P73基因与结肠癌相关的关系

目的　探讨 P73蛋白和 m RNA的表达水平与结肠癌发生发展的可能关系。方法　用免疫组化法检测 2 7例结肠癌和癌旁组织中 P73蛋白表达水平。用半定量 RT- PCR检测 2 8例结肠癌和 2 0例正常组织中 P73m RNA的表达水平。结果　 1 P73蛋白在 78% (2 1 /2 7)结肠癌组织中的表达水平高于配对的结肠癌旁组织 44% (1 2 /2 7) (P<0 .0 5)。从癌旁组织、高分化和中分化腺癌到低分化腺癌 ,P73蛋白的表达水平呈递增趋势 (P<0 .0 0 0 1 ) ,呈正相关。 2 P73 m RNA在 89% (2 5/2 8)结肠癌组织中的表达水平高于正常结肠组织 55% (1 1 /2 0 ) (P<0 .0 1 )。结论　 P73基因的高表达可能与结肠癌的发生发展有关     

转录因子特化蛋白1在大肠癌组织中的表达及意义

目的 研究转录因子特化蛋白1(Sp1)在大肠癌组织中的表达情况及意义。方法 取60例大肠癌患者的癌组织和癌旁正常组织,分别采用实时定量PCR法检测大肠癌和癌旁正常组织中Sp1mRNA表达情况。按ΔΔCT法对目的基因进行相对定量。比较Sp1mRNA的表达情况与不同临床资料、病理参数之间的关系。结果 大肠癌组织中Sp1mRNA表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.01);大肠癌组织中Sp1mRNA阳性表达率与患者的年龄、性别、肿瘤部位无关(P>0.05),而与大肠癌的组织学分级、Duke′s分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 Sp1在大肠癌组织中呈现高表达状态,提示Sp1在大肠癌的发生、发展过程中可能起重要作用。     

原发性肝癌组织中LASP-1 mRNA和HPA-1 mRNA表达水平及其临床意义

目的定量检测LIM和SH3蛋白1(LASP-1)mRNA和乙酰肝素酶-1(HPA-1)mRNA在原发性肝癌组织中的表达水平,探讨二者与肝癌发生、侵袭和转移的关系。方法利用实时荧光定量PCR检测法分别检测62例原发性肝癌癌组织、配对癌旁组织(距癌2 cm)和正常肝脏组织(距癌大于5 cm)中LASP-1mRNA和HPA-1 mRNA的表达水平,并分析二者与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织、癌旁组织、正常肝组织中HPA-1 mRNA表达水平分别为47.25±16.65、23.15±14.89、7.56±5.15,LASP-1 mRNA的表达水平分别为51.66±20.12、35.73±15.07、10.17±8.29。HPA-1 mRNA及LASP-1 mRNA在癌组织中的表达高于癌旁组织和正常组织(P均<0.05)。HPA-1及LASP-1的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关(P<0.05,P<0.01),与患者年龄、性别及肿瘤大小无关(P均>0.05)。Spearman等级相关分析显示LASP-1 mRNA和HPA-1 mRNA的表达呈正相关(OR=0.421,P<0.05)。结论肝癌组织中LASP-1 mRNA与HPA-1 mRNA的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移及TNM分期等密切相关。二者联合表达水平的增加可能促进肝癌的侵袭转移。     

胃癌组织中MMP-11 mRNA的表达及临床意义

目的研究基质金属蛋白酶11(MMP-11)在胃癌组织中的表达及临床意义。方法采用荧光定量PCR方法检测40例胃癌组织和40例癌旁组织中的MMP-11mRNA的表达。结果荧光定量PCR检测胃癌组织及癌旁组织中MMP-11mRNA的表达水平发现癌组织中的MMP-11mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.05),MMP-11mRNA的表达与胃癌淋巴转移以及分期相关(P<0.05),与患者年龄、性别及分化程度及大小无关。结论 MMP-11mRNA在胃癌组织中的高表达,与胃癌的发生发展密切相关。MMP-11很有可能在胃癌的发病机制中起着重要的作用。     

