免疫相关性全血细胞减少症患者骨髓B淋巴细胞数量及凋亡相关蛋白水平

目的　探讨B淋巴细胞在免疫相关性全血细胞减少症 (IRP)发病中的作用。方法　采用流式细胞术测定 2 5例初诊患者 ,1 5例治疗后血常规恢复正常的患者和 1 0名正常人骨髓总B淋巴细胞、CD5+ B淋巴细胞的数量以及B淋巴细胞膜表面凋亡相关蛋白Fas抗原 (CD95)、胞浆内抗凋亡蛋白bcl 2的表达。结果　IRP初诊患者总B淋巴细胞、CD5+ B淋巴细胞比例显著高于治疗后血常规恢复组和正常人 (P均 <0 .0 5) ,后两组相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5) ;三组B淋巴细胞Fas抗原的表达率差异无显著性 (P均 >0 .0 5) ;初诊患者B淋巴细胞胞浆内bcl 2的表达率显著高于其它两组 (P均 <0 0 5) ,治疗后血常规恢复组也显著高于正常对照组 (P <0 .0 1 ) ;各组间B淋巴细胞凋亡相关指数(CD1 9+ CD95+ /CD1 9+ bcl 2 + )比较 ,初诊组显著低于治疗后血常规恢复组和对照组 (P均 <0 .0 1 ) ,治疗后血常规恢复组也显著低于对照组 (P <0 .0 5) ;B淋巴细胞的比例与治疗起效时间呈正相关 (r =0 .69,P <0 0 1 )。结论　IRP患者自身抗体的产生可能与B淋巴细胞及其亚群数量异常、凋亡受抑有关     

全血细胞减少症患者的骨髓细胞学检查

对 1997- 0 1～ 2 0 0 2 - 12我院全血细胞减少 95 1例骨髓细胞学检查总结分析如下。1　对象和方法1.1　对象　本组男 5 33例 ,女 4 18例 ,年龄 16～ 79岁。全血细胞减少标准为 :WBC<4× 10 9/ L ,PL T<10 0× 10 9/ L ,男性 RBC<4× 10 1 2 / L ,Hb<12 0 g/ L ,女性 RBC<3.5× 10 1 2 / L ,Hb<110g/ L。1.2　方法　 1应用美国产 Coulter STKS血液分析仪及其配套试剂测定 RBC、Hb、WBC及 PL T,用瑞氏染色涂片进行细胞分类 ,并作中性粒细胞碱性磷酸酶染色 (NAP)。 2瑞氏染色骨髓片分类 2 0 0个有核细胞 ,并进行形态观察及铁…     

骨髓造血干／祖细胞自身抗体与免疫相关性全血细胞减少

背景：免疫相关性全血细胞减少涉及多个临床学科,近年来受到高度重视.骨髓造血早期细胞自身抗体及免疫调节功能可能是其症结所在.目的：分析骨髓造血早期（干/祖）细胞自身抗体在免疫相关性全血细胞减少症发病机制中的作用及其进展.方法：由作者电子检索1992年3月至2012年3月PubMed、万方医学网以及CHKD数据库中关于骨髓造血细胞相关抗体的文章,中文检索词为“免疫相关性全血细胞减少症、骨髓造血细胞、自身抗体、辅助性T细胞17”,英文检索词为“Immunorelated pancytopenia,Bone marrow hematopoietic cel s, Autoantibody,Th17 cel s”.排除重复性研究共保留30篇进行总结分析.结果与结论：骨髓造血细胞自身抗体是由于T淋巴细胞调控失衡,导致B淋巴细胞及其亚群数量和功能异常而产生的一类抗体.它破坏或抑制骨髓早期造血细胞成熟分化,最终引起外周血细胞减少而致病.T 辅助细胞17细胞数量增多、功能亢进可能与免疫相关性全血细胞减少症患者自身抗体产生呈一定相关性,是免疫相关性全血细胞减少症发病的重要因素.     

