HIF-1α、VEGF在食管鳞癌组织中的表达及与放疗疗效的关系

目的：探讨食管鳞状细胞癌患者缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）表达相关性及与放疗疗效的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测50例食管鳞状细胞癌组织标本中HIF-1α、VEGF蛋白的表达．结合临床病理特征和随访资料进行分析。结果：HIF-1α主要表达于细胞核；VEGF主要表达于细胞质，阳性表达率分别为68．0％和74．0％．两者存在显著正相关性。HIF-1α表达与临床分期、放疗近期疗效和预后有关，与病理类型、病变长度无明显关系。HIF-1α阳性组。VEGF表达强度及放疗后局部未控率均高于HIF-1α阴性组；HIF-1α阳性和阴性表达组1、2、3年生存率分别为38．2％、6．0％、0．0％和81-3％、54．2％、7．9％；HIF-1α表达阳性和阴性组食管癌患者放疗后近期完全缓解率、中位生存时间及95％的可信区间分别为18．8％、10个月（7．9，12．1）和81．3％、25个月（15．6．34．4）。结论：食管鳞状细胞癌组织中存在HIF-1α蛋白表达，HIF-1α蛋白阳性表达是食管鳞癌患者预后不良的标志．其高表达与食管鳞癌放射抗拒性有密切关系。     

HIF—1α、Caspase-3、Survivin蛋白在食管鳞癌组织中的表达及相关性分析

目的研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、Caspase-3、Survivin在食管癌的发生、发展、浸润、转移过程中的作用及有无相互关系，为进一步寻找抑制食管鳞癌发牛、发展的途径提供理论依据。方法应用免疫组化S-P法检测49例食管鳞癌组织中HIF-1α、Caspase-3、Survivin蛋白的表达并进行相关性分析。结果HIF-1α蛋白在食管鳞癌组织中的阳性率为51．0％（25／49），显著高于正常食管黏膜0％（0／32）（P〈0．05）；HIF-1α蛋白的阳性表达与Caspase-3蛋白表达呈负相关关系，与Survivin蛋白表达呈正相关关系，提示HIF-1α蛋白的阳性表达下调了Caspase-3蛋白的表达，使Survivin蛋白的表达率增加，食管癌细胞凋亡受阻。结论HIF-1α蛋白在食管鳞癌组织中的表达显著增高，联合检测HIF-1α、Caspase-3与Survivin可作为判断食管癌生物学行为的客观指标，对判断食管癌的预后具有重要意义。     

Survivin在宫颈鳞癌组织中的表达及其与p53基因表达及HPV感染相关性

背景与目的：survivin基因是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的新成员，其组织分布具有明显的细胞选择性，即仅表达于胚胎及胎儿组织及大多数癌瘤组织中，而不表达于终末分化的成人组织。本研究探讨survivin在宫颈鳞癌组织中的表达及其与HPV-16感染及p53表达的相关性。方法：应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白过氧化酶连接法（S—P法）检测survivin、HPV-16、053基因在21例正常宫颈组织、23例CIN及72例宫颈鳞癌组织中的表达。结果：survivin基因在正常宫颈组织中不表达，在23例CIN中4例表达阳性，占17．39％，与正常宫颈组比较，差异有显著性（P〈0．01，x^2=9．210），在72例宫颈鳞癌组织中52例表达阳性，占72．22％，其中病理分级为G1级的宫颈鳞癌中survivin基因表达阳性率为61．3％，（17／35），G2／G3级为89．19％（33／37），两者比较，差异有显著性（P〈0．01，x^2=9．5211）。临床分期Ⅰ期的宫颈鳞癌的survivin基因表达阳性率为31例中有16例，占51．61％，临床分期Ⅱ期的宫颈鳞癌的survivin基因表达阳性率为28例中有24例，占85．71％，Ⅲ期者为92．30％（12／13），两两比较，Ⅰ期与Ⅱ期，Ⅰ期与Ⅲ期差异均有显著性（P〈0．01），Ⅱ期与Ⅲ期差异无显著性（P〉0．05）。survivin基因表达阳性率与宫颈鳞癌的病理分级和临床分期呈正相关。宫颈鳞癌组织中P53蛋白表达阳性、阴性者中survivin基因表达阳性率分别为84．78％（39／46），50．00％（13／26），两者比较，差异有显著性（P〈0．05）。HPV-16表达阳性、阴性者中survivin基因表达率分别为81．4％（35／43），58．6％（17／29），两者比较，差异有显著性（P〈0．05）。survivin基因表达阳性率与宫颈鳞癌组织中053及HPV-16表达有相关性。结论：①survivin基因的表达与宫颈鳞癌的临床分期、病理分级及患者预后密切相关，其高表达提示宫颈鳞癌预后不良。②survivin基因的表达与宫颈鳞癌组织中p53突变及HPV-16感染呈正相关。     

