疏肝祛瘀通络降浊法对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的保护作用

目的探讨非酒精性脂肪性肝炎大鼠内毒素性肝损伤机制及中药对其影响。方法用喂饲高脂饮食的方法建立非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型。4周后用疏肝祛瘀通络降浊法分小、中、大剂量进行治疗,12周后处死测定血脂、ALT、内毒素(ET)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-1β)的含量;免疫组化法观察肝组织CD14和核转录因子(NF-κB)的表达;RT-PCR检测脂多糖结合蛋白(LBP)和4型Toll样受体(TLR-4)mRNA的表达。同期正常饮食饲养大鼠作对照。结果第12周时,模型组大鼠腹主动脉血清内毒素水平较正常组明显升高,有显著性差异;中剂量治疗组大鼠血清ET、TNF-α、IL-1β水平明显低于模型组,差异有显著意义。模型组大鼠肝组织CD14阳性细胞数量明显增多,主要分布于肝窦内,部分呈灶型聚集;与模型组相比,中剂量治疗组大鼠肝组织CD14阳性细胞数量明显减少。模型组可见少量细胞核染色的NF-κB阳性细胞散在分布于汇管区。模型组肝组织LBPmRNA和TLR-4mRNA表达均明显上调,与正常组比较差异均有显著意义;中剂量治疗组大鼠肝组织LBPmRNA和TLR-4mRNA表达均较模型组明显下调,且有显著性差异。结论疏肝祛瘀通络降浊法对非酒精性脂肪肝有疗效,可能与其降低血清内毒素水平和下调肝组织内毒素相关受体表达继而减轻炎症性肝损害有关。     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核因子-κB mRNA及蛋白表达的影响

目的探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织核因子(NF)-κB mRNA及蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料喂养复制NASH大鼠实验模型,施以造模因素的同时,各用药组大鼠分别灌服疏肝方、健脾方和疏肝健脾合方的高、低剂量进行干预。16 w后,各组大鼠以3%戊巴比妥钠腹腔麻醉,腹主动脉采血,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,肝组织TC、TG含量;HE染色和油红O染色观察肝组织病理变化;实时定量PCR法检测肝组织NF-κB mRNA表达水平;Western印迹法检测肝组织NF-κB蛋白表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠肝细胞脂肪变性明显,血脂及肝脂均有不同程度的升高(P<0.05,P<0.01),大鼠肝组织NF-κB mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组相比,各用药组血脂和肝组织NF-κB mRNA及蛋白的表达均较模型组显著降低(P<0.05,P<0.01),尤以综合方高剂量及健脾高剂量作用最为显著。结论疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NASH有较好的防治作用,其机制可能与其下调肝脏NF-κB mRNA及蛋白的表达有关。     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠重症急性胰腺炎肝损伤的抑制作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)肝损伤的抑制作用机制.方法:54只SD大鼠随机分为假手术组(SO组)、胰腺炎组(SAP组)及NAC干预组(NAC组).各组18只.以4%牛磺胆酸钠溶液逆行注入胰胆管制作SAP模型.NAC组于造模后1 h行股静脉注入NAC(200 mg/kg).分别于3 h、6h、12 h时间点随机剖杀大鼠.采用SP免疫组织化学法检测肝组织NF-κB活性;利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝组织iNOSmRNA表达;胰、肝组织行病理切片观察,同时行血清淀粉酶、肝功能(AST、ALT)检测.结果:SO组肝组织可见散在肝细胞NF-κB活化和iNOS mRNA低表达,SAP组NF-κB活化和iNOS mRNA高表达:NAC对肝组织NF-κB活性有抑制作用,降低iNOS mRNA表达,与SAP组比较差异显著(3 h:0.32±0.05 vs 0.46±0.04.6 h:0.56±0.07 vs 0.97±0.18,12 h:0.87±0.14 vs 1.13±0.11,均P<0.05),并可降低血清淀粉酶、AST、ALT水平.结论:肝组织NF-κB活化及iNOS mRNA过度表达可能是SAP肝损伤发生的原因之一,NAC可抑制肝NF-κB活性及iNOS mRNA的表达,对SAP肝损伤具有一定的抑制作用.     

