国产抗乙型肝炎病毒核心抗原抗体免疫球蛋白M检测试剂的比较

目的为中国急性乙型病毒性肝炎（乙肝）监测,筛选合适的抗乙肝病毒核心抗原抗体免疫球蛋白M（Immunoglobulin M Antibody to Hepatitis B Virus Core Antigen,Anti-HBc-IgM）检测试剂。方法选择市场销量较大的三种酶联免疫吸附试验Anti-HBc-IgM检测试剂,平行检测参比系统各3次,比较各试剂的组内相关系数（Intraclass Correlation Coefficient,ICC）、变异系数,以评价试剂的可靠性,绘制受试者工作特征曲线（Receiver Operating Characteristic,ROC）,计算ROC下面积（Area Under Curve,AUC）、部分（Partial）AUC（pAUC）、固定特异度下灵敏度[Sensitivity at a Fix Specificity,Se（FPR=e）],以评价试剂的真实性。结果三种试剂的ICC均接近于1,一致性均好,两两比较中A试剂稳定性最好,变异性最小（Bootstrap法,P〈0.05）。B试剂ROC位于最上方,AUC中位数最大,和A、C比较均有统计学意义（Bootstrap法,P〈0.05）;B和C、A试剂的pAUC中位数和Se（FPR=0.05）中位数差异无统计学意义。结论符合国家标准的三种试剂,以雅培试剂作为参照相比,综合评价结果,B试剂较好。     

五种国产酶免疫测定法乙型肝炎病毒表面抗原检测试剂的评价

目的为全国人群乙型病毒性肝炎（乙肝）血清流行病学调查,筛选适宜的乙肝病毒表面抗原（Hepatitis B Virus Surface Antigen,HBsAg）检测试剂。方法选择符合国家质量标准,且在全国销量最大的五种（A、B、C、D、E）酶免疫测定法HBsAg检测试剂,平行检测由63份阳性和90份阴性品组成的参比系统各5次,将每个检测的s/n值做log（s/n＋1）转换,计算并比较各试剂的可靠性指标组内相关系数（Intraclass Correlation Coefficient,ICC）、变异系数（Coefficient of Variability,CV）和真实性指标受试者工作特征（Receiver Operating Characteristic,ROC）曲线下面积（Area Under Curve,AUC）、部分（partial）ROC AUC（pAUC）、固定特异度下灵敏度[Sensitivity at a Fixed Specificity,Se（FPR=e）]等。结果五种试剂ICC、CV从优到劣的排位顺序均为E、C、D、B、A,且差异有统计学意义（Bootstrap法,P〈0.05）;五种试剂的AUC均在0.965～0.987,pAUC最大的试剂E、B明显高于最小的试剂A、D（Bootstrap法,P〈0.05）;Se（FPR=e）最高的试剂E明显高于试剂C（Bootstrap法,P〈0.05）。结论五种试剂均有较强的诊断能力,其中试剂E为最佳。     

甲型肝炎病毒TZ84株单克隆抗体在甲型肝炎抗体检测中的应用

将不同位点的甲型肝炎 (甲肝 )病毒 (HAV)TZ84单克隆抗体 (单抗 )或酶标单抗进行混合做包被和酶 ,代替现有试剂中的多克隆抗体 (多抗 ) ,采用竞争抑制法对试剂的灵敏度和可靠性进行测定 ,并通过 2 2 9份甲肝灭活疫苗临床观察血清甲肝病毒抗体的检测 ,对单抗试剂的应用进行研究 ,并对该单抗试剂进行评价。结果表明 :该单抗试剂的灵敏度为 94 % ,特异度均为 98% ,最低检出浓度的变异系数为 9 3% ;单抗试剂、多抗试剂和雅培试剂的最低检出浓度分别为 5 5、98、31mIU/ml。单抗试剂的灵敏度高于多抗试剂 ,特异度低于多抗试剂。     

酶联免疫吸附试验检测甲型肝炎病毒特异性IgM抗体

甲型病毒性肝炎(简称甲肝)是当今世界性主要公共卫生问题,严重威胁人类身体健康。近年来我市甲型肝炎流行,发病率逐年上升,因无特异性检测方法,以致防治研究工作进展缓慢。自1973年Feimstone确认甲型肝炎病毒HAV以来,相继建立了检测HAV及抗—HAV方法,尤其检测急性期抗—HAV IgM的固相放     

