白松片对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及血浆CORT、ACTH的影响

目的：观察白松片对慢性应激抑郁大鼠模型行为学和血浆CORT、ACTH含量的影响。方法：SD雄性大鼠28只随机分为空白对照组、模型对照组、氟西汀对照组及白松片试验组，选用慢性轻度不可预见性应激加孤养造模，观察各组大鼠敞箱实验和液体消耗等行为学指标变化，采用放射免疫方法检测大鼠血浆皮质醇(CORT)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量。结果：慢性应激抑郁大鼠体重增加缓慢，敞箱实验中的水平运动、垂直运动得分、清洁动作次数显著减少，中央格停留时间显著延长；糖水消耗明显下降，纯水消耗显著增多，而且其血浆皮质醇和促肾上腺皮质激素含量增加。氟西汀和白松片均显著改善慢性应激抑郁大鼠模型的行为学和神经内分泌变化。结论：慢性轻度不可预见性应激可使大鼠行为及神经内分泌发生异常改变，引起抑郁状态，白松片对此具有一定拮抗作用。     

慢性应激对心肌梗死后大鼠模型行为学及海马BDNF的影响

目的:探讨慢性应激对心肌梗死后大鼠模型行为学及海马BDNF的影响.方法:建立急性心肌梗死模型.结合慢性不可预见的轻度应激和孤养制作心梗并抑郁复合大鼠模型.观察动物的体重变化和行为学指标,用Westernblot方法检测海马BDNF蛋白表达.结果:经过21天慢性不可预见轻度应激.模型组大鼠体重、糖水消耗和糖水偏爱百分比、敞箱试验得分均明显降低,纯水消耗显著增加;海马BDNF蛋白表达减少(P<0.05).结论:对急性心肌梗死大鼠采用21天慢性应激后,模型鼠体重下降、行为学明显异常,符合抑郁动物的行为学改变,且存在海马神经元可塑性降低的表现,这可能是心肌梗死并抑郁发病的机制之一.     

慢性轻度不可预见性应激对大鼠海马内甘丙肽表达的影响

目的:观察慢性轻度不可预见性应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)对大鼠海马甘丙肽(ga-lanin,Gal)蛋白及mRNA表达的影响,探讨Gal在大鼠实验性抑郁症发病过程中的作用机制。方法:将20只健康雄性SD大鼠,随机分为正常组和模型组,每组10只。孤养结合CUMS 21 d建造抑郁症模型,应用旷场试验和糖水偏好试验检测大鼠行为学变化,使用免疫荧光组织化学方法和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法测定Gal及Gal mRNA的表达。结果:造模后模型组大鼠运动总路程、中央路程、周边路程及糖水摄入量均较正常组偏低(P<0.05);模型组与正常组相比,海马内Gal及Gal mRNA的表达同样降低(P<0.05)。结论:慢性轻度不可预见性应激可使大鼠海马内Gal及Gal mRNA的表达量下降,推测Gal在抑郁发病过程中可能起到神经保护作用。     

复方刺蒺藜苷对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及海马CNTF表达的影响

目的：观察刺蒺藜苷对慢性应激抑郁大鼠行为学及海马CNTF表达的影响.方法：将大鼠随机分为正常组、模型组、复方刺蒺藜苷组、氟西汀组,采用慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型.通过敞箱实验观察抑郁模型大鼠行为学改变并运用免疫组化和原位杂交方法探讨复方刺蒺藜苷对抑郁模型大鼠海马神经元细胞CNTF、CNTFmRNA表达的影响.结果：慢性应激抑郁大鼠敞箱实验中水平穿越格数、竖立次数、理毛时间有减少,中央格停留时间、粪便粒数均有增加.刺蒺藜苷和氟西汀可改善大鼠行为学变化.与模型组相比,复方刺蒺藜苷组大鼠海马神经元CNTF免疫反应阳性颗粒数目增多,神经元平均灰度值降低.结论：刺蒺藜苷能明显改善抑郁动物的各项行为学指标,增加海马CNTF、CNTF mRNA的表达具有抗抑郁作用.     