丹参对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织NF-κB、TNF-α表达的影响

[目的]研究肝组织NF-κB、TNF-α在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用,并探讨丹参注射液对NASH大鼠的保护机制。[方法]采用高脂饮食16周建立大鼠NASH模型,每日予丹参注射液5ml/kg进行干预治疗,免疫组织化学法检测大鼠肝组织TNF-α表达。电泳迁移率改变分析检测大鼠肝组织NF-κB活性,观察丹参对NASH大鼠肝组织NF-κB、TNF-α表达的影响。[结果]与正常组相比,模型组大鼠肝组织NF-κB、TNF-α表达明显升高,丹参治疗后大鼠肝组织NF-κB、TNF-α较模型组明显降低。[结论]肝组织NF-κB、TNF-α表达增强与NASH的发生密切相关,丹参注射液能抑制NASH大鼠肝组织NF-κB、TNF-α表达,达到治疗NASH的目的。     

肝复康对肝纤维化大鼠肝组织NF-κB、MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的研究中药肝复康对肝纤维化大鼠肝脏NF-κB、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制因子2（TIMP-2）基因表达的影响。方法随机将SD大鼠分为正常对照组、模型组、小剂量、中剂量和大剂量治疗组,制备CCl4肝纤维化模型,自第9周起,给予中药肝复康治疗至第20周。采用Western-Blot法检测NF-κB表达;采用RT-PCR法观察NF-κB、MMP-2和TIMP-2 mRNA水平。结果模型组大鼠肝组织NF-κB、MMP-2和TIMP-2表达增加,肝复康可明显抑制上述因子的表达（P〈0.01）,且三者mRNA水平在各组间呈显著正相关。结论肝复康治疗肝纤维化可能与其抑制NF-κB、MMP-2和TIMP-2的表达有关。     

理气化痰祛瘀法对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂肪细胞因子表达的影响

[目的]观察理气化痰祛瘀中药对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、瘦素（1eptin）及其肝组织mRNA水平的影响，探讨其防治NASH的作用机制。[方法]以高脂饮食喂养Wistar大鼠12周，建立大鼠NASH模型，同时以不同剂量的理气化痰祛瘀法中药干预12周，测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及游离脂肪酸（FFA）水平，观察肝组织的病理改变，原位杂交技术检测肝组织TNF-α、IL-6、leptinmRNA表达，放免法测定血清TNF-α、IL-6、leptin水平。[结果]NASH大鼠血清ALT、AST、FFA、TNF-α、IL-6、leptin水平较正常大鼠显著升高，肝组织TNF-α、IL-6和leptinmRNA表达显著增强，理气化痰祛瘀法中药能显著改善NASH大鼠肝组织炎症活动程度，显著降低ALT、AST、FFA、TNF-a、IL-6、leptin水平和肝组织TNF-α、IL-6、leptinmRNA表达。[结论]TNF-α、IL-6、leptin参与高脂饮食诱导的大鼠NASH的发生，理气化痰祛瘀中药能调节TNF-α、IL-6、leptin的分泌，防止NASH的进一步发展。     

杞蓟制剂对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织核转录因子-κB/IκB的影响

目的 观察非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织P65(NF-κB亚型)、核转录因子-κB抑制因子(IκB)-α(IκB亚型)蛋白和mRNA表达情况及杞蓟制剂对其影响.方法 采用高脂饮食复制大鼠NASH模型.实验分正常组对照、模型组、杞蓟制剂组、复方蛋氨酸胆碱片组.测定肝组织P65、IκB-α蛋白和mRNA的表达.结果 与正常组相比,模型组大鼠肝组织P65、IκB-α蛋白和mRNA表达明显增强(P＜0.01),且P65蛋白主要在胞核分布;与模型组相比,杞蓟制剂组大鼠肝组织P65、IκB-α蛋白和mRNA的表达明显降低(P＜0.05).复方蛋氨酸胆碱片组大鼠肝组织P65、IκB-α蛋白和mRNA的表达虽有所降低,但与模型组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 NF-κB蛋白和mRNA表达增强及NF-κB蛋白活化增强参与了NASH的发病.杞蓟制剂能够抑制NF-κB(P65)蛋白和mRNA的表达,从而能防治NASH.     

