催化褪黑素生物转化的细胞色素氧化酶P450异构酶的确定及其动力学研究

采用人肝微粒体温育实验 ,根据 CYP45 0 1A2特异性抑制法及 HPL C机电化学分析仪检测结果 ,发现 :1催化 MT在肝脏羟化和去甲基反应的 CYP45 0异构酶确证是 CYP45 0 1A2。 2 CYP45 0 1A2催化 MT6位羟化反应的Km 是 (4.48± 1.49) μm ol/ L (x± s) ,Vmax是 (13.83± 2 .5 2 ) pm ol/ (m g protein· min) (x±s)。 3催化 MT5位上 O-去甲基主要是 CYP45 0 1A2 ,还有 2 C19参与 ,其 Km值分别为 0 .0 30 μmol/ L 和 8.796 μmol/ L,Vmax分别是 0 .338pm ol/(mg protein· min)和 3.16 7pm ol/ (mg protein·m in)     

琼脂糖凝胶电泳法测定糖化血红蛋白及其临床应用

目的　采用琼脂糖凝胶电泳的方法测定糖化血红蛋白 (Hb Alc) ,了解 Hb Alc与空腹血糖的关系。方法　取正常人及糖尿病人 EDTA- K2抗凝全血 2 32例 ,制成血红蛋白溶液 ,使用法国 sebia公司 sebia HYDRASYS电泳仪及光密度计扫描仪 ,用琼脂糖凝胶进行电泳分离和光密度计扫描定量测定 Hb Alc;在全自动生化分析仪上用己糖激酶法测定空腹血糖。结果　对照组的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=5 .4 1± 0 .94 ,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=4 .92± 0 .87;糖尿病人的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=11.0 6± 4 .3,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=10 .86± 3.0 4 ,P<0 .0 1,血糖值与Hb Alc值有显著相关性 ,r=0 .985 ,回归方程 Y=1.10 15 x 1.815。结论　该方法标本用量少 ,分辨率高 ,重复性好 ,结果不受温度及胎儿血红蛋白的影响 ,Hb Alc可作为糖尿病控制的指标     

ND-ELISA在预测麻风复发中应用的潜在远景

为进行麻风复发的预测研究 ,本室以一种人工合成的二糖抗原 (natural disaccharide octylborine serum albumin)为基础建立了间接酶联免疫吸附测定 (ND-ELISA)法 [1,2 ] ,该法的阈值 (cut off value,CV)设定为 (x± 3 s)。结合麻风病抗体水平实际状况 ,本实验设定实用光密度 (OD)测定的 CV值为 :CV1=0 .1 0和 CV2 =0 .1 6。在 CV2 的条件下方法的敏感性为 96% ,特异性为 1 0 0 % ,阳性预测值为 1 ,阴性预测值为 0 .98,正确指数为 0 .91 4;批内变异系数为 0 .0 2～ 0 .0 8,批间变异系数为 0 .0 1～ 0 .0 9。现将本室用之于早期麻风…     

坐高、下肢长和坐高/身高比值的全国不同年龄参考值及其对于不对称性发育异常的诊断价值

目的:获得荷兰不同年龄段儿童坐高(SH)、下肢长(LL)和SH/身高(H)比值的参考值范围;评估SH标准误值(sx珋)、SH/H s珋x和SH/LL sx珋与H s珋x的相关性;研究身高校正的SH/H临界值对于检测马凡综合征和季肋发育不全的有效性。方法:收集14500名0～21岁荷兰籍儿童的身高和坐高数据,进行横向交叉研究。利用LM S(均小均方误差)方法,设计标准差(s)参考值表。在三个年龄组内,分析相关性。将马方综合征患者和遗传学上确诊为季肋发育不全患者的SH/H的数据资料同身高校正的SH/H参考值加以对比。结果:所有年龄组中,H sx珋、SH s珋x和LL s珋x…     

桂林市中片各类幼儿园儿童健康状况调查

为了解不同性质幼儿园儿童健康状况 ,笔者将我市中片幼儿园 3年的儿童体检资料进行分析 ,结果报告如下。1　资料与方法1.1　资料来源　为我院辖区 12所幼儿园 (公办 1所 ,集体 3所 ,个体 8所 ) 1997～ 1999年“六一”儿童节体检资料。1.2　方法1.2 .1　按《儿童保健学》中规定的测量方法测量儿童的体重、身高 ,由市妇幼保健院安排 ,体重采用 WHO0～ 6岁儿童身高体重参考标准及评价标准评价 ,体重统计≥ M、相似文献   

