大鼠纹状体区多巴胺受体的变化对动物行为的影响

目的研究大鼠黑质区注射脂多糖(LPS)后,纹状体区多巴胺2型受体(D2R)亚型mRNA含量的变化,初步探讨D2R与帕金森病(PD)发病的关系.方法利用立体定向技术将LPS注入大鼠单侧黑质区,注射后21 d左右,以阿扑吗啡诱导大鼠旋转,RT-PCR方法半定量检测各组大鼠双侧纹状体区D2R两亚型mRNA的表达量.结果单侧黑质注射LPS的大鼠经阿扑吗啡诱导后向损毁同侧旋转,实验组大鼠纹状体区DL和DS的mRNA表达量损毁侧较对照侧明显增高(P＜0.05,P＜0.01).结论LPS损毁大鼠的纹状体部位D2R mRNA含量的变化,可导致大鼠行为的改变,提示D2R可能与PD的发病有一定关系.     

黑质内注射FeCl3对大鼠纹状体多巴胺释放量及含量的影响

①目的探讨黑质(SN)内注射不同剂量的FeCl3对大鼠纹状体(CPu)多巴胺(DA)释放量和含量的影响.②方法实验用SD大鼠32只,分成4组6只大鼠为正常对照组;9只大鼠左侧SN内注射 FeCl3溶液10 μg(Ⅰ组);8只大鼠左侧SN内注射FeCl3溶液20 μg(Ⅱ组);9只大鼠左侧SN内注射FeCl3溶液40 μg(Ⅲ组),3周后采用快速周期伏安法(FCV)监测纹状体D A的释放量,高效液相色谱法(HPLC)检测纹状体DA含量.③结果在FeCl3单侧损毁大鼠中,损毁侧CPu DA释放量的减少和DA含量的降低与注射FeCl3剂量之间有明显剂量依赖关系(F=93.78,164.51,q=3.50～29.79,P<0.05).Ⅲ组损毁侧CP u DA的更新率[以(DOPAC+HVA)/DA表示]明显加快,与其他组比较差异有显著性(F=13 6.22,q=22.32～22.72,P<0.05);而Ⅰ,Ⅱ组变化较小,与正常大鼠相比差别无统计学意义 (q=0.25,2.04,P>0.05).④结论黑质内Fe3+含量升高可使CPu内DA释放量和含量均降低,铁含量高可能参与帕金森病的病理改变.     

百草枯对小鼠黑质纹状体多巴胺能系统的影响

目的 探讨百草枯对小鼠黑质纹状体通路的影响。方法 将39只新生C57BL小鼠随机分为5组,分别于出生后第10、11天每天喂食单剂量MPTP、百草枯和生理盐水。（1）MPTP0.3mg/kg组,n=8;（2）MPTP20mg/kg组,n=8;（3）百草枯0.07mg/kg组,n=8;（4）百草枯0.36mg/kg组,n=8;（5）等量生理盐水/kg组,n=7。正常饲养至4月龄观察小鼠自发性行为的变化,采用HPLC测定各组小鼠纹状体中多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）及其代谢产物含量,免疫组化方法检测中脑黑质细胞数量的变化。结果 MPTP20mg/kg组及百草枯0.36mg/kg组C57BL小鼠的自发性活动减少,纹状体中DA及其代谢产物含量降低,中脑黑质细胞数量减少。结论 新生期的C57BL小鼠暴露于大剂量的百草枯可产生类似于帕金森病（PD）的行为,黑质纹状体也发生相应的生化病理改变。     

生理因素对纹状体多巴胺D2受体表达的影响

为了研究大鼠的品系，和年龄相关的体重因素对纹状体多巴胺Ｄ２受体表达的影响，用大鼠纹状体和＾１、２５Ｉ－ＩＢＺＭ｛（Ｓ）－３－碘－２－羟基－６－甲氧基－Ｎ－「（１－乙基－２－吡咯烷基）甲基」苯甲酰胺｝结合，按照大鼠的品系，性别和年龄相关的体重进行组间配对比较。结果；大鼠的品系和性别对纹状体多巴胺Ｄ２受体的＾１２５Ｉ－ＩＢＺＭ结合无明显影响，但纹状体多巴胺Ｄ２受体的＾１２５Ｉ－ＩＢＺＭ结合却有体重相关     

