济南假单胞菌菌苗促LAK活性的研究

研究了济南假单胞菌菌苗(PJV)在体外对小鼠脾LAK细胞活性的影响。结果表明:1.PJV对YAC-1肿瘤靶细胞在3.9～62.5μg/ml浓度范围内对单个核脾细胞有明显的刺激增殖作用,此增殖细胞对肿瘤靶细胞无杀伤作用;2.PJV在LAK细胞的诱导阶段可增加其诱导数量和增殖活性,提高杀伤活性,但PJV在LAK细胞杀伤阶段对其活性无影响;3.PJV不能单独促进脾产生细胞IL-2,但可促进ConA诱导脾细胞产生的IL-2活性。     

淫羊藿甙的体外免疫调节作用研究

淫羊藿甙是从朝鲜淫羊藿中提取的主要单体。采用依赖细胞株法和乳酸脱氢酶4h释放法，分别检测了淫羊藿甙协同诱生IL－2、IL－3、IL－6，及对NK、LAK细胞杀伤活性的影响。结果表明：建羊藿甙可协同PHA诱导扁桃体单个核细胞产生IL－2、3、6呈剂量依赖关系，动力学观察表明：IL－2、IL－6的分泌高峰时相为作用后48h，IL－3的分泌高峰时相为作用后72h。淫羊藿甙可以提高扁桃体单个核细胞NK、LAK细胞杀伤活性；动力学观察表明：在诱导第5天时LAK细胞杀伤活性最强。提示淫羊藿甙是一种有效的生物反应调节剂。     

四种不同组织来源LAK细胞的体外扩增及抗肿瘤作用的比较

目的：比较四种不同组织来源LAK细胞的体外扩增及抗肿瘤作用。方法：选用脐带血制备LAK细胞，并与临床常用的外周血、胎脾及胸腺LAK细胞在体外扩增及抗肿瘤作用方面比较。结果：脐带血的扩增能力显著高于其余3种LAK细胞（P＜0．01），每份脐带血LAK细胞总数可增殖至2．5×1010；抗肿瘤活性以脐带血LAK对SMMC-7221肝癌细胞出现最早（第3d）、活性最强（85％±3％），明显强于其余三者（P＜o．01）；对K562的杀伤作用仍属脐带血LAK最强；而胸腺LAK的活性最弱。结论：脐带血LAK细胞体外增殖快，杀伤活性强，可用于肿瘤的过继性免疫治疗。     

树突状细胞的体外培养及其诱导的抗肿瘤免疫作用

目的 建立体外培养扩增树突状细胞（DC）的方法,并观察其诱导的抗肿瘤免疫作用。方法 分离外周血单个核细胞,应用GM－CSF及IL－4诱导DC产生,用TNF－α和PGE2促进其成熟,并用肺癌细胞系GLC－82可溶性抗原致敏。将成熟DC与自体LAK细胞混合培养（DC－LAK）,用MTT法检测DC－LAK细胞及LAK细胞对多种肿瘤细胞系的杀伤作用。结果 经GM－CSF,IL－4,TNF－α,PGE2作用后,细胞表达CD1a阳性率为71．0％,CD8350．0％,CD14阳性率低于10．0％,高表HLA－I,HLA-Ⅱ和CD45,为典型的DC表型特征。DC－LAK和LAK细胞对4种肿瘤细胞（GLC－82,A549,moser和MCF－7）的杀伤率,前为84．7％,66．9％,49．3％和56．0％,后为43．5％,31．3％,45．0％和32．4％。结论 成功的诱导出具有典型形态特征及增强LAK细胞杀伤活性的DC。     

肿瘤学

980280老年肿瘤患者外周血LAK细胞活性及其影响因素的研究/方艳秋…//中国老年学杂志一1997,17(4)一214~215 比较了IL一2及IL一7诱导的40例健康青中年人,46例健康老年人及21例老年肿瘤患者外周血LAK细胞活性。结果:健康老年组IL一2诱导的LAK细胞活性明显高于老年肿瘤患者,但明显低于健康青中年组;健康老年组及健康青中年组IL一7诱导的LAK细胞活性均明显高于老年肿瘤患者,但两者之间无显著差异;抗lL一2抗体能够抑制IL一2诱导的LAK细胞活性,但对lL一7诱导的LAK活性不影响;老年肿瘤患者血浆能够明显抑制IL一2及IL一7诱导的正常人…     