结肠癌组织中microRNA-340与ROCK1的表达及其临床意义

目的:探讨microRNA-340(miR-340)与rho相关卷曲螺形成蛋白激酶1(rho associated-coi ledcoi l forming protein kinase,ROCK1)在结肠癌组织中的表达及二者的相互关系。方法:采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测41例结肠癌组织及其癌旁正常黏膜组织中miR-340及ROCK1 mRNA的表达水平,同时采用蛋白质印迹法检测组织RohA/ROCK通路的表达,分析miR-340及ROCK1与大肠癌患者临床病理参数之间的关系。结果:结肠癌组织miR-340的相对表达量为0.757±0.056,低于癌旁正常黏膜组织的1.290±0.082,差异具有统计学意义(P<0.05),结肠癌组织ROCK1的相对表达量为1.551±0.078,高于癌旁正常黏膜组织的0.823±0.059,差异具有统计学意义(P<0.05)。结直肠癌组织的ROCK1,ROCK2及RhoA表达水平分别为0.455±0.038,0.385±0.033,0.852±0.075,正常黏膜组织分别为0.185±0.021,0.102±0.011,0.401±0.044,癌组织均高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组织中miR-340和ROCK1的表达与性别、年龄、发病部位、浸润深度、肿瘤分化程度无关(P>0.05),而与淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。Pearson相关分析结果示:结肠癌组织中miR-340与ROCK1表达呈负相关(r=?0.509,P<0.001)。结论:miR-340在结肠癌组织中表达下调,ROCK1表达上调,二者与淋巴结转移及TNM分期密切相关。miR-340可能通过抑制ROCK1表达发挥抑癌作用。     

人胃癌组织FAF1 mRNA和蛋白表达研究

目的:探讨FAF1表达在人胃癌发生发展中的作用。方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)和免疫组化方法,对40例胃癌患者癌组织、癌旁组织及相对正常组织中FAF1mRNA和蛋白的表达进行分析。结果:FAF1mRNA在胃癌组织中的表达水平(0.27±0.12),明显低于在癌旁组织(0.40±0.06)及正常组织(0.48±0.08)中的表达水平(P<0.01),而在癌旁组织中的表达水平明显低于正常组织中的表达水平(P<0.01)。胃癌组织的FAF1蛋白的阳性表达率(37.50%)明显低于癌旁组织(62.50%,P<0.05)和正常组织(72.50%,P<0.01)。结论:FAF1表达的减少在胃癌的发生发展过程中起着重要作用。     

△Np73基因在食管癌中的表达及生物学意义

目的探讨△Np73mRNA及其蛋白在食管癌组织中的表达与食管癌发生的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及流式细胞术（FCM）检测47例食管鳞状细胞癌组织及与其相对应的癌旁组织和正常食管组织中△Np73mRNA及其蛋白的表达水平。结果△Np73mRNA及其蛋白在食管癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织和正常食管组织（P〈0．01）;且△Np73mRNA及其蛋白的表达水平与肿瘤的浸润深度呈负相关（P〈0．05）。结论△Np73基因的表达可能与食管癌的发生发展有关。     

荧光定量PCR法检测多种肿瘤组织和细胞株中nucleostemin基因的表达

目的 建立实时荧光定量PCR技术检测nucleostemin(NS)基因在多种肿瘤组织及细胞株中的表达。 方法 构建NS基因和内参基因β-actin标准品,用RT-PCR和实时荧光定量PCR检测NS基因在胃癌、结肠癌和直肠癌组织以及胃癌细胞株（BGC-823）、肺腺癌细胞株（A549）、肺巨细胞癌细胞株（PLA801-D95）、结肠癌细胞株（SW620）、人白血病细胞株（K562）、前列腺癌细胞株（PC3）的表达。 结果 NS基因在胃癌、结肠癌以及直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P<0.05）,且在BGC-823的表达显著高于其他细胞株（P<0.05）。 结论 NS基因过表达可能在多种肿瘤,尤其在胃肠道肿瘤的发生、发展过程中起重要作用。     

实时荧光定量RT—PCR检测肺癌中PUMA mRNA的表达

目的 建立检测肺癌PUMA mRNA的实时荧光定量RT-PCR方法,初步探讨PUMA mRNA表达水平与肺癌发生发展的关系.方法 以GAPDH作为内参照基因,应用实时荧光定量RT-PCR,检测PUMA mRNA在肺癌组织中的表达水平.结果 建立了应用实时荧光定量RT-PCR检测肺癌PUMA mRNA的方法.熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳结果证实了PCR反应的特异性;相对定量结果显示,40例肺癌患者的肿瘤组织、对应的癌旁组织、远癌组织和10例肺良性病变组织中均有PUMA tuRNA的表达,表达水平在肺癌与肺良性病变之间、肺癌各病理类型之间差异均无统计学意义(P>0.05).结论 应用SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR可以特异、准确、快速地分析不同肺组织中PUMA mRNA的表达差异.非小细胞肺癌的发生发展与PUMA mRNA的表达无明显相关性.     