免疫相关性全血细胞减少症

目的报告28例与免疫异常相关的全血细胞减少症。方法回顾三年来诊断为再生障碍性贫血(AA)患者142例,选择其中与免疫异常相关的全血细胞减少症28例,并对其临床表现、实验室检查及治疗方法作回顾性分析。结果28例患者表现为全血细胞减少,其骨髓增生活跃或减低,但红系比例不低或增高,网织红细胞或/和中性粒细胞百分比不低,常规溶血试验阴性,对肾上腺皮质激素或丙种球蛋白为主的治疗方案反应良好。结论该组疾病与免疫异常介导的造血细胞破坏或功能异常有关,应诊断为免疫相关性全血细胞减少症(immunorelated pancytopenia,IRP)较为合适,目前有人提出IRP是一种独立的疾病,提高对IRP的认识具有重要的临床意义,应注意IRP与AA、MDS的鉴别。     

与异常免疫相关的全血细胞减少症

目的 报告一组与异常免疫相关的全血细胞减少症。方法 分析29例骨髓单个核细胞Coombs试验阳性的血细胞减少症患者的临床及实验室检查特征。结果 该组患者大部分表现为全血细胞减少;绝大部分患者骨髓增生良好,少部分增生减低,但红系比例不低或增高;常规溶血试验阴性;无造血原料缺乏证据;无异常克隆造血证据;骨髓单个核细胞Coombs试验阳性;对肾上腺皮质激素为主的试验性治疗反应良好。结论 该组疾病与异常免疫（特别是自身抗体）介导的造血细胞破坏或功能异常有关,暂称为免疫相关性全血细胞减少症（immunorelated pancytopenia,IRP),将其从再生障碍性贫血（AA）、骨髓增生异常综合征（MDS）中区分出来,患者可得到及时、有效的治疗,并且可减少误诊的AA、MDS。     

380例全血细胞减少患者血片与骨髓象检查结果分析

[目的]了解全血细胞减少患者的血片幼稚细胞检出与骨髓象分析情况。[方法]对380例全血细胞减少患者进行外周血涂片及骨髓象分析。[结果]380例全血细胞减少患者中，血片检出幼稚细胞81例，其中急性白血病（AL）71例，骨髓异常增生综合征（MDS）患者8例，巨幼红细胞性贫血（MA）3例。未检出幼稚细胞患者为299例。骨髓检查主要以再障（AA）为主，其次为巨幼红细胞性贫血（MA）、慢性肝病、恶性肿瘤、感染及其他疾病。其中急性白血病5例，MDS患者54例。[结论]全血细胞减少患者外周血片幼稚细胞检出率主要与血液系统疾病有关，患者宜早行骨髓象分析确诊。骨髓象分析是明确全血细胞减少病因的重要方法。     

480例全血细胞减少患者血片与骨髓象检查结果分析

目的了解全血细胞减少患者血片幼稚细胞检出与骨髓象分析情况。方法对480例全血细胞减少患者进行外周血涂片及骨髓象分析。结果480例全血细胞减少患者中，血片检出幼稚细胞98例（20．4％），其中急性白血病93例（94．9％），主要以急性非淋巴细胞性白血病（ANLL）-M2a、急性淋巴细胞性白血病（ALL）-L1、ANLL-M3a为主，其余5例（5．1％）为骨髓增生异常综合征（MDS）患者；未检出幼稚细胞者382例。骨髓检查主要以再生障碍性贫血（AA）为主，其次为缺铁性贫血（IDA）、巨幼红细胞性贫血（MA）、原发性血小板减少性紫癜（ITP）及脾功能亢进等疾病，其中急性白血病（AL）患者25例（6．5％），各急性白血病亚型数量多少差异无统计学意义，MDS患者47例（12．3％）。结论全血细胞减少患者外周血片幼稚细胞检出率主要与血液系统恶性疾病有关，患者宜早行骨髓象分析确诊。骨髓象分析是明确全血细胞减少病因的重要方法。     

