螺旋藻多糖对肝癌细胞BEL741M增殖的影响

目的 研究螺旋藻多糖对对肝癌细胞增殖的影响,以探讨其抗肝癌机制.方法 体外培养肝癌细胞株BELT404,用MTT法检测螺旋藻多糖作用于BEL7404 24 h后的细胞增殖情况;流式细胞术(FCM)检测对细胞周期的影响和凋亡率.结果 MTT法测定结果表明,螺旋藻多糖对BELT404增殖有抑制作用;FCM检测表明,螺旋藻多糖引起增殖中的BEL7404细胞发生G1期阻滞.结论螺旋藻多糖能有效地抑制BEL7404细胞增殖,提示阻滞细胞周期、抑制细胞增殖可能是螺旋藻多糖治疗肝癌的一个机制.     

螺旋藻多糖对肝癌细胞增殖及Caspase-3表达的影响

目的：研究螺旋藻多糖（PSP）对肝癌细胞增殖及Caspase-3表达的影响,以探讨其抗肝癌的作用机制。方法：体外培养肝癌细胞BEL7404,用MTT法检测螺旋藻多糖作用于肝癌细胞BEL7404后的细胞增殖情况。采用流式细胞术检测Caspase-3的表达。结果：螺旋藻多糖对肝癌细胞BEL7404增殖有抑制作用;螺旋藻多糖作用于肝癌细胞BEL7404,随着螺旋藻多糖浓度的增加,Caspase-3表达明显增加。结论：螺旋藻多糖能有效地抑制肝癌BEL7404的细胞增殖,抑制肝癌细胞增殖可能与螺旋藻多糖使细胞Caspase-3的活化增强有关。     

螺旋藻多糖诱导BEL7404细胞凋亡的研究

目的：研究螺旋藻多糖对肝癌细胞凋亡的影响,以探讨其抗肝癌的机制。方法：以不同浓度（300、500、1000mg/L）的螺旋藻多糖处理BEL7404细胞,用倒置显微镜观察BEL7404细胞的形态变化;并以流式细胞仪测定BEL7404细胞的凋亡情况;免疫细胞化学法检测螺旋藻多糖处理BEL7404细胞后凋亡相关蛋白bax、bcl-2、Apaf-1表达的变化。结果：在形态学观察试验中,螺旋藻多糖使BEL7404细胞24h后出现凋亡,其凋亡率随着浓度的增加而增加;螺旋藻多糖也可使凋亡相关蛋白bcl-2表达降低,bax、Apaf-1蛋白表达增加。结论：螺旋藻多糖具有诱导肿瘤细胞凋亡作用,其作用机制可能是通过下调bcl-2蛋白表达,上调bax、Apaf-1表达来诱导细胞凋亡。     

白藜芦醇对肝癌Bel-7404细胞增殖、凋亡、侵袭影响机制研究

目的:观察白藜芦醇对肝癌Bel-7404细胞增殖、凋亡、侵袭的影响,并研究其内在分子机制。方法:采用MTT法检测白藜芦醇对Bel-7404细胞增殖的影响;流式细胞术检测白藜芦醇对Bel-7404细胞凋亡的影响;Transwell法检测白藜芦醇对Bel-7404细胞侵袭的影响。结果:白藜芦醇可以抑制Bel-7404细胞增殖,也可以诱导Bel-7404细胞凋亡,均呈浓度依赖性,与下调Procaspase3和PARP蛋白表达有关。白藜芦醇可以抑制Bel-7404细胞侵袭性,呈浓度依赖性,与下调MMP-9、VEGF蛋白表达有关。结论:白藜芦醇可以抑制肝癌Bel-7404细胞增殖,通过剪切Procaspase3、PARP蛋白而诱导凋亡,通过下调MMP-9和VEGF蛋白表达水平而抑制Bel-7404细胞侵袭性。     

蝎毒对人肝癌细胞Bel-7404凋亡及端粒酶逆转录酶基因的作用

目的观察蝎毒对人肝癌Bel-7404细胞增殖的影响及对端粒酶逆转录酶基因(hTERTmRNA)活性的影响。方法以人肝癌细胞株Bel-7404为研究对象,以不同浓度的蝎毒处理体外培养的人肝癌Bel-7404细胞72 h,以噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制,采用RT-PCR法检测细胞hTERTmRNA的表达情况。结果MTT结果显示蝎毒抑制Bel-7404细胞增殖、诱导细胞凋亡且抑制有浓度依赖性。同时,蝎毒可抑制hTERTmRNA的表达。结论抑制端粒酶逆转录酶基因(hTERTmRNA)表达而抑制端粒酶的活性、诱导细胞凋亡,可能是蝎毒的抗癌细胞机制之一。     

