有机酸对人血管内皮细胞的保护作用

目的：探讨氯原酸（CHA）、抗坏血酸（AA）、柠檬酸（CA）和苹果酸（MA）4种有机酸对人血管内皮细胞的保护作用。方法：通过人脐静脉内皮细胞培养,从形态、生长状况和乳酸脱氢酶（LDH）释放方面,观察预先4h、与oxLDL同时加入、加oxLDL3h后加入有机酸3种情况,以及3个不同剂量（10、20、40mg/L)的有机酸＋oxLDL(100mg/L)对内皮细胞的作用。结果:oxLDL对内皮细胞具有明显的损伤作用,细胞生存率低于正常对照组,LDH释放率高于正常组。预先和同时加入CAH、AA、CA、和MA各组对oxLDL引起的内皮细胞损伤具有不同程度的保护作用,而后加入有机酸各组对oxLDL引起的内皮细胞损伤没有影响。3个剂量的CHA和AA＋oxLDL各组,以及CA和MA＋oxLDL的高剂量组的细胞生存率均高于oxLDL组,LDH释放率均低于ocxLDL组,呈明显的剂量效应关系。结论、氯原酸、抗坏血酸、柠檬酸和苹果酸4种有机酸对oxLDL诱导的内皮细胞损伤具有不同程度的预防性保护作用,其中以氯原酸和抗坏血酸的作用最佳,柠檬酸次之,苹果酸最终。     

有机酸对人血管内皮细胞保护作用的机制研究

目的: 研究氯原酸(CHA)、抗坏血酸(AA)、柠檬酸(CA)和苹果酸(MA)四种有机酸(OA)对单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和单核细胞聚集刺激因子(M-CSF)的影响及其抗氧化作用,探讨有机酸保护人血管内皮细胞的作用机制。 方法: 在体外原代培养人脐静脉内皮细胞(EC)中,分别加入不同剂量(10,20,40 mg/L)的CHA、AA、CA和MA,以及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL,100 mg/L),观察四种OA对ox-LDL引起人血管EC损伤的保护作用。另观察单纯CHA和AA(40 mg/L)对EC的直接作用。 结果: (1)ox-LDL组的TBARS值明显升高,是正常LDL组的14.85倍;加OA各组TBARS值有不同程度的降低,并呈明显的剂量效应关系,其中CHA和AA作用较强,CA和MA作用较弱。(2)ox-LDL组MCP-1和M-CSF较LDL组显著升高;加OA组(40 mg/L)MCP-1和M-CSF分别显著低于ox-LDL组;单纯CHA和AA组分别低于空白对照组。 结论: OA对EC的保护作用与其抗氧化作用有关,而且可能与对EC分泌MCP-1和M-CSF的影响有关。     

山楂对人血管内皮细胞的作用

目的 :　探讨山楂对人血管内皮细胞的保护作用及其机制。方法 :　通过原代培养人脐静脉内皮细胞 (EC) ,从细胞形态学、细胞生长状态、细胞内乳酸脱氢酶 (LDH)释放、内皮细胞对单核细胞 (MC- EC)的粘附作用、以及低密度脂蛋白脂质过氧化 (TBARS)值测定方面 ,观察不同剂量山楂对氧化修饰的低密度脂蛋白 (Ox LDL)引起的 EC损伤的影响和对 EC的直接作用。结果 :　Ox LDL对 EC具有明显的损伤作用 ,Ox LDL组的细胞存活率低于正常对照组 (P<0 .0 5) ,细胞内 LDH释放率和 MC- EC粘附率均高于正常对照组 (P<0 .0 5) ;山楂可以有效地抑制 Ox LDL对 EC的损伤作用 ,三个剂量的山楂 +Ox LDL各组的细胞存活率均显著高于 Ox LDL 组 (P<0 .0 5) ,LDH释放率、MC- EC粘附率及 TBARS值均显著低于 Ox LDL组 (P<0 .0 5) ,呈剂量效应关系。单纯山楂组的中、高剂量组 MC- EC粘附率均显著低于正常对照组 (P<0 .0 5)。结论 :　山楂可以有效地保护人内皮细胞免受 Ox LDL的损伤 ,其机制与山楂的抗氧化作用和对 EC的直接作用有关     

