IGF—Ⅱ在肝硬变和肝癌组织的表达及其与LCD的相关性研究

目的：探讨ＩＧＦ－Ⅱ在肝硬变及肝细胞癌（ＨＣＣ）发生发展中的作用及其与不典型增生肝细胞（ＬＣＤ）的关系。方法：运用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对５７例肝硬变,２９例ＨＣＣ癌旁组织及２１例ＨＣＣ进行实验研究。结果：ＬＣＤ在肝硬变及癌旁肝组织的发生率分别为５６．１％（３２／５７例）及６５．５％（１９／２９例）。ＩＧＦ－Ⅱ在５７例肝硬变组织、２９例癌旁肝组织及２１例ＨＣＣ中的阳性率分别为７１．９％（４１／５７例     

肝细胞癌患者中p53基因的突变研究

为了解肝细胞癌（ＨＣＣ）中ｐ５３基因的突变情况，收集８６例ＨＣＣ手术切除标本，采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ／ＳＳＣＰ）、聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）和ＤＮＡ序列分析，研究了ｐ５３基因的突变情况。８６例ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变率为３６％，其中，密码子２４９的突变率为３３．７％，１例ＳＳＣＰ和ＲＦＬＰ均提示密码子２４９存在突变者经ＤＮＡ序列分析显示密码子２４９的第三个碱基发生了ＡＧＧ／ＡｒｇＡＧＴ／Ｓｅｒ突变。以上结果提示，ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变主要以点突变为主，主要发生在密码子２４９，其突变率、突变谱和突变方式与启东等ＨＣＣ高度流行区相似     

人肝细胞癌中PTEN基因的DNA杂交及突变分析

目的　研究人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因缺失及第５、第８外显子突变。方法　应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因限制性片段长度多态性和纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。应用聚合酶链单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）检查ＰＴＥＮ基因的第５、第８外显子的突变。结果　Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果显示,所有３４例肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未见限制性片段长度多态性或纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。ＰＣＲＳＳＣＰ检测发现,２例肝细胞癌第５外显子ＰＣＲ产物均显示１条额外电泳迁移带,突变率为５．９％（２／３４）。另２例肝细胞癌第８外显子ＰＣＲ产物呈现额外电泳迁移带,突变率为５．９％（２／３４）,合计突变率为１１．８％（４／３４）。结论　所检３４例人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未见纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失,但存在突变。     

肝细胞癌患者中p53基因的突变研究

为了解肝细胞癌（ＨＣＣ）中ｐ５３基因的突变情况，收集８６例ＨＣＣ手术切除术标本，采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ／ＳＳＣＰ），聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ／ＲＦＬＰ）和ＤＮＡ序列分析，研究了ｐ５３基因的突变情况，８６例ＨＣＣ中，ｐ５３基因的突变率为３６％，其中，密码子２４９的突变率为３３．７％，１例ＳＳＣＰ和ＲＦＬＰ均提示密码子２４９存在突变者经ＤＮＡ序列分析显示密码子２４９     

乙型肝炎病毒基因转基因鼠的肝脏肿瘤癌基因及生长因子

研究了３５例乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）表面抗原基因转基因鼠发生的肝细胞癌和１０例癌旁肝组织Ｃ－ｍｙｃ、Ｈ－ｒａｓ、ＴＧＦ－α、肝生长因子（ＨＧＦ）、Ｃ－ｍｅｔ及胰岛素样生长因子－Ⅱ（ＩＧＦ－Ⅱ）基因结构或表达的异常，发现５１％的肝癌组织及１０％的癌旁组织有ＩＧＦ－Ⅱ的表达，而其它基因无结构或表达的异常。探讨了乙型肝炎病毒表面抗原肝细胞表达诱发肝癌的分子病理基础。     

