实验性兔腰椎间盘退变模型中Fas/FasL基因表达及意义

目的建立腰椎间盘退变模型,检测退变髓核中Fas/FasL基因表达水平,阐明Fas/FasL基因的过度表达是导致髓核细胞凋亡的主要因素之一,腰椎间盘在Fas/FasL基因的过度表达的情况下可能导致超常的凋亡,最终导致椎间盘退变甚或突出。方法选用20只清洁级成年日本大耳白兔,按体重编号,随机分为2组,即模型组和对照组。模型组：麻醉后,手术造成腰椎间不稳;并加以异常应力,以促进造模。对照组（n=10）：对照组同法麻醉,作皮肤切口后直接缝合;两组动物在相同条件下饲养,于术后1M、2 M随机各取5只兔子行病理学检查证明造模成功,同时检测两组动物髓核中Fas/FasL基因表达水平。结果 1术后2月模型组兔腰椎间盘2造模2月后,对照组兔腰椎间盘病理学检查无明显退变表现;而模型组造模2个月后,出现纤维环断裂,髓核向后突出,说明造模成功。2检测本实验提取的总RNA纯度高,RT-PCR产物经1.5%琼脂糖凝胶电泳后紫外透射仪下可见扩增之特异产物条带,且目的基因片段产物与引物设计之目的片段大小完全吻合;Fas mRNA、FasL mRNA在退变腰椎间盘组织中有过度表达,与正常腰椎间盘组织相比,其差异有显著性（P〈0.05）。结论腰椎间盘退变模型髓核中有Fas/FasL基因表达,其表达水平与正常腰椎间盘组织相比,其差异有显著性（P〈0.05）;说明Fas/FasL基因的过度表达是导致髓核细胞凋亡的主要因素之一,腰椎间盘在该基因的过度表达的情况下可能导致超常的凋亡,最终导致椎间盘退变甚或突出。     

MMP-2、MMP-14、TIMP-2在退变腰椎间盘髓核组织的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-14（MMP-14）和金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在退变腰椎间盘髓核组织表达的意义。方法应用免疫组织化学法检测36例退变腰椎间盘髓核组织（退变组）、20例腰椎骨折腰椎间盘髓核组织（对照组）MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达。结果退变组MMP-2、MMP-14表达明显高于对照组（P〈0.001）,TIMP-2表达无明显改变（P〉0.05）;椎间盘退变等级与MMP-2、MMP-14及TIMP-2表达呈正相关（分别rs=0.710,P〈0.001;rs=0.617,P〈0.001;rs=0.406,P=0.014）;MMP-2与MMP-14、TIMP-2表达呈正相关（分别rs=0.665,P〈0.001;rs=0.516,P=0.001）。结论 MMP-2、MMP-14和TIMP-2表达加强可能是导致椎间盘退变的重要原因之一。     

β连环素在腰椎间盘退变组织中的表达及意义

目的研究β连环素在腰椎间盘退变组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测腰椎间盘突出症患者(A组,21例)和腰椎骨折伴截瘫患者(B组,14例)髓核组织中β连环素的蛋白表达,并分析β连环素蛋白表达强度与腰椎退变程度间的关系。结果A组β连环素蛋白表达阳性率高于B组(38.10%vs.7.14%)(P<0.05)。β连环素蛋白表达强度与中晚期腰椎退变程度呈正相关(P<0.05)。结论 Wnt/β连环素信号通路在腰椎间盘退变过程中发挥着重要的作用。     

退变腰椎间盘髓核组织中转化生长因子-α、基质金属蛋白酶-9的表达及意义

目的 观察退变腰椎间盘髓核组织中转化生长因子-α（TGF-α）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达并探讨其意义.方法 标本分别取自退变组和对照组.所有标本一份制作为石蜡切片,用免疫组织化学方法检测TGF-α、MMP-9蛋白表达情况;另一份用RT-PCR方法检测TGF-α、MMP-9 mRNA表达情况.结果 退变组腰椎间盘髓核组织中TGF-α、MMP-9的表达量均较对照组增多（蛋白水平：t=29.114,P＜0.01;t=19.926,P＜0.01.mRNA水平：t=47.642,P＜0.01;t=26.987,P＜0.01）,TGF-α和MMP-9蛋白、mRNA表达均呈正相关关系（蛋白水平：r=0.725,P＜0.01;mRNA水平：r=0.684,P＜0.01）.结论 TGF-α、MMP-9在正常与退变椎间盘髓核组织中表达量不同,退变椎间盘中二者表达量较高,两者可能与椎间盘退变有关.TGF-α对椎间盘退变的调节作用与MMP-9有一定的关系.     

