基质金属蛋白酶组织抑制因子与肝纤维化

基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)广泛分布于体内多种组织中,可以调节基质金属蛋白酶活性,对肝纤维化的形成和逆转具有重要作用。在TIMPs家族中,TIMP-1和TIMP-2与肝纤维化的关系最为密切。     

金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化

近年来 ,随着医学分子生物学的发展 ,肝纤维化发病机制研究有了较大进步。目前认为肝纤维化发生不仅是由于肝内的细胞外基质 (ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａ ｔｒｉｘ ,ＥＣＭ )合成过多 ,而且与ＥＣＭ降解水平有着密切关系。在肝内参与ＥＣＭ降解的主要是一组名为基质金属蛋白酶 (ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ,ＭＭＰｓ)的酶系 ,其特异性抑制物———金属蛋白酶组织抑制因子 (ｔｉｓｓｕｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｏｆｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ,ＴＩＭＰｓ)可对该酶系活性产生抑制作用。二者与肝内ＥＣＭ…     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子和肝纤维化

肝纤维化是各种病因引起的慢性肝病的共同病理归宿。慢性肝损伤过程中,肝星状细胞(HSC)在炎症和各种细     

金属蛋白酶组织抑制因子与肝纤维化

金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)是一组具有许多共同生理、生化性质的活性蛋白质,它们在体内水平的变化、分布的差异,均对机体生命的病理、生理过程产生重要的影响。现就TMIPs的研究现状及其与肝纤维化的关系综述如下。     

基质金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化

肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展的共同病理过程，其实质是以Ⅰ、Ⅲ型胶原为主的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）合成与降解失衡，导致ECM在肝内过度沉积。研究表明，基质金属蛋白酶类（matrix metalloproteinases，MMPs）和金属蛋白酶组织抑制因子（tissue inhibitors of metalloproteinases，TIMPs）两者的平衡在ECM的合成与降解中发挥着重要的作用。     

免疫性肝纤维化中肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子-1的表达

正常肝脏细胞外基质的合成和溶解维持着动态平衡 ,基质金属蛋白酶 1(ＭＭＰ 1)及金属蛋白酶抑制因子 1(ＴＩＭＰ 1)起着重要的调节作用 ,当二者比例失调时 ,Ⅰ、Ⅲ型胶原降解减少而沉积[1,2 ] ,形成肝纤维化。我们应用ＥＬＩＳＡ方法在大鼠免疫性肝纤维化形成的不同时期同步测定ＭＭＰ 1、ＴＩＭＰ 1的蛋白表达 ,旨在进一步了解二者的动态变化及其作用。一、材料和方法1.主要试剂 :2 0 %人白蛋白 (ＨＳＡ ,ＡｒｍｏｕｒＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉ ｃａｌＣｏｍｐａｎｙ ,ＵＳＡ) ;ＭＭＰ 1及ＴＩＭＰ 1测定 (ＥＬＩＳＡ)试剂盒 (ＴＰＩＩｎＣ…     

金属蛋白酶组织抑制因子在肝纤维化研究中的价值

金属蛋白酶组织抑制因子 (TIMPs)是近年发现的一组抑制基质金属蛋白酶 (MMPs)活性的糖蛋白。TIMPs家族由 4个成员组成 (TIMP 1、2、3、4) ,而肝脏中仅有TIMP 1和TIMP 2存在。研究表明[1] ,TIMPs与MMPs在正常状态下处于动态平衡 ,调节肝内细胞外基质 (ECM )的生成和降解 ,两者与ECM以及其他细胞因子相互调节、相互作用 ,构成了复杂的调控网络 ,从而为维持肝脏内ECM质和量的稳定发挥作用 ,而在病理状态下 ,各种原因和机制使肝脏内TIMPs/MMPs的失衡引起ECM质和量的变化 ,导致肝纤维化的发生和发展。一、TIMPs在肝纤维化…     

