胰岛素样生长因子Ⅱ与肝细胞癌

人胰岛素样生长因子Ⅱ（insulin-like growth factor Ⅱ,IGF-Ⅱ）是20世纪70年代末被发现并成功分离的一种多肽,一级结构显示它与人胰岛素原（proinsulin）有高度同源性,它与IGF-Ⅰ,胰岛素样生长因子Ⅰ受体（IGF-ⅠR）,胰岛素样生长因子Ⅱ受体（IGF-ⅡR）及至少6种IGF结合蛋白（IGFBPs）一起,形成完整的IGFs轴。近年的研究发现,IGF-Ⅱ与肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的发生密切相关。     

胰岛素样生长因子家族成员与肝细胞癌变关系

肝细胞癌（肝癌，HCC）是由病毒、化学致癌物等多病因作用，因癌基因或癌相关基因激活、抗癌基因失活或胚胎期某些酶基因重新复活等诸多因素引起肝细胞生长失控而致癌变，经启动、促进、演变多阶段的发病过程，其中基因的调控表达、多种生长因子的活性等均与肝癌的发生发展密切相关。胰岛素样生长因子（Insulin—like growth factors，IGFs）家族在肝癌发生发展过程中异常表达并具调节作用。本文对IGF轴的结构、分布、生物学活性、信号传导及在癌变过程中表达机制等的新进展进行综述。     

胰岛素样生长因子Ⅱ基因与肝癌发病的关系

胰岛素样生长因子Ⅱ（ＩｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒⅡ,ＩＧＦⅡ）是一种由６７个氨基酸残基组成的多肽,在结构和功能上与胰岛素及ＩＧＦⅠ相似,可促进细胞的增殖和生长,在人体的分化和发育过程中起重要作用。ＩＧＦⅡ基因的异常表达与多种肿...     

HepG2人肝癌细胞胰岛素样生长因子1受体定量分析

目的对人肝癌HepG2细胞上的胰岛素样生长因子1受体(type 1 receptor of insulin-like growth factor, IGF1R)进行定量分析.方法常规培养HepG2细胞,以Iodogen法 131I标记抗IGF1R单克隆抗体1H7,Sephadex G-50纯化标记反应液, 131I-1H7和非标记1H7与HepG2细胞表面的IGF1R竞争结合,Scatchard法分析HepG2细胞上IGF1R的平均表达量.结果每孔HepG2细胞(2.0×105)表面IGF1R的Bmax为6.746×10-12 mol/L,平均单个HepG2细胞IGF1R的密度为2.03×104/细胞.结论本实验条件下制备的 131I -1H7满足作为IGF1R特异性配体的要求,碘标记1H7对其与IGF1R结合活性无明显影响,HepG2细胞表达高密度与高亲和力的IGF1R.     

p21、IGF-Ⅱ在肝细胞癌和肝硬化组织中的表达水平及其与肝细胞不典型增生的关系

目的：探讨p21、胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF—Ⅱ)在肝硬化、肝细胞癌组织中表达的意义及其与肝细胞不典型增生(LCD)的关系。方法：用免疫组化S—P法检测单纯肝硬化、癌旁肝硬化及肝细胞癌(HCC)p21、IGF—Ⅱ表达情况：结果：癌旁肝硬化、单纯肝硬化、癌组织p21的阳性表达率分别为92．86％、68％、54．55％；癌旁肝硬化、单纯肝硬化、癌组织IGF—Ⅱ的阳性表达率分别为75％、74％、36．36％。肝硬化与HCC之间差异有统计学意义(P＜0．05)；IGF-Ⅱ与p21阳性表达呈正相关关系；HBsAg的阳性或伴LCD改变的肝硬化，p21、IGF—Ⅱ阳性率均高于HBsAg阴性或不伴有LCD改变的肝硬化(P＜0．05)。结论：①在肝细胞癌变演化过程中p21、IGF—Ⅱ可能发挥协同作用；②LCD是一群具有肿瘤增殖潜能的癌前细胞群，尤其有p21、IG7—Ⅱ共同过度表达者，有发生HCC的高度危险。     

