM的含量进行了测定，发现：①正常男性和女性尿中尿调素水平无显著差异；②孕期≤9周的孕妇尿中UrM水平未见显著变化，随着孕期增加，尿中UrM水平升高，28周后尿中UrM水平显著高于正常人；③不孕和流产的妇女尿中UrM水平显著高于正常人，其水平与妊娠晚期相当；④妊高征孕妇尿中UrM水平很低，但分娩后水平恢复；⑤男性血中抗精子抗体（AsAb）阳性者中有90．91％的人，精浆中AsAb阳性者中88.33％的人，尿中UrM含量高于正常人。不育妇女血AsAb阳性者中有76．92％的人尿中UrM水平显著高于正常人。     

ELISA试剂检测抗-HIV反应性结果分析

目的目前大多HIV初筛实验室采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行定性检测,当检测标本的吸光度值大于试剂盒设定的临界值时为阳性,反之为阴性.对于强阳性和明显阴性的标本几乎不会错检,但是在检测临界值附近的弱显色反应的标本时可能出现假阳性结果,ELISA法操作过程中也存在一部分影响因素会导致出现假阳性;同时也要慎重低于临界值的阴性若显色反应标本,即假阴性反应,以免阳性标本漏检.为此对ELISA测定抗-HIV假阳性和假阴性的发生率和可能导致假阳性影响因素进行了分析,旨在探讨减少假阳性和假阴性的方法,提高检测结果的准确性.     

ELISA检测肾病患者尿微量蛋白系列及其临床意义

用ＥＬＩＳＡ方法检测７２例不同类型肾病患者尿中微量蛋白系列，结果表明，不同肾病患者尿中所出现的微量蛋白成份各具特点，对某些肾脏病的诊断具有一定的指导意义，同时应用ＥＬＩＳＡ法可使检测的精确度达到ｎｍ／ｍｌ水平弥补了常规检验的不足。     

支气管哮喘患者血清可溶性E-选择素含量的变化及意义

目的探讨支气管哮喘患者血清可溶性E-选择素（sE-选择素）含量的变化及临床意义.方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测18例支气管哮喘患者的血清sE-选择素水平.结果哮喘急性发作各组患者sE-选择素的水平与对照组及治疗后差异均有显著性意义（P＜0.001）,重度哮喘组sE-选择素的水平与轻、中度哮喘组间差异有显著性意义（P＜0.001）.结论 sE-选择素作为一个重要的免疫分子参与了支气管哮喘的发病过程,其水平的高低与病情严重程度相关.     

链酶亲和素-生物素ELISA检测人心肌肌钙蛋白T

目的 建立人心肌肌钙蛋白T (cTnT)链酶亲和素-生物素（SAB）双抗体夹心酶联免疫分析（ELISA）方法,诊断急性心肌损伤性疾病。方法 以固相化单抗3F7捕捉样品中cTnT,生物素化3H12单抗为检测抗体,加入SA-HRP,显色。根据已知不同浓度标准cTnT显色后D(l)值的标准曲线,检测待测样品cTnT含量。结果 cTnT的最低检测值为0.15 ng/ml,批内变异系数为3.8%,批间变异系数为11.2%,回收率为98%。35例急性心肌损伤患者cTnT含量为(0.68±0.17) ng/ml,明显高于52例正常人对照组(0.20±0.03) ng/ml(P<0.01)。结论 本方法灵敏、特异、稳定,可用于临床急性心肌损伤疾病的诊断。     