结直肠癌组织中hTcf-4 mRNA表达的研究

目的:研究hTcf-4mRNA在结直肠癌组织及癌旁正常组织的表达,探讨其在结直肠癌发生发展中的作用。方法:用荧光定量PCR检测31例结直肠癌标本及相应的癌旁正常组织hTcf-4mRNA的表达。结果:31例癌组织hTcf-4mRNA表达高于癌旁正常组织(P<0.05);Dukes不同分期结直肠癌hTcf-4mRNA表达随着浸润深度的加深其表达有增高趋势(P<0.05)。结论:hTcf-4mRNA在结直肠癌组织中表达增高,并与结直肠癌侵袭转移有关,可作为判定结直肠癌转移及预后的参考指标。     

miR-200b与癌胚抗原在大肠癌中的表达及其相关性

目的探讨miR-200b与癌胚抗原(CEA)在大肠癌发生、发展中的表达情况及其表达的相关性。方法采用实时荧光定量PCR方法分析60例大肠癌组织及正常组织中miR-200bmRNA和CEA mRNA表达结果,分析其与患者临床资料、病理参数之间的关系,研究大肠癌组织中miR-200bmRNA和CEA mRNA表达的相关性。结果大肠癌组织中miR-200bmRNA的表达显著低于正常组织,CEA mRNA显著高于正常组织,差异均有统计学意义(P0.01);患者性别、年龄及肿瘤部位的miR-200bmRNA和CEA mRNA表达结果比较,差异无统计学意义(P0.05);不同组织学分级及TNM分期中,CEA呈现过表达状态,而miR-200b呈现表达降低或缺失状态;大肠癌组织中miR-200b和CEA的表达具有相关性,且呈负相关关系(r=-0.790,P0.001)。结论 miR-200b在大肠癌组织中呈低表达或表达缺失,与CEA的表达呈一定的负相关关系,提示miR-200b可为肿瘤的诊断和治疗提供新的依据。     

结肠癌组织中lncRNA TPT1-AS1、miR-30c-5p的表达及与病理特征、预后的关系

目的探讨结肠癌组织中长链非编码RNA（lncRNA）肿瘤蛋白翻译调节因子1（TPT1）-反义RNA1（AS1）、微小RNA（miR）-30c-5p的表达及与病理特征、预后的关系。 方法选取2015年1月至2017年12月深圳大学附属第一医院收治的117例接受根治性或姑息性手术切除结肠癌患者,均行手术切除结肠癌组织及癌旁组织。采用qRT-PCR检测lncRNA TPT1-AS1、miR-30c-5p表达水平,分析lncRNA TPT1-AS1、miR-30c-5p表达水平与结肠癌病理特征的关系,采用Pearson相关性检验分析结肠癌组织中lncRNA TPT1-AS1与miR-30c-5p表达水平的相关性,Kaplan-Meier曲线绘制不同lncRNA TPT1-AS1、miR-30c-5p表达水平结肠癌患者3年累积生存率,Cox回归分析结肠癌患者预后影响因素。 结果结肠癌组织中lncRNA TPT1-AS1表达水平明显高于癌旁组织（3.405±0.555 vs 1.766±0.096）,miR-30c-5p表达水平（0.306±0.146 vs 0.872±0.267）明显低于癌旁组织（P＜0.05）。结肠癌lncRNA TPT1-AS1表达水平TNM分期Ⅲ~Ⅳ期明显高于Ⅰ~Ⅱ期（3.651±0.579 vs 3.257±0.486）,浸润深度T₃~T₄明显高于T₁~T₂（3.523±0.601 vs 3.301±0.491）,有淋巴结转移明显高于无淋巴结转移（3.614±0.585 vs 3.220±0.456）,差异均有统计学意义（P＜0.05）;miR-30c-5p表达水平TNM分期Ⅲ~Ⅳ期明显低于Ⅰ~Ⅱ期（0.251±0.126 vs 0.346±0.145）,浸润深度T₃~T₄明显低于T₁~T₂（0.270±0.119 vs 0.338±0.162）,有淋巴结转移明显低于无淋巴结转移（0.255±0.125 vs 0.351±0.151）,差异均有统计学意义（P＜0.05）。Pearson相关性分析显示,结肠癌组织中lncRNA TPT1-AS1与miR-30c-5p表达水平呈负相关（r=-0.572,P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线显示,lncRNA TPT1-AS1高表达水平组3年累积生存率明显低于低表达水平组（59.32% vs 87.93%）,miR-30c-5p高表达水平组3年累积生存率明显高于低表达水平组（85.00% vs 61.40%）（P＜0.05）。多因素Cox回归分析显示,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期（HR=2.387,95%CI：1.004~5.671）、淋巴结转移（HR=2.667,95%CI：1.021~6.969）、lncRNA TPT1-AS1≥3.405（HR=2.023,95%CI：1.076~3.803）为结肠癌患者预后独立风险因素,miR-30c-5p≥0.306（HR=0.175,95%CI：0.012~0.423）为独立保护因素（P＜0.05）。 结论结肠癌组织中lncRNA TPT1-AS1表达显著上调,miR-30c-5p表达显著下调,两者与TNM分期、浸润深度、淋巴结转移相关,为患者预后独立影响因素,可能成为结肠癌预后评估的标志物。     

