鲍曼不动杆菌整合子与耐药性的相关性研究

目的调查鲍曼不动杆菌中Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子的存在情况,分析整合子与鲍曼不动杆菌耐药性的关系。方法测定93株鲍曼不动杆菌对抗菌药物的敏感性;应用简并引物PCR方法,同时扩增整合子5’保守区的I类、Ⅱ类和Ⅲ类整合酶基因,对阳性PCR产物用限制性内切酶Hinf I作限制片段长度多态性（RFLP）分析进行整合子分类。结果 22株鲍曼不动杆菌检测出Ⅰ类整合子,未检出Ⅱ类和Ⅲ类整合子。Ⅰ类整合子阳性的菌株对抗菌药物的耐药率普遍比整合子阴性的菌株高。结论鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药性强,细菌的多重耐药性与Ⅰ类整合子的存在相关。     

分析9年不动杆菌院内感染的耐药性变化及其与I类整合子的相关性

目的了解我院9年间鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌的耐药性变化,并探讨其耐药性与I类整合子的相关性。方法收集2001年1月至2009年12月我院分离培养的不动杆菌共1552株,采用VITEK-2全自动细菌鉴定仪进行检验及耐药分析。采用PCR检测60株鲍曼不动杆菌和30株洛菲不动杆菌的I类整合子,分析I类整合子与细菌耐药性的相关性。结果1552株不动杆菌中以鲍曼不动杆菌1360株（87．6％）,洛菲不动杆菌154株（9．9％）为主。药敏结果显示不动杆菌的耐药率总体呈逐年上升的趋势。PCR检测结果显示38株（63-3％）鲍曼不动杆菌和17株（56．7％）洛菲不动杆菌为I类整合子阳性,I类整合子阳性菌株的耐药率及多重耐药（mulfidrug resistance,MDR）率显著高于I类整合子阴性菌株,且差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论经验性用药或抗生素滥用导致了9年间不动杆菌的耐药率呈逐年上升的趋势。I类整合子在不动杆菌的耐药率及MDR率升高中起重要作用。     

Ⅰ类整合子在多重耐药鲍曼不动杆菌中的作用研究

目的了解我院多重耐药鲍曼不动杆菌临床分离株中Ⅰ类整合子的流行情况,建立一种快速简便的Ⅰ类整合子聚合酶链反应（PCR）检测方法。方法收集我院2008年9月至2010年9月临床分离的鲍曼不动杆菌63株,用MIC法检测耐药性,PCR技术检测Ⅰ类整合子基因。结果 63株鲍曼不动杆菌中Ⅰ类整合子基因阳性率56%（35株）。Ⅰ类整合子阳性和阴性的鲍曼不动杆菌对各种抗生素的耐药性存在明显差异。结论我院多重耐药鲍曼不动杆菌中Ⅰ类整合子携带率高,携带的耐药基因为aaeA4、catB8和aadA1。PCR技术可以方便快速地检出Ⅰ类整合子。     

鲍曼不动杆菌整合子相关耐药基因研究

目的了解我院鲍曼不动杆菌整合子流行情况，证实整合子与鲍曼不动杆菌多重耐药性的关系，建立一种快速简便的整合酶聚合酶链反应（PCR）检测方法。方法收集我院2005年9月至2006年2月临床分离的鲍曼不动杆菌共52株，用纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌耐药性及用整合酶PCR检测其整合子基因。结果在52株鲍曼不动杆菌中，整合酶PCR检测出Ⅰ类整合子33株（63％），未检测出Ⅱ类整合子。统计学分析结果显示，整合子阴性和阳性的鲍曼不动杆菌对各种抗生素的耐药率存在明显差异，前者仅对几种抗生素耐药而后者对多种抗生素耐药。结论我院多重耐药鲍曼不动杆菌中主要为Ⅰ类整合子，整合酶PCR是一种快速、简便、易在临床开展的检测方法，同时也是控制医院感染的有效检测手段。     

