深圳市布吉街道从业人员沙门菌PFGE分型分析

目的了解深圳市龙岗区布吉街道从业人员携带沙门菌的血清型、耐药特点及脉冲场凝胶电泳(pulsed fieldgel electrophoresis,PFGE)分子分型特点。方法对从深圳市龙岗区布吉街道2011~2012年健康从业人员肛拭子样品中分离的19株沙门菌进行生化及血清学分型鉴定、改良K-B法药敏试验和开展PFGE分子分型分析。结果 19株沙门菌以B群(11株)和C1群(4株)为主;19株沙门菌对四环素的耐药率最高,为57.9%,其次为甲氧苄氨嘧啶和磺胺甲基异恶唑(新诺明),均为42.1%,8株菌有多重耐药的现象,为42.1%;PFGE分子分型菌株之间的相似度在57.4%~94.1%,同一血清型的沙门菌相互间的相似度均低于85.0%,同一血清型别的沙门菌可对应多个PFGE型别。结论深圳市布吉街道从业人员携带的沙门菌的PFGE型别呈现多样性,PFGE指纹图谱与血清学型别无相关性;19株沙门菌对头孢类抗生素完全敏感,对其他抗生素存在中度敏感或耐药,耐药谱与PFGE分型无直接的关联。     

广州地区患儿流感嗜血杆菌分离株荚膜基因分型的研究

目的用PCR方法进行流感嗜血杆菌荚膜编码基因分型,调查儿童急性呼吸道感染患儿流感嗜血杆菌的感染情况。方法以流感嗜血杆菌荚膜编码基因(bexA)和荚膜分型编码基因(Hi-a、Hi-b)作为靶基因设计引物,用PCR方法扩增标准菌株为ATCC9006、ATCC49247、EQA0609的3个编码基因并测序,在此基础上对临床分离的43株流感嗜血杆菌进行荚膜基因分型研究。结果PCR结果显示标准菌株ATCC49247未扩增出bexA编码基因,ATCC9006扩增出bexA和Hi-a编码基因,EQA0609扩增出为bexA和Hi-b编码基因,并且PCR产物序列与GenBank公布的序列一致性高。临床分离菌株Hi未扩增出bexA、Hi-a及Hi-b编码基因。结论本实验研究表明广州地区儿童急性呼吸道感染患儿所分离的流感嗜血杆菌主要是不可分型的无荚膜菌株。     

深圳市食物中毒来源金黄色葡萄球菌的分子流行病学分析

目的建立金黄色葡萄球菌(金葡菌)的分子分型技术,研究深圳市食物中毒来源金葡菌的分子流行病学特征。方法对食物中毒事件中食物链的不同环节均采集标本,进行金葡菌分离培养。对所分离菌株同时应用SPA分型及PFGE技术作分子流行病学分析。结果 136起疑似食物中毒事件中有12起能够从食物链不同环节分离到金葡菌,共59株。PFGE将59株金葡菌分为15个型别,在10起食物中毒事件的不同环节中分析到PFGE型别一致的菌株,分辨系数为0.87。SPA分型将59株金葡菌分为10个型别,在12起食物中毒事件中不同环节样品中分析到SPA型别一致的菌株,分辨系数为0.85。结论 PFGE的分辨力高于SPA分型;通过结合流行病学资料分析,12起食物中毒事件中有6起能够通过分子分型方法准确溯源。     

深圳市学龄前儿童流感嗜血杆菌带菌率及耐药性研究

目的了解深圳市健康学龄前儿童口咽部流感嗜血杆菌（Haemophilus influenza,Hi）携带率、菌型特点及对常用抗生素的耐药情况,提供Hi感染的临床防治依据。方法选择深圳市具有代表性的三所日托幼儿园健康儿童181名,进行口咽部Hi携带率监测,Hi分离株进一步作生物学分型及耐药性研究。结果从181份样品中共分离到流感嗜血杆菌45株,阳性率为24．9％。生物学分型分别为Ⅰ型2株（4．4％）、Ⅱ型13株（28．9％）、Ⅲ型18株（40．0％）、Ⅳ型2株（4．4％）、Ⅴ型2株（4．4％）、Ⅵ型2株（4．4％）、Ⅵ型0、Ⅷ型6株（13．3％）。耐药株数（耐药率）分别为：氨苄西林12株（26．7％）、复方新诺明19株（42．2％）、氯霉素8株（17．8％）、四环素10株（22．2％）、氨苄西林／舒巴坦1株（2．2％）、氨曲南1株（2．2％）,头孢噻肟、头孢克肟、利福平、阿齐霉素、氧氟沙星均为0。结论深圳市学龄前健康儿童口咽部Hi生物学分型以Ⅱ型、Ⅲ型为主,对常见抗生素耐药情况不甚严重,特别对头孢噻肟、头孢克肟、利福平、阿齐霉素、氧氟沙星有较高的敏感性。     