色氨酸羟化酶2在去卵巢抑郁症模型大鼠中缝核中表达减少

目的 观察去卵巢抑郁症大鼠模型海马5-羟色胺(5-HT)含量及其合成限速酶-色氨酸羟化酶2(TPH2)表达的变化.方法 雌性SD大鼠,在卵巢切除术的基础上,联合孤养和21 d慢性不可预见性温和刺激(CUMS)制备去卵巢抑郁症大鼠模型,以行为学测试进行评价.用高效液相色谱-电化学法((HPLC-ECD)测定海马5-HT含量;用RT-PCR技术检测中缝核TPH2 mRNA表达量;用荧光免疫组化检测中缝核TPH2蛋白表达.结果 21 d应激后,模型组大鼠直立活动得分及水平活动得分均减少,糖水消耗百分比下降;海马5-HT含量下降;中缝核TPH2 mRNA表达量及TPH2阳性神经元数量减少.结论 在卵巢切除术的基础上,联合孤养和21 d CUMS可造成去卵巢抑郁症大鼠模型;模型大鼠海马5-HT含量下降,可能是中缝核TPH2的表达减少所致.     

色氨酸羟化酶2在更年期抑郁症模型大鼠中缝核中表达减少

目的 观察更年期抑郁症大鼠模型海马5-羟色胺（5-HT）含量及其合成限速酶-色氨酸羟化酶2（TPH2）表达的变化。方法 雌性SD大鼠，在卵巢切除术的基础上，联合孤养和21d慢性不可预见性温和刺激（CUMS）制备更年期抑郁症大鼠模型，以行为学测试进行评价。用高效液相色谱-电化学法（(HPLC-ECD）测定海马5-HT含量；用RT-PCR技术检测中缝核TPH2 mRNA表达量；用荧光免疫组化检测中缝核TPH2蛋白表达。结果 21d应激后，模型组大鼠直立活动得分及水平活动得分均减少，糖水消耗百分比下降；海马5-HT含量下降；中缝核TPH2 mRNA表达量及TPH2阳性神经元数量减少。结论 在卵巢切除术的基础上，联合孤养和21d CUMS可造成更年期抑郁症大鼠模型；模型大鼠海马5-HT含量下降，可能是中缝核TPH2的表达减少所致。     

大鼠海马过表达脑源性神经营养因子对脑卒中后抑郁行为的影响

目的:本研究旨在阐明脑源性神经营养因子(BDNF)过表达对脑卒中后抑郁症(PSD)大鼠抑郁样行为的影响。方法;构建BDNF过表达慢病毒载体,先结扎阻断大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血模型,再采用孤养结合慢性不可预见性温和应激(CMUS)建立PSD大鼠模型。然后海马注射BDNF过表达慢病毒(PSD+LV-BDNF组),应用Real-time PCR和免疫印迹检测海马BDNF mRNA和蛋白的表达水平。结果:BDNF过表达慢病毒注射后第28天,PSD+LV-BDNF组的BDNF mRNA、蛋白表达均多于PSD组。分别于CMUS后、手术前和注射后28 d采用糖水消耗试验和旷场试验检测大鼠抑郁样行为,PSD+LV-BDNF组的糖水消耗量及水平移动次数比PSD组均显著增加。结论:在PSD大鼠海马内BDNF、的过表达可改善对脑卒中后抑郁症的抑郁样行为,发挥神经保护作用。     

