视网膜色素上皮与近视发病机制研究进展

近视是视力损害的主要原因之一,常伴发视网膜脱离、近视性黄斑病变等并发症。体外和体内研究均表明,近视发生过程中视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)组织形态学和离子稳态发生变化,且视网膜色素上皮分泌的多巴胺、乙酰胆碱等神经递质和转化生长因子-β、肝细胞生长因子和胰岛素样生长因子等多种生长因子与近视发展进程密切相关,参与眼轴延长和近视性巩膜基质重塑。本文就近视视网膜色素上皮形态学改变及神经递质和生长因子在近视发生发展中的作用进行综述,为理解近视发展的分子机制及探索新的治疗方法提供新思路。     

体内实验观察bFGF对视网膜色素上皮细胞再生的促进作用

目的：观察重组人碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF)在体内对兔视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium RPE) 细胞再生的作用。方法：应用氩绿激光照射，造成兔RPE损伤模型，照射后应用bFGF3000U/50uL玻璃体腔内注射，眼底荧光素血管造影检查，测定照射后1－4d透见荧光面积和荧光素渗漏面积，并与对照眼进行比较。结果：照射后第1天和第2天，2组眼的透见荧光面积和荧光素渗漏面积无显著差异（P＝0．534，0．283），第3天和第4天，2组眼的透见荧光面积和荧光素渗漏面积有显著差异（P＝0．0180，0．0007）。结论：体内外源性bFGF能促进RPE的再生和修复，bFGF不具有种属特异性。     

人酸性成纤维细胞生长因子对过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮细胞坏死的保护作用

目的 研究人酸性成纤维细胞生长因子(human acidic fibroblast growth factor,haFGF)对人视网膜色素上皮(humanretinal pigment epithelium,hRPE)细胞的保护作用.方法 用0.2 mmol·L-1过氧化氢培养hRPE细胞36 h制作hRPE细胞坏死模型为模型组,用1 mg·L-1haFGF预培养hRPE细胞12 h、24 h、48 h,并设置空白对照组,用台盼蓝染色在倒置显微镜下观察细胞坏死情况,用MTT法检测haFGF预作用hRPE细胞不同时间细胞的死亡率,并用8 g·L-1琼脂糖凝胶电泳检测haFGF不同时间对hRPE细胞完整性的影响.结果 模型组细胞死亡率为(36.97±2.81)%,空白对照组细胞死亡率为(1.05±0.04)%,haFGF预作用细胞12 h、24 h、48 h细胞死亡率分别为(32.50±4.06)%、(19.77±3.68)%、(26.45±3.19)%.其中,模型组与空白对照组细胞死亡率相比、haFGF预作用24 h与模型组相比差异均有显著统计学意义(均为P<0.01),而haFGF预作用12 h、48 h细胞死亡率与模型组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05).台盼蓝染色结果显示haFGF预作用细胞24 h,hRPE蓝染细胞核数明显减少,而预作用12 h染色细胞核数减少不显著,预作用48 h蓝染细胞核数显著增加.琼脂糖凝胶电泳显示:模型组细胞DNA呈现"涂布"状,说明细胞坏死明显,haFGF预作用细胞24 h"涂布"状基体消失,提示hRPE细胞DNA完整性尚好,而预作用12 h和48 h DNA"涂布"状仍明显存在.结论 1 mg·L-1的haFGF可以显著拮抗过氧化氢对hRPE细胞的损伤,预作用24 h时haFGF对hRPE细胞的保护作用最佳.     

碱性成纤维细胞生长因了在视网膜色素变性中的研究

碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对体外培养的色素上皮细胞和感光细胞有增殖作用，在多膜变性的RCS鼠的视网膜下和玻璃体内分别注射bFGF，可以有效地挽救其感光细胞。把神经营养因子与基因治疗相结合，应用病毒载体携带bFGF基因转染细胞，可以达到同样的治疗效果，同时降低了蛋白注射引起的副作用。而应用其它方面如寡聚多肽、电击及基因工程都能使bFGF高效行进入细胞。目前，大多数研究认为bFGF的挽救作用是由于体内bFGF及其mRNA表达上调，但关于视网膜变性疾病中bFGF及其受体的表达意见不一，所以详细的机制尚不明确。各种遗传方式的网膜色素变性疾病中bFGF及其受体的表达意见不一，所以详细的机制尚不明确。各种遗传方式的多膜色素变性都是以凋亡为共同途径，应用bFGF的抗凋亡作用延缓视网膜色素性将对该病的治疗有普遍的实用性。     

