标准化脐血筛选方法在脐血库中的应用

目的对广州脐血库脐血筛选结果进行回顾性分析,建立脐血筛选的标准化方法和探讨其在脐血库建立中的意义。方法对脐血供者从产妇或其旁系亲属医学病史到新生儿随访实行四步筛选程序,筛选内容包括遗传、血液病等病史、脐血采集量、总有核细胞数、细胞活率、凝块和病原学感染等。结果1998年6月至2004年12月共分娩27404例、采集脐血8350份,占总分娩量比率为30.47%。合格4085份,合格率为48.92%;废弃脐血4265份(占51.08%),废弃的主要原因依次为脐血采集量<60ml、血凝块、总有核细胞数、活率低。检疫期共废弃脐血46份(占1.11%);其中检出细菌阳性19例(占41.30%),巨细胞病毒抗体(CMV-lgM)阳性20例(占43.48%)。新生儿随访共发现15例异常,占0.37%。4085份脐血总有核细胞数平均为1.21×109,根据脐血有核细胞输入量3.7×107/kg体重计算,平均能适合32.7kg的受者移植;而按2.0×107/kg体重计算平均能适合60.5kg的受者移植。104例脐血移植中72例获得植入(69.2%)。结论脐血供者的标准化筛选方法可以排除可能存在的血液性、遗传性和传染性等疾病,确保移植用脐血的安全;并能为脐血库的建立节约采集、处理、冻存等费用,提高库存脐血的有效利用率。     

脐血间充质干细胞成功培养的相关因素探讨

目的探讨影响人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成功培养的相关因素,以期提高其培养成功率。方法脐血依胎龄分为3组:40周胎龄组(n＝11);36周胎龄组(n =6);32周及其以下胎龄组(n=5)。采用相对适宜的条件培养,观察能成功培养出MSCs的比率,探讨脐血MSCs培养与胎龄、脐血单个核细胞数量(mononuclear cells,MNCs)、脐血容量之间的相关关系,以及各因素之间可能存在的相关关系。通过检测脐血MSCs的生长曲线、细胞群体倍增时间、成纤维细胞集落形成数目(fibroblast colony forming unit,CFU-F)、表面标志的表达来观察脐血MSCs细胞的生物学特性。结果脐血MSCs培养成功率达54．5％。MSCs培养成功与否与接种于培养瓶内脐血MNCs数量密切相关,脐血MNCs接种数量在1．25×108／L以上者培养成功率达83．3％。单位体积内脐血MNCs含量与胎龄呈负相关。小胎龄者脐血MSCs成集落能力(CFU-F数目)高于大胎龄。流式细胞术检测显示,在原代培养细胞增殖期末间充质干细胞的重要表面标志CD29有62．1％的表达,传1代细胞表达CD29、CD105分别为78．3％和85．0％;造血系统的表面标志CD34、CD45则始终在3．0％以下。结论脐血MNCs的接种数量在1．25×108／L以上可以提高培养的成功率。相同容量内脐血MNCs与胎龄呈负相关,且脐血MSCs样细胞集落形成能力(CFU-F计数)小胎龄者高于大胎龄,可能是小胎龄脐血MSCs相对容易培养成功的原因之一。     

脐血胆红素浓度与新生儿黄疸关系的探讨

测定94例新生儿脐血和血清胆红素浓度。结果表明,高胆红素血症组患儿脐血胆红素浓度明显高于对照组(P<0.01);脐血胆红素浓度与新生儿血清胆红素浓度呈显著正相关(P<0.05);脐血胆红素值≥42.5μmol/L的新生儿78％以后出现严重黄疽(胆红素值≥171μmol/L),说明检测脐血胆红素浓度可预告新生儿高胆红素血症。     