抑郁症大鼠杏仁核微管相关蛋白表达及神经元凋亡

目的 观察抑郁症大鼠杏仁核磷酸化微管相关蛋白-2（pMAP-2）表达和神经元凋亡的变化,探讨抑郁症的发病机制。方法 随机将20只雄性Wistar大鼠分为对照组和模型组,采用慢性不可预见性温和应激（CUMS）方法建立抑郁大鼠模型,采用糖水偏好实验、悬尾实验、Morris水迷宫实验进行行为学检测,免疫印迹方法检测pMAP-2变化,透射电镜观察神经细胞凋亡。结果 模型组体重增长率、糖水偏好百分比低于对照组（ P <0.05）,悬尾不动时间和逃避潜伏期长于对照组（ P <0.05）;模型组pMAP-2蛋白表达高于对照组（ P ＜0.05）;模型组观察到明显的神经细胞凋亡。结论 抑郁症大鼠杏仁核神经细胞凋亡增加,可能与MAP-2磷酸化增高有关。     

抑郁模型大鼠杏仁核神经元凋亡增加

目的 观察细胞色素C(Cyt C)和凋亡相关基因BAX在抑郁模型大鼠杏仁核神经元的表达,探讨抑郁症杏仁核神经元凋亡的机制.方法 将Wistar大鼠随机分为对照组和模型组,每组15只.用慢性强迫游泳(4周)制备慢性强迫游泳应激抑郁模型.用糖水偏好实验、开场实验和Morris水迷宫检测大鼠行为学.用TUNEL和流式细胞术检...     

慢性不可预知性应激对大鼠海马CA1区星形胶质细胞的影响

目的:研究慢性不可预知性应激(CUS)模型大鼠海马CA1区内星形胶质细胞的改变,探讨星形胶质细胞在抑郁症中的作用.方法:选用雄性SD大鼠,随机分为空白对照组和抑郁模型组,利用CUS刺激制备大鼠抑郁模型,利用糖水偏好实验(SPT)筛选出成模大鼠.随后每组随机抽取5只大鼠,利用免疫组织化学方法结合现代体视学对大鼠海马CA1...     

毛蕊花糖苷对抑郁症大鼠行为学和前额叶皮层内质网应激的影响

目的:观察毛蕊花糖苷(acteoside)对抑郁症大鼠行为学及前额叶皮层内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的影响,探讨毛蕊花糖苷的抗抑郁机制。方法:将108只健康雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、阳性对照氟西汀(20 mg/kg)组和毛蕊花糖苷低、中、高剂量(30 mg/kg、60 mg/kg、120 mg/kg)组,每组18只。采用慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)结合孤养的方式制备大鼠抑郁模型。氟西汀组和毛蕊花糖苷各剂量组分别按剂量连续灌胃给药3周,对照组和模型组每日以等体积生理盐水灌胃。采用旷场实验和糖水偏好实验观察大鼠抑郁样行为变化;免疫荧光组化法检测大鼠前额叶皮层ERS通路的关键因子葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达情况;分光光度计检测大鼠前额叶皮层caspase-3的活性。结果:与对照组比较,模型组、氟西汀组及毛蕊花糖苷各剂量组大鼠旷场实验总行程、中间停留时间及糖水摄取量均下降,前额叶皮层GRP78和CHOP的表达均明显增加,caspase-3酶活性明显升高(P0.05);与模型组比较,氟西汀组和毛蕊花糖苷各剂量组旷场实验总行程、中间停留时间及糖水摄取量均增加,GRP78和CHOP的表达均明显降低,caspase-3酶活性明显下降(P0.05)。结论:毛蕊花糖苷可以改善抑郁症大鼠的抑郁样行为,其机制可能与其抑制前额叶皮层ERS通路并减少神经元凋亡有关。     

