一种新SHV基因型β-内酰胺酶的发现及其临床意义

[目的]查明中国浙江省湖州地区临床分离的鲍曼不动杆菌的耐药情况及其β-内酰胺酶(BLA)耐药基因类型。[方法]采用微量稀释法测定临床分离的鲍曼不动杆菌HZ01株对21种抗菌药物的敏感性、三维试验法检测超广谱β-内酰胺酶(ES—BLs)，采用聚合酶链反应(PCR)技术检测TEM、SHV、OXA、CTX—M-1、CTX—M-2、CTX—M-9、PER及VEB型BLA耐药基因、并进行序列分析。[结果]临床分离的鲍曼不动杆菌HZ01株产生SHV型BLA，其扩增片段含826个核苷酸，核苷酸及相应的氨基酸序列经GenBank查询无相同序列，为新发现的一种BLASHV-48型(GenBank注册号：AY259164)。[结论]临床分离的鲍曼不动杆菌HZ01株所产BLA为SHV-48亚型，为一种新发现的新型BLA。     

鲍曼不动杆菌的耐药性及β-内酰胺酶基因的研究

目的调查鲍曼不动杆菌耐药特点及β-内酰胺酶基因类型。方法用Phoenix-100系统对细菌进行鉴定和药敏试验。用琼脂稀释法测定头孢噻肟等6种抗生素的最低抑菌浓度;用PCR法检测β-内酰胺酶基因,并对耐药基因测序分析。结果247株鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美洛培南耐药率仅为3.2%和4.1%,而对阿莫西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦等其余14种抗生素耐药率为31.9%~67.2%。20株多重耐药性鲍曼不动杆菌中17株具TEM基因,任选3株经DNA测序为TEM-1型基因,与GeneBank(χ54604)比较,共有4处同义突变。未检出SHV、OXA、CTX-M、PER和VEB型β-内酰胺酶基因。结论本地区鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药除与TEM型耐药基因有关外,可能还与其他耐药机制有关。     

广州地区鲍曼不动杆菌产β内酰胺酶基因型调查

目的调查广州地区临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性及其主要β内酰胺酶分布。方法用K-B纸片扩散法测定临床分离的211株鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物的敏感性,采用PCR对85株耐药株进行β内酰胺酶基因扩增,通过序列分析明确基因型。结果鲍曼不动杆菌对美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮-舒巴坦和替卡西林-克拉维酸的耐药率分别为0、0.9%、31.4%和31.1%,其余抗菌药物耐药率在39.3%~80.1%;85株耐药菌株中,57株扩增到ampC基因、12株SHV-12型基因阳性,14株PER-1型基因阳性,7株CTX-M-14型基因阳性,8株TEM-1型基因阳性;同时携带2种基因有11株,携带3种基因有10株。结论鲍曼不动杆菌耐药与携带ampC基因、SHV-12、PER-1、CTX-M-14和TEM-1型等基因密切相关。     

OXA-51型β内酰胺酶的研究进展

不动杆菌是引起医院感染的重要病原体之一,其中鲍曼不动杆菌是临床最常分离到的不动杆菌,其次为pittii不动杆菌（Acinetobacter pitti,A.pitti,即以前的不动杆菌基因种型3）和nosocomialis不动杆菌（Acinetobacter nosocomialis,A.nosocomialis,即以前的不动杆菌基因种型13TU）。这3种不动杆菌通常难以鉴别,统称为＂醋酸钙不动杆菌-鲍曼不动杆菌复合体＂（A.calcoaceticus-A.baumannii complex,Acb）。     

铜绿假单胞菌IMP型金属β-内酰胺酶的基因研究

目的　研究铜绿假单胞菌产金属β- 内酰胺酶(metallo -β- lactamases,简称金属酶)的编码基因及亚型。方法　临床分离的铜绿假单胞菌用全自动微生物分析系统鉴定,纸片扩散法进行抗生素敏感试验,采用纸片协同法检测金属酶表型,PCR法扩增金属酶基因,并对PCR产物进行序列测定,确定亚型。结果　24株耐亚胺培南铜绿假单胞菌共检出产金属酶菌株7 株。该7 株细菌均扩增出IMP型金属酶,其扩增片段含500个核苷酸,核苷酸及氨基酸序列经GenBank分析,为IMP -1型金属酶(注册号:AY386702),但有3个位点的同义突变。结论　7 株临床分离的铜绿假单胞菌产生的金属酶为IMP -1亚型。     