足月新生儿脐血ghrelin水平与瘦素、生长激素水平关系研究

目的 探讨ghrelin调节胎儿生长发育的可能的作用机制.方法 采用放射免疫法测定78例足月新生儿脐血ghrelin、瘦素、生长激素水平,分析脐血ghrelin、瘦素、生长激素水平与出生体重的关系及脐血ghrelin水平与瘦素、生长激素水平间的关系.结果 小于胎龄儿(SGA)、适于胎龄儿(AGA)、大于胎龄儿(LGA)三组间新生儿脐血ghrelin、瘦素水平差异均有统计学意义(P均<0.01).脐血ghrelin水平与出生体重呈负相关性(r=-0.339,P=0.002),脐血瘦素水平与出生体重呈正相关性(r=0.373,P=0.001),脐血ghrelin水平与瘦素无相关性(P=0.175).脐血生长激素水平与出生体重、脐血ghrelin水平均无相关性(P=0.267,0.059).结论 Ghrelin及瘦素共同调节胎儿生长发育的机制可能与出生后两者的调节机制有所区别,Ghrelin可能并非通过刺激生长激素分泌而发挥调节胎儿生长发育作用.     

胎儿窘迫孕妇血及脐血一氧化氮

为了解胎儿窘迫时孕妇血及脐血中一氧化氮(NO)水平的变化及其与胎儿窘迫及新生儿窒息的关系.对42例胎儿窘迫孕妇(胎儿窘迫组)及36例正常晚孕妇女(对照组)母血、脐血中NO代谢产物亚硝酸/硝酸基(NO-2/NO-3)进行测定;以血气分析仪测定脐血pH值.结果显示胎儿窘迫组母血及脐血NO水平均较对照组明显下降(P均＜0.01),胎儿窘迫组与对照组相比脐血pH下降(P＜0.01);新生儿Apgar评分下降(P＜0.01);新生儿一分钟Apar评分≤7分的例数所占比例上升(P＜0.01).母血NO≤2.66umol/L,脐血NO≤2.03umol/L时新生儿窒息率明显上升(P＜0.01),与脐血pH值＜7.20时相比,两者新生儿窒息率无显著差异(P＞0.05).新生儿脐血pH值与脐血NO水平呈高度正相关(r=0.74,P＜0.01).结论母血及脐血NO下降与胎儿窘迫有一定关系;NO水平下降在预测新生儿窒息时与脐血pH值有同等价值;监测母血及脐血NO水平可作为诊断胎儿窘迫的指标之一.指导临床及时处理胎儿窘迫,为减少新生儿窒息的发生起很重要的作用.     

采用二甲基亚砜和右旋糖酐冻存脐血造血细胞的研究

脐血移植已被广泛地用于治疗各种血液性疾病和恶性肿瘤 ,临床上主要采用同胞脐血移植和无关供者脐血移植两种形式[1] 。前者往往直接将整份脐血冻存 ,后者供者来源于脐血库 ,多为经羟乙基淀粉 (ＨＥＳ)分离后的有核细胞(ＮＣ) [2 ] 。对于保存方法 ,单用一种冷冻保护剂即使加大剂量也不会增加冷冻效果 ,反而加大毒性[3 ] 。我们采用合用两种冷冻保护剂冻存整份脐血和分离后有核细胞 ,以探讨理想的冻存方法来建立脐血库和保存同胞脐血。材料和方法选取足月健康新生儿采集脐血。冷冻保护剂甲为 2 0 %二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ ,美国Ｓｉｇｍａ公司…     