甲型肝炎病毒检测方法研究进展

甲型病毒性肝炎是由甲型肝炎病毒引起的急性肠道传染病,呈全世界范围的分布,我国高发区,其发病为各型肝炎的首位。甲型肝炎的流行在我国不仅是一个重要的公共卫生问题,也是一个值得关注的社会问题,因此对其快速准确检测显得犹为重要。文中就近年来甲行肝炎病毒的检测方法研究进展作了综述。     

多重PCR检测水中肠道总病毒及甲型肝炎病毒

PCR技术用于病毒的检测已有过较多的研究报道，国内主要将PCR技术用于脊髓灰质炎病毒（简称脊灰病毒）的检测与分型，以及野毒株的鉴定[1。2]；国外已将常规PCR技术用于脊灰病毒及甲型肝炎病毒（简称甲肝病毒）的检测[3-5]。常规PCR技术一次只能检测一种病毒的核酸，如果反应体系中含有两种以上的病毒核酸，则需进行多次PCR，不但操作复杂，费用相对也较高。近年来，人们发展了一种新的PCR技术—多重PCR技术，即在一个反应体系中含两对以上引物，通过PCR反应可同时检测多种目的核酸[6。7]。我们利用肠道病毒具有保守的5非编码区核…     

甲型肝炎病毒的分子生物学进展

近年来,有关甲型肝炎病毒的基因结构、不同株间变异、抗原部位及减毒的分子基础等方面已进行了深入的研究,本文从分子水平综述甲型肝炎病毒研究的最新进展,并阐明其和新疫苗发展的关系。     

甲型肝炎病毒检测方法研究进展

本文综述了甲型肝炎病毒的病原学、食品中甲肝病毒检测情况、ELISA方法和基因芯片检测甲肝病毒研究进展.     

电化学发光免疫分析和酶联免疫吸附试验检测甲型肝炎病毒IgM抗体的比较

目的比较和评价电化学发光免疫分析法(ECLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)测定甲型肝炎病毒(HAV)抗体IgM。方法选择本院住院或门诊患者血清共116例,均使用ECLIA和ELISA检测HAV-IgM抗体,对两种方法的一致性和临床诊断效能进行比较分析。结果用ECLIA和ELISA方法同时检测116例血清标本的HAV-IgM抗体,两种方法的阳性符合率为12.8%,阴性符合率为100%,总符合率为70.7%,两种方法的检测结果有统计学差异(P<0.05)。对两种方法检测结果不一致的34例患者进一步跟踪和随访,以临床诊断为标准,ECLIA检测HAV-IgM的敏感度、特异性、阳性检出率分别是:62.5%、100.0%、4.3%;ELISA方法的敏感度、特异性、阳性检出率分别是:100.0%、71.3%和33.6%。结论 ECLIA和ELISA对HAV-Ig M抗体检测结果的一致性较低,ELISA方法敏感度高,但ECLIA特异性好,检测过程可全自动化,检验结果更符合临床,可引入实验室检测,为临床甲型肝炎病毒感染提供诊断依据。     

五种国产乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒的评价

[目的]评价5种乙肝病毒表面抗原(HBsAg)诊断试剂盒,筛选高质量的诊断试剂,确保血样HBsAg检测结果准确无误。[方法]5种HBsAg试剂盒均采用ELISA方法,对购买的国家参考品和收集的180份临床血浆标本进行检测,分别与参考品标准和本单位经北京万泰和上海科华双试剂检测一致的结果比较。[结果]5种试剂对灵敏度和精密度参考品的检测均符合要求;检测23份参考品结果的总符合率为96.52%,阳性符合率为100.00%,阴性符合率为96.00%;检测180份临床标本,总符合率为98.56%,阳性符合率为99.00%,阴性符合率为98.67%;检测阳性临床标本的δ值为-6.55(C)~-37.61(E);检测阴性临床标本的δ值为0.92(A)~1.65(E)。[结论]5种试剂在灵敏度、特异性、符合性、准确性方面存在差异,综合评价C试剂质量最符合要求。     

快速纯化甲型肝炎病毒及相关性状的检测

甲型肝炎病毒(HAV)在宿主细胞的胞浆内增殖．很少释放到细胞培养的上清液中，因此，给病毒的纯化带来一定困难。本实验室针对制备甲肝诊断试剂盒所需大量病毒抗原问题，对提高抗原的收获率、浓度和纯度等方法进行改良，建立了以冻融、超声，聚乙二醇(PEG)浓缩，蔗糖/甘油不连续密度梯度离心为主要步骤的快速纯化HAV的方法，并对得到的纯化病毒样品进行相关的性状检测。现将结果报告如下。     