原发性肝细胞癌患者体内乙型肝炎病毒DNA检测

用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）对３５例乙型肝炎免疫指标全阴性的原发性肝细胞癌患者血清、外周血单核细胞及肝活检标本进行了乙型肝炎病毒ＤＮＡ检测。结果：血清、外周血单核细胞及肝活检标本中乙型肝炎病毒ＤＮＡ的阳性率分别为３４．２９％、６０．００％、６８．５７％。提示：乙型肝炎病毒ＤＮＡ在乙型肝炎免疫指标全阴的原发性肝细胞癌患者体内仍有相当高的分布；乙型肝炎病毒对原发性肝细胞癌有高致病性。     

早发冠心病患者甲烯四氢叶酸还原酶基因的C677T多态性研究

目的探讨同型半胱氨酸代谢过程的关键酶之一——甲烯四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）基因Ｃ６７７Ｔ多态性与早发冠心病发病的关系。方法采用限制性内切酶片段长度多态性方法检测患者的ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ位碱基突变。结果６７例患者中Ｔ纯合基因型占３４．３％（２３／６７）、杂合基因型占４３．３％（２９／６７）,Ｃ纯合基因型占２２．４％（１５／６７）;Ｔ等位基因频率为５５．９％（７５／１３４）,Ｃ等位基因频率为４４．１％（５９／１３４）;与正常对照组比较,差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。结论ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ点突变可能是中国人早发冠心病发病的危险因素之一。     

TGF-βⅡR在大肠癌组织中的表达及临床意义

（１）目的 探讨转化生长因子βⅡ型受体（ＴＧＦ－βⅡＲ）表达与大肠癌生物学行为的关系。（２）方法 应用免疫组化技术检测５６例大肠癌术后标本及癌旁组织中ＴＧＦ－βⅡＲ表达情况。（３）结果 癌旁组织中ＴＧＦ－βⅡＲ表达阳性率为９６．６４％,原发癌组织表达阳性率为４４．６４％,差异有显著性（ｘ＾２＝３０．７８,Ｐ〈０．０１）;无区域淋巴结转移者阳性率为７２．００％,有区域淋巴结转移者阳性率为２２．５８％     

应用PCR检测恶性淋巴瘤骨髓浸润及其临床意义

目的：检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法：以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＲγ基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果：（１）３４份ＭＬ患者骨髓标本ＩＢＭ检出率为７０．６％（２４／３４），明显高于形态学检测方法（３８．６％，Ｐ＜０．０５）。（２）１９例形态学检测正常的非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓标本，ＩＢＭ阳性率５７．９％（１１／１９），其中８例Ｂ－ＮＨＬ（８／１４）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排；５例同时还检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，２例Ｔ－ＮＨＬ（２／３）检测到克隆性ＴＣＲγ基因重排，无克隆性ＩｇＨ基因重排；２例免疫分型不明确ＮＨＬ患老中１例（１／２）检测到克隆性ＩｇＨ基因重排，无克隆性ＴＣＲ，基因重排。２例霍奇金病（ＨＤ）和１０例非淋巴系肿瘤骨髓ＩＢＭ均阴性。（３）Ⅲ，Ⅳ期ＮＨＬ患者ＩＢＭ检出率显著高于ＩＩ期（ｐ＜０．０１），初诊未治及复发患者也显著高于部分或完全缓解患者（Ｐ＜０．０１）。（４）ＩＢＭ阳性组ＮＨＬ２年死亡率５４．５％（６／１１），明显高于ＩＢＭ阴性（ｐ＜０．０５）。结论：ＰＣＲ方法检测ＩＢＭ有助于估     