MiR-105抑制肝癌细胞增殖能力的实验研究

目的 探讨miR-105对人肝癌细胞增殖的影响及可能机制.方法 改变QGY-7703及HepG2两种细胞的miR-105表达,细胞克隆形成实验和软琼脂增殖试验检测细胞增殖能力的改变;流式细胞仪检测细胞周期改变.结果 细胞克隆形成和软琼脂增殖实验显示,过表达miR-105可抑制QGY-7703及HepG2细胞增殖,反之抑制miR-105表达则促进细胞增殖;细胞流式检测显示miR-105过表达能促进两种癌细胞G0/G1期阻滞.结论 miR-105抑制肝癌细胞增殖,其机制与引起细胞周期阻滞有关.     

苦参碱对肝癌细胞HepG2端粒酶活性调控的体外研究

目的 观察苦参碱对人肝癌细胞株HepG2体外增殖和端粒酶活性的影响,进一步探讨苦参碱的可能作用机制.方法 采用人肝癌细胞株HepG2作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性的变化.结果 苦参碱具有抗HepG2细胞增殖、阻滞细胞周期、诱导凋亡及抑制端粒酶活性的作用.结论 对端粒酶活性的抑制可能是苦参碱发挥抗肿瘤作用的机制之一.     

TSA抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖能力

目的 研究TSA对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响.方法 选用人肝癌SMMC-7721细胞作为实验对象,分为对照组和不同浓度TSA(0.1、0.5、1.0.2.0 μM)处理组,倒置显微镜观察TSA对SMMC-7721细胞形态的影响,MTT比色法测定TSA对SMMC-7721细胞增殖的抑制情况,流式细胞术(FCM)分析细胞周期;结果 倒置显微镜下.经TSA处理的细胞增殖速度显著减慢;MTT比色法测定结果显示不同浓度TSA对SMMC-7721细胞的增殖均有抑制作用,并有明显的剂量依赖和时间依赖关系;流式细胞仪检测结果 显示,SMMC-7721细胞经TSA处理后,GO/G1期细胞明显增加,S期细胞则明显减少,细胞被阻滞于GO/G1期.结论 TSA通过抑制HDAC的活性,调节相关基因的转录,从而调控细胞周期,有效抑制肝癌细胞的增殖.     

穿心莲内酯对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨穿心莲内酯(AD)对人肝癌SMMC-7721细胞增殖和细胞周期的影响。方法不同浓度AD作用于SMMC-7721细胞,培养24,48,72 h收获细胞。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测SMMC-7721细胞的增殖情况;流式细胞术(FCM)检测SMMC-7721细胞周期的变化。结果不同浓度AD干预SMMC-7721细胞,培养24 h后,细胞呈现明显的形态学改变。MTT检测结果显示:随着AD浓度的增加,SMMC-7721细胞光密度值(OD)逐渐减小,呈时间-剂量依赖性,与对照组比较差异有统计意义(P0.05或P0.01)。流式细胞检测结果显示:SMMC-7721细胞阻滞于G0/G1期,与对照组比较差异有高度统计意义(P0.01)。结论 AD对人肝癌SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用,能使SMMC-7721细胞阻滞于细胞周期的G0/G1期,提示AD抗肿瘤的作用机制与抑制肿瘤细胞增殖有关。     

蜂毒素对肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制作用

[目的]观察蜂毒素对肝癌细胞BEL-7402的增殖抑制作用。[方法]肝癌细胞BEL-7402体外培养,采用MTT法检测蜂毒素对其增殖抑制作用,流式细胞术测定蜂毒素对细胞增殖核抗原表达和细胞周期的影响。[结果]蜂毒素体外能够抑制BEL-7402肝癌细胞的增殖活性;并抑制细胞增殖核抗原的表达,呈剂量依赖性;干扰细胞周期,使S期细胞增加,G2/M期细胞减少。[结论]蜂毒素具有抑制BEL-7402肝癌细胞增殖的作用,机制可能与抑制细胞增殖核抗原表达和干扰细胞周期有关。     