人血清脂联素定量ELISA检测方法的建立及初步临床应用

目的:建立一种检测人血清中脂联素(APN)的酶联免疫吸附方法(ELISA),并初步探讨其在冠心病诊断中的应用。方法:构建表达质粒pET22b(+)/gAPN,在原核表达系统大肠杆菌中表达并纯化重组脂联素球状区(gAPN)蛋白。用抗APN单克隆抗体MAB10651包被微孔板,10%小牛血清作为封闭液,针对APN不同抗原表位的单克隆抗体MAB1065生物素化后作为标记抗体,联合生物素-亲和素信号放大系统,以gAPN重组蛋白为标准品绘制标准曲线,以准确性、特异性、重复性、回收率试验和方法对比试验评价ELISA方法。检测161例冠心病患者血清APN水平并结合冠状动脉造影结果和Gensini积分系统,探讨血清APN水平与冠心病的关系。结果:利用基因克隆技术成功构建了pET22b(+)/gAPN质粒,获得了相对分子质量约15 000的重组gAPN蛋白,产量较高(1.57 mg),纯度>90%,并以此为标准品初步建立了检测人血清APN的定量ELISA方法。该法具有良好的准确性和重复性,灵敏度达150 pg/ml,回收率为91.0%~108.0%,与深圳依诺金生物科技有限公司进口分装的ELISA试剂盒对照比较有良好的相关性(r=0.935,P<0.001)。临床检测表明冠心病组血清APN水平明显低于非冠心病组(P<0.01),且血清APN水平随冠状动脉狭窄程度的加重呈进行性下降趋势。结论:本实验成功建立了一种简便快速检测人血清APN的ELISA方法,对诊断冠心病有临床应用价值,为国内APN诊断试剂盒的研制和开发提供了科学实验依据。     

不育与流产妇女尿中尿调素含量的测定意义

尿调素(Uromodulin,UrM)是Muchmore 等在1985年用 ConA-Sepharose亲和层析柱自孕妇尿中提取的分子量为85kD 的酸性糖蛋白。其蛋白部分与 Tamm-Horsfall 糖蛋白(THP)相同,仅糖链结构有某些差异。因此,近年来已将 UrM 与 THP 视为同一种物质。习惯上将用 Muchmore 法自     

ELISA法快速检测脑脊液病毒特异性抗体

目的 探讨ELISA法快速检测脑脊液病毒特异性抗体的临床价值。方法 用ELISA法对脑脊液（CSF）病毒特异性IgM抗体进行检测。结果 对90例有体征且CSF异常者的CSF进行1：1稀释，发现结果特异、敏感、准确性高，方法简便。结论 本法能够快速监测并诊断病毒性脑炎，为预防和治疗提供可靠的依据。     

温育温度及时间对ELISA快速一步法检测乙型肝炎标志物的影响

目的探讨温育温度及温育时间对ELISA快速一步法检测乙型肝炎血清标志物的影响.方法对100例血清标本分别在37℃温育30 min显色10 min及在43℃温育15 min显色5 min的条件下检测乙型肝炎血清标志物S/CO.结果两种检测条件下HBsAg、HBsAb、HBeAg结果无差异,有7例HBeAb和6例HBcAb结果不一致,其不符合率有统计学意义（P《0.05）.结论适当地提高温育温度及缩短温育和显色时间对HBsAg、HBsAb、HBeAg结果影响不明显,对HBeAb、HBcAb的结果有影响,可出现假阴性或假阳性.     

应用酶联免疫吸附试验检测流行性出血热患者尿中抗原方法改进及影响因素探讨

我们应用辣根过氧化物酶标记流行性出血热(EHF)IgG,用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法,检测 EHF 患者尿中抗原,取得满意结果。在实验技术建立的同时,对方法改进及影响因素作了初步探讨。     

胆囊收缩素酶联免疫测定法的研究

为探索多肽类物质的酶联免疫测定方法，采用紫外线照射及戊二醛活化酶标板包被八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ８），并以此为基础进行酶联免疫吸附试验。结果显示：该方法可使ＣＣＫ８稳固地结合于酶标板上；竞争性抑制实验中游离的ＣＣＫ８与固相ＣＣＫ８可与抗体发生竞争结合，并呈良好的定量关系。该方法简便、重复性及稳定性好（批内及批间变异系数分别为４７５％及７８０％），可用于ＣＣＫ相关肽初步的结构分析。     

应用酶联免疫吸附试验测定流行性出血热早期患者尿内抗原

本文首次报导应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定流行性出血热(EHF)患者尿中抗原,进行早期诊断,取得满意效果。本法系应用免疫的特异性和酶的高效能催化的敏感性相结合的一种方法,因而特异性强,灵敏度高。研究结果表明七病日内阳性率较高,为93.89％;二病日内阳性率更高,为100％,故具有早期诊断价值。本文用阻断试验证实尿中具有特异性抗原。另与正常人和其它疾病患者作对照,结果为阴性,证明本法特异性高。