网膜素-1对结肠癌干细胞增殖凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨网膜素-1(Omentin-l)对结肠癌干细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制.方法 采用间接免疫磁珠法分选结肠癌干细胞,分别采用克隆球形成实验、分化实验和流式细胞术鉴定结肠癌干细胞.以结肠癌干细胞为研究对象,设立对照组、Omentin 1 组(1 μg/ml Omentin-1)、Omentin 2 组(2 μg/ml Omentin-1)、Omentin LY 组(1 μg/ml Omentin-1+ 50 μmol/L LY294002) 、 LY 组(50 μmol/L LY294002), CCK-8方法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,同时分别检测Omentin-1干预细胞0、1、6、24、48 h后细胞增殖变化.Western blot法检测对照组、Omentin 1组、 Omentin 2组丝/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶(pAkt)蛋白表达.结果 成功分选培养结肠癌干细胞,CD133 +结肠癌干细胞含量达80.3％ ;与对照组相比,其余4组吸光度(OD)值均下降,细胞凋亡率均上升(P<0. 05);与Omentin 1组相比,Omentin 2组OD值更低,细胞凋亡率高(P<0. 05);分别与Omentin 1组和LY组相比, Omentin LY 组 OD 值低,凋亡率高(P<0. 05) ; Omentin-1 对结肠癌干细胞的作用随时间延长,OD值呈逐渐下降趋势(P<0.05);与对照组相比,Omentin 1 组和 Omentin 2 组 pAkt/ Akt蛋白表达量均下降,其中Omentin 2组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论Omentin-1可抑制结肠癌干细胞增殖,促进其凋亡,与LY294002具有协同作用,其作用机制可能与抑制Akt通路有关.     

咪唑安定、哌替啶合用硬膜外阻滞下胆囊切除术的临床观察

通过咪唑安定和哌替啶合用于连续硬膜外阻滞下胆囊切除术 ,观察其临床效果并与氟哌利多、哌替啶合剂作临床对比 ,报告如下。1　资料和方法1.1　一般资料　选择期行单纯胆囊切除患者 40例 ,一般情况见表 1,ASA ～ 级随机分为咪唑安定、哌替啶组 ( 组n=2 0 )和氟哌利多、哌替啶组 ( 组 n=2 0 )。表 1　患者一般资料 (x± s)组别年龄体重 (kg)性别 (女 /男 )手术时间 (min) 组 (n=2 0 ) 4 9.60± 1 1 .50 62 .2 5± 1 2 .1 5 1 1 /91 0 8.40± 8.50 组 (n=2 0 ) 4 6.73± 1 1 .56 63.56± 1 1 .0 3 1 2 /81 0 6.50± 6.0 0　　麻醉方法 :…     

同型半胱氨酸对体外人脐静脉内皮细胞ET的影响

1　实验资料　无菌条件下 ,从健康产妇新生胎儿脐带收集人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)进行培养 ,传至第 3代 ,使用完全培养液调细胞浓度于 1× 10 8m L- 1 ,加入生理浓度、病理生理浓度 0 .5 mmol· L- 1 、非毒性药理浓度和毒性药理浓度分别为 0 .0 1,0 .85 ,2 .0 0和 5 .0 mmol· L- 1 的同型半胱氨酸(Hcy)以及不含 Hcy的空白对照液继续培养 ,每组做 6个样本 ,分别于 4 ,6 ,8,2 4 h吸取培养液约 2 m L ,测定 ET的含量 .ET的检测应用南京建成生物工程研究所的试剂盒 .所有计量资料均用 x± s表示 ,统计方法采用多因素方差分析 .2　结果…     

