整合子在鲍曼不动杆菌多重耐药机制分析

目的:调查我院鲍曼不动杆菌耐药性;了解整合子类型以及整合子携带耐药基因盒特征。方法:收集我院临床分离鲍曼不动杆菌。细菌鉴定及药敏由MicroScan Walk Away 40仪器完成,整合子分类检测及开放阅读框扩增由PCR法完成。开放阅读框扩增产物经琼脂糖凝胶电泳及凝胶回收试剂盒回收纯化后进行DNA测序分析,测序结果在Genebank上作比对。结果:62株鲍曼不动杆菌有11株呈多重耐药,阳性率17.7%,11株鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物阿米卡星,妥布霉素,庆大霉素均耐药,其余菌株较敏感。11株鲍曼不动杆菌中均检出整合子;进一步分类鉴定显示均为Ⅰ类整合子,未检出Ⅱ类和Ⅲ类整合子。开放阅读框可变区扩增产物为(0.3～2.5)KB不等条带,测序结果证实11株Ⅰ类整合子含有6个不同耐药基因盒:blam-1,orfX,aacA4,catB3,dfrA1,aadA1。其中7株均出现catB3,aacA4和dfrA1组合。结论:与其他报道相比较,我院鲍曼不动杆菌多重耐药率相对较低,但耐药鲍曼不动杆菌携带整合子率较高,且均为Ⅰ类整合子;其整合子基因盒含有多种耐药基因编码,其中aacA4,catB3和dfrA1耐药基因组合在本地区占优势。     

整合子在鲍曼不动杆菌中的分布与结构分析

目的 了解我院临床分离的鲍曼不动杆菌的整合子携带情况,以及整合子与鲍曼不动杆菌的耐药相关性分析.方法 用VITEK2 compact全自动微生物分析系统及纸片扩散法检测临床分离的鲍曼不动杆菌对常用22种抗生素的敏感性.PCR扩增整合酶基因检测鲍曼不动杆菌携带整合子情况,同时对整合子可变区进行扩增及测序以其了解整合子耐药基因盒携带耐药基因的情况.结果 鲍曼不动杆菌呈多重酎药性.鲍曼不动杆菌对CPZ/SB酎药率为7.2%,对替加环素(15.4%)、左旋氧氟沙星(34.4%)、亚胺培南(54.3%)、比阿培南(49.4%)、阿米卡星(59%).对其他抗生素均在71%以上.104株中有73株菌株含Ⅰ类整合子(阳性率为70.2%).未有Ⅱ、Ⅲ类整合子扩增阳性菌株,且Ⅰ类整合子阳性株的耐药性均高于阴性株.Ⅰ类整合子基因盒序列分析表明我院鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合子携带aacA4、catB8和aadA1 3种耐药基因.结论 我院分离的鲍曼不动杆菌主要携带Ⅰ类整合子,且与多重耐药性密切相关.     

鲍曼不动杆菌耐药性与Ⅰ类整合子关系研究

目的:了解本院鲍曼不动杆菌中I类整合子的分布与基因盒结构,并探讨整合子与鲍曼不动杆菌耐药的关系?方法:收集鲍曼不动杆菌临床株,用纸片扩散法(K-B法)测定77株鲍曼不动杆菌对18种抗生素的敏感性,采用PCR法检测鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合酶基因(intI 1)并扩增其可变区,对PCR产物进行酶切分析,并测序分析整合子可变区携带的耐药基因盒?结果:鲍曼不动杆菌耐药现象十分严重?77株菌株中有49株含Ⅰ类整合子,阳性率63.64%,其中有45株(91.84%)整合酶阳性株扩增出可变区,共检测出4种耐药基因盒组合形式:aacA4(0.8 kb)?dfrXII-orfF-aadA2(1.8 kb)? aacA4-catB8-aadA1(2.3 kb)?aacC1-orfX-orfX-orfX’-aadA1a(3.0 kb)?整合子阳性菌株与整合子阴性菌株对多种抗生素耐药性存在差异?结论:Ⅰ类整合子与鲍曼不动杆菌耐药性密切相关,在多重耐药鲍曼不动杆菌耐药机制中起重要作用?     

革兰阴性杆菌中1类整合子的分布与耐药关系

[目的]在革兰阴性杆菌中检测1类整合子,并分析整合子对细菌耐药性的影响.[方法]用VITEK-AMS微生物自动分析仪鉴定细菌和药敏试验,用PCR方法扩增1类整合酶基因,经电泳后检测扩增产物.[结果]266株革兰阴性细菌中检测出1类整合子66株,检出率为24.8%.主要阳性菌为大肠埃希菌34.3%(24/70)、肺炎克雷伯菌48.1%(26/54)、阴沟肠杆菌30%(6/20)、铜绿假单胞菌15.6%(7/45)、鲍曼不动杆菌4.8%(2/42)、产气肠杆菌20%(1/5).1类整合子阳性菌对氨基糖苷类、喹诺酮类及头孢菌素类药物表现出较高的耐药率.携带1类整合子菌株易表现出对至少4种抗菌素的多重耐药性,其多重耐药率为68.2%(45/66),明显高于1类整合子阴性菌株(28.5%),P＜0.05.[结论]1类整合子广泛地存在革兰阴性细菌中,1类整合子对细菌多重耐药性的产生和传播起着重要作用,应加强临床细茵基因水平的耐药监测,采取有效措施防止耐药性的传播.     