食管鳞癌组织VEGF和Angiopoietin-2表达及其临床意义的研究

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）和血管生成素-2（Ang-2）在食管上皮肿瘤的表达及其与肿瘤分期、分级的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测60例食管鳞癌组织、20例食管癌旁组织及10例正常食管黏膜上皮组织中VEGF及Ang-2的表达情况，并结合临床病理资料进行分析。结果：VEGF蛋白在食管鳞癌、癌旁组织和正常食管鳞状上皮阳性表达率分别为45．0％、15．0％和10．0％，Ang-2蛋白阳性表达率分别为36．7％、10．0％和0，差异均有统计学意义，P〈0．05。VEGF及Ang-2蛋白阳性表达与肿瘤浸润深度有关，T3、T4期显著高于T1、T2期，VEGF蛋白阳性表达率分别为52．1％和16．7％，P=0．049；Ang-2蛋白表达率则分别为43．8％和8．3％，P=0．041。VEGF及Ang-2蛋白阳性表达与淋巴结转移有关，有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者，VEGF蛋白表达率分别为69．0％和22．6％（P=0．001），Ang-2蛋白表达率分别为62．1％和12．9％，P=0．000。结论：VEGF及Ang-2在食管上皮鳞癌组织中表达明显高于非癌组织，表明其在食管上皮鳞癌的发生、发展中占有重要作用；VEGF及Ang-2可能为食管鳞癌的标志分子；具有潜在的临床诊断价值；VEGF及Ang-2与食管癌的TNM分期有关。     

HIF-1α和VEGF 的表达与肝细胞癌侵袭转移的关系

 目的 探讨HIF-1α、VEGF的蛋白表达与肝细胞癌血管新生及侵袭转移特性之间的关系。方法 采用免疫组化SP法检测肝细胞癌、癌旁肝组织和正常肝组织中HIF-1α、VEGF的表达，并计数MVD值。结果 HIF-1α在肝细胞癌中的阳性表达率为50．0％，显著高于癌旁（16．1％）和正常肝组织的（8．3％）（P=0．001）；VEGF在肝细胞癌中的阳性表达率为81）％，显著高于癌旁（59．4％）和正常肝组织（41．7％）（P=0．044）；肝细胞癌组织中MVD值显著高于癌旁和正常肝组织（P=0．001）。HIF-1α蛋白表达与有无门静脉或胆管癌栓及肿瘤分化程度有关（P〈0．05）；VEGF蛋白的表达与有无肝内或淋巴结转移及有无门静脉或胆管癌栓有关（P〈0．05）。HF-1α与VEGF表达有关（P=0．005）；HF-1α与VEGF共同表达阳性组的MVD值显著高于共同表达阴性组MVD值（P=0．001）。结论 HF-1α可能通过调节VEGF的表达促进肝细胞癌血管新生，从而促使肝细胞癌侵袭转移。     