原花青素对过氧化氢损伤血管内皮细胞的保护作用

目的：探讨原花青素对氧化损伤的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的保护作用。方法：体外培养内皮细胞,将细胞分为6组,即空白对照组（Control组）、氧化损伤组（H2O2组）、氧化损伤加入VitC对照组（VC＋H2O2组）、氧化损伤加入原花青素5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L浓度组（procyanidin-L＋H2O2组、procyanidin-M＋H2O2组、procyanidin-H＋H2O2组）。将750μmol/LH2O2作用于加入VitC及不同浓度原花青素预培养24h的内皮细胞,继续培养18h,以细胞毒四唑盐（MTT）比色试验、乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）作为检测指标。结果：原花青素呈剂量依赖性降低H2O2对内皮细胞的生长抑制率,降低MDA、LDH量,增加培养液中NO2-/NO3-含量,各指标比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：原花青素可保护和修复过氧化氢诱导的血管内皮细胞的损伤,其作用可能与抗氧化、促进NO释放有关。     

山楂总黄酮对人血管内皮细胞的作用

目的 探讨山楂总黄酮对人血管内皮细胞的保护作用及其机理.方法 通过原代培养人脐静脉内皮细胞(EC),从细胞形态学、细胞生长状况、细胞内乳酸脱氢酶(LDH)释放、内皮细胞对单核细胞(MC-EC)的粘附作用,以及低密度脂蛋白脂质过氧化(TBARS值)测定等,观察不同剂量(25,50,100mg/L)山楂总黄酮对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的EC损伤的影响和对EC的直接作用.结果 oxLDL对EC具有明显的损伤作用,oxLDL组的细胞生存率低于正常对照组(P<0.05),LDH释放率和MC-EC粘附率均高于正常对照组(P<0.05);山楂黄酮可以有效地抑制oxLDL对EC的损伤,3个剂量的山楂黄酮+oxLDL组的细胞生存率均显著高于oxLDL组(P<0.05),LDH释放率、MC-EC粘附率和TBARS值均显著低于oxLDL组(P<0.05),呈剂量-效应关系.单纯山楂黄酮组的中、高剂量组MC-EC粘附率均显著低于正常对照组(P<0.05).结论 山楂黄酮可以有效地保护内皮细胞免受oxLDL的损伤,其机理与山楂黄酮的抗氧化作用和对EC的直接作用有关.     

内皮细胞脂酶对高密度脂蛋白胆固醇及动脉粥样硬化的作用研究进展

内皮细胞脂酶可以调节人体内脂蛋白的代谢,加快高密度脂蛋白的清除,降低高密度脂蛋白胆固醇水平.本文结合文献综述内皮细胞脂酶对高密度脂蛋白胆固醇及动脉粥样硬化的作用.     

抗氧化维生素对氧化密度脂蛋白作用的主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤？…

为深入探讨抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）损伤内皮细胞的防治作用及可能机理,我们以体外培养的小年主支脉内皮细胞为模型,在培养的主动脉内皮细胞中加入不同剂量的抗氧化维生素,共同培养１２ｈ,再与终浓度为０．１ｇ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液,通过硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ６０）粘附计数法观察不同浓度的抗氧化维生素     