偏侧帕金森病大鼠纹状体多巴胺D2R功能的放射？…

目的：观察偏侧帕金森病（ＰＤ）大鼠纹状体多巴胺Ｄ２受体（Ｄ２Ｒ）的功能变化，评价２５Ｉ－ＩＢＺＭ Ｄ２Ｒ显像的应用价值。方法应用６－羟基多巴胺（６－ＯＨＤＡ）建立部分和完全损毁的偏则ＰＤ大鼠模型，静脉注射＾１２５Ｉ－ＩＢＺＭ５０－８０μＣｉ２ｈ后进行脑组织放射自显影；高效液相色谱－电化学法（ＨＰＬ－ＥＣＤ）检测纹状体多巴胺（ＤＡ）及其代谢产物的含量；免疫组化酪氨酸羟化酶（ＴＨ）染色观察黑质方状体的     

新生大鼠脑低氧缺血早期纹状体多巴胺含量的变化

采用新生大鼠脑低氧缺血及单纯缺氧模型,测定动物脑损伤早期纹状体多巴胺(DA)含量的变化.右颈总动脉结扎合并2h高温,低氧导致7日龄大鼠出现自发性向右旋转,左右侧纹状体DA含量失平衡,右侧低于左侧。单纯脑缺氧动物既无自发性旋转,又无DA含量失衡。提示脑缺氧缺血对纹状体DA末梢造成损伤。本文结合前文[1]工作结果,比较并讨论了发育中动物纹状体不同递质系统对脑缺氧缺血的敏感性。     

Experimental study on dynamic regulation of acetylcholine in striatum of rat parkinson disease model and behavior observation

In order to explore the role of acetylcholine in the pathogenesis of Parkinson’s disease (PD),the changes in the concentration of acetylcholine (Ach) in the striatum,the apoptosis of substantia nigra cells,the ultrastructure and the changes of Nissl cells in rats during the morbidity of PD,and the corresponding behaviors in rats with PD were observed.Rat PD model was established by using the modified Thomas method.Eighty-one rats were randomly divided into normal control,sham operation and PD groups and their behavior features were observed at post-operative day (POD) 7,14 and 21 as three subgroups (n=9 each).The concentration of Ach in the striatum was determined by using high-performance liquid chromatography.The apoptosis of substantia nigra cells was assayed by using TUNEL method.The ultrastructural changes in the substantia nigra were observed under the electron microscopy,and the survival of neurons in the substantia nigra area was examined by using Nissl staining.In PD group at POD 7 to 21,the damage in the substantia nigra area was gradually aggravated,the concentration of Ach,apoptosis rate and turns of rotation were gradually increased,and the number of Nissl cells was gradually reduced over the time as compared with the normal control and sham operation groups (all P<0.05).It was concluded that there exist dynamic changes in Ach concentration,ethology and apoptosis of the substantia nigra cells during the morbidity of PD,suggesting the contribution of apoptosis to the morbidity of PD,and critical role of Ach in the pathogenesis of PD.     

多巴胺D2受体缺失加剧MPTP诱导的小鼠帕金森病样改变

目的 探讨多巴胺D2受体与帕金森病的运动行为学及发病间的关系。方法 C57BL/6野生型及D2受体基因敲除小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备帕金森病模型,爬杆实验、游泳实验观察比较两组小鼠行为学的改变,免疫荧光染色法观察小鼠中脑黑质致密部TH阳性神经元数目的变化。结果 MPTP注射后,小鼠爬杆实验时间延长,游泳实验评分降低,中脑黑质致密部TH阳性神经元数目下降(P<0.05或P<0.01);且D2受体基因敲除小鼠的行为学改变及TH神经元数目的减少较野生型小鼠更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论 多巴胺D2受体在小鼠肢体运动协调方面起着重要作用,D2受体缺失加剧了MPTP诱导的小鼠帕金森病样改变。     