免疫相关性全血细胞减少症发病机制的研究进展

免疫相关性全血细胞减少(IRP)或血细胞减少(IRH)症是由于多种病理因素作用导致人体产生抗骨髓未成熟造血细胞自身抗体并破坏或抑制造血细胞,最后引起血细胞减少的一类发病机制相对独立的骨髓造血衰竭综合征。其发病机制不仅涉及由T淋巴细胞调控失衡导致的B淋巴细胞数量、亚群、功能异常,同时存在着Th17、Treg细胞数量、功能的异常。新近认为,由病原微生物侵入所致的感染也是导致IRH/IRP的重要发病因素。     

480例全血细胞减少患者血片与骨髓象检查结果分析

目的了解全血细胞减少患者血片幼稚细胞检出与骨髓象分析情况。方法对480例全血细胞减少患者进行外周血涂片及骨髓象分析。结果480例全血细胞减少患者中,血片检出幼稚细胞98例(20.4%),其中急性白血病93例(94.9%),主要以急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)M2a、急性淋巴细胞性白血病(ALL)L1、ANLLM3a为主,其余5例(5.1%)为骨髓增生异常综合征(MDS)患者;未检出幼稚细胞者382例。骨髓检查主要以再生障碍性贫血(AA)为主,其次为缺铁性贫血(IDA)、巨幼红细胞性贫血(MA)、原发性血小板减少性紫癜(ITP)及脾功能亢进等疾病,其中急性白血病(AL)患者25例(6.5%),各急性白血病亚型数量多少差异无统计学意义,MDS患者47例(12.3%)。结论全血细胞减少患者外周血片幼稚细胞检出率主要与血液系统恶性疾病有关,患者宜早行骨髓象分析确诊。骨髓象分析是明确全血细胞减少病因的重要方法。     

全血细胞减少138例分析

目的：探讨全血细胞减少的病因、疾病谱。方法：对138例全血细胞减少症进行外周血常规、网织红细胞和或骨髓分析等检查。结果：全血细胞减少的病因可分为血液疾病及非血液疾病。血液系统疾病占52．17％，非血液系统疾病占47．83％。血液系统疾病中，再生障碍性贫血占首位。非血液系统疾病中，肝病性占首位。结论：全血细胞减少的病因可分为血液疾病及非血液疾病两大类，诊断时应拓宽思路，以免误诊、漏诊。     

再生障碍性贫血患者骨髓T淋巴细胞的研究

目的：进一步探明免疫因素在再生障碍性贫血（再障）发病中的作用。方法：用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法检测再障患者骨髓中Ｔ淋巴细胞表型的变化，并用半固体培养法检测再障患者骨髓及去Ｔ细胞后骨髓单个核细胞ＣＦＵ－ＧＭ集落形成情况。结果：①与正常对照组相比较，再障患者骨髓中Ｔ淋巴细胞百分率明显增高，且以ＣＤ８、ＣＤ２５细胞增多为主。②再障患者骨髓与外周血中Ｔ淋巴细胞的变化并不完全一致。在部分再障患者，仅骨髓中ＣＤ８细胞增多，外周血中不高。③再障患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ集落数及丛数明显低于正常对照组，去ＣＤ８细胞后，集落数及丛数均明显增加。结论：免疫异常是再障发病的重要因素，而且，骨髓中Ｔ淋巴细胞的变化比外周血更有意义。建议对再障患者常规检查骨髓中Ｔ淋巴细胞及其亚群的变化，以预测应用免疫抑制剂的可行性及其有效性。     