鲍曼不动杆菌的耐药性与Ⅰ类整盒子的相关研究

目的了解该院鲍曼不动杆菌的流行趋势以及鲍曼不动杆菌与Ⅰ类整合子的耐药关系。方法用该院临床常用22种抗菌药物来检测临床分离的鲍曼不动杆菌的敏感性。用PCR检测鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合子酶基因,再扩增部分Ⅰ类整合子酶基因的可变区,对整合子可变区进行基因测序分析。结果鲍曼不动杆菌的耐药现象十分严重,呈多重耐药性。鲍曼不动杆菌对CPZ/SB耐药率为1.2%,对替加环素、左旋氧氟沙星、亚胺培南、比阿培南、阿米卡星等几种抗菌药物的耐药率为15.4%~69.5%,对其他抗菌药物均在71%以上。102株中有72株菌株含Ⅰ类整合子(阳性率为70.2%),Ⅰ类整合子阳性株的耐药性均高于阴性株,对Ⅰ类整合子可变区采用双酶切分析产生类似的酶切条带,说明该院鲍曼不动杆菌具有同源性。Ⅰ类整合子基因盒序列分析表明该院鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合子携带aacA4、catB8和aadA1 3种耐药基因。结论该院2010~2013年,鲍曼不动杆菌对头孢菌素类、广谱青霉素、氨基糖苷类和氟喹诺酮类呈高度耐药及严重的多重耐药现状,说明治疗鲍曼不动杆菌所致感染的抗菌药物选择已十分有限。Ⅰ类整合子与鲍曼不动杆菌多重耐药性密切相关。     

Ⅰ类整合子与鲍曼不动杆菌耐药性相关性研究

目的 了解鲍曼不动杆菌整合子分布情况,探讨Ⅰ类整合子与其耐药性的关系.方法 琼脂稀释法检测65株鲍曼不动杆菌耐药率,聚合酶链反应(PCR)检测Ⅰ～Ⅲ类整合子基因;对Ⅰ类整合子阳性菌株进行可变区扩增及序列分析.结果 Ⅰ类整合子检出率为60%(39/65),未检出Ⅱ、Ⅲ类整合子;Ⅰ类整合子阳性菌株对14种抗菌药物的耐药率高于阴性菌株(P＜0.05);92%(36/39)的Ⅰ类整合子阳性菌株可变区扩增阳性,序列分析显示携带3种耐药基因aacA4、aadA1和catB8.结论 Ⅰ类整合子与鲍曼不动杆菌耐药性密切相关,在鲍曼不动杆菌多药耐药性形成机制中起重要作用.     

整合子在鲍曼不动杆菌耐药中的作用研究

目的调查本院鲍曼不动杆菌耐药谱并了解其整合子流行情况;检测鉴定整合子类型并分析其与耐药的相关性。方法收集本院2007年临床分离鲍曼不动杆菌85株,KB法测定其药敏结果。PCR法扩增整合子的整合酶基因,并进一步鉴定整合子种类。分析鲍曼不动杆菌整合子携带与其耐药之间的关系。PCR法扩增整合子开放阅读框,观测其多态性并挑选个别产物测序。结果 85株鲍曼不动杆菌除对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率低于10%,其他15种常用抗菌药物的耐药率均超过30%。67.1%(57/85)的鲍曼不动杆菌中检出整合子;进一步鉴定结果显示均为Ⅰ类整合子,未检出Ⅱ类和Ⅲ类整合子。携带整合子鲍曼不动杆菌株对14种抗菌药物耐药率高于不携带整合子鲍曼不动杆菌株耐药率。开放阅读框可变区扩增产物为0.3～2.5 KB不等条带,测序结果证实含有多药耐药基因编码。结论本院鲍曼不动杆菌耐药率高,以多药耐药菌株为主,携带Ⅰ类整合子率较高;携带整合子鲍曼不动杆菌对14种抗菌药的耐药率明显增高,整合子与鲍曼不动杆菌的多重耐药性具有密切相关性。     

亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的整合子检测及其与多重耐药相关性的研究

目的调查亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌携带整合子情况,了解其与多重耐药的相关性。方法采用Mi—croWlkway-96全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药敏试验,PCR法对临床分离的120株亚胺培南耐药和80株亚胺培南敏感的铜绿假单胞菌进行整合子检测。结果120株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中I类整合子的检出率为81．7％（98／120）、Ⅲ类整合子检出率为1．7％（2／120）,未检出Ⅱ类整合子;80株亚胺培南敏感的铜绿假单胞菌中I类整合子的检出率为21．3％（17／80）,未检出Ⅱ、Ⅲ类整合子。整合子阳性的铜绿假单胞菌对临床常用抗菌药物的耐药率明显高于整合子阴性的铜绿假单胞菌,并且前者多重耐药现象较为严重。结论I类整合子广泛存在于亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中,并与其多重耐药性密切相关。     