基质金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化

基质金属蛋白酶是肝内细胞外基质降解酶的重要酶类肝内ＭＭＰ家族包括ＭＭＰ－１，ＭＭＰ－２，ＭＭＰ－３及其抑制因子ＴＩＭＰ－１，ＴＩＭＰ－２，ＴＩＭＰ－３，ＭＭＰ主要由肝脏间质细胞合成和分泌，ＴＩＭＰ可由肝实质及间质细胞合成和分履，肝纤维化早期时，肝组织间质胶原酶活性较高。纤维化晚期活性下降，而肝纤维化时肝组织中ＴＩＭＰ－１表达增强，慢性肝炎患者血清ＴＩＭＰ－１水平显著增高，并与肝纤维程度呈显著相关。     

肝纤维化基质金属蛋白酶-26/基质金属蛋白酶抑制因子-1 mRNA的表达

基质金属蛋白酶（MMPs）是一组能降解细胞外基质（ECM）的酶，该家族的一些酶是迄今为止已发现的惟一能分解纤维类胶原的酶类，MMP-26是MMPs家族的一个新成员，又称endometase或matrilysin-2，MMP-26可能参与一系列与组织重建有关的事件。基质金属蛋白酶组织抑制因子（TIMP）是一组能特异性抑制MMPs活性的低分子蛋白质，     

肝纤维化与基质金属蛋白酶以及其抑制因子

肝纤维化的形成主要是以胶原为中心的细胞外基质(Extracellular matrix,ECM)在肝脏异常沉积为特点,这种异常的沉积不仅是由于ECM合成增多,更大程度上是因为肝纤维化后期ECM合成和降解的平衡遭到破坏,胶原降解绝对或相对减少而引起的。在ECM降解过程中起主导作用的是基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)。此外,能够抑制MMPs活性的MMP抑制因子(Tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)在ECM代谢调节中也起到重要作用。     

MMP-1、TIMP-1及其在肝纤维化中的作用

基质金属蛋白酶(MMP)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)是细胞外基质(ECM)合成和降解调节中的两个重要的因素。其中MMP-1主要降解细胞外基质的主要成分Ⅰ、Ⅲ型胶原,TIMP-1可抑制MMP-1的活性。肝纤维化时MMP-1活性下降,而TIMP-1活性不断升高。研究显示,二者活性失衡是导致肝纤维化进展的重要因素。它们的来源结构、活性的调节及功能成为目前的研究热点。     

毒素型及免疫型大鼠纤维化肝组织中金属蛋白酶组织抑制因子定位及表达差异

目的 探讨人血自蛋白免疫诱导型及四氯化碳(CCl4)毒素诱导型所致大鼠肝纤维化模型肝组织中金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)定位及表达状态的差异。方法 分别以20％人血白蛋白进行免疫攻击和CCl4毒素攻击大鼠,造模结束后对大鼠肝组织进行H-E、V-G染色及电镜观察;同时研究TIMP-1、TIMF-2蛋白及mRNA定位及表达状态。结果 造馍结束后,免疫诱导型模型肝组织病理改变具有进行性加重趋势,TIMP-1、TIMP-2 mRNA及蛋白表达强度高、持续时间长：而毒素诱导型模型具有TIMP-1、TIMP-2mRNA及蛋白表达强度弱、肝纤维化持续时间短等特点。免疫诱导实验组肝脏中TIMP-1、TIMF-2相关抗原表达在肌成纤维细胞、成纤维细胞,以汇管区及纤维间隔中最明显,阳性信号位于细胞胞质中,未见细胞核表达。原位杂交检测结果亦相似。结论 毒素诱导型肝纤维化模型自然吸收较快,不利于抗肝纤维化药物疗效的观察;免疫诱导型肝纤维化模型自然吸收时间较慢,且在造模结束后1～3个月有逐渐加重趋势,有利于抗肝纤维化药物疗效观察及肝纤维化机制研究。     