抗心肌肌球蛋白抗体在慢性病毒性心肌炎小鼠中的表达及卡托普利、氧化苦参碱的干预效果

目的 观察抗心肌肌球蛋白抗体(AMA)在慢性病毒性心肌炎(VMC)小鼠中的表达,比较卡托普利和氧化苦参碱的干预效果.方法 以柯萨奇病毒B_3株(CVB_3)重复增量感染(第0、14、28天,剂量分别为0.20、0.25、0.30mL)BALB/c小鼠建立慢性VMC(n=60)模型,正常对照组(n=8)同期腹腔注射等体积生理盐水.42d将慢性VMC模型组存活小鼠随机分为慢性VMC对照组(n=8)、卡托普利干预组(n=8)及氧化苦参碱干预组(n=8),干预28d后,即实验第70天杀死各组小鼠.称取小鼠心脏质量,计算心脏与体质量比值;分别以苏木素-伊红(HE)、苦味酸天狼猩红行心肌组织及心肌胶原组织特异性染色,运用图像分析软件计算心肌组织中胶原容积积分(CVF,%);酶联免疫法(ELISA)检测实验小鼠血清中AMA的表达,以光密度值(OD值)>(x-)+2s为阳性组,<(x-)+2s为阴性组.结果 慢性VMC组小鼠在实验第70天心脏与体质量比值、CVF及血清中AMA OD值均较正常对照组增高(P均<0.01).卡托普利及氧化苦参碱干预后心脏与体质量比值、CVF较慢性VMC组降低(P均<0.01),血清中AMA OD值较慢性VMC组降低(P<0.05).AMA阳性组心脏与体质量比值、CVF及OD值均较阴性组增高(P均<0.01).结论 慢性VMC小鼠血清中AMA表达增高,卡托普利及氧化苦参碱可下调AMA的表达,抑制慢性VMC小鼠的心肌重构.     

BCL-x1和BCL-2在喉鳞状细胞癌细胞中的表达

目的 探讨B细胞淋巴瘤/白血病—2(B-cell lymphoma/leukemia-2,BCL—2)基因及B细胞淋巴瘤/白血病—x基因长片段(B-cell lymphoma/keukemia-x,long，BCL-x1)在喉鳞状细胞癌细胞中的表达及应用干扰素—。对其表达的影响。方法 采用SABC免疫组织化学染色，观察比较干扰素治疗10周后喉癌组织(25例)和未治疗组(27例)喉癌组织中喉鳞状细胞中BCL-x1、BCL—2蛋白的表达。结果 ①治疗组喉癌组织中BCL—xl表达OD值为0．12，未治疗组OD值为0．2l，两组表达率差异有显著性意义(P＜0．05)；②52例喉癌组织中均无BCL-2蛋白表达。结论 BCL—xl可能在喉癌细胞凋亡中发挥抗凋亡作用，干扰素—α可能通过抑制BCL-x1表达而发挥其凋亡诱导作用。     

6σ质量标准在TMS-1024i全自动生化分析仪上的应用

目的应用6σ质量标准评价TMS-1024i全自动生化分析仪部分检测项目的分析性能,指导生化检验的质量控制管理,更好地为临床服务。方法选定以下6个项目:尿素氮(BUN)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、尿酸(UA)、三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC),对TMS-1024i全自动生化分析仪进行精密度检测,对医学决定水平浓度进行6σ质量估计,用标准化OPSpecs图确定质控规则。结果 TG、Cre基本达到6σ的质量标准可采用质量控制方法13.5s规则,选择2个控制测定值(n=2),能提供90%的保证检出误差;UA和Glu相对6σ质量标准表现一般,UA采用12.5s规则,选择4个控制测定值(n=4,r=2),只能提供50%的保证检出误差,Glu采用12.5s规则,选择4个控制测定值(n=4,r=2)只能提供90%的保证检出误差,而TC、BUN的σ值相对6σ质量标准较低,应采用多规则13s/22s/R4s/41s/8x,选择4个控制测定值(n=4,r=2)。结论 TMS-1024i全自动生化分析仪部分检测项目的分析性能指标达到了美国国家临床实验室标准委员会(CLSI)标准,结果可靠,适合临床使用。有部分指标已达到或接...     