上皮-间充质转化在增生性玻璃体视网膜病变发病机制中的作用

增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)是孔源性视网膜脱离及玻璃体视网膜手术后的常见并发症,其主要特征是在视网膜前形成无血管的纤维细胞膜.超微结构和免疫病理研究表明,多种细胞参与PVR的发生与发展,如视网膜色素上皮细胞、神经胶质细胞、巨噬细胞、玻璃体细胞、成纤维细胞和肌成纤维细胞等.其中,肌成纤维细胞是引起PVR增生膜收缩导致视网膜复位手术失败的主要细胞,主要来自于视网膜色素上皮细胞的上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),在PVR的发生发展中具有重要作用.因此,阻断视网膜色素上皮细胞转分化为肌成纤维细胞可能成为预防和治疗PVR的一种有效的方法.     

豚鼠透镜诱导型近视视网膜色素上皮细胞钙离子的研究

目的激光扫描共焦显微镜（LSCM）检测豚鼠透镜诱导型近视模型视网膜色素上皮（RPE）细胞中Ca2＋,探讨Ca2＋在近视发病中的作用机制。方法取2周龄豚鼠10只,选取1只眼用-10.00D凹透镜诱导成近视模型为实验眼,对侧眼为对照眼。实验前后测各组豚鼠屈光度及眼轴长度（AL）。原代培养豚鼠眼球赤道前部及后极部RPE细胞,用角蛋白、波形蛋白、结蛋白、S-100抗体进行免疫细胞化学检测对培养细胞进行鉴定。对各组豚鼠眼赤道前部及后极部RPE细胞进行Fluo-3/AM负载,利用LSCM测定细胞中Ca2＋的变化。结果豚鼠经过45d的透镜诱导,形成（-6.70±1.93）D的相对近视,AL延长了（1.53±0.31）mm,与诱导前的屈光度和AL相比,差异均有统计学意义（F=10.97,P〈0.05;F=-15.64,P〈0.05）。实验眼前部和后极部RPE细胞Ca2＋的荧光强度明显高于对照眼,差异有统计学意义（P〈0.05）,而实验眼和对照眼各自前部和后极部的RPE细胞Ca2＋的荧光强度比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论在实验性近视形成过程中,RPE细胞中Ca2＋浓度增高。     

不同波长的光照射对视网膜色素上皮细胞生长及其分泌生长因子的影响

背景近视的发病机制是眼科研究的一个热点,近年来发现,由神经视网膜细胞及视网膜色素上皮（RPE）细胞分泌的细胞因子可能参与近视的发病,RPE细胞因子的分泌功能受光照射的影响,而RPE细胞对不同波长光的吸光度（A）值是不一样的。目的研究不同波长的光照射对人胚RPE细胞增生及其分泌肝细胞生长因子（HGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bVGF）和转化生长因子-β（TGF—β）的影响,从细胞水平和分子生物学水平探讨近视的发病机制。方法第4～5代人胚RPE细胞置于白光、波长为775nm的红光及波长为480nm的蓝光下照射和培养48h,MTT比色法检测各组人RPE细胞的增生情况,并用透射电子显微镜观察各组传代细胞的超微结构。分别于光照射后12、24、48、72h收集培养液,采用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定培养基中HGF、bFGF和TGF—β的质量浓度。用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测不同波长光照射24h后RPE细胞中HGFmRNA的表达水平,分析蓝光、红光、白光照射对体外培养RPE细胞的影响。结果蓝光组、红光组、白光组和对照组RPE细胞的A490值分别为0．0218±0．0014、0．0353±0．0025、0．0371±0．0024和0．0445-0．0046。4个组中RPE细胞的增生速度明显不同,差异有统计学意义（F=12．579,P〈0．05）,蓝光组和红光组A490值均明显低于对照组,差异均有统计学意义（t=2．043、t=2．024,P〈0．05）。ELISA结果显示人胚RPE细胞可以分泌HGF、bFGF和TGF-β,在受到不同波长的光照射后,不同时间点HGF、bFGF和TGF—β的分泌量不同,随着时间的变化,4个组HGF、TGF—β的质量浓度均逐渐升高,二者在72h和48h均高于12h（P〈0．05）,红光组与蓝光组更为明显,与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。各波长组bFGF的质量浓度随着光照时间的延长在RPE细胞中的表达均逐渐降低,72h与12h时相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。RT—PCR结果显示,不同波长光照射后RPE细胞中HGFmRNA的表达水平不同,蓝光下培养的RPE细胞HGFmRNA表达量最少,白光组、红光组和蓝光组HGFmRNA的表达量（A490）与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。透射电子显微镜下红光组、白光组人胚RPE细胞与对照组相比超微结构均无明显变化,但蓝光组RPE细胞核染色质稀疏变淡,细胞器减少,细胞界膜不清或消失。结论不同波长的光照射可影响人RPE细胞的增生及其分泌HGF、bFGF和TGF—β的功能,提示近视的形成可能与不同波长的光相互作用有关。     