甘草苷对抑郁模型大鼠体重及行为学的影响

目的:观察甘草苷对慢性应激抑郁模型大鼠体重及行为学的影响。方法:72只成年SD雄性大鼠,随机分为6组:正常对照组、模型组、氟西汀组,以及甘草苷3个剂量组,每组12只。采用慢性应激加孤养造模,应激持续5周,从第3周起进行药物干预。观察大鼠体重及行为学改变。结果:应激5周后,与正常对照组相比模型组大鼠体重降低(429±45/494±37,P<0.01),糖水消耗量降低(8.3±3.3/14.4±2.7,P<0.01),强迫游泳的不动时间延长(96±10/37±9,P<0.01)。3周甘草苷灌胃后,大鼠体重仍低于正常对照组(444±45、442±22、423±28/494±37,P<0.01),但与模型组相比差异无显著性;甘草苷3个剂量组的糖水消耗量较模型组大鼠增加(11.4±4.0、14.1±3.5、14.0±2.5/8.3±3.3,P<0.05);强迫游泳不动时间较模型组大鼠也缩短(63±8、66±10、26±8、41±11/96±10,z=-2.02、-3.52、-3.03,P<0.05或P<0.01)。结论:除未发现对体重的影响外,3周灌胃甘草苷可以有效逆转抑郁模型大鼠上述的行为学改变,提示甘草苷具有抗抑郁样作用。     

慢性强迫游泳应激抑郁模型大鼠海马钙离子浓度和c-fos表达的改变

目的:观察慢性强迫游泳应激模型大鼠海马区[Ca2+]i和c-fos/Fos的变化,探讨慢性应激抑郁症与海马相关的发病机制。方法:选用雄性成年Wistar大鼠80只,将大鼠随机分为正常对照组(n=19)、急性对照组(n=12)和模型组(n=49),建立慢性强迫游泳应激抑郁模型,通过糖水偏好实验和开场实验对大鼠进行行为学测试。采用荧光分光光度法测定海马内[Ca2+]i浓度,免疫印迹技术和逆转录-聚合酶链式反应检测Fos和c-fos的表达变化。结果:与正常对照组大鼠相比较:(1)模型组大鼠相对糖水消耗量、糖水偏好百分比、直立次数和体重增长率均降低(P0.01,P0.05);(2)模型组大鼠各个时间点海马神经元[Ca2+]i增高(P0.01);(3)模型组大鼠海马Fos在应激后(0.5,1,2,4h)表达增强(P0.01),c-fosmRNA在应激后(0.5,1,2,4h)转录增强(P0.01)。与急性对照组相比较,模型组Fos蛋白表达高峰提前,表达量降低(P0.05)。结论:海马[Ca2']i及c-fos/Fos的表达变化,可能参与了抑郁症的发病过程。     

应激性抑郁症大鼠杏仁核微管相关蛋白表达的实验研究

目的:探讨抑郁症大鼠杏仁核磷酸化微管相关蛋白-2(pMAP-2)的表达。方法:随机将雄性Wistar大鼠分为对照组和模型组,采用慢性不可预见性温和应激(CUMS)方法建立抑郁大鼠模型,采用糖水偏好实验、悬尾实验、Morri水迷宫实验进行行为学检测,免疫印迹方法检测pMAP-2变化。结果:对照组和模型组大鼠7 d、14d和21d的体重增长率分别为7.62±0.83和2.51±0.38、16.37±1.82和1.45±0.85、22.93±2.78、9.34±1.32,相对糖水消耗量分别为9.42±1.81和3.81±0.84,糖水偏好百分比为92.49±8.19和76.61±4.95,差异有统计学意义(P<0.01);悬尾不动时间分别为(1.75±0.31)s和(2.95±0.38)s,差异有统计学意义(P<0.01);平均逃避潜伏期分别为(8.63±1.07)s和(24.76±2.37)s,差异具有统计学意义(P<0.01);对照组和模型组pMAP-2相对表达水平分别为0.74±0.12和1.54±0.18,模型组高于对照组(P<0.05)。结论:应激抑郁大鼠杏仁核组织中MAP-2磷酸化增高。     