富马酸二甲酯对大鼠椎间盘退变髓核中低氧诱导因子-1α表达和功能的影响

目的 建立SD大鼠腰椎间盘退变模型采用测定低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠模型腰椎间盘髓核中的表达情况及作用,探讨富马酸二甲酯(DMF)对其表达及功能的影响.方法 对大鼠腰椎退变模型行磁共振成像(MRI)扫描后,取L4/L5节段髓核组织行蛋白多糖检测,石蜡包埋、切片后进行HIF-1α的免疫组化染色.结果 MRI结果显示模型对照组(B组)的椎间盘髓核存在明显的退变,T2加权相信号降低 (P<0.05).B组髓核中的HIF-1α呈强阳性,与另两组比较差异有统计学意义(P<0.05).对全部的髓核组织的进行蛋白多糖含量的检测,可见对照组B组的蛋白多糖成分(2.06±0.04) ng·g-1,流失最为严重,富马酸二甲酯用药组(C组)(2.06±0.05) ng·g-1相对较轻,正常对照组(A组)含量为(3.28±0.03) ng·g-1,三组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 HIF-1α在退变的腰椎间盘组织中表达增高,其表达与腰椎的退变密切相关.富马酸二甲酯作为HIF-1α的抑制剂能降低HIF-1α的表达,抑制和延缓腰椎间盘退变的形成和发展.     

CD68巨噬细胞在腰椎间盘突出组织中的分布及其意义

目的:研究CD68巨噬细胞在不同类型腰椎间盘突出组织中的分布及其意义。方法:应用免疫组织化学方法检测40例(男27例,女13例)退变腰椎间盘和8例(男3例,女5例)特发性脊柱侧凸腰椎间盘髓核组织中CD68的表达。将获得的数据进行统计学分析。结果:腰椎间盘突出破裂型组和未破裂型组CD68表达阳性分别为18例,13例。8例特发性脊柱侧凸腰椎间盘组织中CD68阳性表达1例。结论:CD68巨噬细胞参与了腰椎间盘突出症的发病,但与突出严重程度无关。     

腰椎间盘突出症的超微结构病理研究

目的：从超微结构病理角度研究破碎型腰椎间盘突出症和退变型腰椎间盘突出症的病理机制和病理过程。方法：选取40例腰椎间盘突出症患者的椎间盘手术标本，依术中所见分为破碎型腰椎间盘突出组（破碎组）和退变型腰椎间盘突出组（退变组）。椎间盘标本行光镜和透射电镜检查，对比研究两组形态学差异。结果：光镜检查见破碎组组织破坏，炎细胞浸润，血管化；退变组纤维环增厚，软骨基质增生。电镜检查破碎组见髓核基质溶解，胶原纤维断裂崩解，细胞破碎、坏死；退变组见相对完整纤维环、髓核结构，胶原纤维致密、增生，细胞合成活跃。结论：破碎型腰椎间盘突出症是以组织坏死、基质溶解为主的病理过程。退变型腰椎间盘突出是以增生反应为主反应的病理过程。     

Sox9和Ⅱ型胶原蛋白在人腰椎间盘退变中的表达及意义

目的：探讨Sox9和Ⅱ型胶原蛋白（Col2al）在人类腰椎间盘退变中的表达及意义。方法应用免疫组织化学在退变和正常腰椎间盘组织中分别检测Sox9和Ⅱ型胶原蛋白的表达,并分析其相关性。结果实验组Sox9染色阳性率为20.0%（6/30）,对照组Sox9染色阳性率为76.7%（23/30）,两组间染色阳性率有显著性差异（P＜0.05）。实验组Col2al染色阳性率为33.3%（10/30）,对照组Col2al染色阳性率为83.3%（25/30）,两组间染色阳性率有显著性差异（P＜0.05）。退变腰椎间盘中6例Sox9阳性者中,仅1例Col2al表达阴性,而在10例Col2al表达阳性者中,5例Sox9表达阴性,二者同时阳性5例,同时阴性表达19例。退变椎间盘中Sox9和Col2al的表达呈显著正相关（P＜0.05）。结论Sox9和Ⅱ型胶原蛋白表达降低与腰椎间盘退变有关,Sox9可能通过下调Col2al的表达,共同参与腰椎间盘退变。     