抗氧化维生素对氧化低密度脂蛋白作用的主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤的影响

为深入探讨抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）损伤内皮细胞的防治作用及可能机理,我们以体外培养的小牛主动脉内皮细胞为模型、在培养的主动脉内皮细胞中加入不同剂量的抗氧化维生素,共同培养１２ｈ,再与终浓度为０．１ｇ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液,通过硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ６０）粘附计数法观察不同浓度的抗氧化维生素对ｏｘＬＤＬ损伤的内皮细胞脂质过氧化及单核细胞粘附性的影响。结果表明,抗氧化维生素各组细胞培养液中丙二醛（ＭＤＡ）含量以及内皮细胞粘附的ＨＬ６０细胞数均明显低于ｏｘＬＤＬ组,提示维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素三种抗氧化维生素均可减轻ｏｘＬＤＬ对内皮细胞的脂质过氧化损伤,阻止单核细胞的粘附。这些可能是抗氧化维生素防治动脉粥样硬化的重要机理之一。     

茶多酚影响同型半胱氨酸对内皮细胞的作用

目的:探讨茶多酚能否减弱同型半胱氨酸(HCY)对内皮细胞(EC)的损伤作用。方法:体外培养牛主动脉内皮细胞,随机分为5组,正常对照组,用含20%小牛血清DMEM培养液培养;0.25 mmol/L HCY组,培养液中加入HCY使其终浓度为0.25 mmol/L;1 mg/L茶多酚 +0.25 mmol/L HCY组;2 mg/L茶多酚 +0.25 mmol/L HCY组;4 mg/L茶多酚 +0.25 mmol/L HCY组。培养72h后,用流式细胞仪检测细胞周期,观察细胞生长情况,同时检测培养液中的一氧化氮(NO)、 一氧化氮合酶(NOS)、内皮素(ET)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)浓度或活性。结果:浓度为1、2、4、8 mg/L茶多酚组与HCY组相比,(1)细胞形态规则性增强,立体感增加,细胞内颗粒减少;(2)细胞周期检测提示茶多酚组细胞S期比例增多;(3)功能实验提示,茶多酚组EC释放的血管舒张因子NO浓度较HCY组高;而血管收缩因子ET低;(4)MDA含量和GS H-Px活性无明显改变。结论:茶多酚有抑制HCY对EC的损伤作用。     

MK-siRNA对人乳腺癌细胞的生长、粘附及迁移能力的影响

目的:探讨siRNA MK转染对乳腺癌MCF-7细胞增殖和转移能力的影响。方法:构建特异性抑制Midkine基因siRNA片段,转染至乳腺癌MCF-7细胞中,CCK-8法比较细胞增殖能力的改变,体外迁移实验比较细胞运动能力的改变,基质胶粘附实验比较细胞粘附率的变化。结果:MK表达下调后,MCF-7细胞的增殖能力明显降低(P<0.05),体外迁移能力显著降低(P<0.05),siRNA细胞对基质胶的粘附率明显降低(P<0.05)。结论:MK基因表达下调能降低乳腺癌细胞迁移运动和降低细胞对基质胶的粘附率,并降低肿瘤细胞的增殖,提示MK在乳腺癌恶性进展中起重要作用。     

Carnosic acid reduces cytokine-induced adhesion molecules expression and monocyte adhesion to endothelial cells

Background  Expression of cell adhesion molecules on the endothelium and the attachment of monocytes to endothelium may play a major role in the early atherogenic process. Aim of the study  We investigated the effects of carnosic acid on the adhesion of U937 cells to IL-1β-treated human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), as well as on the expression of adhesion molecules. Results  Our data showed that pretreatment with 10 and 20 μmol/l carnosic acid significantly reduced the number of U937 cells adhering to IL-1β-treated HUVECs. In addition, we found that 20 μmol/l carnosic was more effective than 10 μmol/l carnosic acid at inhibiting expression of cell adhesion molecules (ICAM-1, VCAM-1, and E-selectin), the nuclear translocation of NF-κB subunits p65 and p50, and the production of ROS in IL-1β-stimulated HUVECs. Conclusions  We conclude that carnosic acid inhibits IL-1β-induced ICAM-1, VCAM-1 and E-selectin expression in HUVECs through a mechanism that involves NFκB. We propose that the reduction in binding of human monocytic cell line U937 to IL-1β-treated HUVECs is due to the anti-inflammatory properties of carnosic acid.     