黄芪多糖对肾阳虚型糖尿病大鼠肾组织NF-κB及IκB的影响

[目的]研究黄芪多糖（APS）对肾阳虚型糖尿病大鼠肾组织核因子κB（NF-κB）mRNA和细胞内抑制性蛋白κB（IκB）mRNA的影响。[方法]将纯种SD雄性大鼠随机分为4组：对照组，模型组，苯那普利治疗组，APS治疗组。实验第8周时统一处死，以RT-PCR法检测各组大鼠肾组织NF-κBmRNA和IκBmRNA表达，并测定大鼠肾重／体重，血糖（HS）、血脂及肾功能。[结果]与苯那普利相比，APS能减少大鼠肾组织NF-κBmRNA表达，增加IκBmRNA表达，并可明显降低肾重／体重、BS、血脂，改善肾功能。[结论]APS能上凋IκBmRNA表达，抑制NF-κBmRNA的过度表达，从而延缓肾阳虚型糖尿病肾病的进展。     

罗格列酮对大鼠非酒精性脂肪性肝炎逆转机制的研究

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）激动剂罗格列酮对库普弗细胞中LPS诱导的IκB激酶-β（IKK-β）表达以及对NASH大鼠肝组织核因子-κB（NF-κB）活性和环氧合酶-2（COX-2）表达水平的影响及意义。方法 采用Ⅳ型胶原酶消化和密度梯度离心的方法分离纯化正常Wistar大鼠库普弗细胞,并应用LPS（1μg／ml）及不同浓度的罗格列酮（10 nmol／L和50 nmol／L）干预培养,收集细胞及培养上清液。体内实验：健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组和模型组,后者以高脂饲料（2％胆固醇＋10%猪油＋5％玉米油）喂养复制NASH大鼠动物模型,造模成功后,分别以1 mg·kg^-1·d^-1、4mg·kg^-1·d^-1剂量的罗格列酮和等容积等渗盐水灌胃,实验结束后采集大鼠血清和肝组织标本。RT-PCR检测库普弗中细胞IKK-β、肝组织中COX-2 mRNA的表达,Western blot和电泳迁移率改变分析（EMSA）分别检测库普弗细胞中IKK-β蛋白表达和肝组织NF-κB活性变化,ELISA检测细胞培养上清液及血清中TNFα水平。结果 LPS可显著增高体外培养库普弗细胞中IKK-βmRNA、蛋白的表达及上清液中TNFα水平。模型组大鼠肝组织COX-2 mRNA和蛋白的表达均较正常对照组增强,NF-κB活性与COX-2的表达和血清TNFα水平呈正相关。罗格列酮体外可抑制LPS诱导库普弗细胞中IKK-βmRNA和蛋白的表达,体内通过抑制肝组织NF-κB活化,减少COX-2表达,均表明罗格列酮可通过抑制炎症细胞活化,下调炎症介质基因表达,从而减少了NFα等炎症介质合成、释放,抑制肝脏炎症反应。结论 PPAR-γ特异性激动剂罗格列酮通过干预IKK-β／IκB／NF-κβB／TNFα信号通路而发挥抗炎作用,从细胞分子水平逆转NASH大鼠肝组织的炎症反应,这为临床上有效治疗NASH提供了新思路。     

连翘对重症急性胰腺炎大鼠肝组织中NF-κB和Foxp3表达的影响

目的探讨核因子NF-κB和Foxp3在重症急性胰腺炎（SAP）肝损伤中的作用及连翘对其表达活性的影响。方法雄性Wistar大鼠80只,随机分成假手术组（SO组）、SAP组和干预组,其中干预组分连翘高、中、低剂量组和阳性对照组（PDTC）。牛磺胆酸钠溶液在胰胆管远端注射造模,SO和SAP组于术后3、6、12 h,干预组于术后12 h处死大鼠,分别留取标本。测各组血淀粉酶（AMY）、ALT及TNFα水平,鲎试剂法测血浆内毒素水平,流式细胞术测外周血Treg百分数,对胰腺及肝脏进行病理学检查及评分,RT-PCR法检测肝脏组织中NF-κBmRNA和Foxp3mRNA表达量。组间比较采用单因素方差分析,进一步进行多重比较,采用LSD法进行统计学处理,各指标间相关性分析采用直线相关分析。结果与SO组比较,SAP组中各项指标均随时间升高,于12 h达高峰。与SAP12 h组相比,干预组（大鼠死亡率为0）肝脏组织中的NF-κBmRNA和Foxp3mRNA表达明显降低（P〈0.01）,与Treg呈正相关（r=0.738,P〈0.01）。随连翘剂量增加,AMY、ALT及TNFα水平均明显降低,肝脏和胰腺组织炎症明显减轻,高剂量组和阳性对照组相比较无明显差异（P〉0.05）。结论 NF-κB的激活参与SAP肝损伤的发生,连翘能显著降低NF-κB的活性及肝脏组织中NF-κBmRNA和Foxp3mRNA的表达,减轻SAP肝损伤的严重程度。     