Id-1及VEGF在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨分化抑制因子-1(Id-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学SP法检测94例结肠癌和46例正常结肠组织中Id-1和VEGF的表达。结果结肠癌组织中Id-1的阳性表达率(67.0%vs10.9%,P<0.01)和VEGF的阳性表达率(69.1%vs17.4%,P<0.01)明显高于正常结肠组织。Id-1表达与患者性别、年龄、肿瘤大小无关(P均>0.05),与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P均<0.01)。VEGF表达与患者性别、年龄、分化程度、肿瘤大小、浸润深度无关(P均>0.05),与淋巴结转移及TNM分期有关(P均<0.01)。Id-1和VEGF在结肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.413,P<0.01)。结论 Id-1和VEGF的高表达与结肠癌的侵袭和转移有关,二者可能共同参与了结肠癌的进展和血管生成。Id-1和VEGF可作为判断大肠癌恶性程度和预后的指标。     

抑癌基因WWOX与相关基因p73、Bax在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨含有WW结构域的氧化还原酶基因（WW domain containing oxidoreductase,WWOX）的表达与结直肠癌生物学行为及p73、Bax表达的相关性。方法应用免疫组化Envision二步法检测58例结直肠癌中WWOX、p73及Bax的表达,并以20例结直肠黏膜炎症为对照。结果①WWOX、Bax在结直肠癌组织中的阳性率分别为25.86%、58.62%,显著低于结直肠黏膜炎症的65%、85%（P〈0.01,P〈0.05）;二者在结直肠癌中的表达与患者的预后相关（P〈0.01,P〈0.05）,且WWOX的表达在癌组织与浸润深度相关（P〈0.05）;②p73在癌组织中的阳性率显著高于炎症组（63.79%vs 30%,P〈0.01）,在结直肠癌中的表达与淋巴结转移及浸润深度有关（P〈0.05）;③WWOX与p73的表达无关（χ2=0.072,P〉0.05）,而与Bax的表达有关（χ2=6.561,P〈0.05）。结论 WWOX、p73及Bax参与调控结直肠癌的发生、发展,且WWOX与Bax协同作用,在结直肠癌的预后中扮演了重要角色。     

结肠癌组织中p53、p14基因表达的研究

目的　探讨结肠癌组织中 p5 3、p14基因的表达及其与结肠癌某些生物学行为的关系。 方法　经病理诊断明确的内镜活检组织标本 318例 ,其中癌组织 12 6例 ,腺瘤组织 84例 ,正常组织 10 8例。采用免疫组织化学S -P法检测三种组织中p5 3、p14的表达。 结果　p5 3在结肠癌组织中的表达明显高于正常组织 (P<0 .0 5 ) ,p14在腺瘤和癌组织中的表达低于正常结肠组织 (P <0 .0 5 ) ,p14与癌组织的临床分期及组织分化程度相关 (P >0 .0 5 ) ,p5 3与 p14的表达存在负相关性 (r =- 0 .816 9)。 结论　p5 3、p14基因的表达异常可能与结肠癌的发生发展有关 ,联合检测两者的协同表达可作为结肠癌辅助诊断的参考指标。     

Expression and clinical significance of tyrosine phosphatase SHP-2 in colon cancer

Protein-tyrosine phosphatase SHP-2, encoded by gene PTPN11, has been identified as a tumor-promoting factor in several types of leukemia and is hyper-activated by other mechanisms in some solid tumors including gastric cancer, breast cancer, non-small cell lung cancer (NSCLC), etc. But few were reported on the expression and significances of SHP-2 in colon cancer. Here, we detect SHP-2 expression in colon cancer cells, colon cancer-induced by AOM + DSS in mice and 232 human colon cancer specimens, including 58 groups of self-matched adjacent peritumor tissues and normal tissues. We found that compared to the normal colon tissues, SHP-2 significantly decreased in tumor tissues (P < 0.001). The same results were got in colon tumor cells as well as mice colon tumors. And in humans samples, low SHP-2 expression showed a significantly correlation with poor tumor differentiation (P < 0.05), late TNM stage (P = 0.1666) and lymph node metastasis (P < 0.05)     