南京地区鲍曼不动杆菌中整合子流行现状及携带的耐药基因分析

目的研究南京地区鲍曼不动杆菌中整合子的流行现状、与耐药的相关性及携带的耐药基因。方法收集106株南京地区鲍曼不动杆菌,纸片扩散法测定其药敏情况;PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)筛查整合子并分类;PCR法扩增整合子可变区;联合RFLP和DNA测序技术分析整合子携带的耐药基因。结果52.8%(56/106)鲍曼不动杆菌检出整合子,PCR—RFLP结果显示均为Ⅰ类整合子;94.6%(53/56)整合子阳性菌株可变区扩增阳性,扩增片段大小为0.15～2.8kb;共检出7种不同的可变区,含有编码对氨基糖苷类抗生素(aadA1、aadA2、aadA5、aadB、aacA4)、磺胺类抗菌药(dfrⅫ、dfr17)、β内酰胺类抗生素(bla_(axa-10))和氯霉素(catB-like、catB8)耐药的基因及2个功能不清的开放阅读框(orfF、orfI);发现1例新型基因盒组合形式orfI—aadA1,GenBank基因号为DQ092497。结论Ⅰ类整合子广泛存在于南京地区鲍曼不动杆菌中;整合子与鲍曼不动杆菌的耐药和多重耐药有关;鲍曼不动杆菌整合子主要携带氨基糖苷类耐药基因。     

苏州地区鲍曼不动杆菌中Ⅰ类和Ⅱ类整合子的分布及其基因盒结构分析

摘要：目的: 分析Ⅰ类和Ⅱ类整合子在苏州地区临床分离的鲍曼不动杆菌中分布情况及其基因盒结构。 方法：用PCR法检测69株鲍曼不动杆菌中Ⅰ类和Ⅱ类整合酶基因及整合子携带率,基因测序技术对其可变区进行分析;重复序列引物聚合酶链反应（REP-PCR）对Ⅰ类整合子阳性菌株进行基因分型,分析其同源性。 结果：69株鲍曼不动杆菌中Ⅰ类整合子阳性29株,占42.0%,未检测到Ⅱ类整合子;基因盒结构分析共检出6种基因盒,分别为aacA4,aacC1,catB8,aadA1,orfX和orfX′,以5′CS-aacA4-catB8-aadA1-3′CS基因盒排列为主;REP-PCR法将29株Ⅰ类整合子阳性菌株分成I~V型,其中Ⅲ型为主要流行型别。 结论：苏州地区鲍曼不动杆菌中的整合子携带率较高,主要以Ⅰ类Ⅲ型为主。     

肝移植术后患者感染致病菌的整合子基因序列分析

目的检测肝移植术后患者感染的细菌标本中整合子的分布及其与耐药的相关性。方法收集27株肝移植术后分离的革兰阴性杆菌，鉴定并用纸片扩散法做药敏试验；聚合酶链反应（PCR）法检测整合酶及整合子基因盒，对阳性PCR产物采用Hinfl限制性片段长度多态性（RFLP）分析。结果27株细菌均为多重耐药，对9种抗生素耐药率从14．8％到100％；I型整合子阳性率为51．9％；有750bp、1．0kb、1．8kb、2．0kb 4种长度的基因盒片段。结论I型整合子广泛存在于多重耐药的肝移植术后患者感染标本，建议检测整合子，可用于防治院内感染、指导抗生素的合理使用。     

耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药性分析

目的探讨我院耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药特性。方法对2009年1月至2011年12月我院临床标本采用常规方法进行蓠株分离,采用Vitek-32全自动细茼鉴定药敏系统及绒片扩散法（K—B法）测定鲍曼不动杆菌对16种抗菌药物的敏感性。结果．共检测到91株鲍曼不动杆菌,其中耐亚胺墙南的鲍曼不动杆菌为23株（占25．3％）,标本来源大部分为痰液（占94．9％）。耐亚胺培南鲍曼不动杆菌对常用16种抗蕾药物耐药率〉50％的有15种,耐药率〉90％有3种,分剐为氨苄西林（98．O％）、头孢唑林（99．O％）和呋喃妥因（99．0％）,对抗菌药物耐药率最低仅为头孢哌嗣／舒巳坦（10．2％）,另外检测到对所用抗菌素泛耐为4株（8．O％）;而对亚胺培南敏感的鲍曼不动杆菌对常用16种抗菌药物耐药率〉50％的仅为4种,耐药率〉90％同样为氨苄西林（100％）、头孢唑林（97．9％）和呋喃妥因（97．9％）,耐药率比较低的为美罗培南（10．4％）、妥布霉素（16．7％）和环丙沙星（16．7％）,耐药率最低也为头孢哌酮／舒巴坦（6．3％）。结论我院耐亚胺培南鲍曼不动杆茼多重耐药性严重,出现了泛耐菌株;临床可根据药敏试验选用抗茼药物,一般条件下耐亚胺培南鲍曼不动杆菌建议选用头孢哌嗣／舒巴坦。     

