ELISA测定抗百日咳毒素免疫球蛋白

本文介绍了先用胎球蛋白包被微量滴定板的酶联免疫吸附法(ELISA),检测百日咳毒素抗体的方法,以提高ELISA技术检测百日咳毒素抗体的敏感度。作者选用不同浓度的胎球蛋白(15～100μg/ml)和不同浓度(0.5～8.0μg/ml)的纯化百日咳毒素(PT),用加胎球蛋白和不加胎球蛋白包被的微量滴定板ELISA系统,对人双份血清     

百日咳杆菌感染和百日咳菌苗接种后的人体血清抗体应答

作者采用免疫印迹技术比较了百日咳感染和百日咳全菌体菌苗免疫后抗百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69千道尔顿(kDa)的腺苷酸环化酶相关蛋白(69kDa蛋白)和百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)的血清抗体应答.试验血清样品取自1985年7月～1987年2月百日咳流行期的8例百日咳患者、4名百日咳家庭接触者和4名经吸附DTP全程免疫的儿童.百日咳杆菌抗原的SDS-PAGE表明,     

婴幼儿接种百日咳菌苗后的特异性IgE抗体

实验室研究表明,百日咳菌苗(PBV)能促进血清IgE抗体的产生。本研究通过检测婴儿接种DTP后产生的IgE抗体,首次获得了PBV接种可诱生百日咳抗原特异性IgE抗体的证据。对随机抽样的47名黑人和白人新生儿接种3针DTP,定期检测百日咳IgE抗体。使用敏感性极高的被动放射免疫吸附试验(PRIST)和放射变应原吸附试验(RAST)分别检查出生时的脐带血、3和12月龄血清中的IgE总量和对百日咳杆菌、牛奶、蛋清和屋尘螨抗原的特异性IgE。免疫用DTP中的     

抗百日咳杆菌免疫力的血清学相关物

本文介绍了两项百日咳无细胞菌苗试验的血清学数据的分析结果,认为粘附素、菌毛和百日咳毒素抗体水平高与百日咳感染的可能性较低有关。与仅含有百日咳毒素或百日咳毒素和丝状血凝素组分的菌苗相比,含有百日咳抗原成分越多,百日咳无细胞菌苗就越有效。     

在菌苗效果现场试验中对用血清学和鼻咽培养法诊断百日咳的评价

用鼻咽涂抹接种对百日咳诊断有高特异性,但敏感度低,作为补充的血清学法可增加敏感性。本文根据鼻咽分离及测定血清中抗丝状血凝素(FHA)、抗百日咳毒素(PT)抗体,用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞法测PT中和抗体等试验对接种和未接种菌苗的儿童血清进行分析,并对假阳性结果及患者早期抗体的变化作了研究。     

百日咳:母体免疫的重要目标

检得的婴儿脐带血抗百日咳杆菌 Ig G抗体浓度几乎与母体水平相同。至4月龄 ,多数婴儿已检不出抗百日咳毒素 (PT)或丝状血凝素抗体 ,较高水平的母体抗PT抗体与婴儿对全细胞百日咳疫苗而非无细胞百日咳疫苗的较低抗 PT抗体应答有关。这些研究提示 ,母体免疫能为新生儿提供早期保护作用 ,从而使 2、4和 6月龄初免程序能诱生更持久的保护作用。     

百日咳患者、健康者和百日咳类毒素接种者体内抗百日咳毒素IgG的亚类组成

作者用ELISA法分别检测了108份百日咳患者、128份健康者(85名儿童、43名成人)和13份经脱毒的百日咳毒素免疫的儿童血清中抗百日咳毒素(PT)IgG抗体及其亚类含量,旨在了解以上3种人群中抗PTIgG亚类构成的区别.108份患者血清取自75例百日咳患者.其中5份采自症状出现两周内血清,45份采自症状出现后2～5周内血清,其余54份采自症状出现5周后血清.128名健康者中有85名未接种过百日     

百日咳：母体免疫的重要目标

检得的婴儿脐带血抗百日咳杆菌IgG抗体浓度几乎与母体水平相同。至4月龄，多数婴儿已检不出抗百日咳毒素(PT)或丝状血凝素抗体，较高水平的母体抗PT抗体与婴儿对全细胞百日咳疫苗而非无细胞百日咳疫苗的较低抗PT抗体应答有关。这些研究提示，母体免疫能为新生儿提供早期保护作用，从而使2、4和6月龄初免程序能诱生更持久的保护作用。     