视网膜色素上皮细胞与近视眼发病的关系

视网膜色素上皮细胞在近视形成过程中起到重要作用,通过对视网膜色素上皮细胞信号通路的研究,可以对近视的发病机制有更深刻的认识,有助于指导近视的预防和治疗.近期研究发现,视网膜色素上皮细胞在近视发生发展过程中受到多因素的影响,在近视的各个阶段发生了不同的变化.本文主要对视网膜色素上皮细胞的细胞受体、细胞因子以及分子水平的进展等方面进行综述,这些都与近视的发生有密切的联系.     

视网膜钾离子及其通道与近视相关研究进展

视网膜视觉信号处理与近视的发生发展关系密切,其中视网膜离子通道活动在近视相关信号通路中扮演着一定角色。近年来发现,视网膜钾离子的转运参与了眼部屈光发育和近视的形成。本文从视网膜钾离子转运与屈光发育和参与近视形成的可能机制、视觉相关视网膜钾离子通道,以及近视相关钾离子通道基因等方面对这一领域的相关研究进行综述。     

近视发生发展过程中视网膜色素上皮细胞内分子作用机制的研究进展

近视是目前世界范围内严重威胁患者视力的眼部疾病之一,且它的发生发展是一个复杂的机制。研究发现,视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)细胞在近视的病程进展中起到了关键作用。RPE细胞主要通过雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路调控细胞内生长因子、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)的表达来调控细胞功能。同时,RPE细胞也可受到多巴胺受体激动剂的调控,从而使细胞功能发生变化,当多巴胺受体激动减弱后会导致RPE细胞功能发生障碍,从而促进了近视的发展。研究表明RPE细胞内乙酰胆碱以及全反视黄酸的表达量可以调控RPE细胞分泌生长因子,生长因子作用于巩膜成纤维细胞,从而调控了近视的病程。同时,也有研究结果显示,RPE细胞可以协调γ-氨基丁酸对于巩膜细胞的调控作用,间接调控近视的病程。除此之外,通过既往研究发现RPE细胞内微小RNA(microRNA)的表达情况如microRNA-328、microRNA-29a均可通过调控RPE细胞内MMP-2的表...     

神经生长因子对人胚胎视网膜色素上皮细胞生长及其DNA合成的影响

目的　探讨神经生长因子 (NGF)对体外培养的人胚胎视网膜色素上皮 (RPE)细胞的促增殖作用及DNA合成的影响。方法　分别用MTT法测定加入NGF 10 0、2 0 0、30 0 μg/L 48h后人RPE细胞数量的改变和核酸蛋白分析仪测定加入NGF 5 0、10 0、2 0 0、30 0、40 0 μg/L 48h后人RPE细胞DNA质量浓度的变化。 结果　 10 0、2 0 0、30 0 μg/LNGF作用 48h后其细胞增殖的A值分别为 ( 0 2 137± 0 0 2 33)、( 0 2 188± 0 0 181)、( 0 2 32 2± 0 0 16 4) ,与对照组 ( 0 1897± 0 0 15 2 )相比 ,差异有显著性 (q test ,P <0 0 5 ) ;10 0、2 0 0、30 0、40 0 μg/LNGF作用 48h后其细胞DNA质量浓度分别为 ( 981 2 2 0 4± 12 3 5 35 7)、( 1375 8484± 2 44 4 718)、( 16 5 8 70 71± 176 9381)、( 2 35 3 0 86 3± 6 0 9 90 6 4) μg/ml ,与对照组 ( 6 6 6 8188± 14 1 330 2 ) μg/ml相比差异有显著性 (q test,P <0 0 5 )。结论　NGF可促进人RPE细胞增殖及促进细胞DNA合成。     