一种新基因型TEM-128β-内酰胺酶的发现及其临床意义

目的 分析产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌TEM型β-内酰胺酶(BLA)的编码基因并确定其亚型。方法 采用聚合酶链反应(PCR)扩增BLA编码基因TEM、SHV、OXA、CTX—M-1、CTX—M-2、CTX—M-9、PER和VEB片段，双脱氧链终止法测定核苷酸序列、确定亚型。结果临床分离的鲍曼不动杆菌HZ38株产生TEM型BLA，其扩增片段含1049个核苷酸，核苷酸及相应的氨基酸序列经Gen—Bank查询无相同序列，为新发现的一种BLA TEM-128型(GenBank注册号：AY359287)。结论 临床分离的鲍曼不动杆菌HZ38株所产BLA为TEM-128亚型，为一种新发现的新型BLA。     

鲍曼不动杆菌的β—内酰胺酶与耐药表型分析

分析鲍曼不动杆菌的β－内酰胺酶与对β－内酰胺类抗生素耐药表型的关系。用青霉素及头孢唑啉做底物，分别检测从各种临床样品分离到的８４株鲍曼不动杆菌的青霉素酶和头孢菌素酶；并用Ｋ－Ｂ法，微量肉汤稀释法进行了７种β－内酰胺类抗生素及两种加酶抑制剂的三代头孢药敏试验，其中产酶株对７种抗生素基本耐药，不产酶株对头孢他啶 ，哌拉西林较敏感；８４株对头孢哌酮／舍巴坦均敏感，舒巴坦对酶的抑制作用远优于棒酸，用头孢他     

鲍曼不动杆菌的耐药性及β-内酰胺酶耐药基因的研究

目的了解临床分离的鲍曼不动杆菌耐药性及β-内酰胺酶耐药基因的存在类型。方法用美国BD公司Phoenix-100型全自动细菌鉴定药敏系统鉴定细菌及做药敏试验,用聚合酶链反应（PCR）方法检测5种常见β-内酰胺酶耐药基因。采用随机引物PCR扩增对菌株进行分型。结果 50株鲍曼不动杆菌对多粘菌素B全部敏感,,而对其余18种抗生素耐药率为52%-100%,其中24株为泛耐药菌株,共分为8种基因型,B型菌株为主要的流行株,所有菌株均检出TEM-1基因,46株检出AmpC基因,31株检出0XA-24基因、21株检出0XA-23基因,7株检出IMP基因。结论临床分离的鲍曼不动杆菌主要以引起危重病人的呼吸道感染为主,对18种临床常用抗生素耐药率高,对头孢菌素类高度耐药并且存在克隆传播,同时携带多种耐药基因是本院鲍曼不动杆菌对β-内酰胺酶类抗菌药物耐药的主要原因。     

上海地区四家医院鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶研究

目的了解上海地区4家医院2010年鲍曼不动杆菌对13种抗菌药物耐药性及β-内酰胺酶基因携带情况,研究该菌的流行型别,为临床合理用药及控制医院感染提供依据。方法收集上海4家医院临床分离的鲍曼不动杆菌共204株。采用琼脂稀释法检测上述细菌对13种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),三维试验检测AmpC酶,乙二胺四乙酸(EDTA)纸片协同试验检测金属酶表型。聚合酶链反应(PCR)检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、ampC、IMP-1、IMP-4、VIM-2编码基因。结果 4家医院鲍曼不动杆菌对环丙沙星、哌拉西林-他唑巴坦、头孢西丁、复方磺胺甲口恶唑、头孢哌酮耐药率均较高,达到90%以上;对左氧氟沙星、多黏菌素B耐药率均相对较低。研究发现浦东地区医院对美罗培南、左氧氟沙星、多黏菌素B的耐药率均高于浦西地区医院。AmpC酶表型检测以公利医院表型阳性率最高(84.6%),瑞金医院表型阳性率最低(42.3%);金属酶表型检测,公利医院和仁济医院西院未检测到金属酶表型阳性菌株,另外3家医院中以东方医院检出率最高(27.3%),瑞金医院检出率最低(7.7%)。基因检测,浦东地区医院的OXA-23和ampC阳性率要比浦西地区医院的阳性率高。204株菌株OXA-51均为阳性,均未检测到OXA-24、OXA-58、IMP-1基因。在仁济医院东院和东方医院标本中检测到IMP-4和VIM-2基因,其他医院标本未检测到IMP-4和VIM-2基因。结论本地区分离到的鲍曼不动杆菌均检测出OXA-51,上海地区不同医院之间鲍曼不动杆菌产β-内酰胺酶情况略有不同。     