医院获得性肺炎重症患者辅助性T细胞亚群和降钙素原变化及相关性分析

目的 观察医院获得性肺炎(HAP)重症患者辅助性T细胞亚群变化以及血清降钙素原(PCT)水平,并观察其在不同病情程度患者中的变化以及二者之间的相关性.方法 选择符合HAP诊断的患者89例(重症59例,轻症30例),以20例健康成人为对照,测定外周血CD4阳性细胞中Th1、Th2细胞百分比和Th1/Th2比值,采用双夹心免疫发光法检测血清PCT水平.结果 重症肺炎组Th1细胞[(8.40±3.01)％]明显低于轻症肺炎组[(13.90±2.37)％,P＜0.05]和健康对照组[(17.40±4.20)％,P＜0.01];重症肺炎组Th2细胞[(17.30±5.74)％]则明显高于轻症肺炎组[(7.70±2.35)％,P＜0.05]和健康对照组[(7.90±1.92)％,P＜0.01];重症肺炎组Th1/Th2比值(0.57±0.15)也明显低于轻症肺炎组(2.80±0.46,P＜0.01)和健康对照组(3.11±0.87,P＜0.01).与健康对照组相比,轻症肺炎组Th1细胞明显降低(P＜0.05),但Th2细胞和Th1/Th2比值无明显差异(均P ＞0.05).重症肺炎、轻症肺炎及健康对照3组CD4阳性细胞无明显差异[分别为(30.20±10.83)％、(34.70±13.57)％、(28.80±9.61)％,均p＞0.05].与健康对照组比较,轻、重症肺炎组PCT( μg/L)均明显升高(1.73±0.88、3.51±2.66比0.30±0.10,均P＜0.01);且重症肺炎组PCT水平较轻症肺炎组明显升高(P＜0.05).Th1/Th2与PCT的回归分析显示,回归方程为Y=-0.937x,呈显著负相关(F=236.23,P=0.0000).结论 HAP重症患者存在明显的Th1/Th2细胞失衡、细胞免疫功能下降,Th2细胞和抗炎反应优势是导致感染加剧和多器官功能障碍综合征的主要原因;PCT与Th1/Th2呈明显负相关.PCT可作为检测机体免疫应答的一个指标,从侧面体现机体细胞免疫与体液免疫反应的程度.     

Type 1 T helper and type 2 T helper cells: Functions,regulation and role in protection and disease

Summary Two very distinct cytokine secretion patterns have been defined amoung murine CD4⁺ T cells. Type 1 helper (T_H1), but not type 2 helper (T_H2), cells produce interleukin (IL)-2, gamma-interferon (IFN-γ) and tumour necrosis factor-β, whereas T_H2, but not T_H1, cells express IL-4, IL-5, IL-6 and IL-10. The different cytokine patterns lead to different functions of the two types of T cell. In general, T_H2 cells are excellent helpers for B-cell antibody secretion, particularly IgE responses. On the other hand T_H1 cells induce delayed-type hypersensitivity reactions. There is general agreement that the different functional subsets of T_H cells arise post-thymically from a common pool of precursors and as a consequence of activation of antigen. However, the factors affecting differentiation of T_H precursors into the T_H1 or T_H2 subsets are still unclear. Mutual cross-regulation between T_H1 (via IFN-γ) and T_H2 (via IL-10) has also been reported. Recently, human T cell clones similar to murine T_H1 and T_H2 cells have been demonstrated. Most allergen- or helminthic antigen-specific CD4⁺ human T cell clones have a T_H2 phenotype, whereas the majority of T-cell clones specific for mycobacterial antigens or antigens responsible for type IV hypersensitivity exhibit a T_H1 phenotype. Human T_H2 clones provide B-cell help for IgE synthesis, whereas most T_H1 clones are cytolytic for antigen-presenting cells, including B lymphocytes. It is highly probable that the selective or preferential activation of CD4⁺ T-cell subsets secreting defined patterns of cytokines is of major importance in determining the class of immune effector function, thus influencing both protection and immunopathology.     