应用ROC曲线评价抗环瓜氨酸肽抗体对类风湿性关节炎的最佳诊断界点

目的应用受试者工作特征曲线(ROC)分析抗环瓜氨酸肽抗体(Anti-CCP)对类风湿性关节炎(RA)的诊断价值。方法用电化学发光法(ECL)检测173例类风湿关节炎患者、62例非类风湿性关节炎组患者及16例健康对照组患者的血清Anti-CCP的含量,分析不同组间Anti-CCP含量的差异,并确定其最佳诊断临界点。结果 RA组分别与非RA组、健康对照组之间比较差异有统计学意义(Z=-6.81,P0.01;Z=-4.86,P0.01),非RA组与健康对照组比较差异无统计学意义(Z=-1.57,P0.05)。根据ROC曲线分析,用Anti-CCP诊断RA的曲线下面积为0.989,95%置信区间为0.981~0.998,最佳诊断界点为53.50 U/ml。此时灵敏度为92.61%,特异度为94.44%,阳性预测值为97.02%,阴性预测值为86.73%,漏诊率为7.39%,误诊率为5.56%。结论合理确定Anti-CCP的最佳诊断界点,其灵敏度和特异度较高,误判率较低,对RA具有良好的诊断价值。     

手足口病患儿血清中甲型肝炎病毒检测及临床分析

目的检测手足口病患儿血清中甲型肝炎病毒(HAV),分析合并HAV感染对患儿的影响。方法收集2009.6月-2013.10月确诊手足口病例577例。用酶联免疫吸附试验检测血清HAV抗-Ig M,比较甲肝合并肠道病毒71型(EV71)和科萨齐病毒A组16型(Cox A16)的感染率;分析比较合并甲肝感染组与非合并组患儿的临床表现;检测患儿血清中肝功能指标ALT、AST、ALP、GGT、PA、TBIL和DBIL水平,分析合并组与非合并组患儿肝功能损伤情况。结果 577例手足口病患儿中合并甲肝病毒感染32例,合并EV71感染率(6.9%)与合并Cox A16(3.2%)比较,差异无统计学意义(P>0.05);合并组患儿中精神差、抽搐、恶心、呕吐等神经系统症状较非合并患儿明显(P<0.05),而发热、乏力、纳差、腹痛、巩膜黄和尿色深在两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);合并组病程较非合并组长(P<0.05);合并组肝功能指标ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL水平分别高于非合并组,而PA水平低于非合并组,各指标在两组间均有统计学意义(P<0.05)。结论手足口病患者中存在甲型肝炎病毒感染,合并甲型肝炎病毒感染对手足口病病情发展有促进作用。     

贝类及其产品中甲型肝炎病毒RT-PCR检测方法的研究

目的建立一种快速、简便、灵敏的检测贝类中甲型肝炎病毒RT-PCR方法,能够有效防止甲肝病毒的传播和对口岸进口贝类产品的监控。方法通过对病毒富集的3种方法(大体系PEG8000、小体系PEG6000和小体系PEG8000富集法)、提取RNA的2种方法(Trizol法和试剂盒法)以及RT-PCR检测的2种方法(一步法和两步法)进行比较,确立一种快速检测贝类中甲肝病毒的RT-PCR方法。结果经比较,采用小体系肠道样本检测比采用全贝检测的富集效果更佳,并比较了小体系PEG8000与PEG6000和大体系PEG8000对病毒富集的效果,回收率分别为13.3%、7.5%、10.0%;对HAV总RNA的2种提取方法进行了比较,结果均获得了纯度较高、完整性较好的总RNA,以此为模板采用一步法和两步法进行反转录和PCR反应,经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定,从人工污染的阳性样本中扩增得到一段长度为192bp的特异PCR扩增产物。应用本研究建立的RT-PCR方法对大连地区85份贝类及产品进行HAV检测,结果未显阳性,说明样本中不含HAV。整体用时仅为5h。结论本研究建立的检测HAV的RT-PCR方法灵敏特异、操作时间短,该方法可对贝类及其产品进行确实有效的HAV的检测。     