食管鳞癌中Survivin和Nm23-h1表达及其联合检测的临床意义

目的：探讨Survivin与Nm23-h1基因在食管鳞状细胞癌、癌旁组织、正常组织中的表达情况及其联合检测与淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化sP法观察78例食管鳞癌手术切除标本,30例食管鳞癌切除标本断端（距肿瘤〉5cm）和食管鳞癌切除标本断端（距肿瘤〈2cm）30例的石蜡标本切片中Survivin和Nm23-h1的表达情况,分析其与临床病理特征的关系。结果：Survivin在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为70．51％,20．0％,6．67％,有显著性差异（P=0．001）。Nm23-h1在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为60．26％,80．00％,96．67％,有显著性差异。（P=0．001）。Survivin表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）。Nm23-h1表达与患者的TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）。Survivin阳性率与淋巴结转移呈正相关（P=0．008）,nm23-h1阳性率与淋巴结转移呈负相关（P=0．001）。Survivin与nm23-h1呈低度负相关（P=0．001）,在促进肿瘤的进展和转移过程中起联合作用。结论：Survivin蛋白的抑制凋亡作用和nm23蛋白的抑制转移作用可能在食管鳞癌的发生、发展过程中起重要作用,联合检测是判断食管鳞癌患者淋巴结转移倾向及预后的重要指标。     

转移抑制因子KAI1和E-Cadherin在食管癌组织中的表达及其意义

目的 探讨KAI1和E-Cadherin在食管癌中的表达及其意义。方法 用免疫组化S-P法检测KAI1和E-cadherin蛋白在60例食管癌及对应的食管正常黏膜组织中的表达情况。结果 在食管鳞癌组织中KAI1表达（50％）显著低于食管正常黏膜组织（81．67％）（P〈0．01）。食管一常组织中E-cadherin表达（80％）显著高于癌组织（41．67％）（P〈0．01）。KAI1低表达与食管癌病理分级、淋巴结转移及食管癌浸润深度无关（P〉0．05）；E-cadherin低表达与食管癌病理分级、淋巴结转移密切相关（P〈0．05），与食管癌浸润深度无关（P〉0．05）；两者表达皆与食管癌的人体分型无关（P〉0．05）。KAI1与E-cadherin表达无明显相关性（P〉0．05）：结论 E-cadherin的低表达与食管癌的淋巴结转移有关；KAI1低表达未见对食管癌浸润转移的影响；两者无协同作用。     

Survivin、Bci-2和Bax在喉鳞状细胞癌中的表达

目的：探讨凋亡抑制基因survivin在喉鳞癌中的表达及其与Bcl-2、Bax基因表达的相关性。方法：应用免疫组织化学链酶卵白素-生物素复合体（strept avidin-biotin complex，SABC）方法检测45例喉鳞癌及10倒正常喉黏膜组织中survivin，Bel-2及Bax基因的表达。结果：喉鳞癌组织中，Survivin的表达率为80％，显著高于正常喉黏膜组织的表达率20％（P均〈0．05）。Survivin蛋白表达与喉鳞癌的TNM分期及淋巴结转移有关（P均〈0．05）。Survivin表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关（P〈0．05），而与Bax蛋白表达呈负相关（P〈0．05）。结论：Survivin在喉鳞癌的发生发展中起重要作用，可能成为喉鳞癌基因治疗的新靶点；survivin基因可能与凋亡相关基因Bcl-2、Bax在喉鳞癌的发展中分别起协同和拮抗作用。     

Cox-2和HIF-1α在骨肉瘤中的表达及其与临床病理的相关性

目的：研究骨肉瘤中环氧合酶-2（cyclooxygenase 2，Cox-2）与缺氧诱导因子1α（hypoxia-inducible factor 1 alpha，HIF-1α）的蛋白表达及其与临床病理特征、生存预后的关系；探讨其在肿瘤形成、发展过程中的可能机制。方法：筛选不含硬骨组织，未经脱钙处理的骨肉瘤标本59例，进行临床、病理特征分期，并行术后跟踪。应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中Cox-2与HIF-1α的表达，绘制Kaplan-Meier生存曲线，结果：Cox-2和HIF-1α在骨肉瘤中的表达率分别为69．49％和38．98％，在对照组中的表达均为阴性，差异有统计学意义（P〈0．01和P〈0．05）。Cox-2的表达与骨肉瘤临床分期呈正相关（P〈0．05），HIF-1α的表达与年龄相关（P〈0．01）。Cox-2的表达与HIF-1α的表达呈正相关。在Cox-2阳性组和阴性组中，HIF-1α的阳性表达率分别为56．10％和0，差异有统计学意义（P〈0．01）。组间生存率差异显示术后生存期长短与Cox-2和HIF-1α的表达呈负相关，Cox-2和HIF-1α表达阳性者的术后累积生存率均低于阴性者，差异有统计学意义（P〈0．05和P〈0．01）。结论：Cox-2和HIF-1α在骨肉瘤组织中均为高表达，两者的表达与肿瘤的发生、发展有关，可能共同促进了肿瘤的恶性进展。Cox-2和HIF-1α阳性表达者的术后生存率较低，其表达可以反映骨肉瘤的预后。     

