人发角蛋白人工腱体内降解的形态学及泛肽、溶酶体酶的活性变化

目的 阐明人发角蛋白（HHK）人工腱植入体内后的降解过程。方法 选取30只新西兰大白兔，随机分为术后第1、3、6、9、12周实验组和正常对照组。实验组行跟腱切除后植入HHK人工腱，按期进行常规形态学观察和泛肽组化及酸性磷酸酶（AcP)酶细胞化学观察。结果 光镜形态学观察显示，人工腱植入后第1周出现人发毛小皮脱落，消失，人发呈均质状，表面附着巨噬细胞和多核巨细胞，到第3-6周可见降解成颗粒的人工腱被巨噬细胞和多核巨细胞吞噬，泛肽酶组化显示第1-3周，人发周围的巨噬细胞，多核巨细胞和成腱细胞内反应呈强阳性，周围组织呈中等阳性，到第9周，大部分人发被降解，泛肽酶反应在基质呈弱阳性，在腱细胞中呈中等阳性，电镜形态学观察显示毛发之间出现成腱细胞，并开始分泌蛋白多糖和前胶原蛋白，第9-12周，人工腱基本被降解，同时完成了新生自体腱的形成，酶细胞化学观察显示被吞噬的颗粒呈AcP酶反应阳性，结论 在HHK人工腱的降解过程中，泛肽系统首先在细胞外将大体积的人发降解，降解后期细胞内泛肽系统通路和溶酶体通路分别对吞入的人工腱颗粒进行降解，且具有协同作用。     

人发角蛋白人工腱诱导自体腱形成中胶原原纤维的形态学变化

目的 观察人发角蛋白(HHK)人工腱诱导自体腱形成过程中胶原原纤维形成的形态学变化。方法 制备肌腱损伤动物模型，植入HHK人工腱，于术后3、6、9、12、16周取出，进行光镜及电镜观察。结果 自体腱形成过程中，先后有一级、二级和三级胶原原纤维形成。结论 HHK人工腱诱导自体腱形成过程中，人工腱植入区肌腱断端和腱膜下的腱细胞去分化，分泌大量的胶原蛋白，并在细胞外生成一级胶原原纤维，再逐级融合形成二级和三级胶原原纤维，最终多数腱细胞胶原化而消失。     

人发角蛋白人工腱的临床应用

目的 观察人发角蛋白人工腱的临床应用效果。方法 应用人发角蛋白人工腱移植修复四肢肌腱、韧带缺损及周围神经损伤共５１例。手术方法：对肌腱缺损行人发角蛋白人工腱移植修复术，对周围神经损伤和关节韧带损伤行人发角蛋白人工腱功能重建术，对跟民地人发角蛋白人工腱“８”字缝合修补加固术。缝合方法均用可吸收缝合线行编织缝合、术后患肢用石膏制动２８－４２ｄ，术后随访时间为６０－３９０ｄ，结果 ５１例手术全部成功。患     

人发角蛋白人工腱的临床应用

人发角蛋白人工腱的临床应用纪淑香１万德红１赵鹏２研究证明，人发角蛋白（ＣＱＤ）人工腱可完全替代传统的自体移植肌腱、同种异体移植肌腱和高分子化学合成的人工肌腱〔１，２〕。本文结合１５例病人临床应用体会，探讨ＣＱＤ人工腱的应用特点，使用方法和注意事项，旨...     

109人发角蛋白人工腱-特制生物膜复合体的实验研究

目的研究109人发角蛋白(109HH)人工腱-特制生物膜复合体植入体内的可行性。方法制备可吸收性109HH人工腱和特制的腱膜,并将人工腱-腱膜复合体或单纯人工腱植入兔体内,于不同时间点观察植入物的变化。结果109HH人工腱-特制生物膜复合体被逐渐吸收,并逐渐被正常肌腱替代,与周围组织无粘连,未见瘢痕组织形成。结论该复合体植入体内是可行性的。     

109人发角蛋白人工腱-特制生物膜复合体的实验研究

目的 研究109人发角蛋白(109HH)人工腱-特制生物膜复合体植人体内的可行性。方法 制备可吸收性109HH人工腱和特制的腱膜，并将人工腱-腱膜复合体或单纯人工腱植入兔体内，于不同时间点观察植入物的变化。结果 109HH人工腱-特制生物膜复合体被逐渐吸收，并逐渐被正常肌腱替代，与周围组织无粘连，未见瘢痕组织形成。结论 该复合体植人体内是可行性的。     