抗百日咳杆菌免疫力的血清学相关物

本文介绍了两项百日咳无细胞菌苗试验的血清学数据的分析结果，认为粘附素，菌毛和百日咳毒素抗体水平高与百日咳感染的可能性较低有关，与仅含有百日咳毒素或百日咳毒素和丝状血凝系组分的菌苗相比，含有百日咳抗原成分越多，百日咳无细菌菌苗就越有效。     

用干燥抗原ELISA检测人体百日咳杆菌丝状血凝素抗体

ELISA可定量测定人血清中抗丝状血凝素抗体(抗-FHA)和抗百日咳毒素抗体(抗-PT)。但纯化用于致敏的FHA和PT不仅困难,而且不经济,因此,作者改良了试验方法以减少测定抗体所需要的抗原量。作者参照Voller法进行了间接ELISA。用碳酸氢钠缓冲液(pH9.6)吸附抗原致敏聚苯乙烯微量板,置4℃过夜,用室温下在孔内干燥的抗原致敏另一块聚苯乙烯微量板。每孔中加100μl试剂(除封闭过程以外)。抗原致敏的孔用磷酸盐缓冲液(PBS)洗两次,加百日咳恢复期病人抗-FHA和抗-PT阳性血清[参考血清含650 ELISA单位(EU)/ml抗-FHA和200EU/ml抗-PT活性]于37℃孵育2     

百日咳患者和接种全细胞百日咳菌苗的婴儿血清中各类免疫球蛋白的水平

作者使用纯化的百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和凝集原2和3(Agg2/3),在ELISA试验中,测定了114名百日咳患者,49名与百日咳患者密切接触者和139名接种DTP(其中含百日咳全细胞菌苗)菌苗婴儿血清中PT、FHA和Agg2/3的IgG、IgA和IgM的应答。     

对百日咳杆菌丝状血凝素和淋巴细胞增多促进毒素的血清学应答

本文用ELISA测定百日咳患者和DTP免疫后婴儿对百日咳杆菌丝状血凝素(FHA)和淋巴细胞增多促进毒素(LPT)的抗体应答。所用FHA和LPT系从百日咳杆菌Tohama株静止培养物上清中提取,按Cowell法精制。经鉴定证明FHA和LPT间无交叉污染。试验组婴儿于出生后1周内和2、4、6     

百日咳杆菌丝状血凝素的制备及百日咳毒素和丝状血凝素血清抗体的分析

近十年来,提纯和检测百日咳杆菌丝状血凝素(FHA)、百日咳毒素(PT)和其它一些抗原技术的不断发展,为应用百日咳抗原检测血清学应答成为可能.可是这些技术通常十分复杂并且相当费钱.提供纯化抗原仅局限于少数专门研究实验室.作者建立了一种为临床和公共卫生实验室制备FHA血清的简单而经济的方法,利用这个方法开展了百日咳血清诊断的研究.     

百日咳黏着素研究进展

百日咳黏着素(pertactin,PRN)是所有有毒力的百日咳杆菌产生的一种非纤毛性凝集原,存在于菌体外膜上,属于自主转运蛋白.它能产生保护水平的抗体,已经成为百日咳组分疫苗的重要抗原成分.近年来许多疫苗接种率较高的国家均有百日咳发病率增高的报告,其中一个因素就是百日咳杆菌的一些抗原(百日咳毒素、PRN、凝集原)型别的转换导致疫苗保护效果的下降.此文就PRN的分子结构、生物学特征、流行病学及纯化工艺方面作一综述.     