海口市流感嗜血杆菌感染流行病学与病原学特征分析

目的分析海口市流感嗜血杆菌(Hi)感染流行病学与病原学特征。方法对海口各医院送检的咽拭子、痰、脑脊液标本进行Hi培养和鉴定,并对分离的菌株进行血清和生物学分型、β-内酰胺酶和耐药性检测。结果 238例标本中Hi的阳性率为26.1%(62/238),其中咽拭子、痰、脑脊液的阳性率分别为35.7%(45/126)、18.6%(13/70)、9.5%(4/42),差异有统计学意义(P<0.05)。男、女患者阳性率分别为24.3%(25/103)、27.4%(37/135),差异无统计学意义(P>0.05)。≤14岁、14～30岁、31～50岁、≥50岁年龄组Hi阳性率分别为48.4%(45/93)、17.1%(6/35)、14.7%(5/34)、7.9%(6/76),差异有统计学意义(P<0.05)。分离出的62株Hi中有45株(72.6%)为不可分型菌株,其余17株(27.4%)为可分型菌株。在可分型的17株菌株中,以d、e两种血清型为主,分别为23.5%(4/17)和47.1%(8/17)。共检出8个生物型,以Ⅱ、Ⅲ两种生物型为主,分别占35.5%(22/62)和30.6%(19/62)。62株Hi对氨苄西林的耐药率最高,其耐药率为25.8%(16/62),而对头孢唑林和氧氟沙星敏感,敏感率均为100.0%(62/62)。62株Hi的β-内酰胺酶阳性率为16.1%(10/62)。结论海口市Hi感染在儿童中常见,分离的菌株以不可分型、d、e血清型和Ⅱ、Ⅲ生物型为主,对头孢唑林和氧氟沙星敏感。     

福州市健康儿童口咽部流感嗜血杆菌带菌调查

目的：了解福州市健康儿童口咽部流感嗜血杆菌（haemophilus influenzae,Hi)带菌情况及菌型特点，提供Hi感染的临床防治依据。方法：选择幼儿园健康日托儿童603名，进行口咽部Hi携带率四季监测，Hi分离株进一步作血清学分型及生物学分型。结果：健康日托儿童口咽部Hi携带率以冬季最高（36．7％），秋季次之（18．0％），春季（10．9％）和夏季（12．4％）相近。Hi分离株血清型秋季以Hib携带率最高（6．9％），冬季以不可分型Hi(NTHi)为主，携带率占17．1％，Hib携带率5．4％，秋、冬季其它各血清型携带率较低。Hi分离株生物型在秋、春、夏季分布较为一致，以生物Ⅶ，Ⅷ型占优势；冬季生物Ⅶ，Ⅷ型明显减少。结论：健康儿童口咽部Hi定殖菌携带率及菌型有季节变迁现象，以冬、秋季Hi携带率较高。提示，在重视Hib结合菌苗接种的同时，应加强Hi新型菌苗的研究。     

食物中毒中分离的副溶血性弧菌的分子分型研究

目的运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术研究深圳市罗湖区2005-2007年食物中毒事件中分离获得的49株副溶血性弧菌的分子流行情况。方法样品采用荧光PCR与传统分离培养同时检测,对分离获得的副溶血性弧菌阳性菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),BioNumerics软件对图谱进行聚类分析。结果 49株副溶血性弧菌中,有12株不能分型,其余36株副溶血性弧菌分离株大致可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个群,相同血清型的菌株其PFGE型大致相同,同一起食物中毒的菌株间有较高的相关性。结论罗湖区副溶血性弧菌食物中毒存在流行克隆株,PFGE分子分型技术在食物中毒追踪溯源方面有重要提示性作用。     