五味子对产金属β-内酰胺酶鲍曼不动杆菌的体外抗菌作用研究

目的：研究五味子对鲍曼不动杆菌,包括产金属β-内酰胺酶（MBL）细菌和不产 MBL 鲍曼不动杆菌的体外抗菌作用。方法对临床分离的75株鲍曼不动杆菌进行初步筛选,然后对这些菌株进行产 MBL 确证试验;检测75株鲍曼不动杆菌对14种抗菌药物的耐药情况;采用体外抑菌试验检测五味子水煎液对75株鲍曼不动杆菌（包括产 MBL 和不产 MBL 鲍曼不动杆菌）的 MIC。结果结果 MBL 确证试验表明筛选出的50株菌株中,有38株阳性,占试验菌株的76％（38／50）。结论五味子对鲍曼不动杆菌,特别是产 MBL 酶的鲍曼不动杆菌有一定的抑菌作用,可以将西药与五味子联合应用在抗鲍曼不动杆菌的治疗中。     

鲍曼不动杆菌整合子相关耐药基因研究

目的了解我院鲍曼不动杆菌整合子流行情况,证实整合子与鲍曼不动杆菌多重耐药性的关系,建立一种快速简便的整合酶聚合酶链反应（PCR）检测方法。方法收集我院2005年9月至2006年2月临床分离的鲍曼不动杆菌共52株,用纸片扩散法检测鲍曼不动杆菌耐药性及用整合酶PCR检测其整合子基因。结果在52株鲍曼不动杆菌中,整合酶PCR检测出Ⅰ类整合子33株（63％）,未检测出Ⅱ类整合子。统计学分析结果显示,整合子阴性和阳性的鲍曼不动杆菌对各种抗生素的耐药率存在明显差异,前者仅对几种抗生素耐药而后者对多种抗生素耐药。结论我院多重耐药鲍曼不动杆菌中主要为Ⅰ类整合子,整合酶PCR是一种快速、简便、易在临床开展的检测方法,同时也是控制医院感染的有效检测手段。     

多重PCR方法检测多耐药鲍曼不动杆菌基因型

目的建立一种适于临床微生物实验室快速检测多耐药鲍曼不动杆菌基因的多重PCR方法。方法筛选临床分离鉴定的多耐药鲍曼不动杆菌105株;用热煮沸法提取DNA,采用多重PCR技术,优化反应条件,同时扩增OXA酶基因(blaOXA-23-like,blaOXA-24-like,blaOXA-51-like,blaOXA-58-like)和整合酶基因(intI1,intI2),扩增产物经凝胶成像系统分析。结果105株多耐药鲍曼不动杆菌中,76株是blaOXA-51-like blaOXA-23-like intI1基因型,18株是blaOXA-51-like intI1基因型,10株是blaOXA-51-like blaOXA-23-like基因型,1株是blaOXA-51-like blaOXA-23-like blaOXA-58-like基因型。未检测出携带有blaOXA-24-like和intI2基因的菌株。结论多耐药鲍曼不动杆菌的耐药性及流行趋势与其携带的OXA酶基因和整合酶基因相关。     

从携带多种耐药基因认识鲍曼不动杆菌多重耐药性

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药基因和耐药性。方法用MIC法检测鲍曼不动杆菌的耐药性,用PCR方法检测各种耐药基因。结果2株菌对亚胺培南耐药,1株中介;所测菌均呈多重耐药性。23株菌均扩增到blaTEM和aacA4基因;22株菌检测到ampC基因,22株菌aacC1、aadA1基因为阳性,2株菌aphA1基因为阳性;2株菌blaPER基因为阳性,3株菌blaOXA-23型基因阳性。结论携带am-pC、blaPER、blaOXA-23、aacA4、aadA1等多种耐药基因是我院鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因。     