人发角蛋白人工腱材料体内降解及生物相容性研究

目的研究人发角蛋白人工腱(humanhairkeratinartificaltendon,HHKAT)材料在体内的可降解性及其生物相容性.方法对12只日本大耳白兔随机分组,在脊旁肌埋藏不同处理时间的人发角蛋白人工腱试件F及Z,用正常人发O做对照,分别在2、6、12、24周取材,观察人发角蛋白的降解吸收过程及其周围的组织反应.结果动物植入实验中发现不同时间处理的材料其降解速度不同,其中降解最快的F组在24周已完全吸收,而Z组在24周只有部分降解,O组未见降解.HHKAT及人发在肌肉组织内无明显的炎症排斥反应,随着HHKAT材料的降解吸收,其周围的组织反应逐渐降低.结论本研究表明人发角蛋白人工腱材料具有良好的生物相容性,在体内能够被降解吸收,可根据不同的需要调节其降解速度,是良好的肌腱替代材料.     

人发角蛋白人工腱诱导自体腱形成中胶原原纤维的形态学变化

目的观察人发角蛋白(HHK)人工腱诱导自体腱形成过程中胶原原纤维形成的形态学变化。方法制备肌腱损伤动物模型,植入HHK人工腱,于术后3、6、9、12、16周取出,进行光镜及电镜观察。结果自体腱形成过程中,先后有一级、二级和三级胶原原纤维形成。结论HHK人工腱诱导自体腱形成过程中,人工腱植入区肌腱断端和腱膜下的腱细胞去分化,分泌大量的胶原蛋白,并在细胞外生成一级胶原原纤维,再逐级融合形成二级和三级胶原原纤维,最终多数腱细胞胶原化而消失。     

人发角蛋白复合聚乳酸棒的力学强度测试及体内降解观察

目的对自行研究的人发角蛋白复合聚乳酸(HHK-PLA)骨科内固定棒进行力学强度测试和动物体内降解研究。方法(1)利用MTS-858MiniBionix型生物力学测试机分别对20根HHK-PLA棒的剪切强度、弯曲强度和弯曲模量进行测试,了解HHK-PLA骨科内固定棒的力学性能。(2)36个HHK-PLA棒试件随机植入18只SD大鼠双侧脊旁皮下组织中,分别于术后1、2、4、8、12、16、20、24、28周取出,测量质量损失,了解HHK-PLA在大鼠体内的降解情况。结果(1)HHK-PLA骨科内固定棒具有良好的初始机械力学强度,其剪切强度为241MPa,弯曲强度为358MPa,弯曲模量为13GPa。(2)HHK-PLA在大鼠体内可以良好的降解,早期降解较慢,而晚期降解较快。结论HHK-PLA骨科内固定棒具有良好的初始力学强度,且在体内可以良好的降解,有望在将来用于四肢承重骨的内固定。     

正常人头皮毛囊角蛋白的免疫组化研究

目的 了解毛发角蛋白家族在正常人头皮毛囊中的分布情况。方法 采用免疫组化染色方法对毛发角蛋白家族在正常人头皮毛囊切片上进行检测,同时比较了冰冻切片与石蜡切片（含抗原热修复）上的检测差异。结果 ＲＣＫ１０２（Ｋ５、Ｋ８）在皮脂腺、汗腺、毛干、内外根鞘中阳性,ＬＰＩＫ（Ｋ７）在皮脂腺、汗腺、内根鞘中阳性。ＲＫＳＥ６０（Ｋ１０）在汗腺表达,ＲＣＫ１０７（Ｋ１４）在基底层阳性。冰冻切片及石蜡切片抗原热修复     

人发角蛋白对脊髓损伤大鼠少突胶质细胞增殖分化效应的影响

目的探讨体内可降解生物材料人发角蛋白(HHK)植入急性冲击性损伤脊髓后,对神经再生过程中少突胶质细胞增殖分化效应的影响。方法采用改制Ⅱ型NYU装置,在建立大鼠急性冲击性脊髓损伤模型基础上,将经过特殊处理后能在体内降解的HHK植入大鼠脊髓损伤部位,对植入后1、4、12、26周损伤脊髓组织进行光学和电镜结构观察。结果第1周时,损伤部位可见少突胶质细胞散在分布于大量浸润的炎症细胞中;第4周时,通过Mallory's磷乌酸苏木素染色,显示HHK周边呈层包绕的增生少突胶质细胞;第12和26周主要为神经再生和髓鞘重建过程,重建中的少突胶质细胞髓鞘内出现较大的空腔,髓鞘层状分离,并形成大小不一的髓鞘小体,重建髓鞘周边可见新生的少突胶质细胞。结论在急性冲击性脊髓损伤后神经再生过程中,HHK对少突胶质细胞的增殖分化及髓鞘再生修复有积极作用,为进一步综合研究HHK对脊髓损伤修复的作用提供了实验依据。     