低氧诱导因子在腰椎间盘突出中的病理机制研究

目的 研究低氧诱导因子(HIF)在腰椎间盘突出中的病理机制.方法 采用磁共振图像系统对腰椎间盘突出症进行分级诊断并将收集的样本分为腰椎间盘突出轻度、中度、重度组和对照组;采用免疫组织化学方法对HIF在腰椎间盘突出病人中的表达进行检测、real-time PCR方法检测其mRNA水平上的定量表达、Western blotting方法半定量分析HIF的蛋白表达、TUNEL法检测髓核细胞凋亡率;用Excel软件分析HIF在腰椎间盘突出中的表达与髓核细胞的凋亡的相关性.结果 HIF在髓核细胞的细胞核内积聚,其在腰椎间盘突出组的表达明显高于对照组,且在腰椎盘突出轻度、中度和重度组间,HIF的表达逐步增加 (P<0.05).在腰椎间盘突出组59个样本中,HIF的表达结果显示有53个呈弱阳性、阳性或强阳性.定量real-time PCR检测中,HIF在腰椎间盘突出组和对照组中的表达分别为(0.484±0.079)和(0.241±0.083),P<0.05,差异有统计学意义.HIF在患病轻度组的表达量高于对照组,中度组高于轻度组,重度组高于中度组,P值分别为0.021、0.025、和0.014,均差异有统计学意义.Western blotting方法半定量HIF表达呈现与定量real-time PCR检测分析相一致的结果.髓核细胞的凋亡率在腰椎间盘突出组中(51.0±7.5)%明显高于对照组(14.4±6.2)%,差异有统计学意义(P<0.05);重度组的细胞凋亡率达(75.2±8.4)%,高于中度组(P<0.05);中度组细胞凋亡率高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05).HIF的表达与腰椎间盘突出髓核细胞的凋亡呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05).结论 HIF可能参与并作用腰椎间盘突出症的病理机制,其表达水平明显增加,并与腰椎间盘突出髓核细胞的凋亡呈现正相关.     

经皮椎间孔镜髓核摘除术联合千山活血膏治疗腰椎间盘突出症临床疗效研究

目的观察经皮椎间孔镜髓核摘除术联合千山活血膏治疗腰椎间盘突出症的临床效果。方法将腰椎间盘突出症患者175例分为治疗组93例和对照组82例。对照组给予经皮椎间孔镜髓核摘除术治疗,治疗组在此基础上给予千山活血膏治疗,2个疗程后观察2组临床疗效。结果治疗组总有效率为93.55%高于对照组的76.83%,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论经皮椎间孔镜髓核摘除术联合千山活血膏治疗腰椎间盘突出症可快速缓解患者的临床不适及术后所造成的腰腿痛症状,值得临床推广应用。     

臭氧+经皮腰椎间盘髓核切割联合治疗农村社区人群椎间盘突出的临床疗效评价与干预

[目的]探讨臭氧+经皮腰椎间盘髓核切割联合治疗农村社区人群椎间盘突出的临床效果.[方法]将来自农村社区的54例椎间盘突出患者分为两组,对照组采用传统的方法以及药物进行治疗,观察组采用臭氧+经皮腰椎f盘髓核切割术进行治疗,然后观察两组治疗效果.[结果]观察组总有效率为96.3％,对照组总有效率为78.8％,差异有显著性(P＜0.05).[结论]臭氧+经皮腰椎间盘髓核切割术治疗椎间盘突出的临床效果明显,值得在农村社区人群中实施和推广.     

经皮激光椎间盘减压术联合臭氧髓核氧化术治疗颈椎间盘突出症的效果观察

目的 探讨经皮激光椎间盘减压术（percutaneous laser disc decompression,PLDD）加臭氧（O3）髓核氧化术联合治疗颈椎间盘突出症的疗效.方法 应用医用半导体激光和医用O3发生器,在X线引导下采用18G穿刺针经皮穿刺至髓核区,然后由穿刺针插入600μm光导纤维,用脉冲式激光切割、汽化髓核,以每个椎间盘500～600 J切割、汽化,再向椎间盘注入浓度为60μg/ml O3约3～5 ml.结果 共治疗197例289节椎间盘,197例患者术后随访3～36月,参照日本骨科协会（JOA）颈椎病治疗疗效判定结果计算改善率,≥75%135例,50%～74%57例,25%～49%5例,＜25% 0例,优良率97.5%.结论 经皮激光椎间盘减压术加臭氧髓核氧化术组合治疗颈椎间盘突出症,适应症广,操作简便,创伤小,安全性高,恢复快,疗效佳,值得临床推广.     