肝硬变及肝癌癌旁肝组织中小多角肝细胞性质的免疫…

应用免疫组织化学的方法对６０例ＨＣＣ，癌旁肝组织和４７例肝硬变组织中ＨＢｓＡｇ和ＩＧＦ－Ⅱ表达进行实验观察，以探讨小多角肝细胞（ＳＰＬＣ）的性质。结果显示，在癌旁肝和肝硬变的ＳＰＬＣ中ＨＢｘＡｇ和ＩＧＦ－Ⅱ的阳性表达率分别为６９．１４％和６６．６７％，其中ＨＢｘＡｇ阳性的ＳＰＬＣ中ＩＧＦ－Ⅱ阳性率为８２．１４％，而ＨＢｘＡｇ阴性的ＳＰＬＣ中ＩＧＦ－Ⅱ阳性率为３２．００％，ＩＧＦ－Ⅱ的ＨＢｘＡｇ了性     

结直肠癌组织Ⅱ型β转化生长因子受体基因突变的研究

目的 探讨散发性结直有肠癌组织中β转化生长因子Ⅱ型受体基因的突变情况。方法 组织ＤＮＡ提取后进行ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－银染分析,经测序确定点突变类型。结果 在ＴＧＦ－βＲⅡ的ＤＮＡ７０９－７１８位点突变率为１０％,表现为１Ａ的缺失突变。突变率在近端明显高于远端。结论 在散发性结直肠癌中ＴＧＦ－βＲⅡ基因具有较低的突变率;近端结肠癌尤其是回盲部癌有较高的突变率。     

门电路心血池显像结合超声心动图评估原发性高血压病人的左室舒张功能

应用９９ｍＴｃ－ＲＢＣ门电路心血池显像（ＧＢＰＩ）结合超声心动图（ＵＣＧ）对１００例单纯原发性高血压（Ⅱ期）病人和４２例正常人进行左室舒张功能测定，发现：（１）高血压组的ＧＢＰＩ的最大充盈率（ＭＦＲ）与正常组比较显著降低（Ｐ＜０．０１）；（２）ＵＣＧ的Ａ／Ｅ比值，两组比较无显著差异，Ａ／Ｅ与ＬＶＭＩ或其他指标均无相关；（３）高血压组的ＭＦＲ低于正常均值（２．４１ＥＤＶ／Ｓ）的占８６％，其中ＬＶＭＩ高于正常值（男１００．２ｇ／ｍ２，女８６ｇ／ｍ２）的占８９．０％（７７／８６）；高血压组Ａ／Ｅ比值高于正常值（０．６９）的占６４％，其中ＬＶＭＩ高于正常值的占６２．５％。用ＧＢＰＩ的指标ＭＦＲ结合ＵＣＧ的指标Ａ／Ｅ比值来检测左室舒张功能，对原发性高血压的左室舒张功能的评估，有较大的实用价值，尤以ＭＦＲ指标更为可靠。     

人肾癌组织EGFR和TGF—α的分布及其意义

对肾癌组织的表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）和转化生长因子α（ＴＧＦ－α）的表达及ＥＧＦＲ基因的转录进行研究,方法采用ＬＳＡＢ免疫组化和Ｄｉｇｏｘｉｎ标记原位杂交法,结果显示：４６例肾癌组织ＥＧＦＲ和ＴＧＦ－α的表在阳性率明显高于３８例癌旁对照正常肾脏组织,ＥＧＦＲ为５４．３％和２１．０％,ＴＧＦ－α为３９．１％和１３．２％,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）;部分癌组织ＥＧＦＲ和ＴＧＦ－α同时表达;ＥＧＦ     

肝炎患者TTV感染情况及部分基因序列分析的研究

目的 新发现的ＤＮＡ病毒（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｌ ｖｉｒｕｓ简称ＴＴＶ）被进行了ＴＴＶ ＤＮＡ的检测。方法 利用巢式ＰＣＲ方法扩增ＴＴＶ基因,并对两例ＴＴＶ分离株部分基因进行克隆和序列分析。结果：１０８中有２４例ＴＴＶ ＤＮＡ阳性,阳性率为２２．２％;在非甲～非庚型为中ＴＴＶ的阳性率为３４．６％（９／２６）;甲型肝炎病例中ＴＴＶ ＤＮＡ的阳性率为９．５％（１／１１）;乙型肝     