胎脾LAK细胞杀伤不同分化程度的髓系白血病细胞系的比较

使用低浓度的重组人白介素-2（rhIL－2）诱导的胎脾LAK细胞杀伤髓系白血病细胞系HL－60和KG－Ia51Cr释放研究表明，在不同的胎脾LAK效应细胞和靶细胞比（E：T）条件下，对两种分化程度不同的白血病细胞杀伤能力也不同。E：T越高杀伤能力越强，HL－60P＜0．01，KG-IaP＜0．005。胎脾LAK细胞杀伤HL－60平均杀伤率为55．44％±11．23％，KG－Ia平均杀伤率为22．54％±8．22％，两者比较P＜0．005。在相同E：T时对HL－60和KG－Ia杀伤活性比较P＜0．002。结果提示，胎脾LAK细胞对分化程度好的白血病细胞HL－60杀伤能力显著高于分化差的原始白血病细胞KG－Ia，E：T越大杀伤活性越强。因而为LAK细胞治疗髓系白血病提供了参考。     

瘤体注射IL-2重组腺病毒基因治疗小鼠胶质母细胞瘤及其免疫机制的初步探讨

目的：观察瘤体直接注射IL－2重组腺病毒对G422皮下荷瘤的治疗作用,对体内基因转染效率及治疗的免疫机制进行初步分析。方法：将LacZ,IL-2重组腺病毒直接注射到皮下接种的G422胶质母细胞瘤瘤体,X－gal染色检测基因转染的效率,观察肿瘤的大小和荷瘤小鼠的存活期,采用4h^51Cr释放法检测荷瘤小鼠脾细胞诱导的NK、LAK、CTL的杀伤活性,对治疗后的肿瘤进行常规病理分析。结果：采用瘤体注射腺病毒具有较高的体内基因转染效率,瘤体注射IL－2重组腺病毒对皮下建立的胶质母细胞瘤有一定的治疗作用,肿瘤的生长受抑制,荷瘤小鼠的存活期显延长,但没有长期存活小鼠。IL－2基因治疗组小鼠脾细胞的LAK、CTL杀伤活性显增强,肿瘤局部出现更多的坏死和炎性浸润细胞。结论：采用瘤体直接注射IL－2重组腺病毒对胶质母细胞瘤皮下荷瘤有治疗,其机制可能是增强了宿主的局部和全身抗肿瘤免疫反应。     

白细胞介素2/LAK细胞对晚期癌症的临床疗效观察

以白细胞介素2(IL—2)和淋巴因子活化的杀伤细胞(LAK细胞)治疗肿瘤具有一定的效果,但高剂量系统地使用IL—2会产生较重毒副作用,而局部低剂量地使用IL-2既可有效地抗癌又无毒副作用.LAK细胞具有广谱抗肿瘤活性.肿瘤的生物免疫治疗丰富了肿瘤综合治疗的内容.     

LC-CW对人LAK细胞的影响及其机理的研究

提取干酪乳酸杆菌细胞壁成分(LC-CW),研究其对人外周血LAK细胞的影响及其作用机理。结果表明,1.LC-CW可以单独或与IL-2协同,促进PBL的增殖。2.LC-CW可以增强rIL-2诱导的人外周血LAK细胞杀伤Raji细胞的作用,统计学分析有显著意义。但是单独使用LC-CW不能诱导LAK细胞杀伤活性。3.LC-CW可使PBL的CD_4~+,CD_(16)~+抗原表达增加,与IL-2协同,可增加CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+和CD_(25)~+抗原的表达。4.LC-CW可促进PHA-P诱导的IL-2的产生。本研究结果提示LC-CW是一种重要的LAK细胞活性增强因子。     

CD_3AK细胞加IL-2治疗恶性肿瘤体外与临床应用研究

CD3AK细胞在体外对体外癌细胞系细胞杀伤活性最强，对自体癌细胞杀伤活性与TIL细胞接近，且均显著大于LAK细胞．CD3AK细胞IL－2治疗癌症患者30例中，CR＋PR14例，有效率为46％．Kernofsky的生活质量标准评分治疗后有显著提高（P＜0．01）．血浆IL－2活性治疗后有明显提高（P＜0．05）．T4／T6治疗后有所提高．     