胰岛素样生长因子Ⅰ型受体基因对肝细胞癌生物学行为的影响

目的　研究胰岛素样生长因子Ⅰ型受体 (insulin likegrowthfactorⅠreceptor,IGF ⅠR)对肝细胞癌 (hepatocellularcarcinoma ,HCC)生物学行为的影响。方法　应用免疫组化SP法检测肝细胞癌、癌旁和正常肝组织IGF ⅠR的表达。构建IGF ⅠR正、反义基因真核表达载体 ,经脂质体介导转入SMMC 772 1肝癌细胞株 ,观测IGF ⅠR正、反义基因对肝癌细胞生物学行为的影响。结果　 (1)在肝癌组织中IGF ⅠR呈过度表达 (90 .3% ) ,以膜、胞浆混合型表达为主 ,显著高于正常肝组织。肝癌多发结节组高于单发结节组 (P <0 .0 5 )。 (2 )IGF ⅠR反义基因能明显下调内源性IGF ⅠR的表达 ,与 772 1细胞、正义细胞有显著性差异 (P <0 .0 1)。 (3)电镜下反义细胞内可见微腺腔、灶性坏死、髓鞘样结构。 (4 )反义细胞G0 /G1期明显增加 (6 3.9% ) ,S期减少 (19.3% ) ,细胞凋亡增加 (5 .89% ) ,与 772 1细胞、正义细胞有显著性差异 (P <0 .0 1)。 (5 )反义细胞不能在软琼脂中生长。结论　 (1)IGF ⅠR高表达与肝癌的发生及侵袭性行为有密切关系。 (2 )IGF ⅠR反义基因下调 772 1细胞内源性IGF ⅠR的表达 ,对肝癌细胞的增殖有明显抑制作用     

人胰岛素样生长因子ⅡP3启动子调控融合基因质粒构建的研究

目的构建人胰岛素样生长因子Ⅱ基因(IGF-Ⅱ)P3启动子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因穿梭质粒,观察其在肝癌细胞株HepG2及宫颈癌细胞株HeLa细胞中的表达及其作用。方法应用基因重组技术,构建IGF-ⅡP3启动子驱动EGFP与HSV-tk融合表达穿梭质粒载体,脂质体转染技术将其转入HepG2及HeLa中,48h后荧光显微镜下观察荧光表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HSV-tk和EGFP的mRNA表达,四甲基偶氮唑蓝实验检测转染融合蛋白载体后给予不同浓度的更昔洛韦对HepG2及HeLa细胞毒作用。结果酶切鉴定和测序分析证实重组质粒构建成功;转染此穿梭质粒的细胞中仅有HepG2细胞检测到绿色荧光;RT-PCR检测到HSV-tk和EGFP的mRNA仅在HepG2细胞中表达;更昔洛韦(GCV)对转染了携此质粒载体的HepG2细胞有选择性细胞毒作用,1、10、和100μg/ml3个浓度GCV作用72h后(实验均重复3次),对转染细胞的抑制率分别为19.8%±1.3%、36.2%±2.0%和48.7%±1.9%,与细胞病毒转染HepG2组(24.1%±1.9%、45.1%±1.7%、69.4%±3.6%)和此质粒转染HeLa细胞组(25.1%±1.6%、49.3%±1.1%、72.2%±2.9%)相比,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论成功构建IGF-ⅡP3启动子驱动携带HSV-HSV-tk与EGFP融合基因穿梭质粒载体,转染后对人肝癌细胞系HepG2有选择性杀伤作用,为进一步靶向性肝癌腺病毒基因治疗奠定基础。     

人肝癌HepG2细胞胰岛素样生长因子1受体定量分析

目的定量分析人肝癌HepG2细胞IGF1R的表达量.方法 Iodogen法131I标记1H7,求出抗体的亲和常数K值及最大结合容量Bmax,得到IGF1R在HepG2细胞的密度.结果 IGF1R在HepG2细胞的密度为2.03×104/细胞.结论人肝癌HepG2细胞表达有较多的IGF1R,可用于IGF1R相关的实验研究.     