宫颈鳞状上皮癌变过程中HIF-1αVEGF的表达及其意义

目的：研究缺氧诱导因子1α（HIF—1α）、血管内皮生长因子（VEGF）在宫颈鳞状上皮癌变过程中的表达特点及其意义。方法：采用免疫组织化学EliVision法检测HIF—1α和VEGF在20例宫颈正常鳞状上皮、28例宫颈鳞状上皮不典型增生、12例宫颈原位鳞癌和33例宫颈浸润性鳞癌组织中的表达特点及其相关性。结果：HIF—1α和VEGF的表达随上皮病变的恶性进展逐渐增强，二者表达率分别为25．00％和25．00％（正常组），42．96％和50．00％（不典型增生组），58.33％和66．77％（原位癌组）以及57．61％和63．67％（浸润性癌组）；浸润性癌与正常组织中的HIF-1α表达存在显著性差异（P〈0．05）；原位癌、浸润性癌组织中VEGF表达均高于正常组（P〈0．05）；淋巴结转移肿瘤组织的HIF—1α、VEGF表达高于未转移组（P〈0．05）；浸润性癌组织中HIF-1α和VEGF的表达正相关（f=0．45，P〈0．05）。结论：HIF—1α及其靶基因VEGF的过表达可能在宫颈鳞状上皮恶变及肿瘤进展过程中发挥重要作用，二者可作为宫颈鳞癌浸润转移的重要指标。     

HIF-1α、VEGF在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的研究缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1 alpha，HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的基因严物在乳腺浸润性导管癌（invasive ductal carcinoma，IDC）组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化Envision^TM二步法检测86例乳腺IDC和10例乳腺腺病中HIF-1α和VEGF蛋白的表达。结果HIF-1α在86例乳腺IDC组织和乳腺腺病中曲阳性表达率分别为55．8％（48／86）和0％（0／10），差异有显著性（χ^2=11．16，P〈0．01）。乳腺IDC组织中，HIF-1α表达与乳腺IDC的肿块大小（r=0．257，P〈0．05）、TNM分期（r=0．342，P〈0．01）、组织学分级（r=0．393，P〈0．01）、淋巴结转移（r=0．391，P〈0．01）和肿瘤坏死（r=0．595，P〈0．01）呈正相关。VEGF蛋白在86例乳腺IDC组织和乳腺腺病中的阳性表达率分别为61．6％／（53／86）和0％（0／10），差异有显著性（χ^2=13．76，P〈0．01）。乳腺IDC组织中，VEGF表达与乳腺IDC的肿块大小（r=0．274，P〈0．01）、TNM分期（r=0．284，P〈0．01）、组织学分级（r=0．363，P〈0．01）、淋巴结转移（r=0．319，P〈0．01）和肿瘤坏死（r=0．592，P〈0．01）呈正相关。HIF-1α和VEGF蛋白的表达与患者年龄和术后5年生存率均无关。Spearman相关分析发现HIF-1α与VEGF表达程度呈正相关（r=0．636，P〈0．01）。结论乳腺IDC组织中HIF-1α基因表达显著增高，并可能诱导VEGF的过表达并与乳腺癌的侵袭性生物学行为密切相关。     