构建慢传输型便秘与慢性应激抑郁模型大鼠:揭示便秘与抑郁的关系

背景:临床上便秘患者常常伴有抑郁情绪,抑郁患者也常常伴有便秘症状,其机制不清。目的:通过建立动物模型了解便秘和抑郁的关系。方法:将60只SPF大鼠随机分成3组:正常组、慢性应激抑郁模型组和慢传输便秘模型组。慢传输便秘模型组大鼠每日给予复方地芬诺酯灌胃,给药剂量为8 mg/kg,持续时间120 d。实验第100天开始随机予慢性应激抑郁模型组不可预见刺激21 d。正常组大鼠常规饲养。每周记录1次大鼠粪便粒数、粪便干质量及大鼠体质量。建模成功后检测各组大鼠粪便粒数、粪便干质量、首粒黑便排出时间、糖水偏爱百分比、旷场实验行为学得分、强迫游泳时间并进行统计分析。结果与结论:慢性应激抑郁模型组粪便粒数较正常组少(P=0.00)、首粒黑便排出时间较正常组长(P=0.00);粪便粒数较慢传输便秘模型组多(P=0.00),首粒黑便排出时间较慢传输便秘模型组短(P=0.00)。慢传输便秘模型组的液体消耗量、糖水偏爱百分比、旷场实验水平得分和垂直得分、强迫游泳时间均较正常组均差异无显著性意义(P0.05),但均高于慢性应激抑郁模型组(P0.01)。结果证实,实验成功建立的慢性应激抑郁模型大鼠可表现出便秘现象,而慢传输便秘模型大鼠未能表现出抑郁现象,表明抑郁可以导致便秘,但便秘不一定会导致抑郁。     

慢性应激抑郁状态对大鼠海马神经元再生的影响

目的:探讨慢性应激性刺激引起的抑郁状态对大鼠海马神经元再生的影响。方法:建立大鼠慢性应激性抑郁症模型,通过开场实验和蔗糖饮水实验观察大鼠行为学变化;取大鼠脑冰冻切片行Doublecortin(DCX)免疫荧光检测海马新生神经元。结果:慢性应激抑郁模型大鼠开场实验水平运动得分和垂直运动得分降低,蔗糖偏嗜度降低,且体重明显减轻;免疫荧光结果显示慢性应激抑郁模型大鼠海马齿状回颗粒下层(subgranularzone SGZ)DCX阳性细胞减少。结论:慢性应激性刺激引起的抑郁状态下大鼠海马神经元再生能力减弱,提示海马神经元再生的损害可能参与了抑郁症的病理过程。     

香草醛吸嗅对小鼠抑郁样行为的影响及其机制的探讨

目的：探讨香草醛吸嗅对抑郁症的调节作用及其可能的作用机制。方法：将60只雄性C57小鼠,采用孤养＋慢性不可预见性中等强度刺激（ CUMS）或嗅球毁损,制备抑郁症动物模型,造模成功后,将小鼠随机分为百忧解组、香草醛吸嗅组、模型组及嗅球毁损＋香草醛吸嗅组。观察小鼠治疗后各时间点的神经行为学变化、血浆5-HT浓度的变化及海马5-HT表达。结果：香草醛组治疗2周后悬尾实验、强迫游泳实验时间均明显缩短（P＜0．05）,4周后糖水消耗量明显增加（P＜0．05）;香草醛吸嗅明显提高小鼠5-HT血浆内含量及海马区表达（ P＜0．05）。结论：香草醛吸嗅可以改善抑郁症模型小鼠的神经行为学,提高小鼠5-HT血浆含量及其在海马区表达,其机制可能是经嗅觉通路影响体内5-HT环路,影响海马、杏仁核情绪中枢活动,从而达到抑郁症防治的作用。     

慢性强迫游泳应激抑郁模型大鼠行为学及海马Ca~(2+)/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ的变化