人发角蛋白导管修复周围神经缺损的实验研究

目的探索用人发角蛋白（HHK）制成的导管对大段缺损的周围神经的修复效果。方法将25只新西兰兔分成3组,对照组不接受手术;另2组切除胫神经10mm,分别用缝合线（无HHK组）和HHK导管（HHK组）连接神经两断端,术后不同时间分别进行神经电生理检查、解剖和组织学观察。结果术后92d经电生理检查,HHK组较无HHK组功能恢复快。解剖观察发现,神经两断端之间以及HHK导管的腔隙被白色新生组织充满,人发部分消失,残余的人发易脆易断。在光镜下可见人发周围大量再生的雪旺细胞和较幼稚的神经纤维,神经纤维无序排列,人发被初步降解。术后1年,人发被完全降解,神经缺损部位修复完好。结论 HHK导管可诱导神经纤维再生,跨过10mm的缺损间隙,从而修复神经缺损。HHK是制作神经导管的较为理想的材料。     

人发角蛋白神经导管诱导兔胫神经修复时NGF和p75的表达及分布

目的研究人发角蛋白(HHK)神经导管诱导兔胫神经缺损再生修复时神经生长因子(NGF)及其低亲和受体p75的表达及分布。方法取正常胫神经、缝线连接的胫神经和HHK导管桥接的胫神经术后不同时期的切口部位及相邻组织制作石蜡切片,用免疫组化法对切片进行染色。结果正常胫神经组织中无NGF阳性染色。术后76 d,HHK周围的新生组织中NGF免疫组化染色表现为强阳性,而缝线周围的组织中无阳性着色。术后100 d,与正常胫神经组织无显著差异。正常胫神经组织中无p75阳性染色。术后76 d,导管组HHK周围较成熟的神经组织中p75免疫组化染色为弱阳性,而新生组织中为强阳性。术后100 d,导管组的p75免疫组化染色与正常神经组织无显著差别。结论HHK及其降解产物能诱导NGF和p75的产生,为神经再生创造良好的微环境;而缝线无此诱导作用。在新生神经组织中NGF和p75含量多,较成熟的神经组织中含量少。     

神经膜细胞与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体的实验研究

目的 探索神经膜(旧称许旺细胞)与人发角蛋白复合培养构建人工神经桥接体。方法 用10μmol/mlBrdU标记体外培养纯化的许旺细胞与ECM凝胶修饰的人发角蛋白进行三维方向的共培养而构建成人工神经桥接体,移植入SD大鼠坐骨神经缺损处、皮下、骨骼肌中。S-100蛋白免疫组化染色鉴定许旺细胞,倒置显微镜和扫描电镜下观察许旺细胞与人发角蛋白的共培养,石蜡切片抗BrdU免疫组化染色观察体外培养纯化的许旺细胞在体内的生长情况。结果 体外培养的许旺细胞能黏附于人发角蛋白上进行良好的生长,移植入神经缺损处4周后,坐骨神经缺损处、皮下、骨骼肌中的桥接体内的人发角蛋白开始降解,黏附于该人发角蛋白上的许旺细胞均见成活并分裂增殖。结论 许旺细胞可与人发角蛋白进行三维培养,构建成人工神经桥接体,填补神经缺损。     

体外人巨细胞病毒感染对人涎腺导管上皮细胞角蛋白表达的影响

目的探讨体外人巨细胞病毒（HCMV）感染对人涎腺导管上皮细胞（HSG）角蛋白表达的影响。方法应用免疫细胞化学法检测体外培养的HSG中角蛋白8和18（K8和K18）的表达;蛋白印迹法检测HCMV感染对体外培养的HSG中K8和K18表达的影响;半定量逆转录聚合酶链式反应法检测HCMV对体外培养的HSG中K8和K18转录水平的影响。结果体外培养的HSG中K8和K18呈阳性表达;HCMV感染体外培养的HSG0-96h,K8的表达呈逐渐下降趋势,K18的表达在感染后24h内表达升高,此后下降;K8和K18的mRNA水平和蛋白水平均呈反向平行关系。结论HCMV感染体外培养的HSG可引起角蛋白表型发生改变,K8和K18表达水平改变的调节发生在转录后水平。