补肾活血饮对帕金森病大鼠脑内多巴胺D2受体含量的影响

目的探讨补肾活血饮治疗帕金森病(PD)的作用机制。方法用直接向脑组织内注入6-羟基多巴损毁脑黑质致密部的方法建立PD大鼠模型。将120只SD大鼠随机分为正常对照组、生理盐水模型组和补肾活血饮治疗组,观察各组PD大鼠异常不自主运动变化;用放射免疫法测定治疗后大鼠脑组织多巴胺D2受体(DRD2)平衡解离常数(KD)和最大结合量(Bmax)的变化;免疫组化法观察脑组织DRD2受体阳性细胞数。结果补肾活血饮组大鼠的异常不自主运动较模型组减少。补肾活血饮治疗组大鼠损毁侧脑组织DRD2 Bmax较模型组显著增高(P<0.01),KD值较模型组下降(P<0.01);DRD2受体阳性细胞数(80.9±13.59)较模型组(11.15±6.78)明显升高(P<0.01),但与对照组无显著差异(P>0.05)。结论补肾活血饮能改善PD大鼠不自主运动,促进PD模型大鼠脑组织DRD2表达,提高DRD2亲和力。     

Effect of PD Ⅰ Administration on Dopamine Receptors mRNAs Expression in the Lesioned Striatum of PD Rat Model

To study the effect of PD Ⅰ administration on dopamine receptors （DR, , DRz ） mRNAs expression in the lesioned striatum of the PD rat model and confirm if PDⅠ has the effect of dopamine receptor agonist. The PD rats with unilateral 6-hydroxydopamine lesioned were administrated with PD Ⅰ , L-dopa methyl/benserazide, L-dopa methyl/benserazide/ PD Ⅰ , normal saline respectively for 4 weeks and their behavioral changes were observed. Then the rats were sacrificed and RT-PCR technique was used to detect changes of dopamine receptors （DR1, DR2） mRNAs expression in the ipsilateral striatum 1 day after the last treatment. The results showed that treatment with PD Ⅰ plus L-dopa resulted in a stable contralateral rotation behavior; treatment with L-dopa resulted in a progressively increased contralateral rotation behavior. Rotation behavior induced by anhydromorphine decreased with PD Ⅰ or PD Ⅰ plus L-dopa treatment. Treatment With L-dopa or PD Ⅰ plus L-dopa, up-regulation of DR, mRNA and down-regulation of DR2 mRNA were observed in the ipsilateral striatum which were more obvious than that treated with PD Ⅰ or vehicle （P〈0. 05）. It was concluded that long-term treatment with PD Ⅰ could alleviate the behavior of PD rats. PD Ⅰ had no apparent effect on the dopamine receptors （DRI , DRz ） mRNAs expression in the ipsilateral striatum and the PD Ⅰ has no agonist effect on dopamine receptors.     

多巴胺受体与5-羟色胺2A受体基因多态性与迟发性运动障碍的关联分析

目的：研究多巴胺D2受体（DRD2）基因Taq1A多态性、多巴胺D3受体（DRD3）基因Set9Gly功能多态性、5-羟色胺2A（5-HT2。）受体基因A-1438G、T102C多态性与精神分裂症伴发迟发性运动障碍（TD）的相关性。方法：使用异常不自主运动量表（AIMS）评定精神分裂症患者有无TD及TD严重程度。应用聚合酶链反应（PCR）-限制性片段长度多态性（RELP）法分析TD组和非TD组的各受体基因位点的等位基因频率和基因型分布。结果：DRD2基因Taq1A的等位基因频率（P〉0．05）和基因型（P〉0．05）分布在TD组（n=42）与非TD组（n=52）之间均无显著性差异，且不同基因型间的AIMS总分值差异也无显著性（P〉0．05）。DRD3基因Set9Gly的等位基因频率（P〉0．05）和基因型（P=0．08）分布在TD组（n=42）与非TD组（n=52）之间均无显著性差异，且不同基因型间的AIMS总分值差异也无显著性（P〉0．05）。5-HT2A受体基因T102C多态性位点与A-1438G为完全连锁不平衡，TD组（n=42）与非TD组（n=51）的基因型总体分布的差异无显著性（P〉0．05），等位基因频率分布的差异有显著性（x^2=4．36，1，v=1，P〈0．05）。结论：在中国汉族男性精神分裂症患者中DRD，基因的Taq1A多态性、DRD3功能基因的Ser9Gly多态性可能不是影响TD发生的主要危险因素。5-HT2A受体基因的T102C、A-1438G多态性可能与男性精神分裂症患者的TD相关联。     