白血病骨髓基质细胞黏附对Jurkat细胞周期及调控的影响

目的观察白血病骨髓基质细胞-Jurkat细胞共培养模型中Jurkat细胞的化疗敏感性,探讨基质细胞黏附对Jurkat细胞周期及其调控蛋白表达的影响。方法常规分离、培养骨髓基质细胞,Jurkat细胞与^60Co照射的基质细胞层黏附培养,构建基质细胞-Jurkat细胞共培养模型,扫描电镜观察,通过MTT法测定Jurkat细胞DNR的IC50,流式细胞仪检测Jurkat细胞周期分布,Westernblot检测黏附培养4、24和48h Jurkat细胞周期调控蛋白cyclin A、cyclin E及p27的表达。结果悬浮培养Jurkat细胞的IC50为0．45μmol／L,而白血病基质细胞及正常基质细胞黏附组IC50分别为2．30μmol／L和1．78μmol／L。Jurkat细胞与基质细胞黏附培养24h,Go—G1期细胞的比例明显升高（48．74％±8．77％）,与悬浮对照组（27．83％±1．86％）比较差异有统计学意义P〈0．01,G2-M期细胞比例明显降低为2．01％±1．17％,与悬浮对照组（20．33％±1．84％）比较差异有统计学意义P〈0．01;Western Blot检测发现cyclin A、cyclin E的表达在Jurkat细胞黏附培养4h时即有所下调,24h和48h尤为明显,而p27的表达则出现上调,以48h最为明显。结论白血病基质细胞黏附能介导白血病细胞耐药,其机制可能与白血病细胞周期改变有关。     

Novel natural product-based cinnamates and their thio and thiono analogs as potent inhibitors of cell adhesion molecules on human endothelial cells

In the present study, we report the design and synthesis of novel analogs of cinnamates, thiocinnamates and thionocinnamates and evaluated the potencies of these analogs to inhibit TNF-α induced ICAM-1 expression on human endothelial cells. By using whole cell-ELISA, our screening data demonstrated that ethyl 3′,4′,5′-trimethoxythionocinnamate (ETMTC) is the most potent inhibitor of TNF-α induced ICAM-1, VCAM-1 and E-selectin. As functional consequences, ETMTC abrogated TNF-α induced adhesion of neutrophils to the endothelial monolayer. Structure–activity relationship studies revealed the critical role of the chain-length of the alkyl group in the alcohol moiety, number of methoxy groups in the aromatic ring of the cinnamoyl moiety and the presence of the α, β- C–C double bond in the thiocinnamates and thionocinnamates.     

模拟CO_2气腹对宫颈癌细胞黏附和侵袭能力的影响

目的:体外模拟腹腔镜手术二氧化碳气腹方法,探讨二氧化碳(CO2)环境对人宫颈癌Hela细胞黏附和侵袭能力的影响。方法:培养人宫颈癌Hela细胞株,模拟CO2气腹环境12 mmHg气压处理4 h,以培养于常规条件下人宫颈癌Hela细胞为对照,通过MTT法检测细胞生长变化,通过细胞基质黏附试验检测细胞基质黏附能力改变,应用免疫组织化学方法检测人宫颈癌Hela细胞中E-钙黏素(E-cadherin)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达变化。结果:与对照组相比,CO2气腹处理组生长曲线上移(P<0.05)、细胞基质黏附能力增强(P<0.05)、E-钙黏素表达减少(P<0.05)、基质金属蛋白酶-9表达增加(P<0.05)。结论:CO2气腹环境增加宫颈癌侵袭和转移的风险,其机制之一可能与人宫颈癌Hela细胞的E-钙黏素的表达降低、基质金属蛋白酶-9的表达增加有关。     

A standardized bamboo leaf extract inhibits monocyte adhesion to endothelial cells by modulating vascular cell adhesion protein-1