整合子在鲍曼不动杆菌中的分布与结构分析

目的 了解我院临床分离的鲍曼不动杆菌的整合子携带情况,以及整合子与鲍曼不动杆菌的耐药相关性分析.方法 用VITEK2 Compact全自动微生物分析系统及纸片扩散法检测临床分离的鲍曼不动杆菌对常用22种抗生素的敏感性.PCR扩增整合酶基因检测鲍曼不动杆菌携带整合子情况,同时对整合子可变区进行扩增及测序以其了解整合子耐药基因盒携带耐药基因的情况.结果 鲍曼不动杆菌呈多重耐药性.鲍曼不动杆菌对CPZ/SB耐药率为1.2%,对替加环素(15.4%)、左旋氧氟沙星(34.4%)、亚胺培南(54.3%)、比阿培南(49.4%)、阿米卡星(59%),对其他抗生素均在71%以上.104株中有73株菌株含Ⅰ类整合子(阳性率为70.2%),未有Ⅱ、Ⅲ类整合子扩增阳性菌株,且Ⅰ类整合子阳性株的耐药性均高于阴性株.Ⅰ类整合子基因盒序列分析表明我院鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合子携带aacA4、catB8和aadA1 3种耐药基因.结论 我院分离的鲍曼不动杆菌主要携带Ⅰ类整合子,且与多重耐药性密切相关.     

多重耐药鲍曼不动杆菌整合子和ISCR1结构及基因分型研究

目的 探讨临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌整合子I和ISCR1的结构,并进行基因分型.方法 分离临床80株多重耐药鲍曼不动杆菌,PCR检测整合酶I、整合子I、ISCR1以及ISCR1携带的耐药基因,ERIC-PCR进行基因分型.结果 多重耐药鲍曼不动杆菌80株整合酶阳性,50株整合子I阳性,37株ISCR1携带的耐药基因阳性,ERIC-PCR分为22个类型.结论 整合子I和ISCR1在鲍曼不动杆菌介导多重耐药方面有重要作用,ERIC-PCR是研究临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌基因分型的有效方法之一.     

678株革兰阴性杆菌耐药监测分析

目的监测2006年本院临床分离的革兰阴性杆菌耐药性。方法采用Micro—Scan4半自动细菌分析仪及MIC药敏试剂对678株革兰阴性杆菌进行耐药性监测，并对结果进行回顾性分析。结果678株革兰阴性杆菌中，肠杆菌科424株（62．54％），较常见的为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌；不发酵糖的革兰阴性杆菌254株（37．46％），较常见的为铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌。这些菌株对临床常用抗生素均有不同程度的耐药，且呈多重耐药趋势；亚胺培南是最敏感的抗革兰阴性杆菌的药物之一。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌是临床感染的主要革兰阴性病原菌，其耐药性呈多重耐药趋势，应合理应用抗生素，并持续有效地开展药敏监测。     

常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子标志物检测

目的 了解浙江省湖州解放军第98医院从临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子存在状况。方法 从临床分离鲍曼不动杆菌60株、铜绿假单胞菌30株、阴沟肠杆菌20株、嗜麦芽窄食单胞菌19株和黄杆菌属15株（脑膜败血性黄杆菌12株、产吲哚金黄杆菌3株），采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测Ⅰ类整合子标志物int Ⅰ1及qacE△1基因。结果 鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和黄杆菌属中intⅠ1基因阳性率分别为58．3％、0、95．0％、0和0，qacE△1基因阳性率分别为83．3％、83．3％、85．0％、10．5％和0。合计144株中intⅠ1和qacE△1阳性株数（％）分别为54株（37．5％）、94株（65．3％），Ⅰ类整合子标志物总阳性率为68．1％（98／144）。结论 解放军第98医院从临床分离的常见医院感染多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子携带率相当高。     

