硒代蛋氨酸对小鼠巨噬细胞增殖及硒蛋白K的影响

目的探究硒代蛋氨酸(Selenomethionine,Se-Met)对小鼠巨噬细胞的增殖及巨噬细胞中硒蛋白K(Selenopro-tein K,Sel K)的影响,并观察Sel K在小鼠巨噬细胞中的定位。方法加硒代蛋氨酸(Se-Met)培养巨噬细胞,用CCK-8法检测巨噬细胞的增殖活力,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹技术检测Se-Met对小鼠巨噬细胞中Sel K m RNA和Sel K蛋白表达的影响;用细胞免疫荧光法观察Sel K在巨噬细胞中的位置。结果 Se-Met能促进巨噬细胞的增殖,其中浓度为1μmol/L Se-Met在处理巨噬细胞24 h和48h后,能显著性地促进巨噬细胞的增殖(P0.01);1μmol/L Se-Met能使巨噬细胞中Sel K的m RNA含量显著增加(24 h处理组,P0.05;48 h处理组,P0.01),另外,Sel K蛋白的含量也有所增加(48 h处理组,P0.05)。浓度为100μmol/L Se-Met在处理巨噬细胞48 h后,能极显著性地抑制巨噬细胞增殖(P0.01)。结果还显示Sel K蛋白与内质网标志物KDEL都存在于巨噬细胞内的相同位置上。结论 Se-Met在促进巨噬细胞增殖的同时,使存在于内质网上的Sel K增加。     

硒蛋白K基因干扰对T淋巴细胞内质网钙稳定蛋白的影响

目的探讨SelK mRNA干扰效果及其硒蛋白K(SelK)基因干扰后对细胞内质网钙稳态蛋白(endoplasmicreticulum calcium homeostasis protein,CHERP)的表达,观察T淋巴细胞内Ca~(2+)浓度的变化。方法从SelK m RNA(NM_019979.2)的编码序列中符合设计要求的靶位点设计特异性干扰SelK mRNA的RNAi片段,构建shRNA干扰载体靶向干扰SelK RNA,用核酸序列分析方法分析重组片段的正确性,利用荧光定量PCR和Westeron blot鉴定SelK mRNA的干扰效果,采用Real time-PCR的方法检测SelK干扰后细胞内的CHERP的变化。结果阳性重组载体可以被BamH I酶切。酶切片段序列分析重组子质粒结果与所设计片段完全一致,正确率为100.0%。三个ShRNA表现了不同的干扰效果,sh222、sh102和sh101的干扰效率分别为12.13%、16.46%和42.37%,在核酸水平上重组质粒sh101对SelK的干扰效果最佳,与sh222和sh102相比,差异有统计学意义(P0.01)。Western blot检测重组质粒sh101在蛋白水平上的干扰效率为45.4%,干扰组细胞中CHERP的表达与对照组相比抑制率达到40.0%。结论重组质粒sh101对SelK在核酸和蛋白质水平上都有较好的干扰效率,SelK干扰对细胞中CHERP的表达有抑制的作用,或因此打乱了内质网与胞质中的钙离子平衡,从而影响到了细胞内游离的钙离子浓度,是导致T淋巴细胞激活的因素之一。     

动物硒蛋白种类及其生化功能的研究进展

近年来在动物体内发现了大量的含硒蛋白，本文对最新发现的硒蛋白种类，功能及其研究现状进行了较详细的概述，研究表明，硒营养状态的变化通过广泛的生化途径来调节动物的生理功能，随着硒蛋白的不断发现，将使一些以前不能与硒缺乏联系起来的临床问题得以明确。     

内质网应激在胰岛损伤中作用的研究进展

内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是由未折叠与错误折叠蛋白质在内质网腔中积聚引起的一种特殊的细胞内应激。细胞在氧化应激、炎症、钙离子紊乱等多种刺激因素下,内质网稳态被破坏,继而诱发ERS。适应性的ERS通过未折叠蛋白质反应以及保护性自噬恢复内质网稳态,发挥细胞保护作用;严重和持续的ERS将会诱导凋亡、焦亡、自噬等不同类型的细胞死亡。胰岛对氧化应激等介导的损伤非常敏感,不同程度的ERS可与氧化应激、炎症等途径协同作用调节胰岛功能。因此,有效调控ERS可能为糖尿病及其并发症的防治提供新的思路。     

未折叠蛋白反应与胰腺β细胞功能的研究进展

胰腺β细胞功能障碍导致糖尿病发生,在糖尿病早期,胰腺β细胞通过自身调节代偿高血糖和外周胰岛素抵抗,涉及的信号通路之一称为未折叠蛋白反应(UPR)。UPR不但可以维持内质网(ER)动态平衡和β细胞完整性,而且在ER折叠中起重要作用,UPR可以加快错误折叠蛋白降解,还可以抑制信使RNA(mRNA)转录,从而减少内质网腔内未折叠蛋白的堆积。该文着重阐述UPR在糖尿病期间的β细胞代偿和衰竭中的主要作用。     

硒及硒蛋白与精子发生

硒对于雄性生殖有重要作用,在体内主要以硒蛋白形式发挥生物学功能.本文对于几种与精子发生关系密切的硒蛋白以及硒含量对其表达调控影响的进展情况进行了总结,从分子水平进一步探究硒对雄性生殖健康的影响,为临床防治男性不育提供依据.     