毫米波照射对人肝癌细胞株BEL 7404凋亡的影响

目的　研究 35 .8GHz毫米波照射能否诱导人肝癌细胞株BEL 74 0 4凋亡及其可能的机制。方法　选取BEL 74 0 4人肝癌细胞体外培养 ,随机分为 4组 ,采用荧光显微镜和电镜观察细胞核的变化 ;采用免疫印迹法检测半胱氨酸蛋白酶 (caspase) 3的底物多聚腺苷酸核糖基化聚合酶 (PARP)被剪切的比例。结果　BEL74 0 4细胞经毫米波照射后诱发的细胞死亡具有细胞凋亡的形态学特征 ,其中毫米波和 5 氟脲嘧啶 (5 Fu)联合组细胞凋亡比例增高 ;免疫印迹分析对照组中相对分子质量为 116× 10 3 的PARP几乎完全保持完整 ,经毫米波或 5 FU处理过的BEL74 0 4细胞中 ,116× 10 3 的PARP被切割成相对分子质量为 85× 10 3 的肽段 ,其中以毫米波和 5 Fu联合组被剪切的PARP比例最高。结论　毫米波照射可诱导BEL74 0 4肝癌细胞凋亡 ,与 5 Fu联合使用可明显诱导肝癌细胞凋亡     

ADM诱导人肝癌细胞株多重抗药性的形成

目的：建立人肝癌耐药细胞模型,研究其多药耐药机制。方法：对人肝癌细胞株BEL－7404采用阿霉素浓度递增法及高浓度间歇诱导法,建立人肝癌耐药细胞BEL－740／ADM,用MTT法检测其检测其耐药性,用免疫细胞化学法检测细胞p-糖蛋白（p-gp)及多药耐药相关蛋白（MRP）的表达,结果：用此方法建立的肝癌耐药细胞模型BEL－7404／ADM经MTT法检测其对阿霉素的IC50较亲本细胞BEL－7404增加100倍,并对多种抗癌药物产生交叉耐受性。细胞p-gp及MRP表达较亲本细胞有显著增加（P＜0．01）,p-pg阳性率为68．7％,MRP阳性率为53．5％,结论：BEL－7404／ADM是一个多药耐药模型,其多药耐药性与p-gp、MRP高度表达有关。     

螺旋藻多糖超声波提取方案的优化

目的:观察超声波用于螺旋藻多糖提取的可行性,并对实验条件进行优化。方法:通过正交实验优化了用超声波法提取螺旋藻多糖的实验条件,并与单纯水浴提取法进行了比较。结果:螺旋藻干粉在pH11和60℃的水浴条件下超声波处理60min得到的螺旋藻多糖的量最多。与单纯水浴提取法相比,超声波法粗提物的提取率高(分别为3.175±0.214%和2.023±0.307%,P<0.05),体外抗肿瘤实验结果表明,两种提取方法得到的螺旋藻多糖对卵巢癌SKV3细胞的生长均有明显的抑制作用(MTT法抑瘤率分别为43.013±3.497%和39.265±3.293%),两种提取方法得到的螺旋藻多糖对SKV3细胞的生长的抑制效果大致相同(P>0.05)。结论:螺旋藻多糖提取的最佳方案是在pH 11和60℃的水浴条件下超声波处理60min,再静置60℃水浴60min的分离提取方案。     

乙型肝炎病毒X基因对肝癌细胞Bel-7404细胞周期的影响

目的:构建转基因细胞株Bel-7404/HBx,研究HBx对肝癌细胞周期及凋亡的影响,为探索HBx与原发性肝细胞癌(HCC)之间的关系提供更为完善的理论依据。方法:运用脂质体转染及G418筛选获取Bel-7404/HBx阳性克隆,并分别用聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot鉴定HBxmRNA与蛋白的表达,进一步用四唑兰比色实验(MTT)检测Bel-7404/HBx的增殖,流式细胞仪(FCM)检测Bel-7404/HBx的细胞周期及凋亡。结果:成功构建Bel-7404/HBx,MTT检测结果表明Bel-7404/HBx生长速度加快,流式细胞仪检测结果显示,与对照组细胞相比,Bel-7404/HBx凋亡率明显降低(P<0.05),G1期细胞比例降低(P<0.05),S期及G2期细胞所占比例增高(P<0.05)。结论:HBx能加速细胞周期进程,从而促进肝癌细胞的生长并抑制细胞凋亡,可能对肝癌细胞恶性程度具有重要的影响。     

复合螺旋藻多糖对人乳腺癌MB-231细胞株体外抗肿瘤作用研究

目的:研究复合螺旋藻多糖对体外培养的人乳腺癌MB-231肿瘤细胞的抑制作用及可能的作用机制。方法:以人乳腺癌MB-231细胞株为研究对象,将螺旋藻多糖(PSP)与银杏叶提取物(GBE)按不同比例复合,并用不同浓度的复合制剂分别对细胞作用后,分别在48h、72h后,显微镜下观察细胞形态学变化,MTT法测其生长抑制率。48h后,PI及AnnexinV-FITC/PI染色,用流式细胞仪测其细胞周期及凋亡率。结果:复合螺旋藻多糖对人乳腺癌MB-231细胞均有不同程度的抑制作用,复合组优于单一成分组,抑制生长效果与时间和剂量呈依赖关系;将人乳腺癌MB-231细胞阻滞于G0/G1期,抑制肿瘤细胞的有丝分裂;促进肿瘤细胞凋亡,与空白组相比差异显著。结论:复合螺旋藻多糖通过阻断细胞周期达到抑制体外培养的人乳腺癌MB-231细胞的生长的目的,具有较好的抗肿瘤活性。     