胰岛素样生长因子Ⅱ及其受体在肝组织中的表达意义

目的：研究胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF－Ⅱ）及其受体（IGFR）在不同肝组织中的表达及与肝癌病理学分级及乙肝病毒感染的关系。方法：采用免疫组织化学方法，检测10正常肝标本，28例肝血管瘤标本、13例肝硬化标本和42例原发性肝癌中的IGF－Ⅱ及IGFR的表达水平，分析其阳性率及与乙型肝炎病毒（HBV）感染和Edmondson分级的关系。结论：正常肝、肝硬化、肝血管瘤和肝癌中IGF－Ⅱ阳性率分别为10％，76．9％，46．4％，76．2％，IGFR阳性率分别为20％，92．3％，64．2％，61．9％，与正常肝组织相比，各阳性率有显著性差异（P＜0．05），对于肝癌而言，IGF－Ⅱ及IGFR的表达在HBV阳性与阴性之间有显著差异（P＜0．05）；在Edmondson分级Ⅰ-Ⅱ与Ⅲ-Ⅳ之间有显著差异（P＜0．05）。结论：IGF－Ⅱ和IGFR的表达可能参与了肝硬化及肝脏肿瘤的发生。在肝癌中，其表达与HBV感染及肝癌Edmondson分级亦有一定关系。     

人肝癌胰岛素样生长因子Ⅱ基因P2,P4启动子克隆及序列分析

目的克隆人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P2,P4启动子并进行序列分析,以明确肝癌组织中IGF-Ⅱ启动子碱基序列有无改变及其与转录调控的关系,为后续研究奠定基础。方法根据GenBank数据库提供的IGF-Ⅱ基因全序列及有关文献,应用巢式PCR扩增L-02人胎肝细胞系(正常对照)及8例肝癌组织的IGF-ⅡP2,P4启动子,并采用TOPO TA Cloning kit将PCR产物克隆入pCR2.1-TOPO T载体。目的DNA片段和阳性重组子分别通过琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定。结果①L-02细胞及8例肝癌组织P2,P4启动子均扩增成功,长度分别为684 bp及1 246 bp;②8例肝癌组织P2,P4启动子碱基序列与L-02相应的DNA序列完全相同,未见突变、缺失等改变,经与GenBank数据库比较,结果完全一致。结论①成功克隆了IGF-ⅡP2,P4启动子;②本组肝癌组织中IGF-ⅡP2,P4启动子序列稳定,未见突变、缺失等改变,可能与IGF-Ⅱ异常表达的转录调控机制无关。     

胃癌中转化生长因子-βRⅡ、胰岛素样生长因子-ⅡR、Bax基因突变与微卫星不稳定性相关性研究

目的：检测胃癌组织中转化生长因子-βⅡ型受体(TGF-βRⅡ)、胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(IGV-ⅡR)和Bax基因突变与微卫星不稳定性(MSI)发生情况，探讨其相关性以及MSI在胃癌发生发展中可能的作用机制。方法：胃镜下取36例胃癌标本，酚与氯仿法抽提基因组DNA，银染PCR-SSCP方法同时检测目的位点。结果：胃癌组织中TGF-βRⅡ、IGF-HR和Bax基因发生突变分别有7例、6例和6例，MSI发生率达58．3％，3种基因突变均见于MSI阳性的胃癌，尤其是MSI-H型胃癌。结论：MSI可通过引起靶基因突变，特别是部分抑癌基因突变，促进了部分胃癌的发生发展；     

胰岛素样生长因子Ⅱ在肝癌病因方面的研究进展

1　胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF Ⅱ )的生物学特性IGF Ⅱ是单链多肽生长因子 ,与胰岛素前体结构极为相似 ,也含有 3个二硫键 ,有 67个氨基酸组成 ,相对分子量 70 5× 10 3 。人类IGF Ⅱ基因位于染色体HP15区 ,长 30kb ,含有 9个外显子 ,4个启动子 ,可转录成 3～ 4种IGF ⅡmRNA。其结构可分为两类 :在胚胎发育期出现的为胚胎型IGF ⅡmR NA ,是在启动子P2 、P3 、P4 作用下形成的 (以后二者为主 ) ,这种IGF ⅡmRNA在出生后消失 ,代之以由P1启动子作用形成的成年型IGF ⅡmRNA。上述各种IGF ⅡmRNA虽长短不同 ,但差别只在非翻译…     

IGF─Ⅱ受体（IGF─ⅡR）反义基因对肝癌细胞癌基因转录及生物学行为的影响

ＩＧＦ┐Ⅱ受体（ＩＧＦ┐ⅡＲ）反义基因对肝癌细胞癌基因转录及生物学行为的影响ＥｆｅｃｔｏｎｏｎｃｏｇｅｎｅｓｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｂｅｈａｖｉｏｒｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｍａｃｅｌｓｂｙＩＧＦ┐Ⅱｒｅｃｅｐｔｏｒａｎｔ...     