联合检测Th1、2型细胞因子在急性胰腺炎中的应用

目的探讨联合检测辅助性T淋巴细胞(Th)1、2型细胞因子的表达在急性胰腺炎(AP)的病情严重程度及疗效评估中的价值。方法 2009年11月至2013年6月,采用ELISA法分别测定32例轻型胰腺炎(MAP组)与18例重症胰腺炎(SAP组)患者住院第1、4、7天和15例健康者(健康对照组)的Thl型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)表达水平。结果 MAP组住院第1、4、7天IFN-γ的检测结果分别为(31.47±4.35)、(36.92±4.12)、(49.09±4.97)ng/L;IL-4的表达水平分别为(54.72±5.52)、(45.26±4.89)、(39.79±3.85)ng/L。SAP组住院第1、4、7天的IFN-γ表达水平分别为(23.97±5.39)、(26.29±3.47)、(33.64±4.47)ng/L;IL-4的表达水平分别为(70.45±5.05)、(65.99±4.58)、(56.23±4.23)ng/L,健康对照组IFN-γ和IL-4的检测结果分别为(49.26±20.67)、(35.15±16.32)ng/L。与健康对照组相比,MAP组除第7天外的Th1型细胞因子IFN-γ和SAP组外周血Th1型细胞因子IFN-γ表达降低,Th2型细胞因子IL-4表达升高,差异有统计学意义(P0.05);在相同治疗天数,SAP组各检测值与MAP组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论 Th1型细胞因子和Th2型细胞因子在AP存在明显极化,其极化程度与病情严重程度有关,联合检测Th1型细胞因子和Th2型细胞因子有利于判断AP的病情严重程度和治疗效果。     

腹腔灌洗术联合持续血液净化对重症急性胰腺炎患者T辅助淋巴细胞及其细胞因子的影响

目的探讨腹腔灌洗术联合持续血液净化对重症急性胰腺炎(SAP)患者T辅助淋巴细胞(Th)及其细胞因子的影响。方法以完全随机数字分组法将符合诊断及纳入标准的102例SAP患者分为对照组和观察组。对照组在常规对症处理基础上采用连续性血液净化治疗,观察组在对照组连续血液净化治疗基础上,采用腹腔灌洗术进行治疗。比较两组治疗前及1、3 d外周血Th1/Th2及Th1细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)和Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)表达水平。结果治疗前,两组外周血Th1/Th2无显著差异(P>0.05);治疗1、3 d,两组外周血Th1/Th2均明显增高,且观察组明显高于对照组(P<0.05)。治疗前,两组Th1细胞因子IFN-γ水平无显著差异(P>0.05);治疗1、3 d,两组Th1细胞因子IFN-γ水平均明显上升,且观察组明显高于对照组(P<0.05)。治疗前,两组Th2细胞因子IL-4水平无显著差异(P>0.05);治疗1、3 d,两组Th2细胞因子IL-4水平均明显下降,且观察组明显低于对照组(P<0.05)。结论腹腔灌洗术联合持续血液净化可有效调整并促进SAP患者机体Th1/Th2平衡,提高机体免疫力。     

骨髓间充质干细胞抑制异体T淋巴细胞反应的实验研究

目的了解骨髓间充质干细胞(MSC)能否诱导异体T淋巴细胞反应性下降,探讨防治异基因造血干细胞移植中移植物抗宿主病的途径。方法骨髓来源的MSC经60Co照射后与异体T淋巴细胞共培养,用3H-TdR掺入的方法测定共培养前后T淋巴细胞增殖状态及对异体细胞和非特异性分裂原刀豆素A(ConA)的反应性变化。结果MSC与异体T淋巴细胞共培养后,并不刺激T淋巴细胞的增殖;MSC作为刺激细胞与异体T淋巴细胞的首次及二次接触均不引起T淋巴细胞活化。单独T淋巴细胞的放射性核素每分钟闪烁计数(CPM)值为27529±969,首次接触与二次接触的CPM值分别为9126±654及13260±874。混合淋巴细胞反应结果表明,与MSC共孵育后的异体T淋巴细胞对MSC同源淋巴细胞反应性下降,共孵育前的CPM值为45876±5285,共孵育后的CPM值为9850±1618,ConA刺激的细胞增殖活性也显著减低。结论骨髓MSC在体外可使异体T淋巴细胞对异体抗原的反应性减低,这种作用与其低免疫原性有关。     