2种提取大鼠肝RNA方法的比较

目的建立大鼠肝RNA的提取方法,为逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern blot以及cDNA文库构建等分子生物学实验奠定基础。方法用Trizol法和异硫氰酸胍提取法提取大鼠肝RNA,紫外分光光度计测定RNA产量及纯度,琼脂糖凝胶电泳验证RNA的完整性。结果采用Trizol方法提取的RNA的OD260/OD280比值为2.28,异硫氰酸胍方法提取的RNA OD260/OD280比值为1.74。采用Trizol法提取RNA的产量高于异硫氰酸胍提取法,电泳分析18 s、28 s条带完整。结论Trizol提取的大鼠肝RNA纯度、收率都优于硫氰酸胍方法提取的RNA。     

口服阿奇霉素治疗小儿上呼吸道感染临床观察

1　临床资料1.1　一般资料 :90例门诊小儿上呼吸道感染病例 ,其中男 4 8例 ,女 4 2例 ,分别将患儿分为治疗组 (阿奇霉素组 )及对照组 (安奇组 ) ,两组之间指标比较见表 1。表 1　两组之间体温、中性粒细胞绝对计数等指标比较 (x± s)n 体温(℃ )中性粒(× 1 0 9/ L )病程(天 )体重(kg)年龄(岁 )性别(女 /男 )治疗组 4838.46±0 .0 99.38±0 .2 11 .84±0 .0 62 3.0 3±0 .986.2 8±0 .32 2 2 / 2 6对照组 42 38.35±0 .0 99.2±0 .2 21 .76±0 .0 72 0 .78±1 .0 65.71±0 .33 2 0 / 2 2P >0 .0 5 >0 .0 5 >0 .0 5 >0 .0 5 >0 .0 5 >0 .0…     

急性脑梗死患者62例的血粘度与血脂

1　临床资料　脑梗塞患者 6 2例 ,均经头颅 CT检查确诊 ,男4 4例 ,女 18例 ,年龄 4 2～ 80岁 (平均 6 0± 10 )岁 .健康对照系选择同地区 ,年龄 38～ 6 0岁 ,男 6 8例 ,女 32例 .血液流变性应用北京世帝仪器公司生产的 R80型血液粘度仪 ,其切度率 :高切 2 30 s,中切 4 6 .0 s,低切 11.5 5 s.红细胞压积 :30 0 r·min- 1 ,离心沉定 30 min.纤维蛋白原 :双缩尿法 ,血沉(wimtrobe法 ) :在 2 5℃恒温中测定 ,所有数据均用均数±标准差 (x± s)表示 ,Student's t检验进行两组间显著性比较如表 1.2　讨论　脑梗塞病灶血液流变性表现为脑血流量…     

血清C-反应蛋白鉴别小儿急性呼吸道感染的病原体

1　临床资料　急性呼吸道感染的患儿 5 3(男 38,女 15 )例 ,年龄 1/ 4～ 12 (平均 5 .8)岁 .按病原体不同分为细菌组 4 6例 (抗生素治疗有效 ,白细胞计数及中性粒细胞分类均明显高于正常值 )和病毒组 7例 (抗生素治疗无明显疗效 ,白细胞计数正常或略低正常 ,分类以淋巴细胞为主 )同时选择性别、年龄相匹配的健康儿童 5 0例作为对照组 . C-反应蛋白 (C- reactiveprotein,CRP)采用免疫透射比浊法 ,试剂由上海复星长征医学科学有限公司提供 .仪器为 Hitachi70 6 0全自动生化分析仪 .阳性判定值 :CRP>8mg· L- 1 .检测结果以 x± s表示 ,…     

老年人肾脏的B超测量

1　临床资料　 1999- 11/ 2 0 0 0 - 10老年患者 12 4 (男 111,女 13)例 ,6 0～ 70岁 33例为 1组 ;70～ 80岁 5 7例为 2组 ;≥ 80岁 34例为 3组 .老年患者肾脏本身疾患除外 ,在 B超检查的同时化验血尿素氮、肌酐 .超声测量仪为美国产 ATL30 0 0 ,探头频率 3.5 MHz.B超操作者为同一技术娴熟医师 .取晨空腹仰卧位测量双肾大小 (表 1) .有高血压病史者 6 4例 ,无高血压病史者 6 0例 .两组肾大小无显著性差异 (P>0 .0 5 ) .有高血压病史的 6 4人中 ,血肌酐≥ 89μmol· L- 1 (39)与表 1　肾脏大小与年龄 (x±s,cm)年龄 n左肾短轴左肾长轴…     