清肝调脂饮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠胰岛素抵抗的影响

目的探讨清肝调脂饮对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠胰岛素抵抗的干预机制。方法建立高脂饲料诱导的Wistar大鼠NASH模型并随机分组,清肝调脂饮低、中、高剂量组和西利宾胺组分别灌胃相应剂量药物治疗。实验12周后,检测各组大鼠血清TG、TC、葡萄糖、瘦素、FFA、INS;肝组织行脂肪染色、糖原染色并作定量分析。结果与模型组比较,各用药组均能不同程度改善以上各指标（P〈0.05,P〈0.01）,其中,在降低TG、葡萄糖、INS、FFA方面,中药高剂量组均明显优于西药对照组（P〈0.05）。结论清肝调脂饮促进游离脂肪酸代谢与肝内TG分解;改善胰岛素抵抗（IR）及瘦素抵抗（LR）。与西利宾胺比较,清肝调脂饮在抑制NASH的IR方面具有明显的疗效优势。     

舒肝活血化痰方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠脂质过氧化的影响

[目的]探讨舒肝活血化痰方抗非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠脂质过氧化的作用机制。[方法]采用高脂饮食复制NASH大鼠模型，用舒肝活血化痰方治疗，以东宝肝泰为对照，观察其对模型大鼠肝功能、血脂、肝组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）、羟脯氨酸（Hyp）水平及细胞色素P4502E1（CYP2E1）活性的影响。[结果]舒肝活血化痰方显著改善肝功能，降低血清总胆固醇、三酰甘油及低密度脂蛋白胆固醇的同时升高高密度脂蛋白胆固醇水平，并显著降低肝组织Hyp，抑制肝组织CYP2E1的活性。[结论]舒肝活血化痰方可有效干预大鼠NASH，抑制肝组织CYP2E1的表达及与其密切相关的脂质过氧化是该方干预作用的主要机制之一。     

荔枝核提取物对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织巨噬细胞移动抑制因子表达的影响

目的：观察荔枝核提取物对实验性非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠的防护作用,以及对肝组织巨噬细胞移动抑制因子（MIF）表达的影响。方法：35只Wistar大鼠随机分为对照组（5只）、模型组（10只）、低剂量（10只）和高剂量荔枝核提取物组（10只）。除对照组外,其余各组均以脂肪乳剂（添加脂肪肝诱导药物丙基硫氧嘧啶）灌胃,另外低、高剂量荔枝核提取物组大鼠以荔枝核提取物溶液（250mg/kg、500mg/kg）灌胃。第6周末处死全部大鼠,进行肝脏组织学和免疫组化检测,对MIF的表达进行评分,并测定血清Glucose、ALT、AST、TG、TC、HDL和LDL水平。结果：与模型组大鼠相比,荔枝核提取物组大鼠可见肝脏脂肪变性、炎症和坏死改善,肝组织MIF表达及血清Glucose、ALT、TG和LDL水平显著降低（P〈0.01、P〈0.05）,血清HDL水平增高（P〈0.05）,且高剂量组Glucose、ALT、TG和LDL的降低显著优于低剂量组（P〈0.05）。结论：荔枝核提取物可改善NASH大鼠肝脏脂肪变性、炎症、坏死和血糖、血脂代谢以及肝功能损害,并能降低肝脏MIF的表达。     

丹参山楂为主药辨证治疗非酒精性脂肪性肝炎疗效观察

[目的]观察丹参、山楂为主药汤剂治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的临床疗效。[方法]将符合入选标准的92例NASH患者随机分成治疗组62例和对照组30例,治疗组经辨证予丹参、山楂为主药汤剂150 ml口服,每天2次;对照组予易善复胶囊456 mg口服,每天3次,2组均12周为1个疗程。疗程结束后观察临床疗效、检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ谷氨酰转移酶(GGT)、三酰甘油(TG),并观察肝脏影像学(B超、CT)变化。[结果]①治疗组总有效率为91.93%,对照组为73.33%,治疗组明显优于对照组(P0.05)。②治疗后2组ALT较治疗前均明显下降(P0.01);治疗组血清TG较对照组降低明显(P0.05);治疗后2组患者B超检查肝脏回声增强人数均明显减少(P0.01);治疗组治疗后肝/脾CT值降低人数较对照组明显减少(P0.05)。[结论]丹参、山楂为主药辨证治疗NASH临床疗效明显。     