食管癌MGMT、survivin 蛋白的表达及其临床意义

  目的 研究食管癌MGMT、survivin蛋白的表达及其临床意义。方法 应用免疫组化（EnVision二步法）检测56例食管鳞状细胞癌、20例腺样结构食管癌和9例小细胞癌组织中MGMT、survivin蛋白的表达，并分析其与临床病理诸因素之间的关系。结果 小细胞癌与鳞状细胞癌及腺样结构食管癌的MGMT蛋白表达比较均有显著性差异（P〈0．01）；低分化鳞癌MGMT蛋白阳性表达率为45．45％，低于高、中分化鳞癌的阳性率（84．44％，P〈0．05）。食管鳞状细胞癌survivin阳性表达率明显高于腺样结构食管癌（P〈0．05）。结论 MGMT、survivin蛋白表达与食管癌的组织学类型有密切关系，可作为食管癌预后判断的参考指标。     

缺氧诱导因子-1α在胃癌中的表达与临床病理、P53及P糖蛋白的关系

背景与目的：HIF-1α在许多恶性肿瘤中的过表达与肿瘤的血管形成、侵袭转移及放化疗耐受等密切相关。研究发现，HIF-1α的过表达与突变的P53蛋白存在密切关系。本实验探讨HIF-1α胃癌中表达的意义及其与P53及P糖蛋白（P—gP）的关系。方法：采用SP免疫组织化学染色法检测74例经病理证实的胃癌组织中的HIF-1α、P53及多药耐药蛋白的表达。结果：在HIF-1α蛋白表达阳性的44例中，P53蛋白表达阳性率为70．45％；在HIF-1α蛋白表达阴性的30例中，P53蛋白表达阳性率为30．0％，两者表达呈正相关（rs=0．327，P〈0．01）。在HIF-1α蛋白表达阳性的44例中，P—gP蛋白表达阳性率为61．36％，在HIF-1α蛋白表达阴性的30例中，P—gp蛋白表达阳性率为36．67％，两者表达呈正相关（L=0．256，P〈0．01）。在P53蛋白表达阳性的40例中，P—gP蛋白表达阳性率为65％，在HIF-1α蛋白表达阴性的34例中，P—gP蛋白表达阳性率为35．29％，两者表达呈正相关（rs=0．283，P〈0．01）。结论：HIF-1α蛋白过表达为影响胃癌预后的独立因素。胃癌组织中P53突变蛋白具有上调HIF-1α的作用，通过P53／HIF-1α途径可能在P糖蛋白调节及多药耐药过程发生重要作用。     

乳腺癌组织Survivin与HIF-1α表达及其临床意义的初步研究

目的：探讨凋亡抑制蛋白Survivin和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在人乳腺癌的表达及相关性，分析其与乳腺癌转移复发的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测80例乳腺癌组织和20例乳腺增生症组织中Survivin和HIF-1α蛋白的表达情况。结果：80例乳腺癌组织中Survivin和HIF-1α蛋白表达的阳性率显著高于乳腺增生症组织（P=0．000），两者的表达与组织学分级、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、术后复发及c-erbB-2表达密切相关（P〈0．05），HIF-1α的表达还与TNM分期有关，P=0．034。Survivivn和HIF-1a的表达有显著相关性，γ=0．308，P=0．006。结论：Survivivn和HIF-1α与乳腺癌侵袭转移的发生有密切关系，两者均阳性表达时对判断乳腺癌恶性程度及预后具有参考意义。     

食管鳞癌组织中GRIM-19的表达及意义

目的探讨干扰素／维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因-19（GRIM-19）蛋白在食管鳞癌组织中的表达及意义。方法运用免疫组化技术检测68例食管鳞癌、35例癌旁不典型增生及68例正常食管黏膜组织中GRIM-19蛋白表达;采用TUNEL方法检测食管鳞癌组织中的细胞凋亡。结果1）GRIM-19蛋白在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为80．9％（55／68）、34．3％（12／35）和11．8％（8／68）,两两比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）;2）食管鳞癌组织中肿瘤细胞的凋亡与GRIM-19蛋白表达有关,GRIM-19蛋白阳性表达组中肿瘤细胞AI为（5．06±0．93）％,显著高于阴性表达组的（1．12±0．06）％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论GRIM-19蛋白的低表达可能与食管鳞癌的细胞凋亡有关。     

