硒蛋白K基因干扰对T淋巴细胞内质网钙稳定蛋白的影响

目的探讨SelK mRNA干扰效果及其硒蛋白K(SelK)基因干扰后对细胞内质网钙稳态蛋白(endoplasmicreticulum calcium homeostasis protein,CHERP)的表达,观察T淋巴细胞内Ca~(2+)浓度的变化。方法从SelK m RNA(NM_019979.2)的编码序列中符合设计要求的靶位点设计特异性干扰SelK mRNA的RNAi片段,构建shRNA干扰载体靶向干扰SelK RNA,用核酸序列分析方法分析重组片段的正确性,利用荧光定量PCR和Westeron blot鉴定SelK mRNA的干扰效果,采用Real time-PCR的方法检测SelK干扰后细胞内的CHERP的变化。结果阳性重组载体可以被BamH I酶切。酶切片段序列分析重组子质粒结果与所设计片段完全一致,正确率为100.0%。三个ShRNA表现了不同的干扰效果,sh222、sh102和sh101的干扰效率分别为12.13%、16.46%和42.37%,在核酸水平上重组质粒sh101对SelK的干扰效果最佳,与sh222和sh102相比,差异有统计学意义(P0.01)。Western blot检测重组质粒sh101在蛋白水平上的干扰效率为45.4%,干扰组细胞中CHERP的表达与对照组相比抑制率达到40.0%。结论重组质粒sh101对SelK在核酸和蛋白质水平上都有较好的干扰效率,SelK干扰对细胞中CHERP的表达有抑制的作用,或因此打乱了内质网与胞质中的钙离子平衡,从而影响到了细胞内游离的钙离子浓度,是导致T淋巴细胞激活的因素之一。     

PLIN5的生物学功能及其在心血管疾病中的研究进展

脂滴包被蛋白（PLINs）又称脂周蛋白/围脂滴蛋白,是脂滴（LDs）表面含量最多的一类参与脂质代谢调节的脂滴相关蛋白家族。PLINs参与LDs的形成、分解、代谢等生物学过程,不同的PLINs在LDs表面具有各自特异的组织分布特征、亚细胞位置、脂质结合特性等功能。其中脂滴包被蛋白5（PLIN5）在富含线粒体的氧化组织如心肌中高度表达,介导LDs与线粒体、内质网等细胞器的相互作用,与多个心血管疾病的发生、发展密切相关。该文从PLIN5的结构、生理学功能及其与心血管疾病关系等方面对国内外相关研究进展作一综述,为进一步研究PLIN5提供参考。     

泛素连接酶Hrd1与呼吸系统疾病

正肺部的细胞在受到缺氧、烟雾等外界刺激时会发生内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS),而ERS参与多种肺部疾病的发生发展~[1]。羟甲基戊二酰辅酶A还原酶降解蛋白1(Hmg-Co A reductase degradation 1,Hrd1)为一个六次跨膜的内质网膜蛋白,其生物学功能是作为E3泛素连接酶参与内质网相关性降解(ER-associated degradation,     

FUNDC1在肾脏疾病中的研究进展

肾脏含有丰富的线粒体,是人体的高耗能器官.线粒体功能障碍在肾脏疾病的发生和发展中起关键作用.FUN14结构域蛋白1(FUNDC1)作为一种存在于线粒体外膜的新型受体蛋白,参与调节线粒体自噬、分裂/融合及线粒体与内质网之间的相互作用,从而维持线粒体的稳态,发挥其正常的生物学功能.FUNDC1与多种肾脏疾病,包括急性肾损伤...     

翻译控制肿瘤蛋白功能的研究进展

翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)是一种在物种间高度保守、广泛表达和有多种功能的蛋白质,具有调节炎症反应、抗细胞凋亡、参与应激反应、调节细胞增殖和分化、肿瘤逆转等功能,并参与寄生虫、真菌感染和糖尿病的发展过程。本文主要就TCTP的生物学功能做一综述,以期临床借鉴。     

翻译控制肿瘤蛋白功能的研究进展

翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)是一种在物种间高度保守、广泛表达和有多种功能的蛋白质,具有调节炎症反应、抗细胞凋亡、参与应激反应、调节细胞增殖和分化、肿瘤逆转等功能,并参与寄生虫、真菌感染和糖尿病的发展过程。本文主要就TCTP的生物学功能做一综述,以期临床借鉴。     

Ezrin蛋白生物学功能新进展

Ezrin蛋白是ERM(ezrin、radixin、moesin)蛋白家族中的一员,是细胞膜和肌动蛋白细胞骨架之间重要的连接蛋白。在维持细胞形态、参与细胞运动、黏附、信号转导、调节凋亡、影响恶性肿瘤转移及预后等诸多方面均发挥重要作用。近年来,研究者发现Ezrin蛋白在调节胃酸分泌、参与内皮细胞的增殖及新生血管的形成、调节水平衡、维持内皮细胞孔径等很多方面均发挥作用。本文就Ezrin蛋白的生物学功能进行综述。     

SEL1L分子及内质网相关降解途径在肿瘤进展中的作用

lin-12-like抑制/增强子(suppressor /enhancer of lin-12-like, SEL1L)分子可以参与调控多种肿瘤进展;同时,其作为内质网相关降解途径(endoplasmic reticulum -associated degradation,ERAD)的重要组成,还参与调控蛋白质合成,与内质网应激(ER stress)及其引起的未折叠蛋白反应(unfolded protein response,UPR)密切相关。在肿瘤微环境中,ERAD不仅参与调控肿瘤细胞的生物学行为,对肿瘤进展发挥重要作用;其还参与对免疫细胞增殖分化、功能以及代谢途径的调节,影响免疫细胞发挥抗肿瘤免疫作用。因此,深入了解探索肿瘤微环境中SEL1L分子及ERAD的潜在机制,可为肿瘤发生、发展及免疫治疗提供新理论和新靶点。本文就SEL1L分子及其参与的内质网相关降解途径在肿瘤进展与免疫调节中的作用进行简要综述。     

钙网蛋白与自然流产的相关性研究

钙网蛋白(CRT)是内质网中主要的CA2+结合蛋白,作为一种多功能的分子伴侣,CRT参与了细胞多种生理功能的调节,并参与多种疾病的发生和发展进程,如神经系统疾病,肿瘤和自身免疫疾病.最近的研究发现CRT与自然流产密切相关,现将CRT与自然流产的相关性做一综述.     

缺血再灌注损伤中内质网应激介导细胞凋亡的研究进展

内质网参与蛋白折叠、脂类合成和维持钙离子稳态。打乱内质网的稳态将导致未折叠蛋白或错误折叠蛋白在内质网腔蓄积并引起内质网应激。缺血再灌注损伤由器官血流受限（缺血）和随后血流恢复（再灌注）所致,缺血再灌注损伤可发生于心血管手术、高血压和器官移植,而且器官移植不可避免发生缺血再灌注损伤。近年来研究发现内质网应激介导细胞凋亡在缺血再灌注损伤中发挥重要作用,内质网应激主要通过诱导CAAT区/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）、活化含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶12（caspase-12）和激活c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路介导细胞凋亡。本文将对缺血再灌注损伤中内质网应激介导细胞凋亡做一综述。