多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子的检测

目的 研究整合子在多重耐药革兰阴性菌中的分布和所起的作用。方法 用Kirby-Bauer（K-B）药敏法分析80株多重耐药革兰阴性菌的耐药性，再用可变引物与兼并引物进行聚合酶链反应（ecrt），分别扩增革兰阴性菌整合子。结果 用兼并引物可检出50株革兰阴性菌携带有整合子，有21．2％的菌株同时对10种抗生素都耐药，依次为氨苄西林（72．5％）、头孢曲松（62．5％）、头孢唑啉（61．2％）、头孢他啶（56．2％）、哌拉西林（55．0％）、复方磺胺嘧啶（51．2％）、环丙沙星（50％）、庆大霉素（48．8％）、头孢吡肟（48．8％）、头孢西丁（33．8％），显著高于整合子阴性的菌株。用可变引物检出29株携带有Ⅰ类整合子，可扩增出1000bp，1450bp，1600be，1700bp，1850bp，1900bp，大于2000bp等6种不同长度的脱氧核苷酸（DNA）片段，相同菌属可携带有不同长度的耐药基因片段。不同细菌种属间携带有相同长度的耐药基因片段。结论 Ⅰ类整合子广泛分布于革兰阴性杆菌中，在多重耐药机制中起着重要的作用。     

I类整合子与铜绿假单胞菌耐药的相关性研究

目的 研究I类整合子在铜绿假单胞菌临床分离株中的分布及耐药性情况。方法 PCR法检测铜绿假单胞菌中 I 类整合子基因,对整合酶阳性菌株与铜绿假单胞菌PU21行转移接合实验,采用琼脂对倍稀释法分析整合酶阳性菌株及接合转移成功菌株的药敏情况。结果 57 株铜绿假单胞菌经PCR法检测30株含有 I 类整合酶,药敏结果显示 I 类整合子阳性菌株较阴性菌株耐药率明显升高（P<0.05）,I 类整合子阳性菌株21株转接成功,转移接合子与 I 类整合子阳性菌株比较,对亚胺培南、复方新诺明和环丙沙星的耐药性有所降低。结论 铜绿假单胞菌中有 I 类整合子的分布,I 类整合子阳性菌株及转移接合子较阴性菌株对多种抗生素更易产生耐药。     

铜绿假单胞菌整合子及其基因盒与耐药性的相关性研究

目的 调查致呼吸系统感染的铜绿假单胞菌中整合子的存在情况,研究整合子中基因盒与耐药表型的关系.方法 测定97株铜绿假单胞菌对抗菌药物的敏感性;应用简并引物PCR方法扩增整合子5'保守区的Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合酶基因,对阳性产物用限制性内切酶Hinf Ⅰ作限制片段长度多态性(RFLP)分析,并进行整合子分类;对整合酶阳性标...     

ICU病房病原菌的分布与耐药变迁

目的;探讨本院重症监护病房(ICU)病原菌流行菌株分布、耐药耐药性变化趋势.方法:对我院ICU2007年1月-2010年12月所有细菌分离株及其耐药进行回顾性分析,并与2004-2006年结果比较.结果:共分离病原菌1 354株,其中革兰阴性(Gˉ)菌748株(55.2%),革兰阳性(G+)菌504株(37.3%),真...     

苏州地区2004年至2007年铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌医院感染调查分析

目的探讨苏州地区住院患者医院感染铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌的状况及耐药特点。方法采用回顾性调查方法,分析苏州地区2O04年至2007年32所医院的住院患者医院感染铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌的情况。结果2004年至2007年32所医院共发生院内感染17668例,其中铜绿假单孢菌1334例（7.55%）,鲍曼不动杆菌1187例（6.72%）。铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌感染部位主要以下呼吸道为主,两者分别占85.01%、86.69%;感染科室则主要分布在神经外科、ICU病房、呼吸内科。从2004年至2006年铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌对各种抗生素的耐药率呈逐年升高趋势,2007年有所下降。结论苏州地区院内感染铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌发生率呈逐年上升趋势,各医院应高度重视,进一步加强对医院感染工作的管理,采取有效措施,控制院内感染铜绿假单孢菌和鲍曼不动杆菌的发生及耐药率的升高。     

Ⅰ类整合子与耐亚胺培南铜绿假单胞菌多重耐药机制探讨

目的：探讨Ⅰ类整合子在耐亚胺培南铜绿假单胞菌多重耐药中的作用。方法：收集天津市4所大型医院共67株临床分离的耐亚胺培南铜绿假单胞菌,进行Ⅰ类整合子筛选及药敏试验。结果：67株耐亚胺培南铜绿假单胞菌中有46株检出Ⅰ类整合子（68．7％）;Ⅰ类整合子阳性IRPA和Ⅰ类整合子阴性ⅠRPA的多种药物耐药率无统计学差异。结论：Ⅰ类整合子可能不是导致耐亚胺培南铜绿假单胞菌多重耐药的主要原因。     

一株多重耐药铜绿假单胞菌的双整合子基因结构分析

目的 检测临床多重耐药铜绿假单胞菌的整合子,并进行结构及定位分析.方法 PCR扩增耐药基因和整合子、电泳胶回收DNA片段并进行序列比对分析.结果 在一株多重耐药铜绿假单胞菌(PAVim2)中检测到双整合子,其中一个为Ⅰ类整合子,一个为Tn402样的Ⅰ类整合子,两者基因结构为5'CS-IntI-sul1-3'CS和5'CS-IntI-Vim2-Rh506.结论 双整合子结构的发现为铜绿假单胞菌多重耐药研究有临床意义.     