转化生长因子βⅡ型受体在乳腺癌中的表达

目的 研究转化生长因子βⅡ型受体（ＴＧＦ－βＲⅡ）表达与乳腺癌生物学行为和预后的关系。方法 应用免疫组织化学ＳＰ方法检测了１０２例乳腺癌手术标记中ＴＧＦ－βＲⅡ的表达情况。结果 乳腺癌原发灶ＴＧＦ－βＲⅡ表达阳性率为２５．４９％，其中无区域淋巴结转移者阳性率为４４．７４％，有转移者阳性率为１４．０６％（Ｐ〈０．０１），ＴＧＦ－βＲⅡ表达水平与乳腺癌大小和ＴＮＭ分期进展呈负相关（Ｐ〈０．０１，Ｐ〈０     

血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及其与腋窝淋巴结转移的关系

目的：探讨血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）和微血管密度（ＭＶＤ）与乳腺浸润性导管癌腋窝淋巴结转移的关系。方法：采用ＬＳＡＢ法对６５例浸润性导管癌术后根治标本,进行ＶＥＧＦ的表达和微血管密度的测定。结果：６５例乳腺癌的 ＭＶＤ为（４７．６±２２．４）个,ＶＥＧＦ总阳性率为 ８０．００％;ＶＥＧＦ、ＭＶＤ与淋巴结转移有关,在腋窝淋巴结转移的乳腺癌组织中,ＶＥＧＦ的阳性率 ８８．８９％（３２／３６）,ＭＶＤ（５６．６±２０．５）,均明显高于无腋窝淋巴结转移者ＶＥＧＦ的阳性率 ６８．９６％（２０／２９）,ＭＶＤ（３１．３±１８．９）．差异有显著性（Ｐ＜０．０５）;ＶＥＧＦ和 ＭＶＤ在乳腺浸润性导管癌中的表达具有显著的正相关（ｒ＝８.２１３,Ｐ＜０．０５）。结论：ＶＥＧＦ与乳腺癌血管生成密切相关;ＶＥＧＦ表达的增高及 ＭＶＤ的增加对乳腺癌腋窝淋巴结转移可能有促进作用。     

IGF-1及TNF-α对大鼠成骨肉瘤细胞增殖的调节作用

目的：通过对大鼠成骨肉瘤ＵＭＲ１０６细胞增殖状态及细胞周期变化的观察，探讨胰岛素样生长因子 １（ＩＧＦ １）及肿瘤坏死因子 α（ＴＮＦ α）对该细胞增殖调节作用的机理。方法：将ＵＭＲ１０６细胞培养于含１０％小牛血清的ＭＥＭ培养基中。细胞长满后换无血清培养７２ｈ，然后分别用生理剂量的ＩＧＦ １和ＴＮＦ α刺激细胞１２ｈ，应用３Ｈ ＴｄＲ参入、磺基罗丹明染色法和流式细胞技术对细胞增殖状态及细胞周期进行定量测定。结果：ＩＧＦ １有明显促细胞ＤＮＡ合成作用，并使Ｓ期细胞所占比例明显增加；而ＴＮＦ α则具有相反的作用。定量测定细胞增殖也显示ＵＭＲ１０６受ＩＧＦ １的正性调节而受ＴＮＦ α的负性调节。结论：ＩＧＦ １和ＴＮＦ α对ＵＭＲ１０６细胞增殖的调节作用与该细胞ＤＮＡ复制水平调节有关。     