目的 探讨慢性强迫游泳应激(CFSS)模型大鼠行为学的改变和海马神经元Ca~(2+)/钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的表达变化. 方法 成年健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为对照组(30只)和慢性强迫游泳应激组(30只).慢性强迫游泳组强迫游泳4周,制备慢性强迫游泳应激模型;糖水偏好实验、开场实验和Morris水迷宫检测大鼠行为学改变;荧光探针标记法测定海马神经元内Ca~(2+)浓度;胶体金免疫电镜、免疫印迹和RT-PCR检测CaMKⅡ的表达变化. 结果 慢性强迫游泳应激组糖水消耗量和糖水偏好百分比分别为4.114±0.644和86.610±4.450,对照组为8.157±1.105和94.930±2.893,差异有统计学意义(P<0.01);开场实验中慢性强迫游泳应激组和对照组的直立次数分别为1.75±0.96和6.00±0.82,差异有统计学意义(P<0.05);水迷宫实验逃避潜伏期分别为(20.762±3.236)s和(5.632±1.065)s,差异有统计学意义(P<0.01);海马神经元内游离Ca~(2+)浓度分别为(498.94±40.45)nmol/L和(288.91±32.42)nmol/L,差异有统计学意义(P<0.01);CaMKⅡ蛋白和mRNA相对表达水平均高于对照组(P<0.01). 结论 海马Ca~(2+)及CaMKⅡ的表达上调,可能是抑郁模型大鼠情感行为异常的病理生理基础之一.     

抑郁大鼠海马微管相关蛋白pMAP-2和p-Tau表达的研究

目的:观察微管蛋白p MAP-2和p-Tau在抑郁大鼠海马的表达变化情况,探讨海马微管蛋白与抑郁症的关系和意义。方法:通过利用慢性不可预见性温和应激(chronic unpredicted mild stress,CUMS)建立大鼠抑郁症模型,对照组和模型组分别采用糖水偏好实验、旷场实验以及Morris水迷宫对其行为进行学检测,采用尼氏染色观察海马神经元的形态学变化,对照组和模型组造模后1、7、14、28 d分批处死大鼠,用Western Blot方法检测海马组织中p-MAP-2和p-Tau的蛋白表达水平,免疫荧光双标观察海马组织中p-MAP-2和p-Tau定位分布。结果:糖水偏好实验:模型组糖水消耗量和糖水偏好百分比分别低于对照组(P0.01);旷场实验:模型组行走总路程、中央活动时间、直立次数和修饰行为分别低于对照组(P0.01);Morris水迷宫模型组平均逃避潜伏期高于对照组(P0.01)。CUMS后1 d大鼠海马p-MAP-2和p-Tau蛋白的表达低于对照组,7 d后开始升高,14 d明显高于对照组,28 d仍略高于对照组。p-MAP-2和p-Tau免疫荧光双标结果显示:部分神经元的胞浆内p-MAP-2和pTau同时表达,表明p-MAP-2和p-Tau有部分共定位。结论:p-MAP-2和p-Tau在抑郁模型大鼠海马出现先降低后增高的现象,因此我们推测在应激抑郁症发病过程中,p-MAP-2和p-Tau蛋白表达的变化可能影响微管的稳定性,破坏细胞骨架稳态,从而影响海马神经元的结构改变。     

shRNA干扰蓝斑核去甲肾上腺素转运体(NET)表达对大鼠抑郁样行为的改善作用

目的:探讨利用慢病毒在蓝斑核(locus coeruleus,LC)敲除去甲肾上腺素转运体(norepinephrine transporter,NET)对大鼠抑郁样行为的影响。方法:构建NET-shRNA慢病毒载体及阴性对照序列,感染PC12细胞后通过Q-PCR和Western Blot方法测定NET mRNA和蛋白水平;建立慢性不可预见性温和应激大鼠抑郁症模型,双侧蓝斑核注射NET-shRNA;3周后采用强迫游泳实验、糖水偏好实验、旷场实验检测大鼠抑郁样行为;Western Blot检测大鼠NET水平;高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平。结果:Q-PCR和Western Blot检测结果显示:shRNA-1146沉默效率最高(P0.01);与抑郁症模型组相比,蓝斑核注射NET-shRNA组大鼠强迫游泳不动时间减少、糖水偏好率增加、旷场实验得分增加(P0.01),蓝斑核NET表达下降(P0.01)、NE水平升高(P0.05)。结论:NET-shRNA慢病毒注射蓝斑核能下调NET的表达,改善大鼠抑郁样行为,为抑郁症的基因治疗提供了实验依据。