深圳市健康人群流感嗜血杆菌带菌状况调查

目的了解深圳市健康人群流感嗜血杆菌（Hi）带菌状况。方法采用随机整群抽样的方法,于2008年4月～7月采集深圳市各年龄组健康人群咽拭子共380份现场接种于巧克力抗生素平板,用V＋X因子试验、卫星试验、染色镜检、生化试验等分离鉴定,再通过PCR鉴定分型、血清分型。结果所调查的健康人群Hi携带率为31．84％（121／380）。其中6-岁年龄组的带菌率（54．90％）最高,带菌率最低的年龄组为〉50岁年龄组（8．51%）,各年龄组之间带菌率的差异有显著性（X2=30．172,P〈0．005）。结论深圳市健康人群Hi带菌率高,有荚膜Hj比率低（2．86％）,生化分型以Ⅱ、Ⅲ为主,血清型有b型、e型,未发现其它血清型。     

深圳市龙岗区致泻大肠埃希菌的PFGE分子分型

目的了解2010-2015年深圳市龙岗区致泻大肠埃希菌(DEC)的分子流行病学特征。方法收集来自腹泻病人和健康人群的1 714份粪便或肛拭子标本,对其进行DEC的分离培养,生化及PCR鉴定与分型,再利用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对DEC分离株进行分子分型。结果共检出DEC阳性160人,检出率为9.3%,其中感染性腹泻病人中检出率为9.7%(117/1 204);健康人群中检出率为8.4%(43/510)。人群中DEC的检出类型以产毒性大肠埃希菌(ETEC)为主,占45.0%,其次为致病性大肠埃希菌(EPEC)和黏附性大肠埃希菌(EAEC),分别占32.5%、18.7%;腹泻人群和健康人群中检出类型差异有统计学意义(P0.05),前者以ETEC为主(59.8%),后者以EPEC为主(60.5%)。135株DEC样本菌株共分为123种PFGE带型,其中70株ETEC共分为60种PFGE带型,37株EPEC分为36个带型,23株EAEC分为22个带型,病人和健康人群之间检出了带型一致的EAEC菌株。结论研究地区DEC的基因型多样,人群感染类型以ETEC为主。ETEC可能存在优势克隆菌株的感染流行,存在暴发感染的可能;腹泻人群和健康人群之间可能存在同源克隆菌株的感染。     

277株肺炎链球菌生物学鉴定及血清学分型结果分析

目的:对277株肺炎链球菌进行生物学鉴定和血清学分型。方法:本文采用常规细菌鉴定及经改良的针对肺炎链球菌的特殊形态学、生化学鉴定方法,包括菌落特征、革兰染色镜检、生化反应、胆汁溶菌试验、Optochin试验、荚膜肿胀试验、荚膜染色试验等方法,对277株肺炎链球菌菌株进行了生物学鉴定和血清学分型。结果:277株经鉴定为典型的肺炎链球菌菌株中,1型和5型最多见,分别占11.6%和10.1%;其次为6B、3型、14型、19F、23F及2型,约占4.3%～6.5%。结论:实验结果对我国肺炎球菌疫苗生产菌种的质量控制具有指导意义。     

食品中产气荚膜梭菌的分离鉴定与基因分型

目的调查广州地区食品中产气荚膜梭菌的污染水平及菌型分布。方法参照国家标准方法进行产气荚膜梭菌的分离鉴定,采用针对产气荚梭菌α、β、ε、ι、CPE和β2六种毒素的基因cpa、cpb、etx、iA、cpe和cpb2序列的6对特异性引物,用多重PCR方法对分离菌株进行基因分型鉴定。同时用产气荚膜梭菌A型参照株NCTC64609作为阳性对照。结果从142份食品中分离到21株产气荚膜梭菌,以冷冻肉的带菌率最高,为19.6%;鲜肉和速冻肉饺分别为12.2%和11.9%。经多重PCR方法鉴定,均扩增出预期大小为324bp的cpa基因片段的特异性条带,未扩增出针对cpb、etx和iA基因的特异性条带,证实均为A型产气荚膜梭菌。携带β2毒素基因的产气荚膜梭菌共19株(占总分离株的90.4%),其中1株为肠毒素基因阳性的A型菌株。结论初步调查表明广州地区食品中存在可致人食物中毒的肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌污染,为进一步建立广州地区食品中及与食物中毒有关的厌氧菌分子分型数据库奠定了基础。     