2007-2010年长沙市某医院鲍曼不动杆菌的分离情况及耐药性分析

[目的]了解本医院住院患者鲍曼不动杆菌的耐药性变迁,为临床合理使用抗菌药物提供依据.[方法]对2007～2010年本院住院患者各类标本分离的鲍曼不动杆菌进行回顾性统计分析.[结果]近4年来,鲍曼不动杆菌感染占临床分离革兰阴性杆菌的构成比逐年增加（P〈0.01）,对抗菌药物的耐药性显著提高,但亚胺培南、多粘菌素对鲍曼氏不动杆菌仍有较好的抗菌作用（耐受率〈30%）.[结论]鲍曼不动杆菌是临床病原菌的重要组成之一,其对临床常用抗菌药物的耐药性呈逐年上升趋势,多重耐药菌比例明显增加.应重视合理使用抗生素,减少多重耐药菌株的产生     

2012年北京协和医院细菌耐药性监测

目的了解北京协和医院2012年临床分离细菌对抗菌药物的耐药性。方法共收集6662侏非重复的细菌,采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验,结果按cLSI2012年版标准判读,采用WHONET5．6软件进行数据分析。结果6662株非重复的细菌中革兰阴性菌4446株,占66．7％,革兰阳性菌2216株,占33．3％。耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率分别为39．9％和73．4％。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌属。发现少数对万古霉素和替考拉宁耐药的粪肠球菌和屎肠球菌,未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌属。产ESBI．S的大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌（肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌）和奇异变形杆菌的检出率分别为53．0％、25．7％和27．0％。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率为1．1％～2．6％。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为20．3％和13．6％。鲍曼不动杆菌对上述2种抗菌药物的耐药率分别为72．8％和75．2％。泛耐药鲍曼不动杆菌的检出率为43．5％（330／759）。结论细菌对抗菌药物的耐药性呈增高趋势,特别是泛耐药的鲍曼不动杆菌,应采取有效的医院感染防控措施和合理使用抗菌药物。     

Molecular characterization of integrons in Acinetobacter baumannii: description of a hybrid class 2 integron

Twenty Acinetobacter baumannii strains resistant to various antibiotics were analyzed for integron content and sequences of the amplification products. Sixteen clinical isolates had a class 1 integron, 2 contained an additional class 1 or class 2 integron, but no class 3 integron was detected. Thirteen strains had integrons with a single cassette: aac(3)-Ia (9 strains), ant(2")-Ia (2 strains), or aac(6')-Ib (2 strains); 1 had aac(6')-Ib and oxa20 cassettes and an unknown gene; and 1 had an integron containing ant(2")-Ia and an oxa3 cassette truncated by IS6100. The remaining strains harbored class 1 integrons with gene cassettes previously found in Enterobacteriaceae. One integron had a hybrid structure composed of intI2 and the 3' conserved segment of class 1 integrons. These data indicate that integrons play a major role in multidrug resistance in Acinetobacter.     

109株鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性分析

[目的]探讨本院送检标本中检出鲍曼不动杆菌的临床分布情况及耐药性,为临床合理选用抗生素提供实验室依据.[方法]回顾性分析2008 年1 月至2010 年12 月本院分离的109鲍曼不动杆菌的临床分布、感染特点及其药敏结果,药敏试验采用最低抑菌浓度（MIC）法.[结果]109 株鲍曼不动杆菌,标本主要来源于痰液68.8%（75/109）,科室主要分布于ICU 28.4%（31/109）,其次为呼吸内科24.8%（27/109）和神经内科21.1% （23/109）;鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦（2.3%）耐药性最低,其次是亚胺培南（8.6%）、美罗培南（12.3%）和阿米卡星（9.7% ）;对其他抗生素均有不同程度的高耐药性、多重耐药性.[结论]鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物耐药性高且耐药率增加较快,临床应加强监测,合理使用抗菌药物.     