胰岛素样生长因子Ⅱ受体在病毒性心肌炎小鼠心肌中的表达

目的：观察胰岛素样生长因子Ⅱ受体（ IGF－ⅡR）在病毒性心肌炎（ VMC）小鼠心肌组织中的动态表达并探讨其与心肌损伤的关系。方法随机将120只雄性4周龄BALB／c小鼠分为两组：VMC组80只,对照组40只。 VMC组腹腔接种含柯萨奇B3病毒的DMEM液建立VMC模型,对照组接种等量不含病毒的DMEM液。于感染后第3、7、14、28天每组各取10只收集心脏标本,HE染色观察心肌病理改变,免疫组织化学技术测定心肌IGF－ⅡR蛋白表达水平,RT－PCR技术测定心肌IGF－ⅡR mRNA的相对表达量;分析IGF－ⅡR的动态表达水平及其与心肌病变程度的相关性。结果 VMC组小鼠感染病毒后第3天心肌组织中的IGF－ⅡR蛋白表达开始增多,第7天达到高峰。 VMC组小鼠心肌组织中IGF－ⅡR的蛋白表达水平在各个时间点均高于对照组,差异有统计学意义（P＜0．05）,且IGF－ⅡR蛋白表达水平与心肌病理学评分呈正相关。结论 IGF－ⅡR的表达上调可能在VMC小鼠心肌损伤中起一定作用。     

肝细胞癌相关外泌体中微小核糖核酸与肝癌腹腔镜根治术后预后的研究进展

肝细胞癌是临床上发病率、死亡率均较高的一种原发性肝癌,其早期症状不明显,预后较差。因此,需要一种有效的方法在疾病早期进行诊断,同时在监测与治疗疾病中发挥作用。随着医学科技的发展,大量研究发现外泌体微小核糖核酸(miRNAs)可为疾病诊断与治疗提供新思路,肝细胞癌相关外泌体中miRNAs可影响相关癌细胞的微环境、转移、增殖、侵袭等。因此外泌体中miRNAs在肝癌诊断、治疗以及预后中发挥着重要作用。文章以肝细胞癌为例,对外泌体、外泌体miRNAs以及在肝细胞癌发生、发展、诊治进行综述,探讨肝细胞癌相关外泌体中miRNAs与肝癌腹腔镜根治术后预后的研究进展。     

维生素K拮抗剂Ⅱ诱导蛋白在肝细胞癌中的应用进展

高危人群血清肿瘤标记物的检测对于肝细胞癌的早期发现意义重大。研究表明维生素K缺乏或拮抗剂Ⅱ诱导蛋白(PIVKA-Ⅱ)在肝细胞癌的早期诊断、鉴别诊断中,其敏感性、特异度明显优于传统指标血清甲胎蛋白(AFP),联合检测诊断价值更大。手术切除术、肝动脉化疗栓塞术(TACE)或射频消融术(RFA)术后随访动态监测可以有效预测预后。     

新型生物学标志物外泌体mircoRNAs在肝细胞癌中的研究进展

肝细胞癌( hepatocellular carcinoma , HCC )是最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年新发HCC患者约78.3万例,我国新发HCC患者及死亡例数占全球的50％左右[ 1 ].目前缺乏早期诊断HCC的特异性生物标志物.     

胰岛素样生长因子1受体在肌损伤组织肌卫星细胞的表达

目的:探讨胰岛素样生长因子1受体(Insulin like growth factor 1 receptor,IGF1R)在正常和注射心脏毒素后,致肌损伤的肌肉组织中具有再生能力的肌卫星细胞表达情况;为进一步研究某些肌肉变性疾病的分子学发病机制和治疗方法提供参考依据.方法:取C57雄性小鼠12只,随机分为6组,1～6组...