珠海市斯坦利沙门菌耐药特征和分子分型分析

目的分析2012—2016年珠海市斯坦利沙门菌的耐药情况与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。方法将腹泻病人的粪便进行沙门菌分离培养,生化鉴定和血清学分型,采用药敏纸片法(K-B法)进行12种抗生素的耐药试验。根据美国PulseNet实验室推荐的沙门菌PFGE分型试验方案进行分子分型。结果分离培养共获得斯坦利沙门菌108株,检出高峰期在7—10月,主要感染人群是小于1岁的幼儿(55.6%),感染病例男女比为1.84∶1。药敏试验显示本地斯坦利沙门菌对庆大霉素、三代和四代头孢类抗生素及环丙沙星较为敏感,对复方磺胺类抗生素耐药率为64.8%(70/108),对氨苄青霉素、萘啶酮酸、四环素、氯霉素和链霉素呈现低水平的耐药(10.2%~16.7%),但对链霉素的中度敏感率为68.5%,有18株(16.7%)菌呈多重耐药。108株菌经PFGE分型分为6个聚类簇,共获得66种带型,每种带型包含菌株数1~21株不等,相似值在62.4%~100%,优势带型为ST15(21株)和ST18(10株)。结论珠海市斯坦利沙门菌的耐药情况较为乐观,但对磺胺类抗生素耐药率比较高,也出现多重耐药株,需继续加强监测。斯坦利沙门菌遗传基因多样性,多重耐药株的型别多样,菌株来源广泛。     

一起流脑爆发菌株脉冲场凝胶电泳的分子分型研究

目的 运用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对一起C群流脑爆发疫情所分离的菌株进行同源性分析.方法 对分离的脑膜炎奈瑟菌进行血清学鉴定后,并进行PFGE分析和确定分子分型.结果 在疫情中分离的6株C群脑膜炎奈瑟菌菌株的PFGE谱型相同,聚类图谱分析相似性为100%,而与韶关翁源1株从健康人分离到的菌株谱型完全不同.结论 PFGE可以作为爆发流行中对细菌进行鉴定和确定菌株的感染来源.     

海南省2005年霍乱暴发菌株PFGE图谱研究

目的 分析海南省2005年霍乱菌株暴发分离株的分子特征及菌株之间的分型相似性,为防治工作提供病原依据,并与PulseNet China提供资料进行相关分析。方法对分离株进行噬菌体-生物分型,通过PCR检测霍乱毒素基因,利用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型和相似性聚类分析。结果54株分离株中有51株为产毒株,稻叶血清型,噬菌体-生物分型为1b型,其余3株为非流行株。全部菌株被分为15种PFGE带型,聚类分析大部分产毒株之间高度相似,并与PulseNet China提供资料证实,与同时福建、广东、浙江流行的稻叶型菌株带型相同。结论海南省2005年稻叶型暴发菌株,属于2005年流行的菌型,提示在我国东南沿海地区的广泛扩散。     

一起食源性伤寒暴发疫情的耐药分析和分子分型

目的研究一起食源性伤寒暴发疫情的伤寒沙门菌的耐药情况和分子分型特点,为伤寒防制工作提供依据。方法病例及外环境标本采用分离培养、生化鉴定与血清学分型进行菌株鉴定,并对菌株进行10种抗生素的敏感性试验,同时运用脉冲场凝胶电泳(Pulsed field gel electrophoresis,PEFG)技术对菌株进行分子分型和流行病学特征分析。结果共培养分离出93株伤寒沙门菌,分别为92份病例和1份外环境井水标本。选取14株本次暴发疫情、7株往年菌株、1株邻市和1株外环境井水标本进行PFGE检测,结果显示井水与江阴市13株和邻市1株沙门菌带型一致,从分子流行病学角度可基本确认是由一种型别的病原菌引起的伤寒局部流行。来自病例标本的73株伤寒沙门菌对阿莫西林、头孢噻吩、头孢噻肟敏感率100. 00%,对萘啶酸、利福平耐药率100. 00%。结论加强PFGE和耐药监测的运用,可以及时掌握伤寒菌株型别、耐药变迁情况,准确治愈伤寒病例,采取针对性防控措施,防止伤寒疫情扩散和蔓延。     