血清组织金属蛋白酶抑制因子-1在慢性病毒性肝炎肝纤维化非创伤性诊断中的应用

目的评价血清组织金属蛋白酶抑制因子诊断肝纤维化的应用价值.方法本研究测定了142例慢性病毒性肝炎病人的血清TIMP-1,并与血清生化指标、免疫学指标、影像学指标及肝活检组织学检查进行比较,以决定TIMP-1是否可作为慢性肝病肝纤维化诊断的一项有用的指标.结果TIMP-1与ALT、AST、GGT、ALT、SB、HA、APOAI呈正相关,与白蛋白呈负相关,与PGA、PGAA积分无相关.与肝炎病毒标志(HBsAg、抗-HBc、HBeAg、抗-HBe、HBVDNA、抗-HCV)无相关,与血脂(TG、TC、高密度脂蛋白,低密度脂蛋白)无相关,血清TIMP-1浓度与CD3、CD8、NK、IgG相关(P＜0.05).将TIMP-1与B超指标作相关性分析,发现与胆囊壁厚度,脾脏厚度和胆囊形态相关(P＜0.05);将TIMP-1与CT和MRI作相关性分析,发现与脾脏厚度相关(P＜0.01);TIMP-1与肝组织学指标之间的相关分析可以看出TIMP-1与肝内炎症和纤维化均显著相关.利用判别分析法计算,以血清TIMP-1判别肝内炎症程度、纤维化的有无和肝硬化有无的准确性分别为72.54%、40.85%和81.25%.结论血清TIMP-1水平反映了慢性肝病肝内炎症和纤维化的一些重要特征,在目前情况下是一种较好的肝纤维化无创伤性诊断和随访指标.     

抑制TIMP-1的硫代反义寡核苷酸在肝纤维化大鼠体内生物学分布及药代动力学研究

目的　研究抑制TIMP 1的硫代反义寡核苷酸 (S asON )在肝纤维化大鼠体内的生物学分布及药代动力学 ,为其在临床上应用提供理论依据。方法　合成互补于TIMP 1基因的反义寡核苷酸并加以硫代磷酸化修饰 ;用γ 3 2p ATP标记 2 0聚S asON ,给实验大鼠尾静脉一次性注射 ,每 2 4h收集尿液和粪便 ;分别在 12个时间点上放血杀死实验大鼠 ,取各器官组织匀浆 ,用液体闪烁计数测定cpm值。结果　S asON广泛分布于全身各器官 ,以肝、肾聚积浓度最高 ,其药物能在体内维持 72h以上。血浆药物清除曲线符合二室模型。单位时间内机体清除药物的能力即血浆清除率为0 .0 7ml/h ,尿液为主要排除途径 ,2 4h排出 2 8.4% ,72h排出 44 .8% ,粪便排出量较少。结论　抑制TIMP 1的S asON在实验大鼠体内以肝、肾为主的广泛组织生物学分布和较长的清除半衰期 ,使其成药及临床用药变为可能 ,从而为研制新一代抗肝纤维化基因治疗药物奠定了实验基础。肝脏作为反义治疗的靶器官有着重要的现实意义。     

基质金属蛋白酶组织抑制因子mRNA及蛋白在肝硬化组织中的定位

目的：了解基质金属蛋白酶组织抑制因子TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA在肝硬化组织中的表达和分布状态。方法：以抗TIMP－1和TIMP－2单克隆抗体及TIMP－1和TIMP－2 cDNA探针为试剂,采用免疫组织化学法和原位杂交技术检测肝硬化组织中TIMP－1和TIMP－2蛋白和mRNA,结果：40例肝硬化患者肝组织中TIMP－1和TIMP－2蛋白以及mRNA表达的阳性率为100％,TIMP－1阳性的组织TIMP－2亦为阳性,且TIMP－1强度高于TIMP－2,而正常肝组织未见阳性表达,TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA表达的阳性信号均位于肝细胞胞浆中,细胞核中无表达,结论：肝硬化患者的肝细胞中存在TIMP－1和TIMP－2蛋白及mRNA的表达,其表达强度与肝组织病理改变呈正相关,这可能是通过抑制基质金属蛋白酶（MMPs)的活性,使得细胞外基质（ECM）降解减少而引起肝硬化。     