胎儿窘迫孕妇血及脐血一氧化氮及其与新生儿窒息的相关研究

为了解胎儿窘迫时孕妇血及脐血中一氧化氮 (NO)水平的变化及其与胎儿窘迫及新生儿窒息的关系。对 42例胎儿窘迫孕妇 (胎儿窘迫组 )及 36例正常晚孕妇女 (对照组 )母血、脐血中 NO代谢产物亚硝酸 /硝酸基 (NO- 2 / NO- 3 )进行测定 ;以血气分析仪测定脐血 p H值。结果显示　胎儿窘迫组母血及脐血 NO水平均较对照组明显下降 (P均 <0 .0 1 ) ,胎儿窘迫组与对照组相比 :脐血 p H下降 (P<0 .0 1 ) ;新生儿Apgar评分下降 (P<0 .0 1 ) ;新生儿一分钟 Apgar评分≤ 7分的例数所占比例上升(P<0 .0 1 )。母血 NO≤ 2 .6 6 umol/ L,脐血 NO≤ 2 .0 3umol/ L时新生儿窒息率明显上升 (P<0 .0 1 ) ,与脐血 p H值 <7.2 0时相比 ,两者新生儿窒息率无显著差异 (P>0 .0 5 )。新生儿脐血 p H值与脐血 NO水平呈高度正相关 (r=0 .74,P<0 .0 1 )。结论　母血及脐血 NO下降与胎儿窘迫有一定关系 ;NO水平下降在预测新生儿窒息时与脐血 p H值有同等价值 ;监测母血及脐血 NO水平可作为诊断胎儿窘迫的指标之一。指导临床及时处理胎儿窘迫 ,为减少新生儿窒息的发生起很重要的作用。     

小儿免疫及原发性免疫缺陷病

051252脐血IgE值用于预报食物过敏高危儿童的研究/李斐…∥中华儿科杂志.-2004,42(2).-117～120方法:随机选取婴儿118人,随访至出生后4个月,诊断及分组采用标准问卷调查和食物皮肤点刺试验,应用纸片放射免疫吸附法测定脐血IgE值。结果:4个月时,经确诊为食物过敏患儿组的脐血IgE值高于未发生食物过敏的婴儿组及不能确诊为食物过敏的婴儿组(P<0.05);当脐血IgE值的预报界值定为0.9IU/L(CBIgE0.9)或0.5IU/L(CBIgE0.5)时,高脐血组FA检出率高于低脐血组(P<0.01),提示脐血IgE升高是导致食物过敏的危险因素之一;CBIgE0.9预报食物过敏的…     

早产儿脐血造血干/祖细胞特点

目的对12例早产儿和18例足月儿脐血采集量、有核细胞数量、CD34+细胞比例、体外形成造血细胞克隆的能力进行比较研究。方法采用密闭式脐血采集袋,经脐静脉穿刺收集脐带血,按体积比5:1与60 g.L-1羟乙基淀粉(HES)混合、浓缩有核细胞,流式细胞仪检测CD34+细胞比例,甲基纤维素半固体培养基检测其脐血形成造血细胞克隆能力。结果早产儿脐血采集量及分离前后有核细胞数量均低于足月儿脐血[脐血采集量分别为(76.52±22.48)mLvs(94.21±20.32)mL,P<0.05;分离前有核细胞数量分别为(4.78±2.30)×108vs(8.36±2.51)×108,P<0.01;分离后有核细胞数量分别为(3.72±1.71)×108vs(6.54±1.94)×108,P<0.01)]。早产儿CD34+细胞比例高于足月儿脐血[(0.49±0.16)%vs(0.32±0.13)%,P<0.01],早产儿脐血体外生成红系爆式集落形成单位和粒-单系集落形成单位的能力也高于足月儿脐血[分别为(29.58±10.54)/2×105MNCvs(19.27±7.26)/2×105MNC,P<0.01和(45.28±16.2...     

新生儿脐血维生素K缺乏诱导蛋白与胎龄及地区的关系

目的 探讨新生儿脐血维生素K缺乏诱导蛋白(PIVKA-Ⅱ)水平是否与胎龄及地区有关。方法采集405例足月儿(平均胎龄39.31周,城镇259例,乡村146例)及142例早产儿(平均胎龄35.90周,城镇116例,乡村26例)脐血,用酶联免疫吸附法测定其PIVKA-Ⅱ水平,≥2μg/ml为阳性。结果 不同胎龄新生儿脐血PIVKA-Ⅱ阳性率无显著差异(P>0.05);城镇足月儿脐血PIVKA-Ⅱ阳性率32.82％,显著低于乡村65.75％(P<0.01),而城镇与乡村早产儿脐血PIVKA-Ⅱ阳性率(42.24％,46.15％)无显著差异(P>0.05)。结论新生儿脐血PIVKA-Ⅱ水平与胎龄无关,与地区有关。