Diffuse unilateral subacute neuroretinitis

Background In patients with diffuse unilateral subacute neuroretinitis (DUSN), the presence and, therefore, clinical visualization of subretinal nematode makes the diagnosis obvious. However when located under the retinal pigment epithelium (RPE), diagnosis is presumptive and challenging. We report a case of presumed DUSN to illustrate this diagnostic dilemma and to highlight the clinical signs which suggest the diagnosis. Methods Case report of a patient with DUSN. Results In our patient the nematode was not located subretinally and this made the diagnosis difficult. However, the appearance of sub-RPE serpiginous tract in the infero-temporal retina, peripheral RPE hypopigmentation and good clinical response to anti-helminthics supported the diagnosis. Conclusions It is important to have a high index of suspicion when patients present with a combination of above findings. This will help in early control of ocular inflammation and salvaging vision.     

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β在实验性近视中的研究进展

bFGF(碱性成纤维细胞生长因子，basic fibmblast growth factor)和TGF-β(转化生长因子-β，transfbmling growth factor-β)是体内分布广泛、具有多种生物学功能的两种细胞因子。近年的研究发现，实验性近视发生发展过程中视网膜及巩膜的bFGF和TGF-β含量发生改变，而外源性的bFGF和TGF-β也可影响近视的形成，表明bFGF和TGF-β与近视具有密切的关系。其可能的机制为：在异常的视觉环境中，视网膜上的hFGF和TGF-β含量发生变化，作为信号，传递到巩膜，进而影响巩膜细胞的增殖及细胞外基质的降解，使巩膜重新塑形，眼轴过度延长，形成近视。本研究就这两种生长因子和近视的相关研究做一论述。     

Macular Pucker in Association with RPE Adenoma: A Report of a Case and Review of the Literature

Abstract

Background: Retinal pigment epithelium (RPE) adenoma is an extremely rare tumor of the posterior segment which must be differentiated from other choroidal tumors, such as choroidal nevus or melanoma. We report the case of a patient with RPE adenoma coincident with macular pucker who underwent successful pars plana vitrectomy and membrane peeling. Patient and Methods: A 58-year-old female patient was diagnosed with RPE adenoma and epiretinal membrane and subsequently underwent pars plana vitrectomy and epiretinal membrane peeling. Results: RPE adenoma was diagnosed and, following vitrectomy with membrane peeling vision, improved to 20/20 with resolution of symptoms of distortion. Sixteen months of follow-up revealed no clinical change in the RPE adenoma and stable vision. Conclusion: The diagnosis of RPE adenoma can be made upon consideration of unique clinical characteristics of these benign tumors. RPE adenoma may be more closely associated with epiretinal membrane than previously believed, given recent advances in imaging technology. We describe our management strategy, which included observation of the adenoma and surgical removal of the epiretinal membrane.     

Protection of retinal pigment epithelium by OT-551 and its metabolite TEMPOL-H against light-induced damage in rats

OT-551 (1-hydroxy-4-cyclopropanecarbonyloxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidine hydrochloride), is a novel small molecule with antioxidant and anti-inflammatory effects. Protective efficacy of OT-551 and its metabolite TEMPOL-H (TP-H) against light-induced degeneration of retinal pigment epithelium (RPE) was tested. Albino rats were intraperitoneally injected with OT-551, TP-H, or water approximately 30 min prior to a 6 h exposure to 2700 lux white fluorescent light. Retinal protection was evaluated histologically by counting the RPE cell nuclei and measuring the extent of RPE damage on the retinal sections as RPE damage index (%). Following light exposure, the number of RPE cell nuclei was significantly reduced in light-exposed eyes from water-treated animals, while the number was not significantly different between light-exposed and unexposed eyes from the animals treated with 100 mg/kg TP-H or with any dose of OT-551 in the inferior hemisphere, and with 100 mg/kg OT-551 in the superior hemisphere. RPE damage index was significantly lower in the animals treated with any dose of OT-551 compared to water-treated animals both in the inferior and superior hemispheres. Systemic administration of OT-551 and TP-H provides RPE cell protection against acute light damage, and the protection by OT-551 was greater than by TP-H.