大鼠原位肝移植手术成功的影响因素

1　材料和方法1.1　材料　供、受体分别为健康雄性 SD大鼠 ,共 2 80只 ,体质量 (2 5 0± 5 0 ) g,由第四军医大学实验动物中心提供 .随机分为供体 (n=14 0 )和受体 (n=14 0 ) 2组 .1.2　方法　采用“二袖套法”原位肝移植术 .供受体均以乙醚吸入麻醉 ,清洁手术 .预实验组 (12 0只 )供体手术时间(5 3.6± 5 .1) min,受体手术时间 (6 5 .5± 3.4 ) min,受体无肝期 (2 9.8± 2 .1) min.实验组 (16 0只 )供体手术时间 (47.1±4 .2 ) min,受体手术时间 (5 4 .7± 3.4 ) min,受体无肝期(2 2 .8± 2 .8) min.统计学处理 :各组资料数据用 x± s表…     

成人P波离散度正常值及其相关影响因素的探讨

目的　研究 P波离散度 (Pwd)正常值及其相关影响因素。方法　选择 1 8～ 80岁的健康成年人 2 80例 ,按年龄段分为 6组 ,用 1 2导同步心电图收集资料 ,测定最大 P波时限 (Pmax) ,最小 P波时限 (Pmin) ,计算二者差值为Pwd,并探讨不同年龄、性别的 Pwd的变化情况 ,同时观察 2 5mm/s与 50 mm/s两种走纸速度对 Pwd值的测定的影响 ,并对测定方法的可重复性进行了研究。结果　 (1 )两种走纸速度的 Pwd值经统计学处理无显著性差异 (P>0 .0 5) ,其正常值范围确定为小于 40 mm/s(x± 1 .96 s)。 (2 )正常成人 Pwd与年龄的大小无关 (P>0 .0 5) ,但有随年龄增加的趋势 ;男性的 Pwd值大于女性 (P<0 .0 5)。(3)用人工目测的方法测定的 Pwd值有较好的重复性。结论　成人 P波离散度的正常值小于 40 ms,该值与年龄无关 ,男性大于女性 ;心电图的走纸速度对 Pwd值的测定影响不大     

245例狂犬病毒IgG抗体ELISA检测结果判断的讨论

目的了解狂犬疫苗免疫效果与在实际工作中检测报告的误差（误判率）。方法收集采用ELISA法检测的不同批次245例狂犬病毒IgG抗体的OD值，计算出每次阳性对照样本的OD值（以下称为临界值）正负10%的人数。结果245例狂犬检测人员中有50人次结果判阴性，其余195人次为阳性。其中阴性结果中在临界值下限10%的人数有15人次，此种结果占总检测人数的6.1%为负误差；阳性结果中OD值在临界值10%上限的人数有13人次，此为阳性结果中正误差人数占总检测人数的5.3%。结论报告结果中有5.3%的阳性结果有机率小于或等于临界值(0.5IU/ml中和抗体)，此部分人员应当补接种狂犬疫苗，当引起重视。     

利用末梢血检测肺炎支原体IgM抗体的研究

目的 :研究利用末梢血检测肺炎支原体 (MP)IgM抗体的可行性。方法 :利用ELISA法检测 117例肺炎患儿静脉血及末梢血肺炎支原体IgM抗体 ,对其定性检测结果进行比较 ,并对MPIgM抗体值在 2 0 0～ 30 0 0u/ml范围内的 90例患儿的静脉血和末梢血MPIgM抗体水平进行比较 ,进行直线相关及直线回归分析。结果 :117例患儿静脉血和末梢血MPIgM抗体定性检测结果无显著差异 ,P >0 0 5。 90例患儿末梢血组MPIgM抗体水平 ( 912 5 3± 5 48 45u/ml)显著低于静脉血组 ( 10 2 4 0 2± 6 0 4 90u/ml) ,P <0 0 0 1,但二者具有高度相关关系 ,r =0 975。建立了以末梢血MPIgM抗体值为自变量 (x)的估测静脉血MPIgM抗体值 (y)的回归方程为 :y =46 +1 0 6 8x。结论 :利用末梢血检测肺炎支原体IgM抗体是可行性。