免疫性血小板减少症患者外周血中滤泡辅助性T细胞和IL-21的水平及临床意义

目的探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)和IL-21在免疫性血小板减少症(ITP)中的作用。方法采集15例ITP患者及20例健康对照者外周血,用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR5+CD4+Tfh细胞的百分率,ELISA法检测血清IL-21水平;用实时荧光定量PCR检测PBMC中IL-21 mRNA的表达。结果 ITP组PBMC中CXCR5+CD4+Tfh细胞比例(17.55±1.015)%显著高于健康人对照组(10.19±0.343)%,差异有统计学意义(t=7.657,P0.01);ITP组血清中IL-21水平(100.7±3.71)pg/mL显著高于健康人对照组(64.6±0.81)pg/mL,差异有统计学意义(t=10.84,P0.01),且两者之间存在明显相关性(r=0.689 3,P0.01)。ITP患者IL-21 mRNA的相对表达量4.319±0.767明显高于健康人对照组1.125±0.052,差异有统计学意义(t=4.813,P0.01)。结论 ITP患者外周血Tfh细胞比例、IL-21水平及IL-21 mRNA表达均增高,可能在ITP的发病机制中发挥重要作用。     

滤泡辅助性T细胞在急性肝衰竭小鼠模型中的变化及意义

目的:探讨滤泡辅助性T(T follicular helper,Tfh)细胞及相关细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-21在急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)小鼠模型中的变化及意义。方法:将20只雌性C57BL/6小鼠随机分成2组,分别予脂多糖/D-氨基半乳糖或磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)腹腔注射,6 h后采集血液、肝脏和脾脏组织标本。采用苏木精-伊红染色法分析肝脏病变情况;流式细胞术分析小鼠脾脏单个核细胞中Tfh细胞的频数;酶联免疫吸附试验分析血清中IL-21和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的水平。结果:ALF小鼠肝脏肿大而呈暗红色,肝细胞大量坏死和炎性细胞浸润,其血清中TNF-α及IL-21的水平均较正常对照组显著增高(P<0.01,P<0.05);而单个核细胞中CD4+CXCR5+、CD4+PD-1+、CD4+CXCR5+PD-1+T细胞频数亦较正常对照组显著升高(P<0.01)。结论:ALF小鼠脾脏单个核细胞中Tfh细胞频数显著增加,血清IL-21水平显著升高,推测Tfh细胞在ALF的发病过程中起重要作用,本研究结果可能为ALF的治疗提供新思路。     

特发性血小板减少性紫癜骨髓造血干细胞的功能及与疗效的关系

目的：探讨特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者骨髓造血干细胞的增殖分化功能，并从巨核细胞集落形成单位和数量和血小板上升的幅度探讨两者之间的疗效关系。方法：用甲基纤维半固体培养ITP患者粒－巨噬细胞集落形成单位、红系集落形成单位、巨核细胞集落形成单位，观察巨核细胞集落形成单位与血小板上升平均值的关系。结果：ITP患 者骨髓粒－巨噬细胞集落、红系集落形成单位，巨核细胞集落形成单位集落数低于正常对照组，粒－巨噬细胞集落及丛落数高于政党对照组，巨核细胞数大于5／高倍视野的ITP患者其巨核细胞数与血小板上升无关，巨噬细胞集落形成单位与血小板上升平均值有。结论：ITP患者骨髓造血干细胞增殖分化功能异常，提示ITP可能是造血干细胞异常的疾病。ITP的巨噬细胞集落形成单位与血小板上升幅度有关，巨噬细胞集落形成单位可以预测ITP的治疗效果。