2012年铜陵市人民医院细菌耐药性监测

目的了解铜陵市人民医院2012年临床分离菌对抗菌药物的耐药状况。方法共收集临床分离的非重复细菌2002株,采用纸片扩散法（K—B）进行药敏试验,结果按CLSI2012年版标准判读,采用WHONET5．6软件进行数据分析。结果居前6位的细菌依次为：大肠埃希菌379株（18．9%）、鲍曼不动杆菌256株（12．8％）、肺炎克雷伯菌243株（12．1％）、铜绿假单胞菌192株（9．6％）、凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）184株（9．2％）、金葡菌170株（8．5％）。其中革兰阴性菌占71．4％,革兰阳性菌占28．6％。甲氧西林耐药金葡菌和CNS（MRSA和MRCNS）的检出率分别为47．6%和72．8％。MRSA和MRCNS对口内酰胺类抗生素和庆大霉素、左氧氟沙星、红霉素和克林霉素均高度耐药,未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌属。粪肠球菌对青霉素、氨苄西林、呋喃妥因的耐药率较低,屎肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌。大肠埃希菌和克雷伯菌属中ESBLs的检出率分别为50．4％和38．0％,产ESBLs菌株对大多数抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。检出耐碳青霉烯类克雷伯菌（21．2％,54／255）和大肠埃希菌（0．8％,3／379）。鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为84．0％和94．4%,对头孢哌酮一舒巴坦和米诺环素的敏感率较高,分别为69．9％和42．6％;铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为25．5％和24．6％,对阿米卡星的敏感率最高,为94．8％。结论该院细菌对抗菌药物的耐药性呈增强趋势,已发现耐碳青霉烯类克雷伯菌属和大肠埃希菌,应加强抗菌药物的合理使用和医院感染控制。     

北京协和医院内科住院患者细菌耐药性监测

  目的  了解北京协和医院内科住院患者临床分离细菌的分布及对抗菌药物的耐药性。  方法  收集2011年1月1日至2012年12月31日北京协和医院内科临床分离的2767株非重复细菌, 采用纸片扩散法或自动化仪器法进行药敏试验, 按美国临床实验室标准化研究所2012年版标准判读药敏结果, 采用WHONET 5.6软件进行数据分析。  结果  2767株非重复细菌中10种最常见的细菌依次为铜绿假单胞菌(11.5%)、大肠埃希菌(11.2%)、金黄色葡萄球菌(10.1%)、肺炎克雷伯菌(9.7%)、鲍曼不动杆菌(9.4%)、凝固酶阴性葡萄球菌(5.0%)、阴沟肠杆菌(4.1%)、粪肠球菌(3.8%)、嗜麦芽窄食单胞菌(3.6%)和屎肠球菌(3.4%), 其中革兰阴性菌占65.3%(1807株), 革兰阳性菌占34.7%(960株)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase negative Staphylococcus, MRCNS)的检出率分别为33.8%(94/278)和75.8%(222/293)。MRS葡萄球菌(MRSA和MRCNS)对β内酰胺类和其他抗菌药物的耐药率明显高于MSS葡萄球菌[甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus, MSSA)和甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-susceptive coagulase-negative Staphylococcus, MSCNS)]。MRSA中87.2%菌株对磺胺甲噁唑-甲氧苄啶敏感, MRCNS中84.2%菌株对利福平敏感。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对大多数抗菌药物的耐药率明显低于屎肠球菌, 后者对氯霉素的耐药率仅为4.7%。分别发现2株和8株万古霉素耐药的粪肠球菌和屎肠球菌, 根据表型推测为VanA和VanB型耐药; 未发现对利奈唑胺耐药的肠球菌。产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases, ESBLs)的大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)和奇异变形杆菌的检出率分别为66.5%、32.6%和30.5%, 产ESBLs菌株的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物仍高度敏感, 总耐药率0.9%~2.9%。泛耐药肺炎克雷伯菌的检出率为0.4%(1/267)。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为23.4%和17.4%, 对阿米卡星的耐药率最低(6.6%); 鲍曼不动杆菌对上述两种抗菌药物的耐药率分别为56.8%和57.5%, 对头孢哌酮-舒巴坦和米诺环素的耐药率最低(42.1%和24.0%)。泛耐药鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的检出率分别为35.9%和1.6%。流感嗜血杆菌β-内酰胺酶的检出率为19.4%。肺炎链球菌对红霉素和克林霉素的耐药率>94%。  结论  定期进行耐药性监测有助于了解细菌耐药性变迁, 可为临床经验用药提供依据。