原核生物中硒蛋白表达的研究进展

硒是人体中必需的营养元素之一,一般以硒代半胱氨酸(Sec)的形式结合在蛋白质中,称为硒蛋白。编码Sec的密码子为通常作为终止子的UGA,故人们将Sec称为第21种氨基酸,因此Sec的掺入需要一特殊的调控机制。在原核生物中,涉及到一个顺式作用元件(SECIS)和4个基因产物,4个基因产物分别为:硒代半胱氨酸合成酶SelA、特异翻译因子SelB蛋白、识别UGA的丝氨酰tRNAsecSelC和硒代磷酸合成酶SelD。研究表明,合理增加4种基因产物的表达量可以提高Sec的表达效率。     

未折叠蛋白反应参与胰腺癌化疗耐药研究进展

化疗耐药是导致胰腺癌预后不良的重要因素,耐药形成受多种因素调控,其中包括内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)状态下的未折叠蛋白反应(unfolded protein response, UPR)。UPR通过参与化疗药物外排、自噬、上皮-间充质转化和肿瘤干细胞形成等过程, 最终导致胰腺癌耐药。本文综述了近年来未折叠蛋白反应在胰腺癌耐药过程中的作用机制,旨在为改善胰腺癌不良预后提供参考。     

硒谷胱甘肽过氧化酶—一种重要的含硒蛋白

三十年前,Schwarz确立了硒的生物必需微量元素地位,从此,对硒的研究开始了一个新纪元。以后的研究逐步揭示了硒对于哺乳动物和人的生理必需性,许多严重的综合症,如大鼠和小鼠的肝坏死,牛和羊的白肌病,人的心肌病都可以由于缺硒而引起。至于硒与动物和人类肿瘤的关系,人们更是给予了广泛注意,进行了大量的流行病学和实验室的研究。硒与抗衰老、免疫等的密切关系也引起了不少学者的重视。 硒在体内具有多种形式,包括与蛋白结合的硒(如硒谷胱甘肽过氧化酶,SeGPX);小分子状态的硒(如三硫化硒);     

硒蛋白与骨质疏松及骨关节炎关系的研究进展

硒（SE）是人体当中必需的微量元素之一,缺少SE后会导致其他疾病的发生,SE主要以蛋白的形式发挥作用。目前,有25种硒蛋白被发现,重要的硒蛋白包括硫氧还蛋白还原酶（TrxR）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX-Px）及碘甲状腺氨酸脱碘酶（ID）。本研究以TrxR、GPX-Px、ID作为硒蛋白代表,对其功能与骨质疏松及骨关节炎的发病机制关系进行综述,发现TrxR、GPX-Px、ID有抗炎、抗氧化等功能,能够调节骨及钙磷代谢,对早期预警骨关节炎及骨质疏松的发病有着重要作用。     

原位输尿管吻合治疗输尿管全段撕脱1例并文献复习

输尿管镜下碎石取石术目前是输尿管结石保守治疗失败后常用的治疗手段,它具有治疗时间短、疗效好、碎石取石彻底等优点.在一些特殊病例,比如肥胖、凝血功能异常或者孕妇,输尿管镜下碎石取石术也是一个比较好的选择[1-2].近年来,输尿管软镜的使用逐渐增多,但硬性输尿管镜由于它的耐用性、可视性和便于操作,仍然是输尿管结石治疗的主要方法.近10余年来,随着输尿管镜下碎石技术的逐渐开展,相关并发症逐渐减少,但最严重的并发症输尿管全段撕脱仍时有发生,往往导致复杂的手术治疗,甚至导致肾脏的丢失,需要引起高度重视.现报道本院诊治的1例输尿管全段撕脱病例的资料,并就输尿管全段撕脱的处理进行文献复习报道如下.     

颅内多发性血管周细胞瘤综合影像分析—1例报告

正1一般资料患者,男性,33岁,无明显诱因出现头痛伴右下肢麻木,持续加剧就诊。入院后神志清楚,病理反射未引出,血、尿常规未见明显异常。头颅MR平扫(图1-2)示左侧顶部大脑镰旁、右侧额部、右侧颞枕部多发占位,呈椭圆形,病灶以等T1、稍长T2为主,内可见点片状长T1长T2信号;MR增强扫描病灶呈明显强化,部分病灶内可见流空血管影,硬膜受     

基于专业能力培养的中药鉴定学实践教学改革探析

根据中医药院校中药学人才培养需要,中药鉴定学应以培养和提高学生认药、识药、辨药专业能力为目标,从实践教学内容、教学组织形式、教学考核与评价等方面进行实践教学改革,为提高中药鉴定学教学质量提供保证。     

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