乙型肝炎病毒YMDD变异与肝纤维化血清指标关系及其相关研究

为了阐明乙型肝炎病毒YMDD变异对肝纤维化的影响。 4组共 170例患者治疗 (或观察 )前后分别用实时荧光PCR法检测其外周血中的HBVDNA及YMDD变异株 ,用RIA法检测肝纤维化血清指标。治疗后未变异组与变异组比较肝纤维化血清指标差异不显著 (P >0 0 5 ) ,其它组之间比较差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ,各组治疗前后比较血清HBVDNA及肝纤维化血清指标差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结果显示拉米夫定能有效地抑制HBV复制 ,延缓或逆转肝纤维化进程 ,但是 ,YMDD变异使其对HBV复制的抑制作用减弱 ,延缓或逆转肝纤维化进程的作用也受影响     

Expression of matrix metalloproteinase-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in hepatic stellate cells during rat hepatic fibrosis and its intervention by IL-10

AIM: To investigate the expression of matrix metallopr-oteinase-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in hepatic fibrosis and the antifibrogenic role of exogenous interleukin-10 (IL-10). METHODS: Hepatic fibrosis was induced by CCI4 administration and 60 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into normal control group (group N, 8 rats), CCI4-induced group (group C, 28 rats) and IL-10-treated group (group I, 24 rats). At the beginning of the 7th and 11th wk, rats in each group were routinely perfused with pronase E and type IV collagenase through portal vein catheter and the suspension was centrifuged by 11% Nycodenz density gradient to isolate hepatic stellate cells (HSCs). RT-PCR was used to analyze mRNA of MMP-2 and TIMP-1 from freshly isolated cells. Densitometric data were standardized with β-actin signals. Immunocytochemistry was performed to detect MMP-2 and TIMP-1 expression in HSC cultured for 72 h. RESULTS: Compared to group N in the 7th wk, MMP-2 and TIMP-1 mRNA increased in group C (P= 0.001/0.001) and group I (P= 0.001/0.009). The level of MMP-2 and TIMP-1 mRNA in group I was significantly lower than that in group C (P= 0.001/0.001). In the 11th wk, MMP-2 mRNA in group I was still lower than that in group C (P = 0.005), but both dropped compared with that in the 7th week (P = 0.001/0.004). TIMP-1 mRNA in group I was still lower than that in group C (P= 0.001), and increased in group C (P= 0.001) while decreased in group I (P = 0.042) compared with that in the 7th wk. Same results were found by immunocytochemistry. CONCLUSION: Expression of MMP-2 and TIMP-1 is increased in hepatic fibrosis. IL-10 exhibits an antifibrogenic effect by suppressing MMP-2 and TIMP-1 expression.     

慢性乙型肝炎血清胰岛素样生长因子-1水平及其与血清肝纤维化指标关系的研究

探讨各型慢性乙型肝炎（CHB）患者血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）的变化及其与血清肝纤维化指标的关系。用放射免疫分析法检测CHB和乙肝后肝硬化患者血清IGF-1和肝纤维化指标（包括HA、LN、PⅢP和CⅣ）。CHB和乙肝后肝硬化患者血清肝纤维化指标明显高于正常对照组,CHB患者血清IGF-1水平明显高于正常对照组,乙肝后肝硬化患者血清IGF-1水平则明显降低。CHB患者血清IGF-1水平与肝纤维化血清指标呈正相关,乙肝后肝硬化患者血清IGF-1水平与肝纤维化血清指标无相关关系。CHB患者血清IGF-1水平异常与肝脏的损害相关,而且可能与CHB患者肝脏纤维组织增生相关联。