Bamboo leaves (Phyllostachys pubescens Mazel ex J. Houz (Poacea)) have a long history of food and medical applications in Asia, including Japan and Korea. They have been used as a traditional medicine for centuries. We investigated the mechanism of anti-inflammatory activity of a bamboo leaf extract (BLE) on tumor necrosis factor-alpha (TNF-α)-induced monocyte adhesion in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Exposure of HUVECs to BLE did not inhibit cell viability or cause morphological changes at concentrations ranging from 1 µg/ml to 1 mg/ml. Treatment with 0.1 mg/ml BLE caused 63% inhibition of monocyte adhesion in TNF-α-activated HUVECs, which was associated with 38.4% suppression of vascular cell adhesion molecule-1 expression. Furthermore, TNF-α-induced reactive oxygen species generation was decreased to 47.9% in BLE treated TNF-α-activated HUVECs. BLE (0.05 mg/ml) also caused about 50% inhibition of interleukin-6 secretion from lipopolysaccharide-stimulated monocyte. The results indicate that BLE may be clinically useful as an anti-inflammatory or anti-oxidant for human cardiovascular disease including atherosclerosis.     

茶色素抑制单核-内皮细胞粘附及其机制研究

为研究茶色素 (TP)对氧化型低密度脂蛋白 (Ox- L DL)损伤血管内皮细胞所致单核细胞粘附的影响 ,应用硫酸铜诱导低密度脂蛋白 (L DL )氧化 ,用细胞粘附实验、流式细胞仪荧光强度测定、细胞 EL ISA等方法分别从细胞、蛋白表达等方面研究茶色素对细胞间粘附分子 (ICAM- 1)和血管细胞间粘附分子 (VCAM-1)表达的影响。结果显示 ,80、40、2 0 mg/ L的 TP抑制 Ox- L DL诱导的单核细胞 -内皮细胞粘附 ,抑制 Ox-L DL 诱导的 ICAM- 1和 VCAM- 1表达并呈浓度依赖性。提示 TP抑制 ICAM- 1和 VCAM- 1的表达是其抑制单核细胞 -内皮细胞粘附及抗动脉粥样硬化的机制之一。     

Effect of fatty acids on expression of endothelial leukocyte adhesion molecules

Summary.Background: With respect to linoleic acid both beneficial and proatherogenic effects have been described. However, the effect on expression of cell adhesion molecules on human coronary artery endothelial cells (HCAEC) is not yet established. The aim of the experiments was to evaluate the influence of linoleic acid in comparison with palmitic acid regarding the cytokine-induced expression of endothelial leukocyte adhesion molecules (intercellular cell adhesion molecule-1 ICAM-1, vascular cell adhesion molecule-1 VCAM-1, E-selectin).Methods: HCAEC were cultured in microvascular endothelial cell growth medium. In the experiments, the cells were preincubated with linoleic acid and palmitic acid, respectively (10 µmol/l, 2 days) or under control conditions, after which interleukin- 1 (IL-1, 10 ng/ml in the test medium) was added for 1 day. The monoclonal antibodies used were fluorescein isothiocyanate (FITC)- labeled anti-ICAM-1, FITC-labeled anti-VCAM-1, and FITC-labeled anti-E-selectin. Expression was analyzed by flow cytofluorimetry. Next, to examine the effects of fatty acids on adhesion of monocytes to endothelial cells, adhesion experiments with the monocytic U 937 cell line were performed.Results and conclusions: IL-1 increased ICAM-1,VCAM-1, and E-selectin expression compared to controls. Incubation with IL-1 together with linoleic acid reduced the expression of ICAM-1 and VCAM-1 in contrast to palmitic acid. Furthermore, in the presence of linoleic acid a tendency of diminished adhesion of monocytes is seen.The results indicate that a reduced expression of cell adhesion molecules may be relevant to the antiatherogenic effects of linoleic acid. This is in contrast to the properties of palmitic acid.