替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝纤维化基质金属蛋白酶-13及其抑制因子-1的表达和胰岛素抵抗的影响

目的观察替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝纤维化的疗效和对基质金属蛋白酶-13（MMP-13）及其抑制因子-1（TIMP-1）的表达和胰岛素抵抗的影响。方法30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组和替米沙坦干预组。模型组和干预组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎,其中干预组于高脂喂养12周后,给予替米沙坦[5mg／（kg·d）】灌胃治疗4周。16周末处死所有动物。检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）及空腹胰岛素（FINS）、空腹血糖（FPG）,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）,RT—PCR和Westernblot法检测肝组织TIMP-1、MMP-13mRNA和蛋白的表达水平。病理切片观察组织学改变,免疫组织化学法检测a-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况。结果模型组血清ALT,AST,FPG,FINS及HOMA—IR较正常组均显著升高（均P〈0．01）。与模型组相比,干预组血清ALT,FPG,FINS及HOMA—IR均明显下降,差异具有统计学意义（均P〈0．01）。AST与干预组相比存在下降趋势,但差异无统计学意义（P〉0．05）。与模型组相比,替米沙坦可显著改善肝脏炎症活动度及肝纤维化程度（均P〈0．01）。干预组HOMA-IR较模型组明显降低【（3．59±0．29）VS（6．23±0．19）,P〈0．01]。干预组肝组织α—SMA的表达明显减少,肝组织MMP．13mRNA和蛋白的表达均增加,TIMP-1mRNA和蛋白的表达均降低（均P〈0．01）。结论替米沙坦对NASH大鼠具有改善胰岛素抵抗和抗肝纤维化的作用。     

脂炎消煎剂防治大鼠非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的研究脂炎消煎剂对大鼠非酒精性脂肪性肝炎防治作用的机制。方法采用高脂饲料喂养,建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型,随机分正常组、模型组和脂炎消煎剂大、小剂量组(剂量按体重计20g/kg和10g/kg),第24周检测大鼠肝功能、血脂并观察肝脏形态学改变,检测肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(Hyp)含量。结果与模型组比较,脂炎消煎剂组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)下降,血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHOL)减低,高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)升高;肝组织SOD活力和GSH含量升高,MDA和Hyp下降;肝脏形态学明显改善。结论脂炎消煎剂具有降低血脂、抗脂质过氧化和保护肝细胞的作用,对非酒精性脂肪性肝炎具有一定的防治作用。     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝组织Bcl-2和Bax的表达及其意义

目的探讨凋亡调控蛋白Bel-2和Bax表达在大鼠非酒精性脂肪性肝炎发病中的作用。方法将20只Wistar大鼠随机分为普通饲料喂养组（正常组）和高脂饲料喂养组（模型组）,连续喂养12周后,测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）,观察肝组织病理学变化和炎症活动度计分,采用westem blot法检测肝组织Bcl-2和Bax的表达。结果模型组大鼠肝小叶内肝细胞呈弥漫性脂肪变,伴大量炎性细胞浸润及散在性点状坏死;模型组动物肝组织Bax蛋白表达较正常组显著性升高（1．02±0．33对0．51±0．03,P〈0．01）,而Bel-2蛋白较正常组则明显下降（0．15±0．31对0．52±0．01,P〈0．01）,Bel-2／Bax比值降低（0．14±0．01对1．03±0．06,P〈0．01）。结论凋亡调控蛋白Bel-2和Bax的表达变化可能参与了NASH的发生和发展过程。     

甲氰咪呱对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响

目的研究甲氰咪呱对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝微粒体细胞色素P450的影响。方法通过高脂饮食制作非酒精性指肪性肝炎（NASH）动物模型，给予甲氰咪呱灌胃治疗，观察肝组织病理形态变化，进行炎症活动计分，同时测定细胞色素P450（CYP450）和细胞色素2E1（CYP2EI）含量及ALT、AST，并与对照组比较。结果与正常组比较，模型组大鼠ALT、AST及CYP450和CYP2EI含量明显升高；与模型组比较，甲氰咪呱治疗组CYP450和CYP2EI含量均明显下降，（P〈0．05），ALT、AST及炎症活动计分明显低于模型组（P〈0．05）。结论甲氰咪呱能显著改善NASH大鼠肝脏功能及形态损伤，可能通过抑制肝细胞微粒体CYP450和同功酶CYP2EI的表达发挥作用。