PHA、抗CD_3单克隆抗体、LI-2诱导牌细胞培养上清液抗肿瘤效应的研究

本文探讨了PHA、CD_3单克隆抗体、IL-2体外诱导正常人脾细胞培养上清液抗肿瘤效应及其对LAK细胞抗肿瘤效应的增强作用。结果显示，IL-2诱导脾细胞的培养上清液在体外不仅具有直接杀伤肿瘤细胞效应，并且能增强LAK细胞的抗肿瘤作用。PHA、抗CD_3单克隆抗体和IL-2联合刺激可增强脾细胞培养上清液杀伤肿瘤细胞效应。     

植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞胞体外抗肿瘤作用的MTT比色法分析

目的：检测植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞（PHA－LAK）的体外广谱抗肿瘤作用。方法：用MTT比色法测定PHA－LAK对体外培养的K562，MGc80-3,143TK^-,143TK^-,HeLa,LoVo等5种肿瘤细胞的杀伤活性。结果：PHA－LAK对5种不同组织器官来源的肿瘤细胞均有明显杀伤活性，在效靶化为7．5：1．0时，PHA－LAK对143TK^-细胞的杀伤率可高达57．3％，杀伤效应随效靶比增加而升高；但在效靶比为15：1时，杀伤效应不随效靶比增加而增高数。结论：（1）来自健康献血员的PHA－LAK对肿瘤细胞具非特异性杀伤活性，能较好解决传统过继免疫治疗中免疫应细胞的数量和活性问题；（2）在一定的条件下，MTT法用于检测免疫效应细胞的杀瘤作用时才具寻敏，可靠的优点。     

大枣中性多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的 研究大枣中性多糖（JDP－N）对小鼠脾细胞增殖作用及其对刀豆素A（ConA)活化脾细胞内游离Ca^2 浓度（[Ca^2 ]i)的影响。方法 采用MTT法测定增殖程度,用激光扫描共聚焦显微镜技术测定细胞内[Ca^2 ]i。结果 JDP－N能促进小鼠脾细胞自发增殖反应和混合淋巴细胞培养反应,但对经ConA活化、IL－2诱导的脾细胞无促进增殖作用,且对ConA活化的脾细胞内[Ca^2 ]i无影响。结论 JDP－N仅对未活化的小鼠脾细胞有促进增殖作用。     

激活骨髓和淋巴因子激活的杀伤细胞生物活性的实验研究

目的 :证实激活骨髓 (Activated bone marrow,ABM)具有与淋巴因子激活的杀伤 (LAK)细胞不同的生物学效应。方法 :应用重组白细胞介素 - 2 (r IL - 2 )、抗 CD3 单抗体外激活骨髓和外周血单个核细胞 ,以 MTT比色分析法测定 ABM、L AK细胞的杀伤活性 ,采用甲基纤维素半固体培养法进行粒 -巨噬细胞系祖细胞 (CFU- GM)、红系祖细胞 (BFU- E)培养。结果 :r IL- 2 +抗 CD3 单抗激活的 ABM组杀伤活性最强 (6 5 .8± 9.2 ) % ,r IL - 2激活的 ABM组次之为 (5 6 .3± 7.9) % ,活性强于相同条件下的 L AK组 ,两组差异具有显著性 (P<0 .0 1)。增殖倍数与相同条件下的 LAK细胞相比差异亦具有显著性。体外激活 3～ 5 d的 ABM与同期培养的未激活的骨髓细胞相比 BFU- E、CFU- GM形成率差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ,LAK细胞则不具有造血祖细胞活性。结论 :ABM的杀伤活性和增殖效应明显强于 L AK细胞 ,且能保持造血祖细胞活性 ,抗 CD3 单抗能够促进 r IL - 2诱导的 ABM抗肿瘤活性和增殖效应 ,不损伤造血祖细胞活性 ,是优于 LAK细胞的过继免疫疗法。     

胎脾LAK细胞特性的实验研究

自体LAK细胞用于临床治疗肿瘤病人已收到一定疗效。但在实施过程中存在LAK细胞前体细胞来源及数量不足等问题。本文研究胎脾LAK前体细胞的产量、最适培养条件、扩增规律及活性动力学等问题，旨在寻找能够代替自身外周血的新的LAK细胞前体细胞来源。材料和方法1胎脾LAK细胞的诱导及体外扩增将胎脾单核细胞1×106／ml置于含γIL－2（军事医学科学院）125～2000U／ml、PHA（广州医工所）40μg／ml、10％灭活AB型血清的RPMI1640培养液中，于37℃的5％CO2饱和湿度的培养箱培养，每2～3d加液成换液1次，计数并重新调整细胞浓度。2胎脾…     