DiversiLab系统鲍曼不动杆菌基因分型可行性研究

目的 应用DiversiLab系统对鲍曼不动杆菌进行基因分型,并评价其可行性.方法 对2005年全国15个城市医院临床分离的58株鲍曼不动杆菌,应用以rep-PCR为原理的DiversiLab系统分型技术进行分型,并与脉冲场凝胶电泳分型和多位点序列分型技术结果进行比较;计算Simpson相关系数(Simpson's index of diversity)比较3种方法的分辨力.结果 DiversiLab系统将58株鲍曼不动杆菌分为5簇流行克隆和25个散发克隆;多位点序列分型技术将其分为35个序列型,并归为一个克隆复合体CC22(Clone Complex 22)和35个单一体(singleton);PFGE将其分成5个流行脉冲型和34个散发克隆.DiversiLab系统、MLST和PFGE的Simpson相关系数分别为0.876、0.944和0.961.结论 DiversiLab系统的操作简单、快速,可重复性好,可以作为大量菌株首选分型方法,但分辨力低于PFGE和MLST两种分型技术.     

The Acinetobacter baumannii group: a systemic review

BACKGROUND:

The Acinetobacter baumannii group, including Acinetobacter baumannii, Acinetobacter genomospecies 3 and 13TU, is phenotypically indistinguishable and uniformly identified as Acinetobacter baumannii by laboratories of clinical microbiology. This review aimed to demonstrate the differences among them.

METHODS:

Literatures associated with the Acinetobacter baumannii group were identified and selected from PubMed databases and relevant journals.

RESULTS:

Acinetobacter genospecies 3 and 13TU possess a certain proportion in clinical isolates. There were considerable differences in epidemiologic features, clinical manifestations, antimicrobial resistances and therapeutic options among the Acinetobacter baumannii group. Compared with Acinetobacter genomospecies 3 and 13TU, Acinetobacter baumannii with a higher resistance to antimicrobial agents are easier to be treated inappropriately, and present a worse outcome in patients.

CONCLUSION:

The Acinetobacter baumannii group comprises three distinct clinical entities, and their clinical value are not equal.KEY WORDS: Acinetobacter baumannii, Acinetobacter genomospecies 3, Acinetobacter genomospecies 13TU, Difference     

Carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii: epidemiology,surveillance and management

Carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii pose a significant threat to hospitalized patients, as therapeutic options are scarse. Alarmingly, rates of carbapenem-resistance in A. baumannii are on the rise and are slowly becoming a routine phenotype for this organism. This review focuses on infection control strategies for identification and control of A. baumannii, as well the available therapeutic options.     

住院患者鲍曼不动杆菌感染趋势调查

目的探讨鲍曼不动杆菌感染及耐药率的变迁。方法回顾分析我院2001-2005年6月住院患者鲍曼不动杆菌感染情况。结果鲍曼不动杆菌感染由2001年全年15株上升至2005年半年68株，高度耐药菌株由20％上升至77％。结论鲍曼不动杆菌感染率和耐药率的不断上升。     

鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌的医院感染情况及耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌的医院感染和细菌耐药情况。方法收集2016年1月1日至2018年12月31日该院临床标本中分离的鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌,并对标本来源、分布和药敏试验结果进行分析。结果186株鲍曼不动杆菌来源科室主要分布于呼吸内科、康复医学科、神经内科、肾内科和内分泌科,标本以痰液和中段尿为主,对替卡西林/克拉维酸、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢他啶、环丙沙星、头孢吡肟和庆大霉素的耐药率分别为26.03%、24.76%、22.86%、18.70%、18.70%、18.20%和16.60%。51株洛菲不动杆菌来源科室主要分布于呼吸内科、泌尿外科、神经内科、肾内科和康复医学科,标本以痰液和中段尿为主,对头孢他啶、环丙沙星、亚胺培南、头孢吡肟、替卡西林/克拉维酸、美罗培南和庆大霉素的耐药率分别为24.00%、22.00%、18.00%、18.00%、15.62%、14.00%和10.00%。结论两种不动杆菌都主要分离于老年男性的呼吸道标本,二者的耐药率均不高,洛菲不动杆菌的总体耐药率低于鲍曼不动杆菌,但是耐碳青霉烯类抗菌药物的洛菲不动杆菌的检出率高于耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌,需要引起重视。