深圳市甲型副伤寒PulseNet数据库的建立与应用

目的建立深圳市甲型副伤寒PulseNet数据库,用于甲型副伤寒的实时监测和分子流行病学调查。方法采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术,对深圳市2002-2007年散发和爆发的243株甲型副伤寒沙门菌的染色体DNA进行酶切电泳,用BioNumerics软件对PFGE分型图谱电子化数据分析,建立分子分型数据库。结果深圳市甲型副伤寒菌株各年间差异较小,用Xba酶切仅呈现6种PFGE图谱。同一起甲副暴发的临床分离株具有相同的PFGE图谱。各区和各年代的分离株都存在有相同的PFGE带型。结论深圳市甲型副伤寒沙门菌变异较小,呈长期流行趋势,甲型副伤寒PulseNet数据库的初步建立,对直观地分析各起疫情之间的相互关系,对疫情的控制和传染来源的追踪具有重要意义。     

街道饮食及服务行业从业人员携带沙门菌的病原学特征研究

目的分析龙岗街道饮食及服务行业从业人员健康体检分离的沙门菌的耐药性及分子分型。方法对分离到的11株沙门菌进行血清学分型鉴定,并采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）和改良K．B法分别进行分子分型和药敏试验。结果11株沙门菌鉴定出B群5株,E1群6株。对四环素的耐药率最高（63．64％）,其次为氨苄西林（54．55％）、链霉素（54．55％）,5株菌有多重耐药的现象（45．5％）。PFGE分子分型菌株之间的相似度在51．8％。96％之间．同一血清型的沙门菌相互间的相似度均低于85％。结论从业人员携带的沙门菌耐药比较严重,PFGE分型、血清型与耐药谱无直接关联。     

伤寒沙门菌PFGE分子分型及耐药性研究

目的对深圳市2004-2011年伤寒沙门菌进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型及耐药性分析,为临床用药和追踪传染源提供依据。方法采用K-B法对42株伤寒沙门菌进行20种抗菌药物敏感性测试,并用PFGE对其进行分子分型。结果 42株伤寒沙门菌株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻吩、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、头孢西丁、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、甲氧苄啶、氯霉素和四环素17种药物的敏感率均超过90%,对萘啶酸耐药率最高达61.5%。42株伤寒沙门菌株可分为SZ0001-SZ0028共28个PFGE型别,其中流行优势型为SZ0023型别。结论结合药物敏感试验结果和PFGE分子分型结果可以判断伤寒疫情的优势株型。     

云南省食源性沙门菌血清分型及脉冲场凝胶电泳的指纹图谱

目的 研究云南省食源性沙门菌的血清型, 用脉冲场凝胶电泳 (PFGE) 方法对优势血清型进行分子分型, 建立云南省食源性沙门菌PFGE指纹图谱资料库, 为食源性疾病溯源提供数据.方法 对2013年至2016年从云南省食源性疾病监测中分离到的322株食源性沙门菌进行血清学分型, 采用Bio Numerics软件对148株沙门菌DNA酶切图谱进行类聚分析, 通过聚类比较分析菌株间的相关性, 建立指纹图谱库.结果 322株沙门菌血清分型主要包括A、B、C、D、E、F、G群等7个群, 鼠伤寒沙门氏菌是主要血清型, 占11.4% (37/322) .采用Bio Numerics软件对148株沙门菌DNA酶切图谱进行类聚分析, 根据电泳产生条带的位置和数量的不同, 共分为102个不同的PFGE带型.按照90%的相似度, 这些PFGE带型可以分为39个大小不一的聚类群, 呈现多样性.结论 云南省食源性沙门菌分子分型复杂, 以鼠伤寒沙门氏菌为主, PFGE带型呈现多样性.     

江门市公共场所淋浴水中嗜肺军团菌污染分子溯源研究

目的 通过分析江门市公共场所淋浴水中分离的嗜肺军团菌的基因特征,初步建立嗜肺军团菌分子分型数据库,为卫生行政部门实施监督提供科学依据。方法 对分离出来的嗜肺军团菌进行血清分型,并使用脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行分子分型,经BioNumerics软件进行聚类分析,按照相似系数>85%的不同菌株归为同一聚类,获得克隆系。结果 66株嗜肺军团菌有6种血清群,其中Ⅰ型有37株占56.06%,为优势菌型。嗜肺军团菌有38种PFGE型别,带型的相似系数为18.20%～100.00%,菌株之间PFGE带型差异较大。相同的PFGE带型≥3条有6种型别,分别为P8、P9、P11、P21、P25和P26,无优势带型。最大的克隆系是3和4。结论 从公共场所淋浴水分离的嗜肺军团菌呈基因多样性,也具有一定的遗传稳定性。