抑癌基因ING1在大肠癌中的表达与突变

背景抑癌基因ING1高表达可使多种癌细胞发生细胞凋亡,并使其细胞在合成前期细胞周期静止.ING1参与p53的信号传递通路,以一种转录活化因子调节p53的活性.目的探讨人大肠癌组织中ING1基因表达及突变水平与大肠癌临床病理特征的关系.设计以病理标本为观察对象的对照实验.单位解放军第三军医大学西南医院普外科.对象取自1998-10/1999-10在第三军医大学西南医院住院手术患者切除的大肠癌标本52块,于手术中分别取自距肿瘤边缘10 cm正常黏膜及新鲜肿瘤组织.患者男29例,女23例;平均年龄50.28岁.方法检测52块大肠癌组织标本中INGImRNA及蛋白的表达情况,DNA单链多态性分析法检测基因突变情况.同时应用免疫组织化学方法检测大肠癌中P53蛋白表达情况.主要观察指标①INGImRNA及蛋白在结直肠癌中的表达.②P53在结肠癌中的表达.③聚合酶链反应-SSCP分析ING1基因突变情况.结果①ING1mRNA在结直肠癌标本表达较正常黏膜明显减弱(0.626±0.382,1.166±0.245,P＜0.001).淋巴结转移阳性组肿瘤组织中ING1表达强度较阴性组中显著下降(0.393±0.243,0.960±0.299,P＜0.01).②P53蛋白表达强度与ING1mRNA表达相对强度呈显著正相关(P＜0.01).③52块标本仅检测到1块存在ING1mRNA基因表达突变.结论ING1基因可能参与了结直肠癌的发生与发展,其降低使结肠癌患者抑癌基因不能发挥.通过ING1mRNA及蛋白表达的下降而不是基因位点的丢失和突变,提示ING1不像传统的抑癌基因那样主要通过基因位点的丢失和突变来参与癌症的发生,可能存在其他机制参与到ING1基因表达的缺失.     

胃癌组织中p73表达与血管生成的关系研究

目的探讨胃癌组织中p73的表达及其与血管内皮生长因子（VEGF）的关系。方法应用免疫组织化学PV法检测66例胃癌组织及其癌旁正常胃组织中p73的表达情况,观察其与胃癌病理学特点及VEGF之间的关系。结果①p73及VEGF在胃癌中的阳性表达率显著高于其癌旁正常胃组织（P〈0.05）。②p73在胃癌组织中的表达与肿瘤直径、性别、年龄、病理类型、浸润深度无关（P〉0.05）;与淋巴结转移、TNM分期有关（P〈0.05）。③胃癌组织VEGF表达与肿瘤直径、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0.05）;与年龄、性别及病理类型无关（P〉0.05）。④p73与VEGF在胃癌组织中的表达呈正相关（r=0.684,P〈0.05）。结论p73蛋白及VGEF在胃癌发展过程中可能起着重要的作用。     

基于TCGA数据库分析ANO1在结肠癌中的表达及临床意义

目的研究ANO1基因在结肠癌中的表达情况,进一步分析ANO1对结肠癌患者生存及预后的影响。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库获得结肠癌mRNA表达谱数据和相应的临床信息,分析ANO1的差异表达及其与临床病理因素的相关性;进一步探索ANO1表达量对结肠癌患者预后的影响,利用基因集富集分析(GSEA)预测可能与ANO1密切相关的信号通路。结果结肠癌肿瘤组织中ANO1相对表达量明显高于癌旁组织(P<0.01);ANO1表达水平与N分期即淋巴结转移情况有关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤分期,以及肿瘤是否突破肌层、是否存在远处转移均无相关性(P>0.05);ANO1高表达患者总生存期明显缩短(P<0.05);Cox多因素分析可见年龄及ANO1表达状态是结肠癌患者不良预后的独立影响因素(P<0.05);ANO1高表达样本富集至钙离子信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、WNT及多个癌症相关通路等基因集。结论ANO1在结肠癌肿瘤中高表达是患者不良预后的指标,且与淋巴结转移情况明显相关。ANO1有望成为结肠癌重要的预后标志物。