成都地区慢性肝病患者庚型肝炎病毒抗体的检测

庚型肝炎病毒(ＨＧＶ)是新近发现的与人类肝炎相关的ＲＮＡ病毒。据文献报道其所引起的慢性肝炎约占所有慢性肝炎的10%,在非乙非丙慢性肝炎中约占16%。为了解ＨＧＶ在慢性肝病中的作用,我们用酶联免疫法检测了慢性肝病患者血清抗-ＨＧＶ,结果报告如下。一、检测对象:慢性肝病54例,其中男性46例,女性8例,年龄17～68岁,平均36.71岁。依据1995年第五届传染病及寄生虫病学术会议修定的标准,诊断为慢性肝炎18例,肝炎肝硬变22例,慢性重症肝炎6例,原发性肝癌8例。二、材料和方法:全部病例均检测甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎病毒血清学标记物和肝功…     

山东省HIV抗体诊断试剂检测评价

目的：了解现有HIV诊断试剂的敏感性、特异性等性能。方法：以免疫印迹法（WB）为金标准，用9种诊断试剂进行对比检测并统计分析。结果：5种ELISA试剂和4种快速诊断试剂与WB法检测结果差异无统计学意义。结论：9种诊断试剂均可达到卫生部《HIV抗体诊断试剂临床评估与方案的实施办法》中替代方案的试剂要求。     

ROC分析法评价血清抗人型纯化蛋白衍生物Ig G抗体对活动性肺结核的诊断价值

目的探讨血清抗人型纯化蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)Ig G抗体对活动性肺结核的诊断价值。方法 2013年6月—2014年3月以ELISA法测定活动性肺结核组(病例组)32例及健康对照组(对照组)40例血清抗PPD Ig G特异性抗体水平,计量资料采用t检验,P0.05为差异有统计学意义。以受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析法评价其作为诊断试验的价值。结果病例组血清抗PPD Ig G抗体水平明显高于对照组[(2.832±1.578)、(1.297±1.109)],差异有统计学意义(P0.05)。ROC曲线下面积为0.797,95%置信区间为(0.643,0.950),以x±1.0 s作为诊断界点时敏感度最高,特异度也较高。结论血清中抗PPD Ig G抗体对活动性肺结核有一定的诊断价值。     

一步单管反转录PCR检测水中甲型肝炎病毒

以往甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）的检测主要依赖细胞培养法，但此法所需时间长、敏感性低、特异性不强。虽然反转录ＰＣＲ等技术已被用于粪便或食品中ＨＡＶ的检测，但常规反转录ＰＣＲ操作繁琐、污染环节多，极易造成污染，致使实验结果不稳定或出现假阳性结果。为克服ＰＣＲ检测ＨＡＶ的缺点和不足，我们在实验基础上建立了一步单管反转录ＰＣＲ技术检测水中的ＨＡＶ，采用热裂解法提取样品中ＨＡＶ病毒的总ＲＮＡ，反转录与ＰＣＲ反应一步进行，整个反应在一个反应管中进行，操作方法较简单，中间可能污染的环节较少，因此，最大限度的减少了由环境造成的可能污染。我们设计合成的引物（Ｈ１—Ｈ２）在ＨＡＶ病毒核酸的ＶＰ１区，只特异地扩增ＨＡＶ核酸片断，具有较强的特异性。改进后的反转录ＰＣＲ的敏感性与常规反转录ＰＣＲ比有所提高，可检测到细胞培养悬液或水中１０个ＴＣＩＤ＿（５０）的ＨＡＶ。     

两种国产化学发光测试系统测定乙型肝炎病毒表面抗体的一致性评价

目的 比较2种不同国产化学发光测试系统（测试系统1和测试系统2）测定乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）检测结果间的统计学关系和线性关系,探讨不同测试系统检测结果的一致性。方法 选取6～100 mIU/ml系列浓度样本,分别使用2个国产化学发光法测试系统（测试系统1和测试系统2）和临床使用广泛的测试系统A进行检测。将测试系统1和测试系统2的结果分别与测试系统A的结果采用加权最小二乘法进行直线拟合计算相关系数;并以测试系统1和测试系统2的结果均值和信号值均值作为变量,使用配对t检验进行统计学分析;以测试系统A的结果为自变量,以测试系统1和测试系统2的结果为因变量进行线性拟合,分别计算相关系数r、绝对线性偏差和相对线性偏差。结果 测试系统1和测试系统2中HBsAb定量检测结果比较,差异有统计学意义[υ=8,ABS(t)=2.535,t0.05(8)=2.306,P<0.05];测试系统1和测试系统2测试浓度间的线性相关性拟合相关系数r=0.99341。测试系统1与测试系统A的相关系数r=0.99814。测试系统2与测试系统A的相关系数r=0.98821。结论 2个国产测试系统的检测结果...