IL-38 alleviates the inflammatory response and the degeneration of nucleus pulposus cells via inhibition of the NF-κB signaling pathway in vitro

Previous studies have suggested that the inflammatory response contributes to the onset of intervertebral disc degeneration (IVDD). Interleukin (IL)-38, a newly discovered cytokine of the IL-1 family, has been demonstrated to play an anti-inflammatory role in autoimmune diseases, such as Crohn’s disease, rheumatoid arthritis and psoriasis. However, whether IL-38 participates in the pathogenesis of IVDD remains unknown. In this study, human disc tissues from IVDD patients and rat disc tissues from an IVDD model were collected to measure the expression of IL-38 in the IVDD groups and the control groups by western blot and immunohistochemical staining. To further determine the role of IL-38 in IVDD, human nucleus pulposus cells (HNPCs) were stimulated with TNF-α to generate an in vitro model of inflammation to mimic the local inflammatory environment of the lumbar disc. The inflammatory response and HNPC degeneration markers were measured after stimulation with TNF-α and IL-38. IL-38 was upregulated in both the human and rat degenerated disc tissues compared with the control tissues. In vitro, IL-38 significantly decreased the TNF-α-induced expression of IL-1β, IL-6, COX-2, MMP-13 and ADAMTS-5 in the HNPCs, and IL-38 also alleviated the TNF-α-induced reductions in type II collagen and aggrecan. Moreover, IL-38 inhibited the activation of the NF-κB signaling pathway in the HNPC-based model of inflammation by reducing the expression level of the NF-κB P-P65 protein. In conclusion, IL-38 could alleviate the inflammatory response and HNPC degeneration in vitro via the inhibition of the NF-κB signaling pathway. These results suggest that IL-38 may be a new strategy for the treatment of IVDD.     

重组质粒介导hTGF-β1基因在体转染模型动物椎间盘髓核细胞的表达

目的观察以质粒为载体的外源治疗基因pACCMV—hTGF—β1在体转染模型动物腰椎间盘髓核细胞后的表达。方法将扩增后的重组质粒基因注射于模型动物的腰椎间盘髓核细胞中,手术后不同时间取出椎间盘,用免疫组织化学方法对椎间盘髓核细胞进行基因表达产物的测定;并利用CMIAS图像分析系统进行半定量观察。结果免疫组织化学染色显示注射pACCMV-hTGF-β1椎间盘,4d组即呈现阳性颗粒。阳性表达可持续至少2周,实验对照组阳性表达仅维持3d,空白组呈阴性反应。结论椎间盘髓核作为靶细胞能够被外源基因转染,并且能在相当长时间内表达TGF-β1蛋白。     

微创小切口椎板间开窗髓核摘除法治疗腰椎间盘突出症

目的探讨微创小切口椎板间开窗髓核摘除法治疗腰椎间盘突出症的疗效及手术相关问题。方法本组腰椎间盘突出症26例,按突出部位:L3/L42例,L4/L510例,L5/S114例。均采用微创小切口椎板间开窗髓核摘除法进行手术,术后定期随访。结果 26例均获得随访。疗效按M acnab标准评定,优18例,良7例,可1例,优良率96.2%。结论微创小切口椎板间开窗髓核摘除法治疗腰椎间盘突出症具有切口小,创伤轻,出血少,恢复快等优点,是一种理想的微创术式。     

后路椎间盘镜以及开放髓核摘除术应用于腰椎间盘突出者的治疗效果比较

目的：比较后路椎间盘镜( Microendoscopic discectomy,MED)以及传统开放手术( Open discectomy, OD)治疗腰椎间盘突出症( Lumbar disc herniation,LDH)的效果。方法选取2012年6月至2013年12月收治的62例腰椎间盘突出症患者,行后路椎间盘镜下髓核摘除术患者29例为MED组,行传统开放髓核摘除术33例为OD组,比较两组手术时间、切口、出血和住院时间,围手术期切口疼痛JOA以及术前、术后3月的Oswestry功能障碍指数。结果 MED组相比OD组手术时间明显缩短、切口长度减小、术中出血量减少、术后住院时间缩短(P<0.05)。两组患者术前的JOA评分无统计学差异,术后1周以及1月的疼痛评分观察组明显改善,观察组更加明显(P<0.05)。术后3月疼痛评分比较无统计学差异P<0.05)。本研究中62例患者均痊愈出院,两组患者术前的ODI评分无统计学差异(P>0.05),术后经过3个月的随访提示两组手术对患者的近期疗效评估无统计学差异。结论后路椎间盘镜下髓核摘除术相比于传统开放手术时间短、切口小、出血量少以及术后恢复快,疼痛轻、微创等特点,是一种很好的治疗方式。     

腰椎间盘突出髓核在腰椎间盘突出症中的作用机制

本文综述了腰椎间盘突出髓核在腰椎间盘突出症中发病机制的论证。研究的论点在于腰椎间盘突出症的发病机制,以及手法治疗对腰椎间盘突出髓核产生的影响。现在的误区是,学术界按西医手术治疗腰椎间盘突出症的思路及影像学在治疗前后的改变来研究保守治疗腰椎间盘突出症,只着眼于突出髓核的病理意义,而无视腰椎内外平衡失调与腰椎间盘突出症的作用机制,只研究突出髓核形态学的变化而未能关注脊椎内、外平衡力学的改变。