环氧合酶-2和诱导型一氧化氮合酶在舌不典型增生和鳞癌组织中的表达

背景与目的：近期研究表明,环氧合酶（cyclooxygenase-2,COX-2）和诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）共同参与肿瘤的发生发展过程,但有关它们异常表达与舌鳞癌生物学行为的关系尚不清楚。本研究拟探讨COX-2和iNOS在舌鳞癌的表达和两者问的相互关系。方法：应用免疫组化SP法,检测59例舌鳞癌及其45例增生性病变（轻、中、重度不典型增生分别为22例、20例、3例）和36例癌旁正常鳞状上皮中COX-2蛋白、iNOS蛋白的表达情况．并对这些指标进行相关分析。结果：在癌旁正常鳞状上皮、轻、中、重度不典型增生上皮和舌鳞癌组织中,COX-2蛋白异常表达检出率分别为8．3％（3／36）、4．5％（1／22）、5．0％（1／20）、0（0／3）和45．8％（27／59）;iNOS蛋白异常表达检出率分别为44．4％（16／36）、72.8％（16／22）、80．0％（16／20）、100．0％（3／3）和98．3％（58／59）。COX-2蛋白在癌旁正常鳞状上皮的表达。与舌鳞癌组织的表达差异有显著性（P〈0．001）．与不典型增生总体的表达差异无显著性（P〉0．05）：iNOS蛋白在癌旁正常鳞状上皮的表达,与不典型增生总体和癌组织的表达差异均有显著性（P〈0．001）。等级相关分析结果显示,COX-2、iNOS表达异常与组织学分级均显著正相关（相关系数r分别为0．418和0．607,P值均〈0．001）。而且COX-2蛋白与iNOS蛋白之间也具有显著相关性（r=0．245,P〈0．001）。结论：COX-2和iNOS蛋白异常表达与舌鳞癌癌变过程显著相关。     

RUNX3与OPN在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的研究RUNX3与OPN在食管鳞癌发生、发展、浸润和转移中的作用以及临床意义。方法免疫组化检测60例食管鳞癌病人的食管正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及鳞癌组织中RUNX3蛋白和OPN蛋白的表达情况。结果RUNX3在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为78．33％（47／60）、43．48％（10／23）、31．67％（19／60）。RUNX3的表达与食管鳞癌浸润深度和分期均明显相关（P〈0．05）。OPN在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为0％（0／60）、34．78％（8／23）及76．67％（46／60）,OPN的表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移和分期均明显相关（P〈0．05）。RUNX3和OPN在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中的表达呈明显的负相关（P〈0．05）。结论两者联合检测对探讨食管鳞癌的发生、发展、浸润、淋巴结转移及预后判断可能会有更大的意义。     

HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤MG-63细胞HIF-1α、P53、Bcl-2表达及凋亡的影响

背景与目的：本实验研究缺氧诱导因子HIF-1α反义寡核苷酸（antisense oligonueleotides，ASODN）在缺氧环境下对骨肉瘤MG-63细胞HIF-1α、P53、Bel-2表达及细胞凋亡的影响，进一步探讨HIF-1α在缺氧诱导肿瘤细胞凋亡的过程中的作用机制。方法：设计针对HIF-1α RNA亚基的反义、正义寡核苷酸（sense oligodeoxynueleotides，SODN），并建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型，观察缺氧培养不同时相（8、16、24h）5μmol／L的HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤MG-63细胞HIF-1α、P53、Bel-2表达及细胞凋亡的影响。半定量RT—PCR方法检测HIF-1α、P53和Bcl-2 mRNA的转录水平，免疫组化（SP法）和免疫印迹（Western Blot）检测HIF-1α、P53和Bcl-2蛋白表达情况。流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：HIF-1α转录水平（8～24h）单纯缺氧组（22．0％～22．6％）及SODN缺氧组（22．0％～22．8％）与常氧组（20．2％～20．9％）比较未见明显改变，而在ASODN缺氧组（16．8％～18．5％）显著降低（P〈0．01）。其蛋白表达单纯缺氧组（33．1％～88．9％）、SODN缺氧组（32．5％～88．7％）随缺氧时间延长明显升高；而P53、Bel-2 mRNA水平单纯缺氧组、SODN缺氧组较常氧组均显著增强（3．4～7．5倍不等）（P〈0．05）。其蛋白的表达这二组也较常氧组均显著增强（2～大于37倍不等）（P〈0．05）。然而在ASODN缺氧组P53、Bel-2 mRNA活性明显减弱（11．5％～13．9％）（P〈0．05），蛋白表达水平也显著降低（13．6％～35．4％）（P〈0．05）：细胞凋亡率其他三组未见明显变化，但ASODN缺氧组显著增加（P〈0．05）。结论：缺氧可以通过诱导野生型P53的突变使HIF-1α和Bcl-2的过表达，从而抑制肿瘤细胞的凋亡。而HIF-1α反义寡核苷酸抑制HIF-1α活性后，可以抑制野生型P53的突变，降低Bcl-2的表达，导致细胞凋亡的增加。     