妇科良、恶性肿瘤患者CD_3AK细胞和LAK细胞体外扩增能力比较

为探讨妇科良、恶性肿瘤患者CD3AK细胞的体外增殖能力，对其外周血淋巴细胞用CD3MAb＋IL－2诱导CD3AK细胞，体外动态观察CD3AK细胞增殖倍数，并与同期培养的LAK细胞进行对比。结果：①良性肿瘤组CD3AK细胞在培养第1周，增殖倍数高于恶性肿瘤组，但无显著性差异（P＞0．05），第2、3、4周，良、恶性肿瘤组CD3AK的增殖倍数较接近；②LAK细胞增殖倍数，在良性肿瘤组培养第1周时显著高于恶性肿瘤组（P＜0．05），培养第2、3周也高于恶性肿瘤组，但无统计学意义（P＞0．05）。结果提示：CD3AK细胞和LAK细胞短期培养时，不宜取材于恶性肿瘤患者。     

CD3AK的制备及杀菌作用观察

目的：观察CD3AK（抗CD3单克隆抗体）的活化及对肿瘤细胞的杀伤活性。方法：以不同的肿瘤细胞为靶细胞,以人外周血淋巴细胞为效应细胞,在体外用不同浓度的抗CD3单克隆抗体和／或IL－2进行激活,用MTT法观察细胞毒杀伤作用。结果：CD3AK的扩增率较LAK高一个数量级,且对不同的肿瘤细胞均有杀伤作用。其18h杀伤均大于4h。结论：由于CD3AK较LAK对IL－2的需要量少,扩增率高,而比LAK更有临床应用发展前景。     

人体胃癌免疫活性细胞的生物活性研究

采用3H－TDR掺入法对人体胃癌免疫活性细胞的生物活性进行研究。结果，胃癌术前经NK细胞活性、LAK细胞活性、IL－2活性显著低于正常对照组（P＜0．05）。胃癌术后组LAK细胞活性已明显恢复（P＜0．05），NK细胞活性、IL－2活性稍有恢复（P＞0．05）。提示人体胃癌免疫活性细胞活性低下可能为胃癌发生发展的原因之一，而癌肿本身可导致其进一步恶化。切除癌肿后，受损的免疫功能有可能恢复或改善。因此应尽量切除原发癌灶．免疫活性细胞的肿瘤生物治疗是一种新的抗癌方法。     

成纤维细胞介导的IL-4基因疗法对小鼠浆细胞瘤的治疗效果

为观察白细胞介素4（IL－4）基因疗法对晚期浆细胞瘤的治疗作用，用成纤维细胞介导的IL－4基因疗法治疗小鼠J558L浆细胞瘤，并对其免疫学机理进行了初步探讨。对经治疗小鼠存活期的观察表明，该疗法对早期荷瘤小鼠（荷瘤3d以内）无明显治疗效果；而对晚期荷瘤小鼠（荷瘤10d以上）则具有较明显的治疗效果；与常规瘤苗联合应用时其疗效更加明显。对经治疗的荷瘤小鼠体内抗肿瘤免疫功能的检测表明，晚期荷瘤小鼠经IL－4基因治疗后第12天，脾细胞NK活性及经诱导后的LAK活性变化不明显，而经诱导的CTL杀伤活性明显提高；当与常规瘤苗联合…     

胸腺素α原的生物学活性及基因表达谱芯片分析

目的：对一个新的胸腺素α原（human prothymosina,ProTα）进行生物学活性研究及基因表达谱分析，方法：用体外刺激小鼠脾细胞增殖进行实验及ELISA法检测ProTα对IL－2和TNF－α的诱导分泌作用，并用基因芯片技术对其表达谱进行分析，结果：ProTα对小鼠脾细胞有明显的促进增殖作用，对IL－2和TNF－α有明显的诱导分泌作用（P＜0．01），基因芯片研究发现ProTa对蛋白酷氨酸磷酸酶基因，淋巴细胞抗原6复合体，增殖相关基因A等的表达有上调作用。结论：该新型ProTα在体外实验中有免疫调节活性，并诱导一些基因的表达。