泛耐药鲍曼不动杆菌整合子Ⅰ和ISCR1结构及基因分型研究

目的研究从临床分离的鲍曼不动杆菌的整合子Ⅰ和ISCR1的分布及结构情况,并对其进行基因分型。方法分离自临床的57株鲍曼不动杆菌,PCR检测整合酶Ⅰ、整合子Ⅰ、ISCR1以及ISCR1可变区,PCR产物进行限制性片段长度多态性(RFLP)分型并进行测序分析可变区携带的耐药基因盒,ERIC-PCR进行基因分型。结果 49株整合酶I阳性,其中47株整合子I扩增阳性,RFLP分为2型,测序结果为aacA4-catB8-aadA1和drf17-aadA5。3株ISCR1以及ISCR1可变区扩增均阳性,可变区经RFLP分为1型,测序结果为orf513-qnrA1-ampR-qacEdeltal,ISCR1阳性菌整合子I均阳性,经ERIC-PCR检测将57株鲍曼不动杆菌分为27个基因型。结论Ⅰ类整合子广泛存在于鲍曼不动杆菌中,ISCRI携带率较低,氨基糖苷类、甲氧苄啶类和β-内酰胺类耐药基因盒较常见,ERIC-PCR可用于临床鲍曼不动杆菌的分子流行病学研究。     

鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌在我院临床各科室感染分布及耐药性分析

目的分析我院铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌临床分离株的感染分布并分析其耐药特征。方法收集2013年1月至6月住院和门诊患者送检的各类标本并进行分离培养,采用Siemens Microscan WalkAway 40全自动细菌鉴定仪鉴定菌种;采用世界卫生组织(WHO)-NET 5.4软件对病原菌的耐药性进行分析。结果共分离出鲍曼不动杆菌92株,铜绿假单胞菌228株,主要分布于呼吸系统。全院多重耐药性(MDR)鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南(MPM)、氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为12.5%、38.6%、54.5%;而重症监护病房(ICU)MDR的鲍曼不动杆菌的耐药率分别为13.3%、46.7%、53.3%;重症监护室的MDR的铜绿假单胞菌对美罗培南、复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为20.8%、12.5%、12.5%,全院的MDR铜绿假单胞菌对美罗培南、复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦的耐药率分别为20.9%、16.5%、16.5%。结论各临床科室尤其是重症监护室中铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌感染分布广泛,多重耐药性明显。临床应加强对这两种院感菌耐药性的监控和防止耐药菌株的传播,在经验性用药同时进行病原学检查,根据药敏结果适当调整抗菌药物,以逐步降低耐药状况,避免院内感染和爆发流行。     

ICU呼吸道感染患者抗感染治疗前后痰细菌培养变化的研究

目的探讨ICU呼吸道感染患者在治疗前后痰细菌培养的变化及影响临床治疗效果的相关因素。方法选择在我院ICU治疗的呼吸道感染患者62例,分析其治疗前后的痰培养结果及影响治疗效果的相关因素。结果患者治疗前后铜绿假单胞菌的感染比例最高。在新定植的细菌中,铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌等的比例较高。肾功能不全是影响治疗效果的重要因素。结论入住ICU的重症呼吸道感染患者铜绿假单胞菌的感染比例最高,新定植的细菌中铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌等的比例较高。治疗过程中应注意保护肾功能。     

烟台市铜绿假单胞菌质粒、转座子、整合子遗传标记研究

目的了解烟台市铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa,PAE）质粒、转座子、Ⅰ类整合子遗传标记存在状况。方法采用K-B法测定临床分离的30株铜绿假单胞菌对16种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应法（PCR）对其进行质粒遗传标记（traA、traF）、转座子遗传标记（tnpA、tnpU、merA）、Ⅰ类整合子遗传标记（intⅠ）检测。结果30株铜绿假单胞菌对16种抗菌药物均有不同程度的耐药。30株PAE菌merA阳性14株,阳性率46．7％;intⅠ阳性14株,阳性率46．7％。其中merA与intⅠ基因同时阳性11株,单独merA基因阳性3株,单独intⅠ基因阳性3株;共有17株检出merA和／或intⅠ基因。其它均为阴性。结论临床分离的铜绿假单胞菌转座子遗传标记和Ⅰ类整合子遗传标记检出率较高。本组PAE菌没有检出F质粒和RP4质粒的遗传标记。