食管鳞癌中bcl-2与nm23-h1基因表达情况与纵隔淋巴结转移的相关研究

目的：研究与探讨bcl-2基因与nm23-h1基因在食管鳞状细胞癌中的表达情况及其与纵隔淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化SP法观察了85例食管鳞癌手术切除标本切片中bcl-2和nm23-h1的表达。结果：63．53％（54／85）肿瘤呈bcl-2阳性表达，bcl-2表达与肿瘤淋巴结转移及TNM分期有关（P均〈0．05）。40％（34／85）肿瘤呈nm23阴性表达，nm23-h1阴性表达与肿瘤侵润深度、淋巴结转移、TNM分期有关（P分别为0．032、0．001、0．001）。单因素分析显示：bcl—2基因与nm23-h1基因表达为影响淋巴结转移的主要因素（OR值分别为6．985、0．014，P〈O．001）。而其他临床病理学参数与淋巴结转移之间未见明显相关（P均〉0．05）。bcl-2基因与nm23-h1基因表达之间呈负相关（0=-0．3849，P〈0．05），在促进肿瘤的进展和转移过程中起联合作用。结论：bcl-2基因与nm23-h1基因联合测定是判断食管鳞癌患者淋巴结转移倾向及预后的一个重要手段。     

食管鳞癌组织中RECK和MMP-9基因mRNA检测与分析

目的：探讨RECK和MMP-9在食管鳞状上皮细胞癌中的作用及其与临床病理因素的关系。方法：收集河南省安阳市肿瘤医院食管癌标本62例、癌旁不典型增生组织31例及正常食管粘膜组织62例。应用原位杂交方法检测每例食管标本RECK和MMP-9mRNA的表达情况。应用X^2检验，Spearman等级相关分析在SPSS13．0统计软件上作相关统计。结果：在食管鳞癌癌变过程中RECK在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生组织及正常食管粘膜组织中mRNA的表达率依次增高，分别为45．2％（28／62）、61．3％（19／31）、82.3％（51／62），组间比较差异有统计学意义（X^2=19．186，P〈0．05）；不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECKmRNA阳性表达卒差异均有统计学意义（X^2分别为6．799、7．862、9．121，P均〈0．05）。食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中MMP-9 mRNA表达均高于正常食管粘膜组织，表达率分别为71．0％（44／62）、54．8％（17／31）、48．4％（30／62），组间比较差异有统计学意义（X^2=6．876，P〈0．05）；食管鳞癌组织中MMP-9 mRNA表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关（X^2分别为7．458，11．737，3．916，P均〈0．05）。RECK和MMP-9 mRNA表达率均与食管癌患者的性别、年龄无显著相关关系（P均〉0．05）．RECK和MMP-9的mRNA的表达呈负相关关系（γ=-0．348，P〈0．01）。结论：RECK mRNA表达率降低与MMP-9 mRNA表达率升高可能与食管鳞癌的发生、发展及浸润转移有关。