酶联免疫吸附试验快速诊断百日咳的效力

作者比较了酶联免疫吸附试验(ELISA〕和细菌凝集试验(BA)快速诊断百日咳的敏感性。试验用两株百日咳Ⅰ相菌(NCTC 10908和NCTC10911,血清型分别为1、2、3、4和1、2、5、6),在含20%马血的活性炭琼脂上生长。血清标本取自急性期和恢复期疑似百日咳患者。 ELISA阳性结果判断标准要求试验组抗体滴度超过正常人群的均值2个标准差。IgG、IgM和IgA阳性结果的临界值分别为≥51、≥67和≥31%(正常人群平均值分别是20、35和12%)。患者血清的ELISA阳性IgG、IgM和IgA的均值±标准差分别为88±9、     

百日咳无细胞或全菌体菌苗初免儿童对无细胞菌苗的加强反应

用无细胞菌苗初次免疫的婴儿,这些儿童再用百日咳无细胞菌苗加强免疫,有关效果的资料很少。在19月龄时,作者用百日咳无细胞菌苗加强免疫,41名婴儿随机分成2组,在2、4、6月龄时,1组接受无细胞菌苗(ACV),另1组接受全菌体菌苗(WCV),在7月龄时,ACV组比WCV组产生较高效价的抗百日咳毒素的抗体和丝状血凝素。在15个月龄时,接受百日咳ACV组,抗丝状血凝素的抗体(不是百日咳毒素)仍保持较高的水     

用于抗百日咳毒素抗体测定的毒素中和试验和ELISA的比较

ELISA通常用于测定血清抗感染性微生物抗原的抗体.血清抗细菌毒素抗体也可用中和试验测定.本文就上述两种方法测定抗百日咳毒素抗体的结果进行比较.血清佯品来自参与单组分百日咳类毒素菌苗安全性及免疫原性试验研究的受试者.在第1项研究中,145名健康儿童于1岁内分别接受3剂百日咳类毒素(每剂含25μg)菌苗,分别于第1次和第3次接种前及第3次接种后1个月采集3份血样,大部分儿童于2和3岁时再采第4和第5份血样.在第2项研究中,47名儿童分别于3、5和12月龄接受3剂与破伤风和白喉类毒素联合的百日咳类毒素(40μg),分别于3、6、13及24个月时采集血样.192名儿童的796份血清分别用ELISA和中和试验进行检测.     

百日咳无细胞菌苗、百日咳毒素和丝状血凝素体外诱导人体抗原特异性抗体合成和T淋巴细胞增殖

本文报道了人体B和T淋巴细胞对百日咳无细胞菌苗JNIH-6(含百日咳类毒素和丝状血凝素)、JNIH-7(含百日咳类毒素)、纯化组分JNIH-4(丝状血凝素)和JNIH-5(百日咳毒素)的体外免疫应答的研究结果.百日咳类毒素和丝状血凝素在体内能诱导恢复期患者的淋巴细胞合成特异性Ig.抗原依赖性Ig在淋巴细胞培养悬液中的存在可通过ELISA和中国仓鼠卵巢细胞毒性中和试验来证明.JNIH-4、JNIH-6和JNIH-7能诱生高滴度抗体,在百日咳恢复期患者细胞     

国际百日咳学术讨论会

1988年4月20～22日,来自24个国家的164位学者(其中包括两名中国代表)出席了由民主德国微生物学和流行病学协会在柏林组织召开的国际百日咳学术讨论会。会议讨论了百日咳杆菌的活性成份,百日咳杆菌的分子克隆技术和百日咳无细胞菌苗进展及评价。现将会议主要内容整理报告如下。百日咳毒素的抗原结构及其亚单位各国实验室对百日咳杆菌所含的许多抗原和毒素成份进行了大量研究和分析。这些活性物质可能在致病机理或在宿主对疾病反应方面起重要作用,其中包括:百日咳毒素     

婴儿对两组分百日咳无细胞菌苗的剂量-应答及与百日咳全细胞菌苗的比较

作者就 Pasteur Merieux Connaught公司生产的百日咳无细胞菌苗DTP(DTaP）在婴儿中的剂量-应答进行了研究。该菌苗以氢氧化铝为佐剂,每0.5ml菌苗含百日咳毒素（PT）和丝状血凝素（FHA）各12.5μg（DTaP-12.5）或25μg(DTaP-25）、破伤风类毒素（TT）10Lf、白喉类毒素（DT）30Lf。以磷酸铝为佐剂的百日咳全细胞菌苗DTP（DTwp）含4个小鼠保护单位的百日咳抗原、5Lf TT和12.5 Lf DT。作者将婴儿随机分成3组,于2、4和6月龄时分别肌肉注射0.5ml上述菌苗,第1和第3针前及第3针后4～8周采集血清样本,置于—20°C保存。