大脑神经递质多巴胺检测方法研究

多巴胺是人脑中一种特殊的神经传递介质,其含量的异常变化将导致一些临床病症的出现,例如帕金森病。因此如何简单快速地检测多巴胺成为全世界研究者们关注的课题。常用的检测方法有分光光度法、化学发光法、化学荧光法、液相色谱法和电化学方法等,现对近几年有关多巴胺检测方法的研究作一综述。     

人胚胎脑多巴胺D_2受体基因的克隆

为了克隆人多巴胺D2 受体 (D2 R)基因以用于帕金森病的治疗 ,从人胎脑中提取总RNA ,并逆转录成cDNA ;设计一对引物用PCR方法扩增目的cDNA片段 ,并将其重组于 pGEM T载体中 ,酶切鉴定插入片段后 ,进行全序列测定。结果表明从人胎脑纹状体扩增出至少 2种长度的cDNA片段 ,其中一个片段全长 1 4 4 5bp ,序列与GenBank(NM0 0 0 795 )登录的序列完全相同 ;另一片段为 1 30 5bp ,在第 6外显子开始处有 1 4 0bp的缺失 ,与已知的D2 R 3种转录体均不相同 ,可能为一种新的D2 R转录体。     

多巴胺受体D1在小鼠运动调节方面的作用及与帕金森病的关系

目的: 探讨多巴胺受体亚型D1在小鼠运动协调中的作用及与帕金森病的关系. 方法:观察WT组(野生型)和D1(-/-)组小鼠的运动协调行为、体质量等表现差异;纹状体部苏木精伊红(HE)石蜡切片的形态学比较;酪氨酸羟化酶(TH)免疫组化黑质致密部嘴侧1/3～2/3多巴胺能神经元数目比较,以及纹状体部Western Blot蛋白水平检测TH含量变化. 结果:TH免疫组化示两组小鼠黑质致密部嘴侧1/3～2/3区域的阳性多巴胺能神经元数目无明显差异. HE染色示两组小鼠纹状体部形态及其大小无明显差别,但日常行为学观察两组小鼠差异显著(P＜0.01),D1(-/-)组小鼠中脑石蜡切片显示神经元的退行性表现;而WT组未发现典型的神经元退行性改变. Western Blot示WT组与D1(-/-)组小鼠的纹状体部TH表达水平差异显著(P＜0.05). 结论:多巴胺受体D1在小鼠运动协调方面起重要作用,该受体的缺失对黑质多巴胺能神经元的影响程度虽没临床帕金森病(PD)严重,但仍可加速多巴胺能神经元发生退行性改变.     

滋补肝肾、通络解毒中药对异动症大鼠行为学及纹状体多巴胺D2受体活性的影响

目的：观察滋补肝肾、通络解毒中药对异动症大鼠行为学和多巴胺D2受体活性的影响。方法：采用6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）注射于大鼠脑右侧黑质造成偏侧帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）模型,进一步对PD大鼠予以左旋多巴/苄丝肼制作异动症（levodopa-induced dyskinesias,LID）模型。实验设立正常对照组、模型组、中药干预组、中止给药对照组和中止给药＋中药干预组,观察中药对LID大鼠异常不自主运动（abnormal involuntary movement,AIM）评分的影响,测定大鼠纹状体多巴胺D2受体的最大结合容量（maximum binding capacity,Bmax）和平衡解离常数（equilibrium dissociation constant,KD）,来评价中药对LID大鼠多巴胺D2受体亲和力的影响。结果：与模型组和中止给药对照组比较,中药干预组可明显减少异动症大鼠的AIM积分（P〈0.01）;纹状体多巴胺D2受体亲和力检查示,中药可使Bmax显著上调（P〈0.05,P〈0.01）,KD值下降（P〈0.01）,多巴胺D2受体亲和力显著提高。结论：滋补肝肾、通络解毒中药可以有效缓解异动症症状,明显改善纹状体多巴胺D2受体活性。