螺旋藻多糖和藻胆蛋白对人白血病Jurkat细胞生长的影响

目的 研究螺旋藻不同成份对人白血病Turkat细胞生长的影响。方法 从直线型钝顶螺旋藻（SP-Dz）中提取藻多糖和藻胆蛋白，将不同浓度的螺旋藻粗提取液、藻多糖和藻胆蛋白分别添加到细胞培养液中进行体外细胞培养，每天在显微镜下计数活细胞数。结果 100mg／L的藻粗提取液抑制率接近90％，螺旋藻多糖浓度为25mg／L或者藻胆蛋白浓度为200mg／L时，对癌细胞生长的抑制率可以达到50％左右，随着浓度的增加，抑制效果增强。结论 螺旋藻粗提取液、藻多糖和藻胆蛋白对lurkart细胞生长均有明显抑制作用，螺旋藻多糖发挥抑制作用的浓度最低。     

螺旋藻多糖对人宫颈癌Hela细胞体外生长的影响

目的：探讨螺旋藻多糖（PSP）对体外培养的Hela细胞生长的影响。方法：采用MTT法测定 PSP的抗肿瘤活性，并观察其对Hela细胞形态学的影响。结果：随PSP浓度的升高，Hela细胞存活率逐渐降低，抑制率逐渐增加；光镜下观察显示，PSP作用24-48h后，细胞出现明显的形态学改变。结论：PSP能抑制Hela细胞增殖。     

不同地域中药蕲蛇多糖含量测定及抗肿瘤作用初步研究

正蕲蛇为蝰科动物五步蛇Agkistrodon acutus(Güenther)的干燥体,具有祛风,通络,止痉等功效,用于风湿顽痹,麻木拘挛,中风,半身不遂,抽搐痉挛,破伤风,麻风疥癣~([1])。蕲蛇主要含有氨基酸、骨胶原、脂肪、多糖等成分~([2]),药理研究显示,其具有抗炎、镇痛、抑制肿瘤活性和杀死癌细胞的作用~([3])。     

板蓝根组酸诱导耐药人肝癌原位移植瘤的细胞凋亡研究

目的　研究板蓝根组酸诱导耐药人肝癌原位移植瘤的细胞凋亡作用及机制。方法　利用已建立的人耐药肝癌BEL 74 0 4 /ADM动物模型 ,应用FCM、透射电子显微镜等方法观察板蓝根组酸在体内对耐药肝癌细胞的形态学特征变化。结果　FCM检测到的凋亡细胞为 :BEL 74 0 4细胞组 0 5 % ,ADM组为 8 3% ,组酸 ADM组为 1 7 6 % ,两组比较有显著性差异 (P <0 0 5 ) ;电镜下见组酸 ADM组的肿瘤组织中多个凋亡细胞聚集 ,细胞核内染色质空虚 ,或染色质浓缩成新月体帽状结构 ,核仁浓缩或碎裂 ,凋亡小体形成 ,粗面内质网结构松散、脱粒、滑面内质网增多 ,排列无序 ,线粒体呈泡状或出现絮状物 ,嵴模糊不清 ,桥粒连接疏松 ,细胞膜微绒毛脱落或消失 ,溶酶体减少。结论　经组酸 ADM作用于肿瘤后 ,耐药肝癌中凋亡细胞明显增多 ,肝癌细胞的超微结构形态学改变符合程序化死亡的过程 ,说明板蓝根组酸联合ADM能诱导耐药肝癌细胞发生凋亡 ,具有逆转耐药作用。     

树舌多糖GF对肝癌细胞系HepA抑制作用研究

目的在体外研究树舌多糖GF组分对HepA细胞的抑制作用,进一步阐明多糖抗肿瘤的分子机制。方法用MTT法、流式细胞仪分析树舌多糖GF对体外培养的腹腔积液型肝癌细胞系HepA生长、细胞周期及细胞凋亡的影响。结果树舌多糖GF组分作用48h后,抑制率、S期数、凋亡率与空白对照组比较有明显差异（P〈0．05）。结论树舌多糖GF组分对腹腔积液型肝癌细胞系HepA增生有显著的抑制作用,可以引起HepA细胞S期阻滞,诱导HepA细胞的凋亡。