肺癌组织表皮生长因子及其受体的检测

本文应用免疫组化ＡＢＣ法检测了５８例肺癌和１５例正常肺组织中表皮生长因子（ＥＧＦ）与表皮生长因子受体（ＥＧ－Ｒ）的表达情况。正常片组织ＥＧＦ阳性率２０％（３／１５），ＥＧＦ－Ｒ１阳性率１３％（２／１５），主要着色于支气管上皮刷状缘，均为弱阳性。肺癌中ＥＧＦ主要着色于胞浆区，ＥＧＦ－Ｒ主要分布于胞膜和胞浆区，ＥＧＦ阳性率５５．２％（３２／５８），ＥＧＦ－Ｒ阳性率５１．７％（３０／５８），明显高于正常对照组织（Ｐ＜０．０５），有淋巴结转移或直径大于５ｃｍ的肺癌中ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ阳性率明显高于淋转阴性或直径小于５ｃｍ者；高分化癌中ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ阳性率也较高。ＥＧＦ和ＥＧＦ－Ｒ表达与年龄、性别、吸烟史无明显相关。本文结果提示部分肺癌可过度表达ＥＧＦ或ＥＧＦ－Ｒ　ＥＧＦ／ＥＧＦ－Ｒ自分泌可能在肺癌生长中起一定的促进作用。     

胰岛素样生长因子结合蛋白－3基因在乳腺癌中的表达

我们应用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法、组织原位分子杂交、细胞生长曲线和ＤＮＡ合成等技术，检测９例人类乳腺癌细胞株和２０例乳腺癌标本中胰岛素样生长因子结合蛋白－３（ＩＧＦＢＰ－３）基因的蛋白质和ｍＲＮＡ水平的表达，研究其生物学作用。结果：①在乳腺癌细胞株中，雌激素受体阴性（ＥＲ－）者，分泌大量的ＩＧＦＢＰ－３，而雌激素受体阳性（ＥＲ＋）者不分泌ＩＧＦＢＰ－３；②在乳腺癌病人标本中，ＥＲ（－）者ＩＧＦＢＰ－３ｍＲＮＡ的定量表达明显高于ＥＲ（＋）者（Ｐ＜０．００５）；③ＩＧＦＢＰ－３能明显增强乳腺癌ＭＣＦ－７细胞株胰岛素样生长因子－Ⅰ（ＩＧＦ－Ⅰ）所致的细胞生长和ＤＮＡ合成作用。结论：我们认为ＩＧＦＢＰ－３基因蛋白质和ｍＲＮＡ的表达水平有可能成为乳腺癌患者的预后指标。     

树鼩实验性肝癌过程中GGT酶阳性肝细胞灶、IGF-Ⅱ及HBxAg异常表达

动态观察ＨＢＶ与ＡＦＢ１诱发树肝细胞癌（ＨＣＣ）病变过程中肝癌前病变γ－谷氨酰转肽酶阳性肝细胞灶（ＧＧＴ阳性灶）、胰岛素样生长因子Ⅱ（ⅠＧＦ－Ⅱ）发生情况，探讨ＨＣＣ发生的可能机制。实验动物分４组，Ａ组：ＨＢＶ阳性和摄入ＡＦＢ１；Ｂ组：ＨＢＶ阳性组；Ｃ组：摄入ＡＦＢ１；Ｄ组：空白对照。组织化学及免疫组织化学检测肝活检组织。结果：（１）肝癌前病变ＧＧＴ阳性灶在各实验组不仅灶数量，而且灶大小均明显高于空白组（Ｐ＜０．０５），且双诱癌因素组（Ａ）灶数量明显大于单诱癌因素组（Ｂ、Ｃ）（Ｐ＜０．０５）；（２）实验第１５周，即有ＩＧＦ－Ⅱ阳性表达，在第４５周阳性率明显高于第７５周（Ｐ＜０．０５）；（３）ＨＢＶ感染组（Ａ，Ｂ）动物肝组织中ＨＢｓＡｇ阳性率高达９２．１％，首次在树肝组织中检出ＨＢｘＡｇ，且阳性率达８６．５％。提示：ＨＢＶ与ＡＦＢ１协同致树ＨＣＣ；ＨＣＣ发生早期就有ⅠＧＦ－Ⅱ异常表达。